Determinación espectrofotométrica de una constante de equilibrio

Objetivos:
 Determinar la constante de equilibrio de un indicador.
 Observar cómo influye el pH en el color de la sustancia examinada.
 Familiarizarse con el uso del espectrofotómetro.
Introducción
La espectrofotometría es la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe o transmite un sistema
químico en función de la longitud de onda; es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones
químicas y bioquímicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación
absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
En la espectrofotometría es aprovechada la absorción de radiación electromagnética en la zona del
ultravioleta y visible del espectro. La muestra absorbe parte de la radiación incidente en este espectro y
promueve la transición del analito hacia un estado excitado, transmitiendo un haz de menor energía
radiante. En esta técnica es medida la cantidad de luz absorbida como una función de la longitud de onda
utilizada. La absorción de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de
las moléculas, y es característica para cada sustancia química.
La espectrofotometría ultravioleta-visible utiliza haces de radiación del espectro electromagnético, en el
rango UV de 180 a 380 nm y en el de la luz visible de 380 a 780 nm, por lo que es de gran utilidad para
caracterizar los materiales en la región ultravioleta y visible del espectro.
En este laboratorio se buscó obtener la constante de equilibrio del rojo de metilo disuelto en agua, este
compuesto es débilmente ácido, por lo que podemos expresar su constante de equilibrio, como una
constante de disociación o constante de acidez.
Metodología
Primera parte
Preparación de la solución madre: se pesó 1 g de cristales de rojo de metilo y se disolvió en 300 mL de
etanol al 95%, luego se afora con agua destilada a 500 mL.
Preparación de la solución estándar: se pipetean 5 mL de la solución madre y se transfirió a un matraz
de 1000 mL, se añadió 50 mL de etanol al 95% y se aforo con agua destilada.
Preparación de la solución ácida: se coloca 10 mL de solución estándar en un matraz de 100 mL y se
afora con HCl 0.1 M (la solución se tornó roja purpura).
Preparación de la solución básica: en un matraz de 100 mL se mezclaron 10 mL de la solución estándar
y se aforan con acetato de sodio 0.1 M (la solución se torna amarilla).
Se toma el espectro de absorción de la solución acida y básica, realizando un barrido de 350 a 550 nm, a
intervalos de 10 nm. Se ajusta a cero para cada longitud de onda, sin colocar nada en la celda y a 100%
de transmitancia con un blanco que se prepara con todas las soluciones empleadas excepto la solución del
indicador. Se transforma los porcentajes de transmitancia a absorbancia utilizando la fórmula:
A=-log(%T/100)
Se anota las absorbancias en el cuadro N°1.
De cada espectro se seleccionó las longitudes de onda de máxima absorbancia, es decir de mínima
transmitancia; siendo la de 420 nm y 520 nm.
Segunda Parte.
Preparación de 5 disoluciones a partir de la solución ácida: en 5 matraces de 25 mL, se colocaron 5,10,
15, 20 y 25 mL de la solución acida y se aforaron con HCl 0.01 M.
Preparación de 5 disoluciones a partir de la solución básica: en 5 matraces de 25 mL, se colocan 5.10,
15, 20 y 25 mL de la solución básica y se afora con acetato de sodio 0.01 M.
Se mide la absorbancias de las disoluciones básicas y acidas a las longitudes de 420 nm y 520 nm. Se
calcula la concentración molar de casa disolución y se recopila los resultados en el cuadro N°2 y N°3. Se
representa gráficamente la absorbancia vs. Concentración para ambas series y longitudes de onda.
A partir de las gráficas se determinó la absortividad molar o coeficiente de extinción de cada especie en
ambas longitudes de onda.
Tercera Parte.
La constante de disociación del indicador rojo de metilo se determinó preparando 4 soluciones, cada una
con la misma concentración total de rojo de metilo, pero a pH diferentes, tales que caigan en la zona donde
el rojo de metilo se encuentre parcialmente disociado, en proporciones determinadas por el valor del pH.
Preparación de las soluciones:
Se prepararon 4 matraces de 100 mL, debidamente rotulados, en cada uno de ellos se vertieron 10 mL de
la solución estándar, seguidamente se añaden 20, 30, 40, 50 y 70 mL de ácido acético 0.01 M en los
matraces 1,2, 3 y 4 respectivamente y se aforan con acetato de sodio 0.01 M (se tornan tonos entre rojo y
amarillo).
Medición de la absorbancia: se mide la absorbancia de las 4 soluciones a 420 nm y 520 nm; se ajusta al
cero y se mide el pH de cada solución y los valores se anotan en el cuadro N°4.
Se procura ejecutar todas las mediciones a la misma temperatura, ya que el equilibrio es muy sensible a
los cambios de esta.
Resultados
Cuadro N°1: Barrido
ʎ (nm) A (base) %T ʎ (nm) A (ácido) %T
400 0.284 52 400 0.0132 97
410 0.276 53 410 0.0269 94
420 0.310 49 420 0.0410 91
430 0.292 51 430 0.0605 87
440 0.276 53 440 0.1079 78
450 0.268 54 450 0.1612 69
460 0.260 55 460 0.2441 57
470 0.215 61 470 0.3468 45
480 0.174 67 480 0.5086 31
490 0.137 73 490 0.6576 22
500 0.097 80 500 0.9586 11
510 0.066 86 510 1.0458 9
520 0.051 89 520 1.0969 8
530 0.041 91 530 0.8861 13
540 0.032 93 540 0.6383 23
550 0.027 94 550 0.4437 36

Las longitudes de máxima absorbancia fueron a 420 nm y 520 nm.

Cuadro N°2
Solución A (420) %T (420) A (520) %T(520)
Ácida
(mL)
5 0.0044 99 0.125 75
10 0.0315 93 0.284 52
15 0.0458 90 0.420 38
20 0.0605 87 0.553 28
25 0.0706 85 0.699 20
Cuadro N°3
Solución A %T(420) A (520) %T(520)
Básica (mL) (420)
5 0.056 88 0.00436 99
10 0.119 76 0.02687 94
15 0.174 67 0.02687 94
20 0.215 61 0.02228 95
25 0.276 53 0.04576 90
Cuadro N°4
λ1 420nm λ2 520 nm
Solución pH %T A %T A
1 5,98 53 0,276 79 0,1024
2 5.79 55 0,260 72 0,1427
3 5.52 59 0,229 58 0,2366
4 5.82 70 0,155 35 0,4559
Estándar 5.82

Cálculos
Solución madre
mol
1g HMR x = 3,713x10−3 mol HMR
269,31 g
3,713x10−3 mol
M= = 𝟕, 𝟒𝟐𝟔𝐱𝟏𝟎−𝟑 𝐌 𝐇𝐌𝐑
0,5L
Solución estándar
7,426x10−3 mol
5x10−3 L x = 3,713x10−5 mol HMR
1L
3,713x10−5 mol
M= = 𝟑, 𝟕𝟏𝟑𝐱𝟏𝟎−𝟒 𝐌 𝐇𝐌𝐑
0,1L
Solución ácida
3,713x10−4 mol
10x10−3 L x = 3,713x10−6 mol HMR
1L

3,713x10−6 mol
M= = 𝟑, 𝟕𝟏𝟑𝐱𝟏𝟎−𝟓 𝐌
0,1L
Solución básica
3,713x10−4 mol
10x10−3 L x = 3,713x10−6 mol HMR
1L

3,713x10−6 mol
M= = 𝟑, 𝟕𝟏𝟑𝐱𝟏𝟎−𝟓 𝐌
0,1L
Disoluciones a partir de la solución ácida
3,713𝑥10−5 mol
1. 5x10−3 x = 1,86x10−7 mol
1L

1,86x10−7 mol
M= = 𝟕, 𝟒𝟑𝐱𝟏𝟎−𝟔 𝐌
25x10−3 𝐿
 3,713𝑥10−5 moll
2. 10x10−3 x = 3,71x10−7 mol
1L

3,71x10−7 mol
M= = 𝟏, 𝟒𝟖𝟓𝟐𝐱𝟏𝟎−𝟓 𝐌
25x10−3 𝐿
3,713𝑥10−5 mol
3. 15x10−3 x = 5,569x10−7 mol
1L

5,569x10−7 mol
M= = 𝟐, 𝟐𝟐𝟖𝐱𝟏𝟎−𝟓 𝐌
25x10−3 𝐿
3,713𝑥10−5 mol
4. 20x10−3 x = 7,426x10−7 mol
1L

7,426x10−7 mol
M= = 𝟐, 𝟗𝟕𝐱𝟏𝟎−𝟓 𝐌
25x10−3 𝐿
5. 𝟑, 𝟕𝟏𝟑𝒙𝟏𝟎−𝟓

Solución ácida Solución básica

λ1 420nm λ2 520 nm λ1 420nm λ2 520 nm Concentración (M)
A A A A
0.0044 0.125 0.056 0.00436 7,43x10-6
0.0315 0.284 0.119 0.02687 1,4852x10-5
0.0458 0.420 0.174 0.02687 2,228x10-5
0.0605 0.553 0.215 0.02228 2,97x10-5
0.0706 0.699 0.276 0.04576 3,713x10-5
Graficas

A (base) vs Longitud de onda

Barrido
0.350
0.300
0.250
0.200
0.150
0.100
0.050
0.000
400 420 440 460 480 500 520 540 560

A (ácido) Vs. Longitud de onda

Barrido
1.2000

1.0000

0.8000

0.6000

0.4000

0.2000

0.0000
400 420 440 460 480 500 520 540 560
 Solución Ácida
420nm
0.08

0.07

0.06
Absorbancia

0.05

0.04

0.03

0.02

0.01

0
0 0.000005 0.00001 0.000015 0.00002 0.000025 0.00003 0.000035 0.00004
Concentración

Solución Ácida
520 nm
0.8

0.7

0.6

0.5
Absorbancia

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 0.000005 0.00001 0.000015 0.00002 0.000025 0.00003 0.000035 0.00004
Concentración
 Solución Básica
420nm
0.3

0.25

0.2
Absorbancia

0.15

0.1

0.05

0
0 0.000005 0.00001 0.000015 0.00002 0.000025 0.00003 0.000035 0.00004
Concentración

Solución Básica
520 nm
0.05

0.045

0.04

0.035
Absorbancia

0.03

0.025

0.02

0.015

0.01

0.005

0
0 0.000005 0.00001 0.000015 0.00002 0.000025 0.00003 0.000035 0.00004
Concentración

La absortividad molar es igual a la pendiente de las gráficas

ελ420(ácida) = ελ520(Ácida) = ελ420(Básica) = ελ520(Básica) =

2210.9 19410 7341.1 1071.1
Concentraciones y constantes calculadas

Aλ1 = Eλ1(HMR)bC(HMR) + Eλ1(MR-)bC(MR-) (1)

Aλ2 = Eλ2(HMR)bC(HMR) + Eλ2(MR-)bC(MR-) (2) pH Solución A (420) %T (420) A (520) %T (520)

5.98 1 0.276 53 0.102 79
Despejando en la ecuación (1) y (2)
5.79 2 0.260 55 0.143 72
𝐴𝜆1 − 𝐸𝜆1(𝑀𝑅−) 𝑏𝐶(𝑀𝑅−) 5.52 3 0.229 59 0.237 58
𝐶(𝐻𝑀𝑅) = 5.11 4 0.155 70 0.456 35
𝐸𝜆1(𝐻𝑀𝑅)
5.82 Estandar
𝐴𝜆2 − 𝐸𝜆2(𝑀𝑅−) 𝑏𝐶(𝑀𝑅−)
𝐶(𝐻𝑀𝑅) =
𝐸𝜆2(𝐻𝑀𝑅)

Para la solución a pH 5.98, la absorbancia 𝜆1= 0.276 y 𝜆2= 0.102

𝐴𝜆1 − ɛ𝜆1(𝑀𝑅−) 𝐶(𝑀𝑅−) 𝐴𝜆2 − ɛ𝜆2(𝑀𝑅−) 𝐶(𝑀𝑅−)

=
ɛ𝜆1(𝐻𝑀𝑅) ɛ𝜆2(𝐻𝑀𝑅)

𝐴𝜆1 − ɛ𝜆1(𝑀𝑅− ) 𝐶(𝑀𝑅− ) (ɛ𝜆2(𝐻𝑀𝑅) ) = 𝐴𝜆2 − ɛ𝜆2(𝑀𝑅−) 𝐶(𝑀𝑅−) (ɛ𝜆1(𝐻𝑀𝑅) )

(19410)(0.276 − (7341.1)𝐶(𝑀𝑅− ) ) = (2210.9)(0.102 − (1071.1)𝐶(𝑀𝑅−) )

5.36 × 103 − 1.42 × 108 𝐶(𝑀𝑅−) = 2.26 × 102 − 2.36 × 106 𝐶(𝑀𝑅− )

5.36 × 103 − 2.26 × 102 = 1.42 × 108 𝐶(𝑀𝑅−) − 2.36 × 106 𝐶(𝑀𝑅− )

5.134 × 103 = 𝐶(𝑀𝑅−) (1.42 × 108 − 2.36 × 106 )

5.134 × 103 = 𝐶(𝑀𝑅−) (1.396 × 108 )

(5.134 × 103 )
𝐶(𝑀𝑅−) =
(1.396 × 108 )

𝑪(𝑴𝑹− ) = 𝟑. 𝟔𝟖 × 𝟏𝟎−𝟓 𝑴

(𝟎. 𝟐𝟕𝟔 − (𝟕𝟑𝟒𝟏. 𝟏)𝟑. 𝟔𝟖 × 𝟏𝟎−𝟓

𝑪(𝑯𝑴𝑹) = = 𝟐. 𝟔𝟒 × 𝟏𝟎−𝟔 𝑴
(𝟐𝟐𝟏𝟎. 𝟗)
Ecuación de Henderson-Hasselbach:

[𝑀𝑅 − ]
𝑝𝐻 = 𝑝𝐾𝑎 + log
[𝐻𝑀𝑅]

[𝑀𝑅 − ]
𝑝𝐻 − log = 𝑝𝐾𝑎
[𝐻𝑀𝑅]

3.68 × 10−5 𝑀
𝑝𝐾𝑎 = 5.98 − log ( ) = 4.84
2.64 × 10−6 𝑀

Solución pH 𝑪(𝑯𝑴𝑹) 𝑪(𝑴𝑹−) pKa Ka

5,98
1 2.64 × 10−6 𝑀 3.68 × 10−5 𝑀 4.84 1.46 × 10−5
4.93
2 6.48 × 10−5 𝑀 1.59 × 10−5 𝑀 6.40 3.98 × 10−7
4.39
3 1.03 × 10−5 𝑀 2.81 × 10−5 𝑀 5.08 8.32 × 10−8
3,92
4 2.26 × 10−5 𝑀 1.43 × 10−5 5.31 4.90 × 10−6

El promedio de los pKa fue de 5.41

Valor teórico 5,05±0,05

|5.05 − 5.41|
% 𝑒𝑟𝑟𝑜𝑟 = 𝑥 100% = 7.13%
5.05
Discusión
En esta experiencia se procedió a determinar la constante de equilibrio de un indicador rojo de metilo,
mediante el uso de un espectrofotómetro, se basaba en medir la concentración de la especie protonada y
desprotonada, para ello se procedía a colocar la misma en una solución básica y acida respectivamente,
esta presenta un color rojo púrpura en su forma protonada y un color amarillo en su forma desprotonada.
Luego se medía la absorbancia y se graficaba la absorbancia Vs concentración, se calculaba la pendiente
la cual representaba la absortividad molar y nos permitía calcular la concentración de la forma protonada
y desprotonada para luego reemplazar los valores en la ecuación de Henderson-Hasselbach para calcular
el pKa del rojo de metilo.
El % de error del pKa obtenido experimentalmente fue bastante bajo, es decir se trabajaron los datos
correctamente. Aunque el grafico de Absorbancia Vs. Concentración de la solución básica no fue tan lineal
como se esperaría.
Cuestionario
1. ¿Qué porcentaje de la absorbancia total a λ1, representa absorbancia de la forma disociada?
(2210.9)(1)(3.86𝑥10−5 )
𝐴𝜆1 = 𝜀𝜆1(𝑀𝑅−) 𝑏𝐶(𝑀𝑅−) =
0,276
0,309
% = × 100% = 100%
0,276
2. ¿Qué porcentaje de la absorbancia total a λ2, representa absorbancia de la forma protonada?
(19410)(1)(2.64𝑥10−6 )
𝐴𝜆2 = 𝜀𝜆2(𝐻𝑀𝑅) 𝑏𝐶(𝐻𝑀𝑅) =
0.1024
0,500
%= × 100% = 48. %
0,1024
3. Si solo se hubiese medido la concentración de la forma disociada (o solamente la de la forma protonada)
¿Cómo hubiera podido calcular la constante de disociación?
Si solo se hubiese utilizado una de las formas no se podría conocer de manera experimental el valor del
pKa, ya que según la ecuación de Henderson-Hasselbach se necesita la concentración de ambas formas
del indicador.
4. ¿En qué zona de pH cae el viraje (cambio de color) del rojo de metilo, si el ojo humano percibe el
cambio cuando ya un 10% de la forma no preponderante se encuentra presente?
El rojo de metilo es un indicador de pH. (Fórmula: C15H15N3O2). Actúa entre pH 4,2 y 6,3 variando
desde rojo (pH 4,2) a amarillo (pH 6,3). Luego del viraje del indicador es predominante la forma ácida.
5. ¿En qué tipo de neutralización acido-base se podría utilizar el rojo de metilo como indicador?
En la neutralización de un ácido fuerte con una base débil, en el punto de equivalencia, el pH es ácido, y
por tanto menor que 7. El indicador más adecuado es el rojo de metilo, el rojo congo o el naranja de
metilo que cambian de color en ese intervalo de pH.
Conclusión
Se observó que la absorbancia es directamente proporcional a la concentración de la especie
absorbente.
Se prepararon las soluciones correspondientes y se realizó un barrido espectral para determinar las
longitudes de trabajo.
Se calcularon las absortividades molares a partir de las gráficas de absorbancia Vs concentración.
 Se estudió la influencia del pH en el color de la muestra, que se veía reflejado en el %T determinado
con el espectrofotómetro.
El valor de la constante se alejaba del valor real encontrado en la literatura, se
puede concluir que el experimento se llevó a cabo satisfactoriamente, ya que, se encontró que los
valores hallados siguen una tendencia lógica de acuerdo con las características ácidas del compuesto
que se utilizó.
Bibliografía
 https://es.scribd.com/doc/70804813/Determinacion-espetrofotometrica-de-una-constante-de-
equilibrio.
 Baeza Baeza, J. J. El equilibrio químico. Departamento de Química Analítica, Universidad de
Valencia. Disponible en http://www.uv.es/baeza/equili.html.
 Burriel Martí, F., Lucena Conde, F., Arribas Jimeno, S., Hernández Méndez, J. (1985).Química
Analítica Cualitativa. Madrid: Paraninfo. Págs.348-49.
 Marín García, M. L. (2004) Bases químicas del medio ambiente: manual de laboratorio. Página
41. Disponible en Internet.