UNPRG-FCCBB: Manual de Prácticas de Microbiología del Suelo

PRÁCTICA 8
BIODEGRADACIÓN ANAEROBIA DE RESIDUOS
AGROPECUARIOS: METANOGÉNESIS

1. Introducción
El término biogás define la mezcla de gases resultantes de la descomposición de la
materia orgánica, por acción bacteriana en condiciones anaerobias (Barreto & Córdova,
2011). El biogás es producido en un recipiente cerrado o tanque denominado biodigestor, el
cual puede ser construido con diversos materiales como ladrillo, cemento, metal o plástico.
El biodigestor de forma cilíndrica posee un ducto de entrada, a través del cual se suministra
materia orgánica (estiércol animal o de humano, aguas sucias de las ciudades, residuos del
matadero), en forma conjunta con agua (afluente) y un ducto de salida para que el material
ya digerido por acción bacteriana abandone el biodigestor (efluente).

El proceso de digestión que ocurre en el interior del biodigestor libera energía química
contenida en la materia orgánica, la cual es convertida en biogás, cuyos componentes son
metano (CH4) y dióxido de carbono (CO2), además de pequeñas cantidades de sulfuro de
hidrógeno, hidrógeno y nitrógeno (Benavides & Plasencia, 2012). El metano es el principal
componente del biogás y le confiere las características combustibles al mismo. El valor
energético del biogás, por lo tanto estará determinado por la concentración de metano,
alrededor de 20 – 25 MJ/m3, comparado con 33 – 38 MJ/m3 del gas natural. A pequeña y
mediana escala, el biogás ha sido utilizado para cocinar en combustión directa en estufas
simples; sin embargo, también puede ser utilizado para la iluminación, calefacción y como
reemplazo de la gasolina o el combustible Diesel en motores de combustión interna.

Adicionalmente al beneficio energético, en la producción del biogás, se logra la

transformación de los vertimientos y biodegradables que constituyen hoy en día en su
conjunto, una de las principales fuentes de contaminación del ambiente, originando un
biofertilizante rico en potasio y activo como mejorador de suelos que también puede ser
aprovechado como alimento de peces y aves de corral.

1.1 Parámetros de operación en la producción de biogás

Los parámetros de operación son aquellos que se fijan antes del inicio del proceso y
señalan las condiciones en las cuales va a trabajar el sistema (Rojas, 1992; Acuña &
Villalta, 1998).
 Temperatura
La producción de biogás puede ser mesofílica (28 – 38º C) o puede ser
termofílica (40 – 60º C).

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 Sustrato
El contenido de materia orgánica del sustrato para la producción de biogás
deberá tener una relación C: N entre 25 a 30.
 Dilución o contenido de sólidos totales
Los sólidos totales están constituidos por el porcentaje de material seco que
queda después del secado de la muestra a 104 ºC y están formados por los sólidos
digeribles y los sólidos no digeribles. En un sistema discontinuo el porcentaje de sólidos
totales será de 25 – 35 % y en un sistema continuo o semicontinuo será de 6 – 10 % .
 pH
El pH óptimo está entre 6,6 – 7,6.
 Tiempo de retención
Depende de la temperatura en la que se lleve a cabo la producción de biogás. Si
es termofílica serán 6 a 10 días y si es mesofílica serán 15 a 60 días.

1.2 Parámetros de control

Permiten evaluar el desarrollo del proceso, previenen y explican fenómenos que
afectan el normal desenvolvimiento del digestor, así como permiten calcular la eficiencia.

 Contenido de ácidos volátiles (sólidos volátiles)

Representan en gran parte a los sólidos biológicamente digeribles. Son los ácidos
orgánicos de cadena corta que presentan alta presión de vapor a 104 ºC. Incluyen los ácidos
acético, propiónico, butírico, fórmico, valérico y caproico producidos durante la
acidogénesis y constituyen un factor limitante cuando una alta concentración de ellos
origina un descenso del pH afectando la actividad de las bacterias metanogénicas. El límite
máximo es 2000 ppm, aunque este valor depende mucho de la capacidad de
amortiguamiento del sistema.
 Alcalinidad
Es la capacidad de amortiguamiento que presenta el sistema generada por
aniones de ácidos débiles y bases fuertes como bicarbonatos, carbonatos e iones hidroxilo
formados durante la digestión anaerobia. Los valores pueden fluctuar entre 1500 – 5000
ppm como ácido acético.
 pH
Es la función de la relación entre el contenido de ácidos volátiles y la acalinidad.
Cuando no existe equilibrio entre estos dos parámetros se manifiestan cambios en el valor
del pH. El rango de operación está entre 6.6 – 7.6.

 Producción y composición del biogás

Es un parámetro que permite evaluar el comportamiento del proceso y a la vez
calcular su eficiencia. Es conveniente expresar la producción del biogás en términos de
sólidos volátiles introducidos porque expresan la forma directa cómo la población
bacteriana los está utilizando. Normalmente en un proceso de digestión se dan

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fluctuaciones en la producción y composición del gas; sin embargo, si los descensos en la

producción del gas persisten por 4 o 5 días se debe pensar que existe algún problema. En
cuanto al contenido de metano, cuando se trabaja con estiércol de vacuno y pajas, fluctúa
entre 50 – 60 % con un 40 a 50 % de CO2. Durante los primeros días de iniciado el proceso
el contenido de metano es muy bajo pero luego se va incrementando.

 Degradación de la materia orgánica

Permite evaluar la eficiencia de la actividad bacteriana en la transformación del
material orgánico al biogás. El contenido de materia orgánica se puede expresar como
sólidos volátiles. Estos son aquellos que desaparecen cuando se somete la muestra seca a
ignición a 550 ºC.
Rendimiento de biogás (m3/kg fresco)
Estiércol vacuno 0,0372
Estiércol equino 0,0573
Estiércol porcino 0,0520
Estiércol ovino 0,152
Estiércol de aves 0,091
Estiércol humano 0,042
Desechos de maíz 0,190
Desechos de arroz 0,190

2. Objetivo
2.1 Obtener biogás a partir de residuos agropecuarios

3. Metodología
3.1 Producción de biogás en fundo Casa Blanca, Pachacámac, Lima
Finca de producción, investigación y capacitación en agricultura ecológica y
agroturismo, situada en el lote 20, parcelación Casa Blanca en el distrito de Pachacámac
(Figura 1), valle Lurín de Lima, conducida por los Ingenieros agrónomos Ulises moreno y
Carmen Felipe, ambos docentes cesantes de la Universidad Nacional Agraria La Molina.
Las prácticas agroecológicas que se aplican en la finca son: Crianza ecológica de
Cavia porcellus “cuy” (Figura 2), producción y uso de abonos orgánicos, funcionamiento
de un biodigestor modelo Chino que produce biogás, rotación de cultivos y asociaciones,
riego tecnificado por sifón, microaspersión y goteo, uso de plantas hospederas de
organismos benéficos controladores de plagas y de preparados a base de plantas repelentes
de insectos dañinos, conservación de la agrobiodiversidad.
El biodigestor tipo Chino tiene 10 m3 de capacidad. Una vez al año se prepara pre-
compost con 625 kg de estiércol y 483 kg de rastrojo de maíz picado. El rastrojo del maíz
se deposita sobre una manta de polietileno para humedecerlo con agua de caño antes de
armar la cama compostera, con una capa de 25 cm de rastrojo y una capa de 5 cm de guano
y así sucesivamente hasta terminar con una capa de rastrojo. Luego se coloca un bambú en

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el centro de la cama, para favorecer la aireación y se deja a temperatura ambiental,

removiendo semanalmente, durante 1 mes (Figuras 3 a 7).
El digestor se carga con 1 tonelada de pre-compost de 1 mes (Figuras 8, 9, 10),
400 kg de bazofia y 200 L de solución de agua de cal al 2%, de tal manera que se completa
hasta 8 m3, dejando libre 2 m3 para el almacenamiento del biogás. Después de 1 mes,
comienza la producción de biogás (Figura 11). Semanalmente se extraen 200L de Biol
(Figura 12) y se introducen 200L de una mezcla de 50 kg de estiércol fresco de cuy,
remojados en 150 L de agua durante 24 horas. En promedio, al día se obtienen 3 m3 de
biogás con 70% de metano. Una vez al año se saca el biofertilizante sólido Biosol del
interior del biodigestor (Figuras 13, 14, 15).

3.2 Diseño y acondicionamiento de biorreactor anaerobio con sistema de purificación

Acondicionar un biorreactor anaerobio, constituido por un depósito rectangular,
cerrado de latón de 1/16 pulgadas (utilizado para el transporte de aceite) con capacidad de
18 L y cuyas dimensiones son de 0,24m de largo y ancho por 0,36 m de altura. Sobre el
extremo superior el biorreactor presentará una abertura de 10 cm de diámetro, cubierta con
una tapa rosca plástica provista de un agujero (0,5 cm) en la parte central. La abertura
servirá para realizar la carga y descarga del biorreactor y el agujero central permitirá la
salida del biogás a través de una manguera plástica de 0,5 cm de diámetro y 60 cm de
longitud (Figura 16).
Anexo al biorreactor se encontrará el sistema de purificación que estará constituido
por un frasco lavador de CO2, de vidrio y de 500 mL de capacidad, conteniendo 200 mL de
una solución de cal 2 %. Cerrar herméticamente el frasco lavador con una tapa rosca
plástica que presentará un agujero en la parte central por donde ingresará el extremo final
de la manguera de plástico (0,5 cm de diámetro y 60 cm de longitud) llevando el biogás
desde el biorreactor y saldrá una manguera de plástico (1 cm de diámetro y 50 cm de
longitud) sacando el biogás para su almacenamiento en un globo fuertemente sujeto a su
extremo final (gasómetro).

3.3 Recolección de la materia prima para la producción de biogás

En un centro de engorde de porcinos recolectar estiércol fresco y en campos agrícolas
recolectar residuos celulósicos (tallos, raíces, malezas, corontas) en las cantidades de 20 kg
y 5 kg, respectivamente.

3.4 Preparación de la carga inicial para la producción de biogás (fermentación

aerobia o pre-fermentación)
Para lograr una relación de C:N de 25 a 30 : 1 mezclar 9 kg de estiércol de cerdo
previamente desmenuzados por trituración con 2 kg de residuos celulósicos, cortados en
pedazos de más o menos 3 – 5 cm. Mezclar el material resultante con agua de cal al 2 %, en
la proporción de 1 : 2, equivalente a 11 Kg de residuos y 22 L de agua de cal al 2 %.
Colocar la mezcla sobre un plástico ubicado en el suelo, homogeneizarla y airearla durante

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15 minutos interdiariamente durante 16 días. También se pueden mezclar 6 kg de estiércol

de cuy más 1 kg de residuos celulósicos, adicionar 14 L de agua de cal 2 % y dejar que se
degrade por 10 días con aireación.

3.5 Fermentación anaerobia para la producción de biogás

Determinar el contenido de sólidos totales en el sustrato previamente sometido a una
fermentación aerobia. El valor será aproximadamente de 50 %. Debido a que para la
producción de biogás en sistema discontinuo se requiere 25 – 35 % de sólidos totales, pesar
el sustrato y diluirlo con agua de cal 2 %, en la proporción 1: 1 (9 kg de sustrato más 9 L de
agua de cal al 2 %). Posteriormente, mezclar el sustrato pesado y humedecido con 200 mL
de líquido ruminal y colocarlo inmediatamente en el biorreactor (4/5 del volumen) con
llenado intermitente o tipo Batch, lo cual significa que será cerrado herméticamente y no se
abrirá hasta que cese la producción del biogás. El tiempo de retención será
aproximadamente de 30 días. También se pueden pesar 5 kg de la mezcla estiércol de cuy
pre-fermentada y agregar 5 kg de agua de cal más 50 mL de líquido ruminal.

3.6 Parámetros de control de la producción de biogás

 Diariamente registrar la temperatura, pH y volumen del gas producido.
 Al inicio y al final de la producción de biogas determinar:
Sólidos totales (%)
Sólidos volátiles (%)
 Antes de la pre – fermentación y después de la digestión del sustrato determinar el
porcentaje de nitrógeno, carbono y fósforo.

3.7 Purificación del biogas para la obtención del metano

El biogás que sale del biorreactor y que es conducido a través de la manguera plástica
será llevado hacia un frasco lavador conteniendo 200 mL de agua de cal 2% para eliminar
el CO2 y posteriormente será almacenado en el globo de polietileno (gasómetro). De ser
posible acondicionar también un filtro para la captación del sulfuro de hidrógeno, que
deberá ser instalado en la manguera de conducción del biogás desde el lavador de CO2
hacia el reservorio de biogás o gasómetro; constituido por un tubo de PVC relleno en las
2/3 partes con limadura de hierro y el tercio restante con esponjilla de hierro utilizada para
la limpieza doméstica de utensilios domésticos. El biogás ingresará por un extremo del
filtro y lo abandonará por el extremo opuesto. El sulfuro de hidrógeno será atrapado por el
material ferroso formándose sulfuro de hierro.

3.8 Descarga total de lodos

Terminado el proceso de producción de biogás con un determinado tipo de sustrato,
sacar totalmente el contenido del digestor (bioabono), limpiar y preparar el biorreactor para
la siguiente etapa de producción.

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3.9 Ejemplo de valores obtenidos en la producción de biogás

Biodigestor: cilindro de 55 galones de capacidad: diámetro = 0.56; altura = 0.87 m;
volumen total = 0.214 m3 (Rojas, 1992; Acuña & Villalta, 1998).

 Mayo – Junio con una Tº promedio de 28.7º C

 Volumen de sustrato : 4/5 del biodigestor = 0.172 m3
 Sutrato : 70 kg de estiércol (conejos, cuyes, gallinas,
vacuno) más restos vegetales más 70 kg de agua
(Dilución 1:1)

 Fecha de carga : 20_04

S.T. (%) Inicial : 47.5
S.V. (%) Inicial : 85.45
pH inicial : 6.9

 Fecha de término : 09_06

S.T. : 64.27
S.V. : 54.22
pH final : 7.2
 Buffer : 2% (1.4 kg de CaO)
 Fecha de inicio de la producción del biogas : 30/04
 Día de máxima producción diaria : 26avo
 Tiempo de retención : 40 días

Antes de la pre – Después de la Pre Después de la

Características
fermentación – fermentación digestión

Sólidos totales (%)

64,27
Sólidos volátiles (%)
90,77 54,22
pH 47,5
79,58 7,2
Alcalinidad (%) 85,45
6,7 1,9
Nitrógeno (%) 6,9
0,21 1,79
Carbono (%) 0,86
0,68 0,173
Fósforo (%)
20,37 1,79
Tiempo de retención (días) 14
0,68 40
Producción de biogas / m3
0,7407 m3

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Figura 1. Fundo Casa Blanca, Pachacámac en Lima.

Figura 2. Crianza de Cavia porcellus “cuy”.

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Figura 3. Residuos celulósicos: rastrojo de Zea mays L.

Figura 4. Prefermentación: mezcla de estiércol de Cavia porcellus y rastrojo de

Zea mays L.

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Figura 5. Prefermentación: Cama compostera.

Figura 6. Pre-fermentación para la obtención de pre-compost.

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Figura 7. Volteo del pre-compost.

Figura 8. Pre-compost para alimentar el biodigestor.

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Figura 9. Biodigestor tipo Chino.

Figura 10. Biodigestor tipo Chino enterrado en el fundo Casa Blanca, Lurín.

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Figura 11. Orificio para la salida del biogás a través de una cañería.

Figura 12. Extracción de abono líquido Biol.

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Figura 13. Área para limpieza del digestor y extracción del biofertilizante sólido.

Figura 14. Extracción del biofertilizante Biosol.

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Figura 15. Productos de la digestión anaerobia: metano, biol y biosol.

Figura 16. Biorreactor anaerobio con sistema de purificación.

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4. Bibliografía
Acuña, A. & Villalta, P. (1998) Evaluación de parámetros en la obtención de biogás
en una planta piloto. (Tesis de Ingeniería). Universidad Nacional Pedro Ruiz
Gallo, Perú.
Barreto, G. & Córdova, J. (2011). Bacterias aisladas del Dren 4000 para la
obtención de proteína a partir de metano producido con excretas de Cavia
porcellus “cuy” y residuos lignocelulósicos en Lambayeque, 2011. (Tesis de
Licenciatura). Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Perú.
Benavides, A. & Plasencia, C. (2012). Caracterización físico-química y biológica
del abono líquido Biol obtenido por digestión anaerobia de tres sustratos
orgánicos en Jayanca, Lambayeque. (Tesis de Licenciatura). Universidad
Nacional Pedro Ruiz Gallo, Perú.
Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura, FAO.
(1986). Reciclaje de materias orgánicas y biogás. Una experiencia en China.
Chile: FAO.
Rojas, S. (1992) Diseño y construcción de una planta de biogás para dotar de
energía a un laboratorio. (Tesis de Ingeniería). Universidad Nacional Pedro
Ruiz Gallo, Perú.
4 Anexos
4.1 Método gravimétrico para determinar los sólidos totales (FAO, 1986)
a) Pesar una muestra de sustrato.
b) Colocar la muestra en un crisol y llevarla a la estufa a una temperatura de 105 ºC
durante 24 horas.
c) Sacar la muestra de la estufa y llevarla a un desecador durante 15 minutos.
d) Pesar la muestra seca.
e) Calcular el porcentaje de sólidos totales.
S.T.(%) = PS_ X 100
PT
Donde:
ST = Sólidos totales (%)
PS = Peso de la muestra seca
PT = Peso total inicial de la muestra
4.2 Método gravimétrico para determinar los sólidos volátiles
a) Calcular el peso de los sólidos totales.
b) Llevar la muestra seca a un horno de incineración o mufla a una temperatura de 550
ºC durante 3 horas.
c) Sacar la muestra del horno de incineración y llevarla a un desecador durante 15
minutos.
d) Pesar la muestra (cenizas) y calcular el porcentaje de sólidos volátiles.
S.V.(%) = (P.S.T - PC)_ X 100
P.S.T

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Donde:
S.V = Sólidos volátiles (%)
P.S.T = Peso de sólidos totales
P.C = Peso de las cenizas
4.3 Formulación de carga para un biodigestor modelo chino
Para la carga inicial del biodigestor, se requiere determinar las cantidades de materiales
que van a ingresar (estiércol de cuy y rastrojo de maíz), para lo cual se pueden utilizar
diferentes métodos y ecuaciones. A continuación se presenta un método simplificado
utilizando la siguiente ecuación N° 1 de balance de materia C/N.
a. Balance de materia C/N

C1X1 + C2X2 = 30 ….…………… (1)

N1X1 + N2X2

Donde:
C1 = % de carbono en el estiércol
C2 = % de carbono en el rastrojo de maíz
N1 = % de nitrógeno en el estiércol
N2 = % de nitrógeno en el rastrojo de maíz
Para una concentración del 10% de sólidos totales de la masa de digestión y un
volumen útil del 80% del digestor, se tiene la siguiente ecuación N° 2:

10% = ST1 X1 + ST2 X2 ….…………… (2)

80% (volumen total)
Donde:
ST1 = % Sólidos totales del estiércol
ST2 = % Sólidos totales del rastrojo de maíz

b. Ejemplo de aplicación
Se tiene los valores de % de carbono, % nitrógeno y % sólidos totales en la
siguiente tabla:
Material %C %N % ST C/N
Estiércol de 38,7 1,98 80 19,5
cuy
Rastrojo de 51,9 0,94 90,8 55
maíz
Fuente: Bioagricultura Casa Blanca

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Se trabaja a una dilución del 10% de sólidos totales, en un biodigestor de 10 000

litros (10 M3).

Primer paso
Los valores de carbono y nitrógeno se reemplazan en la ecuación N°1:
38,7 X1 + 51,9 X2 = 30
1,98 X1 + 0,94 X2

38,7 X1 + 51,9 X2 = 30 (1,98 X1 + 0,94 X2)

X1 = 1,14 X2 …………… (a)

Segundo Paso
Usando los valores del % de sólidos totales de la tabla y la ecuación N° 2, se obtiene
lo siguiente:

10% = 80% X1 + 90,8 X2 ………… (b)

80% (10 000)

Reemplazamos (a) en (b) y desarrollamos la ecuación:

800 = 80% (1,14 X2) + 90,8% X2

X2 = 439 Kg rastrojo de maíz ………… (c)

Reemplazamos la ecuación (c) en la ecuación (a):

X1 = 500 kg de estiércol de cuy

Como los pesos del estiércol del cuy y el rastrojo maíz se dan en materia seca, se
realiza una simple regla de tres para determinar los pesos húmedos, entonces finalmente se
obtienen los valores para realizar el material de carga para el biodigestor de 10 M3.

100 ………………………… 80
X ........................................... 500
X = 625 Kg de estiércol

100 ………………………. 90,8

Y ......................................... 439

Y = 483 Kg de rastrojo de maíz

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