UNIVERSIDAD DE CHILE

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACÉUTICAS

LABORATORIO DE BIOELECTROQUÍMICA

“SÍNTESIS Y CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA

DE NUEVOS 4-NITROIMIDAZOLES SUSTITUIDOS”

Directores de tesis: Dr. J. Arturo Squella Serrano

Dr. Luis J. Núñez-Vergara

Tesis para optar al grado de Doctor en Química

PAOLA ANDREA JARA ULLOA

SANTIAGO-CHILE
2009
 Esta tesis fue realizada con el apoyo de CONICYT a través de Beca de
postgrado N°21040213, Beca apoyo a realización de tesis doctoral
N°23070175 y Beca término de tesis doctoral N°23080034. Del mismo modo
se agradece el financiamiento de FONDECYT proyecto N°1050767 y a
MECESUP por beca de estadías cortas en el extranjero.

PUBLICACIONES ORIGINADAS A PARTIR DE LA REALIZACIÓN DE ESTA

TESIS
• Electrochemical Reduction of 2-Nitroimidazole in Aqueous Mixed Medium.
J.A.Squella, L. J. Núñez-Vergara, A. Campero, J. Maraver, P. Jara-Ulloa and J.
Carbajo, Journal of the Electrochemical Society, 154 (4) F77-F81 (2007)

• Micellar Effects on the Reduction of 4-Nitroimidazole Derivative: Detection and

Quantification of the Nitroradical Anion. P. Jara-Ulloa, L. J. Núñez-Vergara, J. A.
Squella, Electroanalysis, 19 (14), 1490-1495 (2007)

• Voltammetric Reduction of a 4-Nitroimidazole Derivative on a Multiwalled Carbon

Nanotubes Modified Glassy Carbon Electrode. P. Jara-Ulloa, S. Bollo, L. J.
Núñez-Vergara, J. A. Squella, Electroanalysis, 20 (13), 1470-1474 (2008)
 ÍNDICE DE CONTENIDO

Índice de contenido i
Índice de figuras iii
Índice de tablas ix
Resumen x
Summary xi
1.- Introducción 1
2.- Hipótesis 7
3.- Objetivos 7
3,1.- Objetivos generales 7
3,2.- Objetivos específicos 7
4.- Materiales y Métodos 8
4,1.- Materiales 8
4,1,1.- Compuestos en estudio 8
4,1,2.- Reactivos y solventes 9
4,1,3.- Material de vidrio 11
4,1,4.- Electrodos 11
4,1,5.- Equipos 11
4,2.- Métodos 13
4,2,1.- Métodos de síntesis 13
4,2,1,1.- Síntesis de 1 metil- 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol 13
4,2,1,2.- Síntesis de 1 metil- 2-Bromometil- 4-nitroimidazol 14
4,2,1,3.- Síntesis de 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol 15
4,2,2.- Medios de trabajo para estudios electroquímicos 17
4,2,2,1.- Medio acuoso 17
4,2,2,2.- Medio acuoso micelar 17
4,2,2,3.- Medio no acuoso 18
4,3.- Técnicas utilizadas 19
4,3,1.- Polarografía de pulso diferencial y Polarografía tast 19
4,3,2.- Voltamperometría cíclica 20
4,3,2,1.- Determinación de la razón de corriente (ip,a/ ip,c) 21
4,3,2,2.- Determinación del tipo de reacción electródica 23
4,3,4.- Curvas electrocapilares 26
4,3,5.- Voltamperometría adsortiva 26
4,3,6.- Modificación de GCE con NTC 27
4,3,7.- Voltamperometría de onda cuadrada (SWV) 29

i
5.- Resultados y Discusión 30
5,1.- Determinación de CMCs por técnicas electroquímicas 30
5,1,1.- Curvas electrocapilares 30
5,1,2.- Voltamperometría adsortiva 34
5,2.- Caracterización catódica 36
5,2,1.- Medio Acuoso 36
5,2,1,1. - Polarografía de pulso diferencial y Polarografía Tast 36
5,2,1,2.- Voltamperometría cíclica 40
5,2,2.- Medio Heterogéneo: Surfactantes 41
5,2,2,1.- Polarografía de pulso diferencial y Polarografía Tast 41
5,2,2,2.- Voltamperometría cíclica 47
5,2,3.- Medio no acuoso 56
5,2,3,1.- Polarografía de Pulso Diferencial y Polarografía Tast 56
5,2,3,2.- Voltamperometría Cíclica 58
•
5,3.- Estabilización de RNO2 : ¿micela o monómero? 63
5,3,1.-Voltamperometría cíclica 63
5,3,2.- Dispersión de luz 72
5,3,3.- Espectrofotometría UV-Visible 73
•
5,4.- Interacción del RNO2 con endobióticos y xenobióticos 76
5,5.- Reducción de derivados 4-nitroimidazolicos sobre GCE modificados con
NTCs 79
5,5,1. Voltamperometría cíclica 79
5,5,2. Voltamperometría de Onda Cuadrada 92
6.- Conclusiones 94
7.- Presentaciones a congresos 95
8.- Referencias 97

ii Paola Jara Ulloa

Índice de Figuras.
Figura 1. 1
Bioactivación reductiva de compuestos.

Figura 2. 4
Voltamperogramas cíclicos de barridos cortos a distintas velocidades de barrido de 4 NImOH,
en Medio 100 % DMF.

Figura 3. 13
Síntesis de 1 metil- 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol.

Figura 4. 14
Síntesis de 1 metil- 2-Bromometil- 4-nitroimidazol.

Figura 5. 15
Esquema general de la síntesis de 4NimOH.

Figura 6. 19
Polarograma de pulso diferencial (A) y polarograma Tast (B).

Figura 7. 22
Voltamperograma cíclico.

Figura 8. 25
Curvas teóricas para dismutación (A) y dimerización (B).

Figura 9. 30
Curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de CTAB en solución de KNO3 0.1M (A),
Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de CTAB a diferentes potenciales aplicados (B).

Figura 10. 31
Curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de Hyamina en solución de KNO3 0.1M.

Figura 11. 32
Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de Hyamina a diferentes potenciales aplicados.

Figura 12. 33
Curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de SDS en solución de KNO3 0.1M (A),
Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de SDS a diferentes potenciales aplicados (B).

Figura 13. 34
Voltamperogramas lineales de Neutral Red 1μM sobre electrodo de Hg a diferentes tiempos de
acumulación (A). Dependencia de la corriente de pico con el tiempo de acumulación (B). Velocidad
de barrido: 345 mVs-1.

Figura 14. 35
Gráficos corriente versus concentración de CTAB en presencia de Neutral Red 1 μM.

Figura 15. 37
Polarogramas de pulso diferencial (A) y polarogramas TAST (B) para 0.1mM de 4-NimMeOH en
britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

Figura 16. 38
Dependencia del potencial de pico (A) y de la corriente de pico (B) con respecto al pH de una

iii Paola Jara Ulloa

solución 0.1mM de 4-NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M.

Figura 17. 38
Dependencia del potencial de media onda (A) y de la corriente límite (B) con respecto al pH de una
solución 0.1mM de 4-NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M.

Figura 18. 39
Polarogramas de pulso diferencial y dependencia del potencial de pico para 0.1mM de 4-NImMeBr
en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

Figura 19. 40
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH 4.85x10-4M (A) y 4-NimMeBr 5.1x10-4M (B) a diferentes
pHs en tampón Britton Robinson 0.1M, velocidad de barrido: 100 mV/s.

Figura 20. 41
Polarogramas de pulso diferencial (A) y polarogramas TAST (B) para 0.1mM de 4-NimMeOH en
presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

Figura 21. 42
Dependencia del Ep,c (A) y de la corriente de pico (B) con respecto al pH de una solución 0.1mM
de 4-NimMeOH en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1M.

Figura 22. 42
Dependencia del E1/2 (A) y de la ilim (B) con respecto al pH de una solución 0.1mM de 4-NimMeOH
en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M.

Figura 23. 43
Polarogramas de pulso diferencial y Tast para 0.1mM de 4-NimMeBr en presencia de CTAB 15
mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

Figura 24. 44
Dependencia del Ep,c (A) y de la ip,c (B) con respecto al pH de una solución 0.1mM de 4-
NimMeBr, CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M.

Figura 25. 45
Polarogramas de pulso diferencial y Tast para 0.5 mM de 4-NimHOH en presencia de CTAB 15
mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

Figura 26. 48
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH 1mM en tampón Britton Robinson 0.1M a pH 8.4 en
Presencia de 15 mM de diferentes surfactantes: A) CTAB, B) Triton-X, C) 100% BR (sin
surfactante), D) SDS y E) Hyamina. Velocidad de barrido = 1 V/s. Línea continua desde A) hasta E)
muestra el par redox RNO2/RNO2• aislada.

Figura 27. 49
Voltamperogramas cíclicos en aumento de la velocidad de barrido en presencia de surfactante
aniónico (A), no iónico (B) y catiónico (C) para 1mM de 4-NImHOH en Britton Robinson 0.1 M.

Figura 28. 50
Voltamperogramas cíclicos del par redox RNO2/ RNO2• de 4-NimMeOH 1mM en tampón Britton
Robinson 0.1M a pH 8.4 en presencia de Hyamina 15 mM a diferentes velocidades de barrido.
Figura 29. 50
Razón de corrientes Ipa/Ipc con respecto a la velocidad de barrido para 4-NimMeOH 1 mM en
tampón Britton Robinson 0.1 M y Hyamina 15 mM a pH 7.4, 8.4 y 9.4.

iv Paola Jara Ulloa

Figura 30. 52
Voltamperogramas cíclicos en aumento de la velocidad de barrido en presencia de surfactante
catiónico para 1mM de 4-NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M a pH 7.4 (A) y pH 8.4 (B).

Figura 31. 53
Voltamperogramas cíclicos de 4-Nitroimidazol 2mM en CTAB 15mM desde pH 2 hasta 8, tampón
Britton Robinson 0.1 M.

Figura 32. 53
Voltamperogramas cíclicos a pH 8 a distintas velocidades de barrido (A) y Dependencia de la razón
de corrientes ((ip,a/ip,c) ) con la velocidad de barrido(B) para 4-nitroimidazol 2mM en medio CTAB
15mM.

Figura 33. 54
Voltamperogramas cíclicos de 2-nitroimidazol 2mM a distintos a pHs en CTAB 15mM (A) y en
Hyamina 15 mM (B), tampón Britton Robinson 0.1M.

Figura 34. 56
Polarogramas de pulso diferencial para el compuesto 4NimMeBr en Medio 100 % DMF.

Figura 35. 57
Polarogramas Tast para el compuesto 4-NimMeBr en Medio 100 % DMF.

Figura 36. 58
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH (A) y 4NimOH (B) en 100% DMF, 0.1M PTBA.

Figura 37. 58
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeBr en 100% DMF, 0.1M PTBA.

Figura 38. 59
Voltamperogramas cíclicos para el compuesto 4-NimMeBr en Medio 100 % DMF.

Figura 39. 60
Voltamperogramas cíclicos a distintas velocidades de barrido de 4-NimMeBr (A), Razones de
corriente con respecto la velocidad de barrido (B) en medio 100 % DMF (PTBA).

Figura 40. 60
Curvas teóricas de dismutación y dimerización para un electrodo esférico (Hg). Resultados
obtenidos para 4NimMeBr en 100% DMF.

Figura 41. 61
Relación logarítmica entre ip,c y la velocidad de barrido para 4-NimMeOH (A) y 4NImMeBr, en
Medio 100% DMF.

Figura 42. 62
Voltamperogramas cíclicos de 4NImMeBr en aumento de la velocidad de barrido en Medio 100 %
DMF.

Figura 43. 62
Relación logarítmica entre ip,cI y ip,cII y la velocidad de barrido para 4-NimMeBr (A) y razón de
corrientes ip,cII / ip,cI para 4NImMeBr, en Medio 100 % DMF.

Figura 44. 63
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH en ausencia (A) y presencia de surfactante catiónico 15
mM (B), Britton Robinson 0.1 M, ph 8.4.

v Paola Jara Ulloa

Figura 45. 65
Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Hg de 4-NimMeOH, en ausencia y aumento de la
concentración de CTAB, 100% Tampón Fosfato, pH 8.4.

Figura 46. 65
Dependencia de la intensidad de corriente (A) y el Ep,c (B) con la concentración de CTAB, 4
NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

Figura 47. 66
Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Pt de 4-NimMeOH, en ausencia y aumento de la
concentración de CTAB (A). Dependencia de la intensidad de corriente (B) y Ep,c (C) con la
concentración de CTAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

Figura 48. 67
Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Hg de 4-NimMeOH, en ausencia y aumento de la
concentración de Hyamina, Tampón Fosfato, pH 8.4.

Figura 49. 68
Dependencia de la intensidad de corriente y el Ep,c con la concentración de Hyamina, 4NimMeOH
5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

Figura 50. 69
Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Pt de 4-NimMeOH, en ausencia y aumento de la
concentración de Hyamina (A). Dependencia de la intensidad de corriente (B) y Ep,c (C) con la
concentración de CTAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

Figura 51. 70
Estructuras de los surfactantes catiónicos Bromuro de cetiltrimetilamonio, CTAB (A) y Hyamina (B),
utilizados para el estudio voltamperométrico de 4-NimMeOH.

Figura 52. 70
Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Hg de 4-NimMeOH, en ausencia y aumento de la
concentración de BrETAB, 100% Tampón Fosfato, pH 8.4.

Figura 53. 71
Dependencia de la intensidad de corriente (A) y el Ep,c (B) con la concentración de BrETAB, 4
NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

Figura 54. 73
Distribución de tamaño obtenida por light scattering para CTAB.

Figura 55. 73
Espectros de absorbancia de 4-NimMeOH en aumento de la concentración de CTAB.

Figura 56. 74
Espectros de absorbancia de 4-NimMeOH en diferentes solventes.

Figura 57. 76
Compuestos utilizados para el estudio de interacción con RNO2•.

Figura 58. 77
Voltamperogramas cíclicos de 1 mM de 4-NimMeOH en tampón Britton Robinson 0.1 M, 15 mM
de CTAB, pH 8.4 a diferentes velocidades de barrido (100 – 10000 mV)(A). Dependencia de la
razón de corrientes (ip,a/ip,c) con el logaritmo de la velocidad de barrido (B).

vi Paola Jara Ulloa

Figura 59. 77
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH 1 mM en tampón Britton Robinson 0.1 M, 15 mM de
CTAB, pH 8.4 en presencia de diferentes concentraciones de endo/xenobióticos desde 0-6mM.

Figura 60. 78
Razón de corrientes ipa/ipc del par redox RNO2/RNO2• en presencia de diferentes concentraciones
de endo/xenobióticos. Concentración de 4-NimMeOH 1mM en tampón Britton Robinson 0.1 M, 15
mM CTAB, pH 8.4. Velocidad de barrido: 5000 mV s-1.

Figura 61. 79
Voltamperograma cíclico de 4-NimMeOH 1.18×10-4 M sobre GCE, tampón Britton Robinson 0.1 M,
pH 2 . Velocidad de barrido:100 mVs-1

Figura 62. 80
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE, GCE/NTCs(H2O) y GCE/NTCs(DMF).
Concentración de la dispersión de NTC: 1 mg/mL, tampón, Britton Robinson 0.1 M pH 2. Velocidad
de barrido:100 mV s-1, tpo. de acumulación: 120 s.

Figura 63. 82
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE/NTCs(H2O). Concentración de la dispersión
de NTC: 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 250 mVs-1.
Inserto: Dependencia de la corriente con la velocidad de barrido.

Figura 64. 83
Curvas de calibración obtenidas con electrodos modificados con NTCs en distintos agentes
dispersantes. [NTCs]:1 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M pH 2, tiempo de acumulación:120
s.

Figura 65. 84
Curvas de calibración obtenidas a diferentes pHs Tampón Britton Robinson 0.1M. Concentración
de la dispersión de NTCs: 1 mg/mL, tiempo de acumulación: 120 s.

Figura 66. 85
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE y GCE/NTCS(H2O). Concentración de la
dispersión de NTC: 0.2 y 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido:
100 mVs-1.

Figura 67. 86
Dependencia de la corriente de pico con la concentracion de NTC. [4-NimMeOH]: 3×10-6M, tampón
Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 100 mVs-1, tiempo de acumulación: 420 s.

Figura 68. 87
Voltamperogramas lineales de 4-NimMeOH sobre electrodo GCE/NTC(H2O) a diferentes tiempos
de acumulación. Inserto: dependencia de la corriente de pico con el tiempo de acumulación.
[4NimMeOH]: 5×10-4 M, NTCs(H2O) : 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de
barrido: 100 mVs-1

Figura 69. 88
Dependencia del potencial de pico con respecto al pH. [4-NimMeOH] : 3×10-6 M, NTCs(H2O): 4
mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2. Velocidad de barrido: 100 mV s-1.

Figura 70. 89
Curvas de calibración de 4-NimMeOH obtenidas sobre GCE/NTCs(H2O) a dos tiempos de

vii Paola Jara Ulloa

acumulación (2 y 7min). NTCs(H2O): 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de
barrido:100 mVs-1.

Figura 71. 90
Dependencia de la corriente de pico con el tiempo de acumulación. [4-NimMeBr] : 3×10-6 M,
NTCs(H2O): 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 100 mVs-1.

Figura 72. 91
Curvas de calibración de 4-NimMeBr obtenidas sobre GCE/NTCs(H2O) a tiempo de acumulación
de 7min. NTCs(H2O): 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2. Velocidad de barrido: 100
mVs-1.

Figura 73. 92
Voltamperogramas de onda cuadrada de [4-NimMeOH]: 3×10-6M obtenidas sobre
GCE/NTCs(H2O), (A) variación de frecuencia, (B) variación de amplitud. Tampón Britton Robinson
0.1 M, pH 2, tiempo de acumulación: 420 s.

Figura 74. 93
Curva de calibración de 4-NimMeOH obtenida sobre GCE/NTCs(H2O), tampón Britton Robinson
0.1 M, pH 2.

viii Paola Jara Ulloa

Índice de tablas.
Tabla 1. 33
Valores de concentración micelar critica para CTAB y Hyamina.

Tabla 2. 34
Valores de concentración micelar critica para CTAB y Hyamina.

Tabla 3. 36
Potenciales de pico para nitrocompuestos en medio acuoso, tampón Britton Robinson a pH 2.

Tabla 4. 46
Potenciales de pico para nitrocompuestos en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1
M.

Tabla 5. 52
Solución acuosa de Hyamina 5 mM Dato obtenido (referencia) desde soluciones en medio mixto b
30/70: Etanol/ tampón Britton-Robinson, c 60/40 : DMF/ tampón citrato.
Constantes de disproporcionación, tiempo de vida media para el anión radical nitro y potenciales
de pico catódico para el par redox RNO2/ RNO2• en solución acuosa con Hyamina 15 mM a
diferentes pHs.

Tabla 6. 57
Potenciales de pico catódico para nitrocompuestos en medio 100% DMF.

Tabla 7. 72
Tamaño de micelas observado por Light Scattering para el surfactante catiónico CTAB.

Tabla 8. 72
Tamaño de micelas observado por Light Scattering para el surfactante catiónico Hyamina.

Tabla 9. 74
Solvente utilizado y λmáx observado para 4-NimMeOH.

Tabla 10. 81
Valores de potencial de pico catódico de 4-NimMeOH sobre GCE modificado con NTC en dos
agentes dispersantes.

Tabla 11. 83
Valores de sensibilidad para dos agentes dispersantes.

Tabla 12. 83
Valores de sensibilidad para un electrodo GCE modificado con NTC dispersos en agua a distintos
pH. Potencial de pico catódico para 4-NimMeOH en las mismas condiciones.

Tabla 13. 91
Valores de sensibilidad para electrodo de GC modificado con diferentes NTCs.

ix Paola Jara Ulloa

RESUMEN

Los nitroimidazoles en general, han presentado un gran interés desde el

punto de vista biológico, debido a que dichos compuestos son drogas efectivas
contra enfermedades infecciosas, utilizándose algunas como drogas
antibacterianas o antiprotozoarias y además, como agentes citotóxicos en la
terapia del cáncer.
Durante el desarrollo de esta tesis se realizó la síntesis y caracterización
electroquímica de dos series de compuestos derivados del 4-nitroimidazol. Las
series fueron diseñadas para estudiar y/o evaluar la influencia de diferentes
sustituyentes en las posiciones 1 y 2 del anillo nitroimidazólico, sobre la reducción
del grupo nitro, en cuanto a energética, estabilidad del anión radical generado y
mecanismo involucrado. La reducción del grupo nitro es el paso fundamental para
la actividad biológica de estos compuestos, debido a que se generan
intermediarios altamente reactivos.
Se estudió la reducción electroquímica de éstos derivados sobre diferente
material de electrodo, en medio acuoso, no acuoso y en presencia de surfactantes
(aniónico, catiónico y no iónico), encontrándose que el mecanismo de reducción
es fuertemente dependiente de las variables antes mencionadas. Utilizando
voltamperometría cíclica (VC) entre otras técnicas, se logró estudiar la generación
del anión radical nitro y su estabilidad en medio micelar. Los experimentos por VC
demostraron que la reducción de los derivados nitroimidazólicos en presencia de
micelas catiónicas genera un anión radical nitro bien estabilizado en medio acuoso
desde pH 7.4 en adelante. Teniendo en cuenta que el ambiente micelar es
considerado como un modelo primitivo de la membrana biológica, este trabajo
otorgó una herramienta muy útil para estudiar la formación, estabilidad y
reactividad del anión radical nitro en estas condiciones.
Por otra parte, se realizó un estudio acerca del comportamiento electroquímico
de dos derivados sintetizados del 4-nitroimidazol, sobre electrodo de carbón vítreo
(GCE) y GCE modificado con nanotubos de carbono de (NTCs).
La respuesta electroquímica de los electrodos modificados con NTCs fue

x Paola Jara Ulloa

evaluada por técnicas electroquímicas, optimizando varios parámetros, como pH
del medio, naturaleza y concentración de la dispersión de NTCs y tiempo de
acumulación. El electrodo modificado exhibió atractivas propiedades
electroquímicas, como el aumento de la intensidad de corriente y una reducción
significativa en el valor de potencial comparado con el GCE sin modificar.

xi Paola Jara Ulloa

SUMMARY
Nitroimidazoles generally have a strong interest from the biological point of view, because
these compounds are effective drugs against infectious diseases, such as using certain
drugs or antibacterial antiprotozoarias and as cytotoxic agents in cancer therapy.
During the development of this thesis was the synthesis and electrochemical
characterization of two series of compounds derived from 4-nitroimidazole. The series was
designed to study and / or evaluate the influence of different substituents in positions 1
and 2 of the ring nitroimidazoles, on reducing the nitro group, in terms of energy stability of
the radical anion generated and mechanism involved.
The reduction of nitro group is a key step for the biological activity of these compounds,
because they generate highly reactive intermediate.
We studied the electrochemical reduction of these derivatives on different electrode
material in aqueous media, non-aqueous and in the presence of surfactants (anionic,
cationic and nonionic), found that the mechanism of reduction is heavily dependent on the
variables mentioned above.
Using cyclic voltammetry (CV) among other techniques, were able to study the generation
of the nitro and anion radical in micellar stability. The experiments showed that VC
reduction nitroimidazólicos derivatives in the presence of cationic micelles creates a good
stable nitro radical anion in water pH from 7.4 onwards. Taking into account that the
micellar environment is considered a model of primitive biological membrane, this paper
gave a very useful tool for studying the formation, stability and reactivity of the nitro radical
anion in these conditions.
Moreover, a study on the electrochemical behavior of two derivatives synthesized from 4-
nitroimidazole on glassy carbon electrode (GCE) and GCE modified with carbon
nanotubes (NTCs).
The electrochemical response of the electrodes modified NTCs was evaluated by
electrochemical techniques, optimizing various parameters such as pH of the environment,
nature and concentration of dispersed NTCs and time of accumulation. The modified
electrode exhibited attractive electrochemical properties, such as increasing the intensity
of flow and a significant reduction in the value of potential compared to the CGE
unchanged.

xii Paola Jara Ulloa

1.- INTRODUCCIÓN.

El estudio sobre los nitroimidazoles ha tenido un gran desarrollo debido a sus

interesantes propiedades. Dependiendo de la naturaleza del sustituyente y de la posición
del grupo nitro, los derivados nitroimidazólicos pueden mostrar diferentes tipos de
actividad farmacológica.1
Los compuestos nitroimidazólicos han sido utilizados en el tratamiento de diversas
enfermedades debido a que poseen características antibacterianas y antiprotozoarias.2-8
Variados estudios han sido realizados para dilucidar el mecanismo de acción de
estos compuestos, los que han permitido concluir que es necesario que ocurra la
reducción del grupo nitro para que exista actividad citotóxica9, ya que este genera varios
intermediarios altamente reactivos en las diferentes etapas de su reducción.
La reducción de estos compuestos puede ser llevada a cabo por dos rutas
distintas4,10 dependiendo si el medio es aeróbico o anaeróbico. En ausencia de oxígeno, el
proceso de reducción de los nitroimidazoles es similar al de nitrobenceno.11 En ambas
rutas de reducción, la primera etapa es la captación de un electrón por el grupo nitro para
dar el anión radical nitro correspondiente¡Error! Marcador no definido., de acuerdo a:

RNO2 + ē RNO2 • (Ec.1)

Un esquema clásico que describe la reducción del grupo nitro en condiciones

aeróbicas y anaeróbicas se presenta en la figura 1

TS 2 H2 O + 1/2 O2
T(S H ) 2

Vía Aeróbica
H 2O 2 OH + OH
2H + + e -
Fe ++ F e +++
SO D
O2 O2 (ox)D NA + T Vía Anaeróbica
ciclaje re dox
D NA
1e - H+ 1e - 2e - 2e -
RNO2 RNO2 RNO2 H RNO RNHOH RNH2
nitroso hidro xilam ina am ina
anió n ra dical nitro
dism utación
descom posición H 2O RNO RNO
(5-nitr oim idazo les) RNO2 H 2e - + 2H +
RNO2 RN=NR RN=NR + H2 O
- +
NO 2 H R azo
R O
radical im idazólico nitrit o azoxy 2e -
2H +

RNHNHR

Figura 1 : Bioactivación reductiva de com puestos

1
 Tal como lo muestra la figura 1, es posible la formación de una gran variedad de
intermediarios donde uno o más de ellos son responsables de la toxicidad de estos
compuestos. En condiciones anaeróbicas, el anión radical nitro (RNO2•) puede reducirse
para formar el derivado nitroso (RNO), el derivado hidroxilamínico (RNHOH) y finalmente
el derivado amino (RNH2), como lo muestran las siguientes reacciones de transferencia
electrónica:

RNO2• + ē + 2H+ RNO + H2O (Ec.2)

RNO + 2ē + 2H+ RNHOH (Ec.3)

RNHOH + 2ē + 2H+ RNH2 + H2O (Ec.4)

En condiciones aeróbicas, el anión radical nitro (RNO2•) es oxidado por el oxígeno

molecular (O2) para producir anión radical superóxido (O2•) y regenerar el grupo nitro
inicial dando origen a un mecanismo de detoxificación denominado “ciclaje redox.”12,13

RNO2 • + O2 → RNO2 + O2 • (Ec.5)

Este anión radical superóxido (O2•) a su vez puede generar otras especies
reactivas de oxígeno como el radical hidroxilo (OH•), peróxido de hidrógeno (H2O2), etc..
Por lo tanto el anión radical nitro ocupa un rol fundamental en el mecanismo de
acción de los compuestos nitroimidazólicos, debido a que es la base de su actividad
biológica, es por ello que el conocimiento de su comportamiento es de suma importancia
ya que su química radicalaria es determinante para su uso.

Dentro de los derivados nitroimidazólicos se distinguen los nitrosustituidos en las

posiciones 2, 4 y 5 del anillo. Los 5 y 2-nitroimidazoles potencian el efecto de las
radiaciones sobre tumores de centro necrótico, pero solamente los 5- nitro derivados son
útiles como antibacterianos y antiparasitarios. Los compuestos nitrosustituidos en la
posición 4 son generalmente menos activos que los derivados 5-nitroimidazólicos, tales
como metronidazol, misonidazol, ornidazol, secnidazol, etanidazol y tinidazol; fármacos
comúnmente usados como agentes terapéuticos contra una variedad de infecciones
protozoicas y bacterianas.3,14-15

2 Paola Jara Ulloa

 Sin embargo, tanto los derivados 2 y 5-nitroimidazólicos han mostrado efectos de
genotoxicidad frente a las células sanas del organismo al cual han sido administrados, el
caso más conocido dentro de los 5-nitroimidazoles es el metronidazol, ya que se ha
encontrado que es tóxico en algunos sistemas de prueba biológicos así como con
pacientes tratados con la droga,16 otros estudios les atribuyen propiedades mutagénicas y
cancerígenas.17-20

Estos antecedentes han conducido a sintetizar nuevos compuestos

nitroimidazólicos con similar actividad terapéutica pero con menor toxicidad para los seres
humanos; lo que en muchos casos ha derivado a los compuestos 4-nitroimidazólicos.21,22

Las técnicas voltamperométricas han sido aplicadas, a la investigación del

mecanismo de acción de los nitroimidazoles como agentes antimicrobianos,23 a su
determinación en formas farmacéuticas24-29 y a estudios clínicos.30,31

El electrodo de mercurio es el más empleado, pero también se han obtenido

buenos resultados con electrodos sólidos como por ejemplo para el estudio de
nitrobenceno32,33

La técnica electroquímica como la Voltamperometría Cíclica ha demostrado poseer

un importante rol en el estudio del anión radical nitro.34-44 En condiciones óptimas en el
medio adecuado, la reducción monoelectrónica del grupo nitro a anión radical nitro
produce voltamperogramas cíclicos muy bien resueltos debidos al par redox RNO2/RNO2•.
Por ello se propone utilizar esta técnica para estudiar la factibilidad de formación del anión
radical nitro,20el tiempo de vida media 36,37 y la reactividad con otras moléculas.38,39

Para el estudio de la formación y estabilidad de los aniones radicales generados,

en medio mixto a pH básico, así como en medio totalmente no acuoso, es posible obtener
una respuesta reversible que da cuenta de la transferencia monoelectrónica. En la figura 2
se puede apreciar un voltamperograma cíclico y su dependencia con la velocidad de
barrido para el caso del derivado 4NimOH.

3 Paola Jara Ulloa

 15
6
12 4

9 2
1
6
i / μΑ 0,5
3 0,1

0
V/s
-3
-6

-1100 -1200 -1300 -1400

E / mV
Figura 2. Voltamperogramas cíclicos de barridos cortos a distintas velocidades de barrido
(0.1 – 6 V/s) de 4-NImOH 1x10-3 M, en medio 100 % DMF, 0.1M de PTBA.

Los estudios electroquímicos de derivados de 4-nitroimidazol son escasos, el

primer trabajo registrado es de Vianello y col.45 En este trabajo se revisó el
comportamiento polarográfico, ciclovoltamperométrico y EPC-culombiométrico del 4-
nitroimidazol sólo en medio no acuoso. Mediante VC se encontraron dos picos de
reducción. El primer pico fue irreversible hasta una velocidad de 250 V/s mientras que el
segundo resultó ser reversible aún a bajas velocidades de barrido. El primer pico
irreversible fue atribuido a la siguiente reacción,

5HRNO2 + 4 ē → HRNHOH + 4RNO2- + H2O (Ec.6)

y el segundo pico reversible se atribuyó a la reacción de reducción que genera un radical

di-anión nitro,

RNO2- + ē → RNO22- (Ec.7)

Además, en ese estudio se informó que el par RNO2/RNO2• no pudo ser aislado
debido al rápido decaimiento del RNO2• producto de una reacción de protonación por el
protón ácido del 4-nitroimidazol inicial (reacción padre-hijo) generando la base conjugada
(RNO2)- y el radical neutro RNO2H•. Esto describe una reacción intermolecular del tipo
padre-hijo entre el anión radical nitro y un protón ácido.

4 Paola Jara Ulloa

 Posteriormente, Zuman y col.46 realizaron estudios polarográficos con una serie de
1,2-dialquil-4-nitroimidazoles, sólo en medio prótico donde se observó que todos los
compuestos son reducidos en una onda de cuatro electrones para producir el
correspondiente derivado hidroxilamínico. Este trabajo no hace ninguna mención a la
posible formación de aniones radicales nitro.

Adicionalmente, el grupo de Bioelectroquímica47 donde se realiza esta tesis, se

llevo a acabo un estudio acerca del comportamiento electroquímico de 4-nitroimidazol en
medio prótico en una amplia escala de pH. Los resultados obtenidos fueron distintos a los
informados por Vianello en medio no acuoso, ya que mostraron que la reducción del 4-
nitroimidazol, en medio prótico a pH básicos, produjo un anión radical nitro estable dentro
de la escala de tiempo de la voltamperometría cíclica, lo que no había sido posible en
medio no acuoso. Este resultado no fue el esperable ya que el anión radical nitro se sabe
más estable en medio no acuoso que en prótico. Según la publicación de Vianello, la
inestabilidad del anión radical se debe a una reacción de protonación intermolecular con
el mismo 4-nitroimidazol de modo que las reacciones intermoleculares del anión radical
afectan fuertemente su estabilidad. En el medio prótico estudiado el anión radical nitro
decayó de acuerdo a una reacción de 2do orden (disproporcionación) de tal manera que
la reducción monoelectrónica del 4-nitroimidazol y el posterior decaimiento del anión
radical siguió un esquema EC2 de acuerdo a,

RNO2 + ē → RNO2• (Ec.8)

2RNO2• + 2H+ → RNO2 + RNO + H2O (Ec.9)

Como se puede concluir del análisis del estado de la técnica no se cuenta con
estudios exhaustivos que permitan descripciones más concretas acerca de los
mecanismos electroquímicos involucrados en la reducción de compuestos derivados del
4-nitroimidazol, así como tampoco existen estudios electroquímicos que apunten a
dilucidar la influencia de los sustituyentes en el anillo 4-nitroimidazólico y como éstos
afectan los mecanismos de la reducción y fundamentalmente como afectan la formación y
estabilidad del anión radical nitro.

5 Paola Jara Ulloa

 Por lo tanto se consideró de interés un estudio que contempló la síntesis de
compuestos derivados del 4-nitroimidazol con distintos sustituyentes en la posición 1 y 2
del anillo. Se estudió la reducción electroquímica de estos derivados sobre diferente
material de electrodo en medio acuoso, no acuoso y en presencia de surfactantes (medio
micelar).

Los sistemas micelares han sido utilizados en una variedad de aplicaciones

químicas como un modelo primitivo de la membrana biológica.48 Los estudios
electroquímicos en soluciones micelares se han dividido principalmente en dos líneas de
investigación. La primera examinando el efecto de las micelas sobre pares redox
reversibles y la segunda es la búsqueda de un sistema micelar capaz de estabilizar
intermediarios altamente inestables en solución acuosa. Saveant et al.49 tiene reportada
una notable estabilización del anión radical electrogenerado de ftalonitrilo en presencia de
micelas catiónicas y sugiere que la observación de una disminución de 250 veces la
velocidad de protonación del anión radical era debida a su asociación con la micela
cargada positivamente.

En un trabajo posterior, Blount et al. estudió la reducción electroquímica de

nitrobenceno (NB) en micelas aniónicas, catiónicas y no iónicas y encontró en contraste
con Saveant, que el único medio capaz de estabilizar el anión radical NB• no era en
micelas catiónicas sino aniónicas.50

Debido a lo anteriormente expuesto, se estudió la reducción de los derivados 4-

nitroimidazólicos en presencia de surfactantes catiónicos, aniónicos y no iónicos, de
manera de encontrar el medio óptimo para la estabilización del anión radical nitro.

Finalmente, se estudió el comportamiento electroquímico de un derivado

sintetizado del 4-nitroimidazol sobre electrodos de carbón vítreo (GCE) modificado con
nanotubos de carbono (NTCs), los NTCs han llamado mucho la atención debido a sus
notables propiedades eléctricas, químicas, mecánicas y estructurales,51 los electrodos
modificados con NTCs exhiben atractivas propiedades electroquímicas como un fuerte
efecto electrocatalítico.52

6 Paola Jara Ulloa

2.- HIPÓTESIS.

Un estudio electroquímico de compuestos 4-nitroimidazólicos sintetizados con

diferentes sustituyentes en la posición 1 y 2 del anillo, permitirá obtener información de la
viabilidad de la reducción del grupo nitro (potenciales de reducción), además la utilización
de surfactantes en el medio de trabajo permitirá la estabilización del anión radical nitro en
solución acuosa, de esta manera se obtendrá información del mecanismo de reducción,
de la estabilidad y reactividad de los productos y/o intermediarios de la reducción.

3.- OBJETIVOS.

3,1.- OBJETIVOS GENERALES.

Sintetizar y caracterizar electroquímicamente derivados del 4-nitroimidazol con un
sustituyente CH3 y H en posición 1 y CH2OH, CH2Br y H en posición 2.
Evaluar la influencia de los distintos sustituyentes sobre el mecanismo de reducción.

3,2.- OBJETIVOS ESPECÍFICOS.

• Sintetizar nuevos derivados del 4-nitroimidazol sustituidos en la posición 1 y 2 del
anillo.
• Dilucidar el comportamiento electroquímico de estos derivados en diferentes medios.
• Caracterización de los intermediarios REDOX generados en la reducción.
• Caracterizar la influencia de los sustituyentes en la posición 1 y 2 del anillo sobre el
mecanismo global de reducción.
• Obtención de las condiciones adecuadas de generación del anión radical nitro en los
distintos medios.
• Desarrollo de metodologías para la obtención de parámetros cuantitativos como
constantes de estabilidad y tiempos de vida media, que describan los distintos grados
de estabilidad de los radicales.
• Evaluar la interacción del anión radical nitro con endo/xenobióticos.

7 Paola Jara Ulloa

4.- MATERIALES Y MÉTODOS.
4,1.- MATERIALES.
4,1,1.- Compuestos en estudio.

a) Código de síntesis: 4-NimMeOH.

Fórmula global: C5H7N3O3.
Nombre: 2-Hidroximetil-1- metil - 4-nitroimidazol.
PM: 157 g / mol.

b) Código de síntesis: 4NimMeBr.

Fórmula global: C5H6N3O2Br.
Nombre: 2-Bromometil-1-metil-4-nitroimidazol.
PM: 220 g / mol.

c) Código de síntesis: 4NimHOH.

Fórmula global: C4H5N3O3.
Nombre: 2 -Hidroximetil-1H-4-nitroimidazol.
PM: 143, g / mol.

d) Fórmula global: C3H3N3O2.

Nombre: 4-nitroimidazol.
PM: 113,09 g / mol.

e) Fórmula global: C3H3N3O2.

Nombre: 2-nitroimidazol.
PM: 113,09 g / mol.

8 Paola Jara Ulloa

4,1,2.- Reactivos y solventes.

De síntesis
• Acetato de etilo, Equilab
• Acetona, Merck
• Ácido clorhídrico, Merck
• Ácido sulfúrico, Merck
• 1-Bencilimidazol, Aldrich
• 1-Metilimidazol, Aldrich
• Bicarbonato de sodio, Equilab
• Bromuro de tionilo, Sigma
• Cloruro de amonio, Scharlau
• Cloruro de sodio, Equilab
• Diclorometano, Equilab
• Dimetilsulfóxido-d6 (DMSO-d6), Sigma
• Etanol absoluto, Merck
• Éter etílico, Merck
• Hidróxido de potasio, Equilab
• Hielo seco, AGA
• Metanol, Equilab
• Nitrato de potasio, Merck
• Piridina, Sigma
• Sodio metálico, Merck
• Solución formalina 37%, Aldrich
• Solución hidróxido de amonio 25%, Equilab
• Sulfato de sodio, Merck

9 Paola Jara Ulloa

De electroquímica

• Ácido acético glacial p.a. Mallinckrodt

• Ácido bórico (99%) p.a. Fluka Chemica
• Ácido clorhídrico (36%) p.a. Reutter
• Ácido fosfórico (85%) p.a. Merck
• Agua desionizada pureza milli-Q
• Bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB), Aldrich
• Bromuro de 2-bromoetil trimetilamonio, Aldrich
• Cloruro de potasio (KCl), p.a Merck
• Dodecil sulfato de sodio (SDS), Sigma - Aldrich
• Fosfato monobásico de potasio, Merck
• Fosfato dibásico de sodio, JT Baker
• Hidróxido de sodio (pellets) p.a Merck
• Hyamina, Sigma - Aldrich
• Mercurio, Merck
• Neutral red, Sigma
• Nanotubos de carbono (MWNTCS) 1-5 µm X (30 ± 15) nm de
diámetro, NanoLab (USA);
• Nitrógeno extra puro, Indura
• N,N - dimetilformamida (DMF) p.a., Merck;
• Perclorato de tetrabutil amonio (PTBA), Fluka Chemica,
Merck.
• Triton-X, Merck

10 Paola Jara Ulloa

4,1,3.- Material de vidrio.
• Todo el material de vidrio utilizado fue clase A.

4,1,4.- Electrodos.
a) De trabajo:

• Gota colgante de mercurio ((SMDE) Static Mercury Drop Electrode), BAS.

• Goteo de mercurio ((CGME) Controlled Growth Mercury Electrode), BAS.
• Electrodo de Platino ( PTE) de1.6 mm de diámetro (BASi MF-2013)
• Electrodo de carbono vítreo (Glassy carbon electrode GCE)) de 3 mm de
diámetro (Model CHI104, CH Instruments)
• Electrodo de carbono vítreo (Glassy carbon electrode (GCE)) de 3 mm de
diámetro (Model CHI104, CH Instruments) modificado con nanotubos de carbono
(NTCs).

b) Auxiliar : Alambre de platino. (BASi MW-1032)

c) De referencia : Ag / AgCl (BASi MF-2052)

4,1,5.- Equipos.
a) Sistema voltamperométrico/polarográfico y computacional:
• Analizador voltamperométrico BAS CV-50W y BAS CV-100W.
• Analizador voltamperométrico CHI 900 (CH Instruments Inc., USA)

b) Sistema espectrofotométrico:
• Espectrofotómetro UV-Vis UNICAM modelo UV-2, software VISION 2.1 para
control del instrumento.

c) Equipos de uso general:

• Agitador magnético Heidolph MR 3002
• Balanza de precisión Precisa 40SM-200A (sensibilidad 0,01 mg)

11 Paola Jara Ulloa

 • Espectrofotómetro UV-Vis, Unicam modelo UV-2
• Estufa WTB Binder.
• Lámpara UV- Visible para placas cromatográficas
• Manto calefactor
• Medidor de pH WTW modelo pMx 3000.
• Medidor de pH WTW modelo pH 537
• Micropipetas Socorex de volumen variable entre 1-10 mL
• Micropipetas Transferpette de volumen variable entre 2-1000 μL
• Sistema purificador de agua Milli-Q Ultra- Pure Water System
• Sonicador Bransonic Branson 2210
• Polarizador Thomson (Light Scattering)
• Rotavapor modelo HEIDOLPH WB2000.

d) Equipos para análisis de productos de síntesis:

• Punto de fusión, Electrothermal capillary.
• Espectroscopía NMR: espectrómetro Bruker Avance DRX 300.
• FT-IR: espectrómetro Bruker IFS 55 Equinox.

12 Paola Jara Ulloa

4,2.- MÉTODOS.
4,2,1.- Métodos de síntesis.
Los compuestos estudiados fueron sintetizados de acuerdo a metodologías descritas53-57
o modificaciones simples de éstas, para su posterior estudio electroquímico.

4,2,1,1.- Síntesis de 1-metil- 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol.

La síntesis de este compuesto se realizó de acuerdo al esquema que se presenta en la
fig. 3, utilizando como compuesto de partida 1-metil-imidazol (1).

O2N
N N N
Formalina 37% KNO3/H2SO4
OH OH
N ∆ N N
CH3 CH3 CH3

(1) (2) (3)

Figura 3: Síntesis de 1 metil- 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol.

• Síntesis de 2-hidroximetil-imidazol (2).

Se mezclaron 50 mL de 1-metil-imidazol con 100 mL de formalina al 37%, la solución
resultante fue calentada a reflujo con agitación por un tiempo de 27 horas.
Posteriormente, se evaporó el solvente mediante el uso de rotavapor, lavando la mezcla
de reacción con etanol y luego metanol, de manera de eliminar la formalina que no
reaccionó y el exceso de agua. El producto fue cristalizado lentamente, se filtró y se
recristalizó en metanol.

• Síntesis de 1-metil- 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol (3).

Se tomaron 10 g de 1-metil-2-hidroximetilimidazol y se adicionaron a 20 g de nitrato de
potasio, se homogenizó esta mezcla y luego se adicionó en pequeñas cantidades con
agitación mecánica sobre 50 mL de ácido sulfúrico, ya que además de reactivo se utilizó
como solvente, sin sobrepasar los 50ºC. Luego, se calentó en un baño de agua por 3
horas; posteriormente, se agitó a temperatura ambiente por 15 horas. El producto fue
neutralizado hasta pH 7-8 con una solución de hidróxido de potasio concentrada. Se
extrajo con acetato de etilo, se secó con sulfato de sodio anhidro y se evaporó al vacío.
Se dejó cristalizar lentamente. Se recristalizó en etanol.

13 Paola Jara Ulloa

La caracterización física y química de este compuesto dio los siguientes resultados:
PF: 180-181ºC 1HRMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 3,2 (s, 1H, OH), 3,8 (s, 3H, -N-CH3), 4,5
(s, 2H,-CH2-), 8,0 (s, 1H, -C=CH-N-CH3).

4,2,1,2.- Síntesis de 1- metil- 2-Bromometil- 4-nitroimidazol (4).

La síntesis de este compuesto se realizó a partir del compuesto (3) del esquema de la
fig.1,

O2N
O2N N
N
SOBr2 Br
OH Piridina N
N
CH3
CH3

Figura 4: Síntesis de 1 metil- 2-Bromometil- 4-nitroimidazol.

Se tomó 1 g de 1-metil- 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol y se disolvió en el mínimo volumen

de piridina que fue posible, obteniéndose una solución traslúcida levemente coloreada
(amarillo muy claro). Una vez disuelto se agregan 700 μL de SOBr2, la mezcla resultante
cambió a un color naranjo intenso, se calentó a reflujo con agitación mecánica por un
tiempo de 3 horas. Se observó la aparición de un precipitado amarillo, se filtró al vacío y
se lavó el producto repetidas veces con acetona fría para eliminar el exceso de piridina, el
sólido fue recristalizado en metanol, obteniéndose cristales blancos.

La caracterización física y química de este compuesto dio los siguientes resultados:

PF: 219-220ºC 1HRMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 4,9(s, 3H, NCH3), 7,2(s, 2H, CH2), 9,6(s,
1H, -C=CH-N-CH3).

14 Paola Jara Ulloa

4,2,1,3.- Síntesis de 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol.
La síntesis de este compuesto se realizó de acuerdo al esquema que se presenta en la
fig. 3, utilizando como compuesto de partida 1-Bencil-imidazol (5).

O2N
N N N N
Formalina 37% Na° / NH3 liq. KNO3/H2SO4
OH OH OH
N ∆ N NH4Cl N N
H H

(7) (8)

(5) (6)

Figura 5: esquema general de la síntesis de 4NimOH

• Síntesis de 1-bencil-2-hidroximetilimidazol (6).

Se tomaron 10 g de 1-bencilimidazol y se adicionaron 90 mL de formalina al 37%, esta
mezcla fue calentada a reflujo con agitación mecánica por 24 horas. La solución
resultante fue lavada con etanol y evaporada al vacío. Luego, se lavó con metanol y se
evaporó al vacío. Se obtuvo un líquido viscoso de color amarillo, el cual no cristalizó.
Formación del clorhidrato: El 1-bencil-2-hidroximetilimidazol fue disuelto en 20 mL de
éter anhidro y burbujeado con HCl (g), el producto resultante son cristales blancos.

• Síntesis de 2-hidroximetilimidazol (7).

Se agregaron 10,0 g de 1-bencil-2-hidroximetilimidazol a 150 mL de amoníaco líquido
recién preparado; luego, se adicionaron pequeñas piezas de Naº con agitación mecánica
hasta obtener un color azul permanente. La solución fue neutralizada con pequeñas
porciones de cloruro de amonio. La mezcla resultante se extrajo con 100 mL de etanol
absoluto y se evaporó al vacío, obteniéndose un líquido viscoso de color café, el cual no
cristalizó. Si eventualmente apareciera un sólido (sales) se agrega etanol absoluto frío, se
filtra al vacío y se evapora al vacío.
Formación del clorhidrato: El 2-hidroximetilimidazol fue disuelto en 20 mL de éter anhidro
y burbujeado con HCl (g), el producto resultante son cristales blancos.

15 Paola Jara Ulloa

 • Síntesis de 2-hidroximetil-4-nitroimidazol (8)

Se formó una mezcla con 7,0 g de 2-hidroximetilimidazol y 14 gramos de nitrato de

potasio, se homogenizó y luego se adicionó en pequeñas cantidades sobre 50 mL de
ácido sulfúrico, el que además de reactivo se utiliza como solvente, sin sobrepasar los
50ºC. Posteriormente se calentó con un baño de agua a 80 ºC por 2 horas, se mantuvo
con agitación mecánica a temperatura ambiente por 15 horas. El producto fue
neutralizado con una solución saturada de bicarbonato de sodio hasta pH 7-8. Se extrajo
con acetato de etilo, se secó con sulfato de sodio anhidro y se evaporó al vacío. El líquido
viscoso de color amarillo cristalizó en acetona seca, obteniéndose cristales amarillos.

La caracterización física y química de este compuesto dio los siguientes resultados:

PF: 148-150ºC 1HRMN(300 MHz, agua-d): δ 4,5 (s, 2H, -CH2-). 6,9 (s, 2H, -NH; OH), 7,3
(s, 1H, -C=CH-NH).

16 Paola Jara Ulloa

4,2,2.- Medios de trabajo para estudios electroquímicos.
4,2,2,1.- Medio acuoso.
• Preparación de soluciones.
Soluciones stock de nitrocompuestos.
Se prepararon soluciones stock de cada compuesto nitroimidazólico a una concentración
de 0.01 M en Britton-Robinson 0.1M.

Soluciones de trabajo.
Se prepararon por dilución de la solución stock hasta obtener la concentración requerida,
para el caso de polarografía de pulso diferencial y Tast se trabajó a concentraciones del
orden de 10-4 M.
Para Voltamperometría Cíclica la solución de trabajo fue en el orden de 10-3 M. Estas
soluciones se mantuvieron refrigeradas y protegidas de la luz para evitar su
descomposición.

Soluciones tampón Britton Robinson 0.1 M.

A un matraz aforado de 1000 mL se agregaron 500 mL de agua grado Milli-Q, luego se
adicionaron 6.18 g de ácido bórico, 5.7 mL de ácido acético glacial y 6.7 mL de ácido
fosfórico, la solución resultante fue agitada hasta completa disolución del ácido bórico y se
completó el volumen con agua grado Milli-Q. El pH de este tampón recién preparado fue
de 1.6.

4,2,2,2.- Medio acuoso micelar.

• Preparación de soluciones.
Soluciones stock de nitrocompuestos.
Se prepararon soluciones stock de cada compuesto nitroimidazólico a una concentración
de 0.01 M en la solución de surfactante a realizar el estudio. Las soluciones de trabajo
fueron preparadas por dilución de la solución madre hasta obtener la concentración
deseada. Estas soluciones se mantuvieron refrigeradas y protegidas de la luz para evitar
su descomposición.

17 Paola Jara Ulloa

Soluciones de surfactantes.
Se pesó la cantidad en gramos necesaria de los siguientes surfactantes; Bromuro de
cetiltrimetilamonio, Hyamina, Dodecilsulfato de sodio y Triton-X, de manera de obtener
una concentración superior a la CMC de cada uno de ellos en Britton-Robinson 0.1 M.

4,2,2,3.- Medio no acuoso (100% DMF + 0.1M PTBA)

• Preparación de soluciones.
Soluciones stock de nitrocompuestos.
Se prepararon soluciones stock de cada compuesto nitroimidazólico a una concentración
de 0.01 M en DMF.

Soluciones de trabajo.
Se tomó una alícuota de la solución stock preparada con DMF, se agregaron 0.34192 g
de electrolito soporte perclorato de tetrabutil amonio (PTBA) y luego se aforó a 10 mL con
DMF.

18 Paola Jara Ulloa

4,3.- Técnicas utilizadas.
4,3,1.- Polarografía de pulso diferencial (PPD) y Polarografía tast (Ptast).

Para los estudios polarográficos se prepararon soluciones de trabajo de

compuesto nitroimidazólico de una concentración del orden de 10-4M en los distintos
medios.
Se utilizó como electrodo de trabajo, un electrodo goteante de mercurio (CGME),
como contra electrodo un alambre de platino y los potenciales fueron medidos contra un
electrodo de referencia de Ag/AgCl(sat). Antes de cada medición se burbujeó con
nitrógeno. El ajuste de pH de las soluciones acuosas se realizó con adiciones de
pequeñas alícuotas de NaOHconc. o HClconc.

Se tomó en cuenta el comportamiento que presentaron los parámetros

característicos (Fig.6), como el potencial de pico (Ep), potencial de media onda (E1/2),
corriente de pico (ip) y corriente límite (ilim) con respecto a la variación del pH, desde 2
hasta 12.

2.0 1.2
ip,c
ilim
1.0
1.5
0.8

1.0 A 0.6 B
i / μA

i / μA

0.4
0.5

0.2

0.0
0.0 E 1/2
Ep,c
0 -200 -400 -600 -800 -1000 0 -200 -400 -600 -800 -1000

E / mV (Ag/AgCl) E / mV (Ag/AgCl)

Figura 6. Polarograma de pulso diferencial (A) y polarograma Tast (B)

19 Paola Jara Ulloa

4,3,2.- Voltamperometría cíclica.

El estudio voltamperométrico se realizó con soluciones de cada compuesto

nitroimidazólico a una concentración del orden de 10-3M en los distintos medios, una
alícuota de 10 mL de esta solución fue transferida a una celda de 25 mL y burbujeada
con nitrógeno por 10 minutos antes de cada experiencia. Se utilizaron como electrodos de
trabajo, gota colgante de mercurio (SMDE), y un electrodo de carbono vítreo modificado
con nanotubos de carbono (GCE/NTCs), un alambre de platino como contra electrodo y
los potenciales fueron medidos contra un electrodo de referencia de Ag/ AgCl(sat).

Se llevo a cabo el estudio de reversibilidad de la señal voltamperométrica variando

la velocidad de barrido y el valor de pH de la solución cuando el medio de trabajo fue
acuoso. Se ajustó el pH con adiciones de pequeñas alícuotas de NaOHconc. o HClconc.

A partir de los valores de corriente de pico catódico (ip,c) en función de la

velocidad de barrido, fue posible distinguir si el proceso era controlado por difusión o
adsorción. Para reacciones de transferencia electrónica reversibles se cumple la siguiente
relación para procesos controlados por difusión,

3 1 1
i p = 2,69 × 10 5 ⋅ n 2
⋅ A ⋅ D0 2 ⋅C ⋅v 2
(Ec.10)

y para procesos controlados por adsorción,

3 1
i p = 2,69 ×10 5 ⋅ n 2
⋅ A ⋅ D0 2 ⋅C ⋅ v
(Ec.11)

Donde
C = [mol / cm3]
A = [cm2], área del electrodo
D0 = [cm2 / s], coeficiente de difusión
ν = [V / s], velocidad de barrido
n = número de electrones
ip = [A] Intensidad de pico

20 Paola Jara Ulloa

Para casos irreversibles, se tiene la expresión:

i p = 2,99 × 10 5 ⋅ n ⋅ (α ⋅ n a )
1 1 1
2 ⋅ A ⋅ C 0 ⋅ D0 2 ⋅v 2
(Ec.12)

Donde,
n = número de electrones transferidos finales
na = número de electrones transferidos antes de la etapa determinante
α = coeficiente de transferencia electrónica

entonces según la relación logarítmica de la Ec.10 se tiene:

1
Log i p = Log (k ) + ⋅ Log (v )
2 (Ec.13)

( )
∂ Log i p
= 0. 5
∂ Log (v )
(Ec.14)

De esta manera, un valor de pendiente igual a 0.5 de la ecuación 14, indica que el
proceso está controlado por difusión.

Por otra parte al realizar el mismo desarrollo para la ecuación 11 obtendremos una
pendiente (Log (ip) / Log (ν)) igual a 1, lo que indicaría que el proceso está controlado por
adsorción.

4,3,2,1.- Determinación de la razón de corriente (ip,a/ip,c).

La tendencia de una especie generada electroquímicamente para dar reacciones
químicas posteriores se ve reflejada en la razón de corrientes ip,a/ip,c. En este estudio la
razón de corrientes es el principal parámetro experimental, el cual es obtenido
directamente de cada voltamperograma. Es de utilidad tanto para evaluar cualitativamente
la formación del anión radical nitro como para determinar cuantitativamente la constante
cinética de estabilidad del mismo. Por lo tanto es importante definir una forma de medición
que sea lo mas fiable y reproducible del fenómeno observado. Para este efecto, se aplicó

21 Paola Jara Ulloa

un método simple desarrollado por Nicholson58, que permite medir la razón ip,a/ip,c desde
un voltamperograma cíclico, midiéndose tres puntos en cada voltamperograma como se
detalla en la figura 7.

20

15

10 (Ip,c)0 Catódico
i / μA

5 (Ip,s)0

-5 (Ip,a)0 Anódico

-10

-500 -600 -700 -800 -900

E / mV

Figura 7. Voltamperograma cíclico.

Donde
(Ip,a)0: intensidad de corriente anódica
(Ip,c)0: intensidad de corriente catódica
(Ip,s)0: intensidad de la corriente en el potencial de inversión de barrido

A partir de estos tres valores, se calcula la razón de corrientes según la siguiente

ecuación,

i p ,a (i ) (0.485) ⋅ (i )
=
(i ) + (i ) + 0.086
p ,a 0 p ,s 0

i p ,c p ,c 0 p ,c 0
(Ec.15)

De este modo se evita la influencia negativa sobre la línea de base del pico de vuelta
debido a transferencias posteriores.

22 Paola Jara Ulloa

4,3,2,2.- Determinación del tipo de reacción electródica.
Para la caracterización de la reacción química acoplada a la reacción de
transferencia electrónica involucrada en la formación de la especie radicalaria, se
59,60
utilizaron aproximaciones teóricas descritas por M.L Olmstead et. a.l en las que se
relaciona la razón de corriente ip,a/ip,c con el parámetro cinético ω.

log ω = log (k 2 ⋅ C0 ⋅τ ) + 0,034(a τ − 4 ) (Ec.16)

log ω = log (k 2 ⋅ C0 ⋅τ ) + 0,047 (aτ − 4 )

(Ec.17)

La Ec.16 está descrita para un mecanismo de Dimerización (b) y la Ec.17 está

descrita para un mecanismo de Dismutación (a).

A + e ⎯⎯→
ks
B
2B ←⎯→
⎯ A + C
kdis
(a)
2B ←⎯⎯→ D
kdim
(b)

Se tiene que, k2 es la constante de decaimiento de segundo orden, τ es la

constante de tiempo, definida por,

( E1 / 2 − E λ )
τ=
v (Ec.18)

En la que, E1/2 se obtiene

E p , a + E p ,c
E1/ 2 =
2 (Ec.19)

y ν es la velocidad de barrido.

23 Paola Jara Ulloa

 Por otra parte, de las ecuaciones 16 y 17, el segundo término representa el efecto
del potencial de inversión de barrido (Eλ) sobre el parámetro cinético, ya que,

⋅ (Eλ − E 0 )
nF
a ⋅τ =
RT (Ec.20)
siendo,

nFv
a=
RT (Ec.21)

( Eλ − E 0 )
τ=
v (Ec.22)

Se ajustaron los valores de Eλ para que el producto a x τ sea igual a 4 en todas las
experiencias realizadas. Entonces así, se obtiene de las ecuaciones 16 y 17 la expresión,

ω = k 2 ⋅ C 0 ⋅ τ (Ec.23)

relación lineal que nos permite determinar la constante de segundo orden de decaimiento.
Obtenido el valor de k2 se pudo calcular los valores de tiempo de vida media del
radical, según:

1
t1 / 2 =
k2 ⋅ C 0 (Ec.24)

24 Paola Jara Ulloa

 Figura 8. Curvas teóricas para dismutación (A) y dimerización (B).

Olmstead y Nicholson59,60 presentan en sus trabajos curvas de trabajo de ip,a/ip,c

vs k2C0τ (log ω) que permiten interpolar valores experimentales de ip,a/ip,c obtenidos para
diferentes velocidades de barrido. En la fig.8 se muestran estas curvas teóricas para el
caso de dismutación (A) y dimerización (B). El parámetro cinético interpolado (k2C0τ)
graficado versus la constante de tiempo τ resulta en una relación lineal con pendiente
igual a k2C0 lo que permite obtener el valor de la constante cinética.

Por otra parte, como se mencionó en el punto 4,2,2,2. se prepararon las

soluciones de surfactantes por sobre la CMC de cada uno de ellos para la realización de
los estudios electroquímicos.

Si bien, existen numerosos de estos datos reportados en literatura acerca de la

CMC, de manera adicional se realizó un estudio para determinar la CMC de los
surfactantes utilizados por técnicas electroquímicas, las técnicas que se utilizaron fueron
las siguientes,

25 Paola Jara Ulloa

4,3,4.- Curvas electrocapilares61.

Las curvas electrocapilares fueron obtenidas con un BAS CV-100W. Se utilizó

como electrodo de trabajo, un electrodo goteante de mercurio (DME), un alambre de
platino como contra electrodo y los potenciales fueron medidos contra un electrodo de
referencia de Ag/AgCl(sat). Como electrolito soporte se empleó una solución de KNO3
0.1M. El oxígeno disuelto fue removido de la solución tras burbujear con nitrógeno por 10
minutos antes de cada medición.

El método consistió en obtener curvas electrocapilares (tiempo de goteo vs

potencial aplicado) en aumento de la concentración de surfactante en solución.
Posteriormente se graficó el tiempo de goteo vs Log [Surfactante] a diferentes
potenciales6263. La presencia de un mínimo en esta gráfica es tomada como el valor de
CMC.

4,3,5.- Voltamperometría adsortiva64.

La voltamperometría adsortiva es sumamente efectiva en el análisis de

compuestos orgánicos, debido a que muchos de estos compuestos pueden ser
adsorbidos sobre la superficie del electrodo. Al seleccionar las condiciones apropiadas de
preconcentración la sensibilidad de la voltamperometría adsortiva resulta ser mucho
mejor en comparación a otras técnicas voltamperométricas. La voltamperometría
adsortiva consiste básicamente en realizar una voltamperometría lineal, luego de haber
aplicado un determinado potencial sobre el electrodo de trabajo por un tiempo
determinado. Se utilizó como electrodo de trabajo, un electrodo de gota colgante de
mercurio, un alambre de platino como contra electrodo y los potenciales fueron medidos
contra un electrodo de referencia de Ag/ AgCl (sat). Antes de cada medición se burbujeó
con nitrógeno.

Para el desarrollo de este estudio se prepararon una serie de soluciones que

contenían una concentración de 1μM de Neutral Red (NR), compuesto orgánico
electroactivo (Ecuación 25) que fue utilizado como estándar interno debido a que es muy
soluble en medio apolar y poco soluble en agua, por lo tanto una vez formada la micela el

26 Paola Jara Ulloa

NR se solubilizará en su interior quedando menos disponible para su reducción en la
superficie del electrodo.

H
N N NH2 N N NH2
+ 2ē + 2H ↔ +

N N
H
Ecuación 25. Reducción de Neutral Red

Inicialmente se realizó la optimización de las siguientes variables en ausencia de

surfactante; potencial de acumulación, tiempo de acumulación, velocidad de agitación,
tiempo de reposo y velocidad de barrido. Seleccionándose los parámetros de máxima
intensidad de corriente de NR. Luego se registraron los valores de corriente obtenidos
para NR en ausencia y en aumento de la concentración de los surfactantes en estudio.

4,3,6.- Modificación de GCE con NTC.

Los NTCs fueron oxidados por tratamiento químico con una mezcla 1:1 de H2SO4:
HNO3 ambos 3M y llevados a reflujo por 3 horas, luego la suspensión fue filtrada y lavada
con abundante agua hasta llegar a pH neutro. Todos los experimentos
voltamperométricos fueron obtenidos después de purgar con N2.
Preparación del electrodo de trabajo
Antes de cada modificación, el GCE fue pulido con alúmina al agua de 0.3 y 0.05 μm, y
luego lavado con abundante agua. Los NTC oxidados fueron dispersados a diferentes
concentraciones (mg/mL) en agua y DMF y sonicados por 5 minutos, este último
procedimiento se repitió 3 veces. La inmovilización de los NTCs fue llevada a cabo
tomando un volumen de 5 µL de la dispersión de NTCs (DMF, H2O) y depositándolos
sobre la superficie del GCE (Esquema 2). Para secar la dispersión, el GCE fue introducido
a una estufa a 50°C por 15 min. Los electrodos resultantes fueron llamados
GCE/NTC(DMF) y GCE/NTC(H2O) de manera de identificar en que medio fue realizada la
dispersión.

27 Paola Jara Ulloa

 200

150
5
3 100

i / μΑ
50

1 50°C 0

-50

-100
0.0 -0.2 -0.4 -0.6 -0.8

E/V
15 Min
80

6
70

i / μΑ
60

4 50

-0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5

E/V

1. Dispersión de NTC en agua y/o DMF

2. Modificación del electrodo de GC: 5 µL de la dispersión de NTC
3. Secado del electrodo de GC: 15 min a 50°C. Generación electrodo modificado
(GC/NTC)
4. Acumulación del 4-NimMeOH: 250 rpm a un tiempo variable
5. Barrido de potencial (VC), señal cercana a -320 mV
6. Construcción de curva de calibración (CC) sobre un electrodo

Esquema 2. Modificación de GCE con NTCs.

28 Paola Jara Ulloa

4,3,7.- Voltamperometría de onda cuadrada (SWV).

El estudio voltamperométrico, se realizó con soluciones del compuesto

nitroimidazólico a diferentes concentraciones, en solución tampón Britton-Robinson. Se
utilizó como electrodo de trabajo, un electrodo de carbono vítreo modificado con
nanotubos de carbono un electrodo de gota colgante de mercurio, un alambre de platino
como contra electrodo y los potenciales fueron medidos contra un electrodo de referencia
de Ag/AgCl(sat). Antes de cada medición se burbujeó con nitrógeno. Se optimizaron los
parámetros de frecuencia y amplitud.

29 Paola Jara Ulloa

5.- RESULTADOS Y DISCUSIÓN.
5,1.- Determinación de CMCs por técnicas electroquímicas.
5,1,1.- Curvas electrocapilares
Se realizaron curvas electrocapilares utilizando KNO3 0.1M como electrolito
soporte. En este caso, el tiempo de goteo en función de la concentración, a un potencial
constante, presenta un valor mínimo, ese valor de concentración correlaciona con valores
de CMC reportados en literatura por técnicas convencionales.

1.1 0.045 mM

1.0
Tiempo goteo / s

0.9

0.8
0.530 mM
0.7

0.6 A

500 0 -500 -1000 -1500 -2000

E / mV (Ag/AgCl)

1.1

1.0
E/V
Tiempo goteo / s

-0.2
-0.4
0.9
-0.6
-0.8
-1.0
0.8 -1.2
-1.4
-1.6
0.7

B
0.6
-1.6 -1.4 -1.2 -1.0 -0.8 -0.6 -0.4 -0.2

Log [CTAB]

Figura 9. Curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de CTAB en solución de

KNO3 0.1M (A), Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de CTAB a diferentes
potenciales aplicados (B).

30 Paola Jara Ulloa

 La figura 9A muestra las curvas electrocapilares obtenidas a diferentes
concentraciones de CTAB. En ausencia de CTAB el máximo electrocapilar se encontró a
-500 mV.
En aumento de la concentración de CTAB se observó entre -250 y -1250 mV una
disminución en el máximo electrocapilar y un cambio en el potencial de carga cero de la
curva electrocapilar.
Este comportamiento demuestra la absorción de CTAB sobre la superficie de
electrodo de Hg, el efecto más significativo fue encontrado entre -250 y -900 mV.

La figura 9B muestra el tiempo de goteo vs la concentración de CTAB, los

potenciales a los que se encontró la mayor diferencia en el tiempo de goteo fueron a -800
y -1000 mV. Donde se puede observar la presencia de dos mínimos, los que
correlacionan con valores de CMC reportados, el primer valor corresponde a la formación
de los agregados micelares y el segundo a la transición de la forma esférica a la de barras
alargadas.

1.1 0.1

1.0
Tiempo goteo / s

0.9

0.8

3.6
0.7

0.6
A
0.5
0 -500 -1000 -1500 -2000
E / mV (Ag/AgCl)

Figura 10. Curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de Hyamina en solución de

KNO3 0.1M.

31 Paola Jara Ulloa

 E/V
1.0 0
-0.2
Tiempo goteo / s -0.4
0.9 -0.6
-0.8
-1.0
-1.2
0.8

0.7

B
0.6
-1.0 -0.8 -0.6 -0.4 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6

Log [Hyamina]
Figura 11. Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de Hyamina a diferentes
potenciales aplicados.

La figura 10 muestra las curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de

Hyamina. En ausencia de Hyamina el máximo electrocapilar se encontró a -500 mV. En
aumento de la concentración de Hyamina se observó entre 0 y -1300 mV una disminución
en el máximo electrocapilar y una deformación en la curva.
Este comportamiento demuestra la absorción de Hyamina sobre la superficie de electrodo
de Hg.
La figura 11 muestra el tiempo de goteo vs la concentración de Hyamina, los
potenciales a los que se encontró la mayor diferencia en el tiempo de goteo fueron a -250
y -600 mV. Donde se puede observar la presencia de dos mínimos, los que correlacionan
con valores de CMCI y CMCII reportados.

32 Paola Jara Ulloa

 Se obtuvieron curvas electrocapilares para el mismo sistema KNO3 0.1M en
presencia de SDS (Fig.12). Este surfactante sufrió una fuerte adsorción sobre la superficie
del electrodo a concentraciones muy bajas, de modo que no fue posible obtener
información acerca de la CMC por esta técnica.

1.00
1.0
0.95
Tiempo goteo / s

0.9

Tiempo goteo / s
0.90 E/ V
0.8 -0.2
-0.4
0.7 0.85 -0.6
-0.8
-1.0
0.6 0.80 -1.2
-1.4
0.5 B
A 0.75
0.4
500 0 -500 -1000 -1500 -2000 -1.6 -1.4 -1.2 -1.0 -0.8 -0.6 -0.4 -0.2

E / mV (Ag/AgCl) Log [SDS]

Figura 12. Curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de SDS en solución de
KNO3 0.1M (A), Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de SDS a diferentes
potenciales aplicados (B).

En la tabla 1 se resumen los valores de CMC obtenidos por curvas electrocapilares

Técnica CTAB Hy cmc-I Hy cmc-II

C Electrocapilares 0.83 mM 0.31 mM 1.25 mM
Literatura 0.88 mM 0.26 mM61 1.2 mM

Tabla 1. Valores de concentración micelar crítica para CTAB y Hyamina.

33 Paola Jara Ulloa

5,1,2.- Voltamperometría adsortiva.

Para la voltamperometría adsortiva, se utilizó Neutral Red (NR) como estándar interno,
optimizándose inicialmente el tiempo de acumulación (Fig.13) y la velocidad de agitación
en ausencia de surfactantes, seleccionándose los parámetros de máxima intensidad de
corriente (200 s y 350 rpm). Bajo estas condiciones se observó una relación lineal entre la
corriente y la concentración de NR.

0.6 0.6 B
A
0.5 0.5

0.4 0.4
i / μA
i / μA

0.3
0.3

0.2
0.2
0.1
0.1
0.0
0.0
-200 -400 -600 -800 -1000 -1200 0 50 100 150 200 250
E / mV (Ag/AgCl) Tiempo de acumulación / s

Figura 13. (A) Voltamperogramas lineales de Neutral Red 1μM sobre electrodo de Hg a
diferentes tiempos de acumulación. (B) Dependencia de la corriente de pico con el tiempo
de acumulación. Velocidad de barrido: 345 mVs-1

En presencia de los surfactantes, los resultados mostraron una disminución en el

valor de corriente de NR al aumentar la concentración de éstos (Fig.14), siendo los
quiebres en la tendencia los que se relacionaron con la CMC. La explicación a este
fenómeno es que el NR presenta una mayor liposolubilidad que hidrosolubilidad, por lo
tanto, al producirse la formación de la micela se solubiliza en su interior dejando de estar
disponible para ser reducido sobre la superficie del electrodo.

34 Paola Jara Ulloa

 3.5

3.0

2.5

i / μΑ 2.0

1.5

1.0

0.5

0.0
0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2

[CTAB] / mM

Figura 14. Gráficos corriente versus concentración de CTAB en presencia de Neutral Red
1 μM.

En la tabla 2 se presentan los valores determinados por voltamperometría

adsortiva para CTAB y Hyamina, además de valores reportados en literatura

Técnica CTAB Hyamina

Voltamperometría 0.70 mM 0.30 mM
Literatura 0.88 mM64 0.26 mM

Tabla 2. Valores de concentración micelar crítica para CTAB y Hyamina.

35 Paola Jara Ulloa

5,2.- Caracterización catódica
5,2,1.- Medio Acuoso (100% Tampón Britton-Robinson)
5,2,1,1. - Polarografía de pulso diferencial y Polarografía Tast

• Efecto sustituyente
En medio 100% tampón Britton Robinson a pH 2, todos los compuestos fueron
estudiados, dando una señal de reducción tanto por PPD como por PTast. Los valores de
potencial encontrados se diferenciaron de manera significativa, en la tabla 3 se presentan
las estructuras de los compuestos y sus respectivos potenciales de pico.

Compuesto Ep,c mV
O2N
N

H
-527
N
H A

O2N
N
OH -560
N
H B
O2N
N
OH -132
N
CH 3
C

O2N
N
Br -180
N
CH 3
D

Tabla 3. Potenciales de pico para nitrocompuestos en medio acuoso sobre electrodo de Hg,
tampón Britton Robinson a pH 2.

36 Paola Jara Ulloa

 Nuestro anillo base es el 4-Nitroimidazol (A), el cual presentó un Ep,c de -527 mV
en las condiciones antes mencionadas, cuando se sustituyó con un hidroximetil (CH2OH)
en la posición 2 (B), se observó un desplazamiento de ≈ 30 mV en sentido negativo,
dificultando la reducción. En las mismas condiciones experimentales, el compuesto C, que
se encuentra sustituido con un grupo metil (CH3), y conserva el sustituyente (CH2OH) en
la posición 2, fue reducido a tan solo -132 mV, disminuyendo cerca de 400 mV el
potencial de reducción de nuestra molécula base. De estos resultados, es posible concluir
que la sustitución en la posición 1 del anillo, es la que determina el potencial de reducción.

O2N
N
OH
N
CH 3
A B
2.4
2.2 2.0
2.0
1.8
1.5
1.6
1.4
1.2
i / μΑ

1.0
i / μA

1.0
0.8
0.6 0.5
0.4
0.2
0.0
0.0
-0.2
0 -200 -400 -600 -800 -1000 0 -200 -400 -600 -800 -1000

E / mV (Ag/AgCl) E / mV (Ag/AgCl)

Figura 15. Polarogramas de pulso diferencial (A) y polarogramas TAST (B) para 0.1mM de 4-
NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

En la figura 15 se observan los polarogramas de pulso diferencial y Tast para el

4-NimMeOH en medio 100 % acuoso, tampón Britton Robinson a distintos valores de pH,
en ambos polarogramas se aprecia una única señal de reducción correspondiente a la
reducción del grupo nitro al derivado hidroxilamínico (Ec.17), esta señal se desplaza en
sentido negativo con el aumento del valor de pH, es decir, se dificulta el proceso de
reducción. En los polarogramas Tast se observa el mismo desplazamiento.

RNO2 + 4ē + 4H+ → RNHOH + H2O (Ec.17)

37 Paola Jara Ulloa

 Los resultados de un estudio más detallado de la influencia del pH para el 4-
NimMeOH en medio acuoso, se presentan en las figuras 16 y 17. Se analizó la señal en
todo el rango de pH y se midieron los parámetros: potencial de pico (Ep) y corriente de
pico (Ip) obtenidos mediante PPD y potencial de media onda (E1/2) y corriente límite (Ilim)
obtenidos por PTast.

3.0
-1100
-1000
A 2.5
B
-900
-800
2.0
-700
-600

ip / μA
Ep / mV

1.5
-500
-400
1.0
-300
-200
0.5
-100
0
0.0
2 4 6 8 10 12 2 4 6 8 10 12

pH pH

Figura 16. Dependencia del potencial de pico (A) y de la corriente de pico (B) con respecto al
pH de una solución 0.1mM de 4-NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M.

-900 1.25

-800 A B
-700
1.00
-600
E 1/2 / mV

i lim / μA

-500
0.75
-400

-300

0.50
-200

-100

0 0.25
2 4 6 8 10 12 2 4 6 8 10 12

pH pH

Figura 17. Dependencia del potencial de media onda (A) y de la corriente límite (B) con
respecto al pH de una solución 0.1mM de 4-NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M.

38 Paola Jara Ulloa

 Es posible apreciar en la figura 16A, la existencia de una dependencia lineal entre
el potencial de pico y el pH del medio hasta pH 9. A pH > 9 cambia este comportamiento
tornándose independiente.

El potencial de media onda tiene el mismo comportamiento antes descrito para el

potencial de pico (Fig. 17A). La corriente límite es independiente del pH, (Figura B) lo que
permite decir que el proceso es controlado por difusión y que se transfieren el mismo
número de electrones en todo el rango estudiado de pH.

-700
2.5
-600

-500

2.0
Ep / mV

-400 m = -45.2

-300

1.5 -200
i / μA

-100
0 2 4 6 8 10 12

pH
1.0

0.5

0.0

0 -200 -400 -600 -800 -1000

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 18. Polarogramas de pulso diferencial y dependencia del potencial de pico para
0.1mM de 4-NImMeBr en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

En los polarogramas de pulso diferencial para el 4-NimMeBr (Fig.18) se aprecia

una única señal de reducción correspondiente a la reducción del grupo nitro al derivado
hidroxilamínico, esta señal se desplaza en sentido catódico con el aumento del valor de
pH, se observa una dependencia lineal del potencial de pico hasta pH cercano a 10.
La reducción de los otros compuestos siguió el mismo comportamiento antes
descrito.

39 Paola Jara Ulloa

5,2,1,2.- Voltamperometría cíclica

En medio acuoso, tampón Britton Robinson se obtuvieron voltamperogramas

cíclicos para 4-NimMeOH y 4-NimMeBr, en la figura 19 se observa para ambos
compuestos una única señal de reducción, de carácter irreversible, la cual se desplazó en
sentido catódico con el aumento de pH en la solución de trabajo.

En todos los voltamperogramas además se observó, en el barrido anódico, una

nueva señal, la cual correspondería a la oxidación de la especie hidroxilamínica generada
en el barrido catódico que corresponde al derivado nitroso.

2 11 3 11
7
3.5
6 3.0
5
A B
2.5

4 2.0
1.5
3
i/μA

i/μA

1.0
2
0.5
1
0.0
0 -0.5
-1 -1.0

0 -200 -400 -600 -800 -1000 -1200 0 -200 -400 -600 -800 -1000 -1200

E/mV (Ag/AgCl) E/mV (Ag/AgCl)

Figura 19. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH 4.85x10-4M (A) y 4-NimMeBr 5.1x10-4M

(B) a diferentes pHs en tampón Britton Robinson 0.1M, velocidad de barrido: 100 mV/s

Para ninguno de los compuestos estudiados en medio acuoso fue posible obtener
la separación de la transferencia mono electrónica.

40 Paola Jara Ulloa

 5,2,2.- Medio Heterogéneo: Surfactantes
5,2,2,1.- Polarografía de pulso diferencial y Polarografía Tast

Una vez establecido el comportamiento de los compuestos en solución acuosa, se

cambió el medio de estudio por solución acuosa con surfactantes.

1.6
A B
1.4

1.2 1.8
1.6
1.4
1.0 1.2
1.0
0.8 0.8
i / μA

0.6
0.4
0.6
0.2
0.0
0.4 -200 -400 -600 -800 -1000 -1200

E / mV
0.2
O2N
0.0 N
OH
-0.2 N
-200 -400 -600 -800 -1000 -1200 -1400
CH 3
E / mV
Figura 20. Polarogramas de pulso diferencial (A) y polarogramas TAST (B) para 0.1mM de 4-
NimMeOH en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

Al realizar el estudio polarográfico en presencia de CTAB (Fig.20) se observa que

en la zona de pH > 2 < pH ≈ 8, existe una única señal que se desplaza a valores más
negativos de potencial a medida que aumenta el pH. A partir de pH 8, se produce un
desdoblamiento de la señal principal lo que indica, la ocurrencia de otro proceso
electródico. Dicho desdoblamiento no se observa en PTast.

Se repitió el estudio anterior en iguales condiciones, cambiando el surfactante

CTAB por Hyamina, observándose el desdoblamiento de la señal en ambos polarogramas
(pulso y tast).

En la figura 21A es posible observar el comportamiento del potencial de pico con

respecto al pH, se observa una dependencia lineal hasta valores cercanos a 8, para
posteriormente hacerse independiente. La segunda señal que aparece en presencia de

41 Paola Jara Ulloa

surfactantes catiónicos es independiente del pH en los potenciales que aparece. Además,
se observa en la figura 21A, un cambio de pendiente para 4-NimMeOH lo que indicaría,
un cambio en el mecanismo de reducción.

-1100 A 2.0 B
pico I pico I
1.8
-1000 pico II pico II
1.6

1.4
-900
1.2

1.0
m = 1.10
Ep / mV

-800

ip / μA
0.8

0.6
-700
0.4

0.2
-600
0.0
m = -37.6
-0.2
-500
-0.4

2 4 6 8 10 12 2 4 6 8 10 12

pH pH

Figura 21. Dependencia del Ep,c (A) y de la corriente de pico (B) con respecto al pH de una
solución 0.1mM de 4-NimMeOH en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1M.

O2N
N
-900
1.2
OH
N
A 1.0
B
-800 CH 3

0.8
E 1/2 / mV

-700
i lim/ μΑ

0.6

-600 0.4
m = - 37.89

0.2
-500

0.0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2 4 6 8 10

pH pH

Figura 22. Dependencia del E1/2 (A) y de la ilim (B) con respecto al pH de una solución 0.1mM
de 4-NimMeOH en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M.

42 Paola Jara Ulloa

 La corriente límite es independiente del pH (Fig.22) hasta valores cercanos a 8 lo
que indica que en ese rango proceso es controlado por difusión y se transfieren el mismo
número de electrones. A pH > 8 este comportamiento cambia.

Como se observó en la figura 19, en medio acuoso, el 4-NimMeBr presentó una

señal de reducción en todo el rango de pH estudiado. Al cambiar el medio (+ CTAB) y a
medida que se fue alcalinizando la solución de trabajo, se produjo la aparición de una
nueva señal a potenciales más negativos, la cual fue detectada por ambas polarografías
(Fig.23).
pH
5,5
2.0 6,5
7,5

1.5

O2N
i / μΑ

1.0 N
Br
0.5 N
CH3
0.0

-200 -400 -600 -800 -1000 -1200

E / mV (Ag/AgCl)

2
i / μΑ

1
pH
5,5
0 7,5
-200 -400 -600 -800 -1000 -1200 -1400

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 23. Polarogramas de pulso diferencial y Tast para 0.1mM de 4-NimMeBr en presencia
de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

43 Paola Jara Ulloa

 -1300
pico I
pico II
-1200
A
-1100

-1000
Ep / mV

m = 16.31

-900

-800

-700
m = 2.21
-600
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

pH

B
3

1
i / μΑ

-1 pico I
pico II
-2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

pH

Figura 24. Dependencia del Ep,c (A) y de la ip,c (B) con respecto al pH de una solución
0.1mM de 4-NimMeBr. CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M.

Los potenciales de pico de ambas señales de reducción se muestran en la

Fig.24A, donde se observa una independencia del primer pico y una dependencia del
segundo pico. Para las intensidades de corriente se observa que a medida que aumenta
el valor de pH en solución, la señal I disminuye mientras la segunda señal aumenta en
intensidad. (Fig.24B)

44 Paola Jara Ulloa

 Continuando con el estudio polarográfico de estos derivados nitroimidazólicos en
solución acuosa con surfactantes, se observa en la figura 25, como a 2 < pH < 8 existe
una única señal de reducción para 4-NimHOH, la que a medida que se incrementa el
valor de pH se intensifica para posteriormente a pH > 8 desdoblarse, dando cuenta de un
cambio de mecanismo. El mismo comportamiento se corrobora por polarografía tast.

10 pH
1,8
8 6,8
7,5
8,4 O2N
6
10,5 N
i / μΑ

OH
4 N
H
2

200 0 -200 -400 -600 -800 -1000-1200-1400-1600

E / mV (Ag/AgCl)

10

6
i / μΑ

-200 -400 -600 -800 -1000 -1200 -1400

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 25. Polarogramas de pulso diferencial y Tast para 0.5 mM de 4-NimHOH en presencia
de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.

45 Paola Jara Ulloa

 Se estudió la reducción del 4-nitroimidazol en presencia de Hyamina, tanto en
polarografía de pulso diferencial como Tast se observó la aparición de una segunda señal
a pH > 9.
Todos los compuestos estudiados presentaron el mismo comportamiento
electroquímico en presencia de surfactantes catiónicos, es decir, se observó de manera
general un desdoblamiento de la señal de reducción. En suma, el cambio de mecanismo
de una etapa a dos etapas de transferencia electrónica, cuya diferencia principalmente fue
el valor de pH a que esto ocurrió para cada uno de los compuestos sintetizados.(Tabla 4)

Compuesto pH Ep,c I / mV Ep,c II / mV

O2N
N
9.1 -773 -997
N H
H

O2N
N
OH 7.5 -732 -888
N
H
O2N
N
OH 8.6 -744 -1000
N
CH 3

O2N
N
Br 5.5 -708 -968
N
CH 3

Tabla 4. Potenciales de pico para nitrocompuestos en presencia de CTAB 15 mM en Britton

Robinson 0.1 M.

46 Paola Jara Ulloa

5,2,2,2.- Voltamperometría cíclica.

Recordemos que en medio acuoso, tampón Britton Robinson, se observó una

única señal de reducción en todo el rango de pH estudiado, como se detallo en 5,2,1,2. El
desdoblamiento observado por PPD y PTast tras la adición de surfactantes catiónicos
también fue confirmado por voltamperometría cíclica. La figura 26 muestra
voltamperogramas correspondientes al 4-NimMeOH a pH ≈ 8.4 en presencia de diferentes
surfactantes. Se observa que tras la adición de los surfactantes catiónicos (CTAB y
Hyamina), el desdoblamiento de la señal de reducción del grupo nitro de acuerdo con la
ecuación 1 y 25,
RNO2 + ē RNO2• (Ec.1)

RNO2• + 3ē + 4H+ → RNHOH + H2 O (Ec.25)

En presencia de SDS y Tritón-X, la morfología del pico de reducción del grupo nitro
es esencialmente la misma que en ausencia de éstos, lo que indica que tanto SDS como
Triton-X no modifican las características del proceso electroquímico. De acuerdo a estos
resultados, exploramos la posibilidad de estabilizar el anión radical nitro en la interfase de
micelas catiónicas resultante, siendo ésta muy buena para el estudio de radicales libres
en medio acuoso. Sin embargo, los resultados encontrados son de alguna manera
contradictorios con los informados anteriormente por McIntire y col.50, quienes estudiaron
la reducción electroquímica de nitrobenceno en presencia de surfactantes aniónicos,
catiónicos y no iónicos. En ese trabajo se reportó que el único medio capaz de estabilizar
el anión radical nitro y en consecuencia susceptible de ser detectado por
voltamperometría cíclica resulto ser empleando surfactantes aniónicos. Con surfactantes
catiónicos no fue posible estudiar el anión radical nitro de NB. Por otra parte, Saveant y
col.49, han informado una notable estabilización del anión radical de ftalonitrilo en
presencia de micelas catiónicas, sugiriendo que la disminución en 250 veces de la
velocidad de protonación del anión radical, se debía a su asociación con la micela
cargada positivamente. Los resultados combinados permiten concluir que la influencia de
los sistemas micelares sobre los procesos electroquímicos de un sustrato no se pueden
predecir sobre la base de simples consideraciones electrostáticas, siendo fuertemente
dependientes de las estructuras de los surfactantes y el sustrato65.

47 Paola Jara Ulloa

 8 5

6
A B
4

4 3

i / μΑ
i / μΑ

2
2

0
1
-2
0
-4
0 -3 0 0 -6 0 0 -9 0 0 -1 2 0 0 -1 5 0 0 0 -3 0 0 -6 0 0 -9 0 0 -1 2 0 0 -1 5 0 0
E / mV E / mV

4 C
i / μA

-2

0 -300 -600 -900 -1200 -1500

E / mV

8 8
D E
6 6

4
i / μΑ

4
i / μΑ

2
2
0
0
-2
-2
0 -300 -600 -900 -1200 -1500 0 -300 -600 -900 -1200 -1500
E / mV E / mV

Figura 26. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH 1mM en tampón Britton Robinson

0.1M a pH 8.4 en presencia de 15 mM de diferentes surfactantes: A) CTAB, B) Triton-X, C)
100% BR (sin surfactante), D) SDS y E) Hyamina. Velocidad de barrido = 1 V/s. Línea
continua desde A) hasta E) muestra el par redox RNO2/RNO2• aislada.

48 Paola Jara Ulloa

 Utilizando la respuesta obtenida por voltamperometría cíclica, es posible estudiar
la cinética y la estabilidad del anión radical nitro. Como se observa en la fig. 26 (línea
continua) en el caso de Hyamina y CTAB se encuentra muy bien resuelto el par redox
RNO2 / RNO2• si se ajusta adecuadamente el potencial de inversión.

En la figura 27 se muestran los voltamperogramas cíclicos a distintas velocidades

de barrido, obtenidos en presencia de tres surfactantes. Si el surfactante es aniónico solo
es posible obtener una respuesta anódica a velocidades muy altas de barrido. Cuando el
surfactante fue no iónico, la señal fue irreversible en todo el rango de velocidades y
finalmente al emplear surfactantes catiónicos se obtuvieron voltamperogramas cíclicos
bien resueltos en medio 100% acuoso dando cuenta de la estabilización de la especie
radicalaria en estudio.

10μA

A B C
-500 -600 -700 -800 -900 -500 -600 -700 -800 -900
-500 -600 -700 -800 -900 -1000
E / mV E / mV E / mV

Figura 27. Voltamperogramas cíclicos en aumento de la velocidad de barrido en presencia

de surfactante aniónico (A), no iónico (B) y catiónico (C) para 1mM de 4-NimHOH en Britton
Robinson 0.1 M

En la figura 28, podemos observar los voltamperogramas cíclicos para el par

redox aislado RNO2 / RNO2• a diferentes velocidades de barrido utilizando Hyamina como
surfactante. Además, en la figura 29 se muestra el efecto del aumento de la velocidad de
barrido sobre las razones de corrientes (ip,a/ip,c) en soluciones con Hyamina a diferentes
pHs. La misma tendencia se observó con ambos surfactantes catiónicos, es decir, la
razón de corrientes (ip,a/ip,c) aumentó con el aumento de la velocidad de barrido.

49 Paola Jara Ulloa

 V/s
10

5
2.5
1
0.5
0.1
10 μΑ

-500 -600 -700 -800 -900

E / mV (Ag/AgCl)
Figura 28. Voltamperogramas cíclicos del par redox RNO2/ RNO2• de 4-NimMeOH 1mM en
tampón Britton Robinson 0.1M a pH 8.4 en presencia de Hyamina 15 mM a diferentes
velocidades de barrido.

1.0

0.8
ipa/ i pc

0.6
pH
7.4
0.4
8.4
9.4
-0.8 -0.4 0.0 0.4 0.8 1.2

Log ν
Figura 29. Razón de corrientes Ipa/Ipc con respecto a la velocidad de barrido para 4-
NimMeOH 1 mM en tampón Britton Robinson 0.1 M y Hyamina 15 mM a pH 7.4, 8.4 y 9.4

50 Paola Jara Ulloa

 Estos resultados cumplen con los requisitos de una reacción de transferencia de
carga reversible seguida de una reacción química irreversible de acuerdo con los criterios
de Nicholson y Shain58. Además, la razón de corrientes fue dependiente de la
concentración de 4-NimMeOH implicando una reacción de segundo orden. De acuerdo a
lo previamente observado para el mismo compuesto en medio mixto70, la reacción
química de segundo orden es de disproporcionación. En consecuencia, se utilizaron las
aproximaciones teóricas de Olmstead et al.59 de disproporcionación para calcular la
constante cinética de segundo orden, k2, y el correspondiente tiempo de vida media.

Las constantes cinéticas, k2, y los tiempos de vida media para el anión radical en
medio acuoso en presencia de micelas a diferentes pHs se muestra en la tabla 5, también
se incluye una comparación con soluciones de diferente concentración de surfactante y en
medio mixto sin micelas. De estos resultados podemos afirmar que el uso de surfactantes
es la única condición capaz de estabilizar el anión radical nitro de 4-MinMeOH hasta el
punto de ser detectable por VC, en solución acuosa en la zona de pH de 7-9. En medio
mixto sin surfactantes este estudio solo fue posible a partir de pH 10. Probablemente este
hecho se debe a la disminución en la velocidad de protonación del anión radical. Por otro
lado, cuando la concentración de Hyamina disminuyó de 15 a 5 mM, los valores de k2
muestran un aumento en seis veces y el potencial de pico catódico disminuyó alrededor
de 20 mV. Ambos hechos pueden ser asociados a la adsorción del surfactante sobre la
superficie del electrodo66,67, el que puede alterar el sobrepotencial del electrodo y a la
formación de agregados micelares que afectan la reacción de disproporcionación.

En todos los estudios, cuando el surfactante fue incorporado a la solución acuosa,

el potencial de pico catódico cambió hacia valores más negativos, dificultando la
reducción del compuesto. Además, si comparamos los resultados obtenidos con la misma
concentración de micelas a diferentes pHs (Figura 30), encontramos que el pH afecta
fuertemente la estabilidad del anión radical nitro (valores de k2), sin embargo, no afecta a
los valores de potencial del grupo nitro (Ep,c). Estos resultados confirman la dependencia
del pH de la reacción de disproporcionación y la independencia del pH de la reacción de
reducción vía un electrón de los derivados nitro para formar el anión radical nitro de
acuerdo con la ecuación 1.

51 Paola Jara Ulloa

 30 20

25 A B
15

20
10
15
i / μΑ

i / μΑ
10
0
5
-5
0

-5 -10

-500 -600 -700 -800 -900 -500 -600 -700 -800 -900

E / mV (Ag/AgCl) E / mV (Ag/AgCl)

Figura 30. Voltamperogramas cíclicos en aumento de la velocidad de barrido en presencia

de surfactante catiónico para 1mM de 4-NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M a pH 7.4 (A) y
pH 8.4 (B).

pH 10-4 k2, dis / M-1 s-1 t1/2 / ms - EP,C / mV

8.4 4.30 ± 0.43 23.25 802
9.4 1.37 ± 0.21 72.99 796
9.4a 8.77 ± 0.62 11.40 774
10b 0.59 ± 0.03 169.49 760
10c 1.36 ± 0.21 73.52 727

Tabla 5
a
Solución acuosa de Hyamina 5 mM Dato obtenido (referencia 68) desde soluciones en
medio mixto b 30/70: Etanol/ tampón Britton-Robinson, c 60/40 : DMF/ tampón citrato.
Tabla 5.- Constantes de disproporcionación, tiempo de vida media para el anión radical nitro
y potenciales de pico catódico para el par redox RNO2/ RNO2• en solución acuosa con
Hyamina 15 mM a diferentes pHs.

Los estudios por voltamperometría cíclica anteriormente expuestos también fueron

realizados para los compuestos 4-NimMeBr, 4-NimHOH, 4-Nim y 2-Nim.

En las figuras 31 y 32, se muestra el comportamiento voltamperométrico del 4-

Nitroimidazol en presencia de CTAB 15 mM, donde es posible observar el desdoblamiento
de la señal de reducción a medida que se alcaliniza la solución de trabajo, así como

52 Paola Jara Ulloa

también a pH 8 se logra aislar el par redox RNO2/ RNO2•, corroborándose, el mismo
comportamiento electroquímico que los derivados nitroimidazólicos antes estudiados en
presencia de surfactantes catiónicos.

10 μ A

-200 -400 -600 -800 -1000 -1200 -1400

E / mV (Ag/AgCl)
Figura 31. Voltamperogramas cíclicos de 4-Nitroimidazol 2mM en CTAB 15mM desde pH 2
hasta 8, tampón Britton Robinson 0.1 M.

0.9
4
A B
3 0.8

2
i p,a / ip,c
i / μΑ

pH 8,0
0.7
1

0
0.6
-1

-2 0.5
-400 -500 -600 -700 -800 -900 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0

E / mV (Ag/AgCl) Log V

Figura 32. Voltamperogramas cíclicos a pH 8 a distintas velocidades de barrido (A) y

Dependencia de la razón de corrientes ((ip,a/ip,c) ) con la velocidad de barrido(B) para 4-
nitroimidazol 2mM en medio CTAB 15mM.

53 Paola Jara Ulloa

 Se repitió el estudio, esta vez utilizando 2-Nitroimidazol, de manera de evaluar la
influencia que tiene la posición del grupo nitro en el comportamiento electroquímico.

-200 -400 -600 -800 -1000 -1200

E / mV (Ag/AgCl)

-200 -400 -600 -800 -1000 -1200

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 33. Voltamperogramas cíclicos de 2-nitroimidazol 2mM a distintos a pHs en CTAB

15mM (A) y en Hyamina 15 mM (B), tampón Britton Robinson 0.1M.

54 Paola Jara Ulloa

 Como se observa en la figura 33, los voltamperogramas cíclicos para el 2-
Nitroimidazol muestran una única señal de reducción en todo el rango de pH estudiado.
Independientemente del surfactante catiónico utilizado no se observó un cambio en el
mecanismo de reducción, por lo tanto no fue posible generar el RNO2• a partir del 2-
nitroimidazol en estos medios de trabajo.

A partir de este resultado, podemos concluir que la generación y por ende, la

estabilidad del RNO2• obtenido a partir de los derivados nitroimidazólicos, no tan solo
depende del medio, sino también de la posición en la cual se encuentra el grupo nitro en
la molécula. El comportamiento observado para el 2-Nitroimidazol en presencia de
surfactantes catiónicos, es muy similar al encontrado para los otros derivados
nitroimidazólicos en medio acuoso, por lo tanto la adición de surfactantes al medio de
trabajo no afectó el mecanismo de reducción del 2-Nitroimidazol.

55 Paola Jara Ulloa

5,2,3.- Medio no acuoso (100% DMF + PTBA 0.1M)
5,2,3,1.- Polarografía de Pulso Diferencial y Polarografía Tast

En este medio los compuestos 4-NimMeOH y 4NimOH presentaron una única

señal de reducción por ambas polarografías. Distinto fue el caso de 4NimMeBr (Figura
34), que como se observa, muestra un pre pico, la que puede ser atribuida a la reducción
de una especie formada producto de una reacción ácido–base.
Para verificar el probable equilibrio ácido-base, se adicionaron alícuotas de TBAOH, las
que causaron la desaparición de este pre pico.

O2N O2N
N H
+
N
Br Br
N N
CH3 CH3

100% DMF
2.5 100% DMF + 50uL TBAOH
100% DMF + 100uL TBAOH

2.0

1.5
i / μΑ

1.0

0.5

0.0

-800 -1000 -1200 -1400 -1600

E / mV (Ag/AgCl)
Figura 34. Polarogramas de pulso diferencial para el compuesto 4NimMeBr en Medio 100 %
DMF.

56 Paola Jara Ulloa

Observándose el mismo comportamiento por polarografía Tast. (Figura 35)

0.5 μΑ 100% DMF

+ 30 uL TBAOH
+ 60 uL TBAOH
+ 90 uL TBAOH
+ 120 uL TBAOH

-800 -1000 -1200 -1400 -1600 -1800

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 35. Polarogramas Tast para el compuesto 4-NimMeBr en Medio 100 % DMF.

Los valores de Ep,c para los tres compuestos en medio 100% DMF se indican en
la tabla 6. El compuesto que presenta el potencial de reducción más bajo es el 4-
NimMeOH, a diferencia del medio 100% acuoso, en este medio se aprecia que la
incorporación de los sustituyente sobre el anillo base 4-Nitroimidazol, desplaza los
potenciales de reducción hacia valores más negativos.

Técnica -Ep,c/ mV

4-NimMeOH 1288
4NimMeBr 1200
4NimOH 1688
4Nim 900

Tabla 6. Potenciales de pico catódico para derivados sintéticos del 4-Nitroimidazol en

medio 100% DMF.

57 Paola Jara Ulloa

5,2,3,2.- Voltamperometría Cíclica

Los voltamperogramas cíclicos para los tres compuestos se aprecian en las figuras
36 y 37 en las cuales se encuentra representado el par redox RNO2/RNO2• por la línea
continua.

5
6

4
4

3
2
i / μA

i / μA
2
0

1
-2

0
-4
-400 -800 -1200 -1600 -2000 -2400 -400 -800 -1200 -1600 -2000 -2400

E / mV ( Ag/AgCl) E / mV (Ag/AgCl)

Figura 36. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH (A) y 4NimOH (B) en 100% DMF, 0.1M
PTBA.

1.6

1.2
i / μΑ

0.8

0.4

0.0

-400 -800 -1200 -1600 -2000 -2400

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 37. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeBr en 100% DMF, 0.1M PTBA.

58 Paola Jara Ulloa

 Los voltamperogramas del compuesto 4-NimMeBr presentan una pre onda, para
este caso, se repitió el procedimiento utilizado por PPD, es decir, la adición de TBAOH.

100% DMF
+ 30uL TBAOH
+ 60uL TBAOH
+ 90uL TBAOH
+ 120uL TBAOH

0.5 μΑ

-600 -800 -1000 -1200 -1400 -1600

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 38. Voltamperogramas cíclicos para el compuesto 4-NimMeBr en Medio 100 % DMF.

Tal como se aprecia en la figura 38, luego de la segunda adición de TBAOH (60μL
en total) desapareció la pre onda, dando un voltamperograma muy bien resuelto.
Posteriormente, se evaluó el efecto de la velocidad de barrido sobre la reducción de 4-
NimMeBr (par redox RNO2/RNO2•) en estas condiciones (Figura 39A) y así construir el
gráfico de razones de corrientes (ip,a/ip,c) vs Log velocidad de barrido (Figura 39B). Se
observa el comportamiento característico descrito para una reacción de transferencia
electrónica seguida de una etapa química.

59 Paola Jara Ulloa

 3 A B
1.0

2
0.9
1

ipa / ipc
i / μΑ

0.8
0

0.7
-1

0.6
-2
-600 -800 -1000 -1200 -1400 -1600 -1.2 -0.9 -0.6 -0.3 0.0 0.3 0.6 0.9

E / mV (Ag/AgCl) Log ν
Figura 39. Voltamperogramas cíclicos a distintas velocidades de barrido de 4-NimMeBr (A).
Razones de corriente con respecto la velocidad de barrido (B) en medio 100 % DMF (PTBA).

El anión radical nitro formado, puede sufrir reacciones de decaimiento químico por
disproporción o dimerización. A diferencia de los medios acuosos donde ocurre una
reacción de decaimiento por disproporción, en este medio no acuoso, ya que no hay una
alta disponibilidad H+ y se espera una reacción de dimerización como la reacción más
probable.

1.05 dis Hg
1.00 dim Hg
Experimental
0.95
0.90
0.85
ipa / ipc

0.80
0.75
0.70
0.65
0.60
0.55
-2.0 -1.5 -1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0

Log ω
Figura 40. Curvas teóricas de dismutación y dimerización para un electrodo esférico (Hg).
Resultados obtenidos para 4NimMeBr en 100% DMF.

60 Paola Jara Ulloa

 La figura 40 muestra las curvas teóricas descritas por Olmstead para una reacción
de dimerización y una reacción de disproporción. Se presentan en círculos los datos
obtenidos experimentalmente para el el compuesto 4-NimMeBr en medio 100% DMF.

0.5
1.2 B
A
0.4
1.0
0.3
Log ip,c

0.8 0.2

Log ipc
0.1
0.6
0.0
A 0,17226
A 0.76344 -0.1
0.4 B 0,40211
B 0.44472
R 0.99973
R 0,99556
-0.2
0.2
-1.2 -0.8 -0.4 0.0 0.4 0.8 -1.2 -0.9 -0.6 -0.3 0.0 0.3 0.6 0.9

Log ν Log ν

Figura 41. Relación logarítmica entre ip,c y la velocidad de barrido para 4-NimMeOH (A) y
4NImMeBr, en Medio 100% DMF.

Para determinar si el proceso fue controlado por un fenómeno de adsorción o

difusión se estudio la relación de log ip,c v/s log ν (Figura 41) en que el valor de la
pendiente nos indica el tipo de proceso involucrado.

Para procesos controlados por difusión este valor es cercano a 0.5 y para
procesos controlados por adsorción el valor es cercano a 1. Los valores para ambos
compuestos son cercanos al valor teórico de 0.5 descrito para procesos controlados por
difusión.

Para esclarecer el origen de la pre onda observada para el 4-NimMeBr por las
técnicas utilizadas, y descartar algún fenómeno de tipo adsortivo, se realizó un estudio de
velocidad de barrido sin la adición de TBAOH. La figura 42 muestra los voltamperogramas
obtenidos en medio 100% DMF.

61 Paola Jara Ulloa

 Tal como se observa, al aumentar la velocidad de barrido aumenta la intensidad de
corriente de ambas señales, ahora si graficamos el logaritmo de la corriente catódica para
cada señal (Ip,c) vs el logaritmo de la velocidad de barrido (Figura 49), podemos ver que
para ambas señales, la pendiente de la gráfica posee un valor cercano al valor teórico de
0.5 descrito para procesos controlados por difusión.

16

12

8
i / μΑ

-4
-800 -1000 -1200 -1400 -1600

E / mV (Ag/AgCl)
Figura 42. Voltamperogramas cíclicos de 4NImMeBr en aumento de la velocidad de barrido
en Medio 100 % DMF.

2.0
1.2 0,42589
A B
1.0
1.5
0,45157
0.8
ip,cII/ ip,cI
Log ip,c

0.6 1.0

0.4
0.5
0.2
ip,cI
ip,cII
0.0 0.0
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0

Log ν Log ν

Figura 43. Relación logarítmica entre ip,cI y ip,cII y la velocidad de barrido para 4-NimMeBr (A)
y razón de corrientes ip,cII / ip,cI para 4NImMeBr, en Medio 100 % DMF.
5,3.- Estabilización de RNO2• : ¿micela o monómero?

62 Paola Jara Ulloa

5,3,1.- Voltamperometría cíclica

En los resultados anteriormente expuestos (5,2,2,2) se demostró que en presencia

de surfactante catiónicos es posible generar y estabilizar el anión radical nitro a partir de
pH 7.4. Sin embargo, la concentración utilizada para todos los experimentos fue de 15
mM, concentración muy superior a la CMC de cada uno de los surfactantes utilizados, por
lo que cabe preguntarse ¿es necesaria la existencia de micelas en solución para que
ocurra la estabilización del RNO2•?

C < CMC C > CMC

A B

75 16
70
14
65
60 12
55
10
50
45 8
i / μΑ
i / μΑ

40
6
35
30 4
25
2
20
15 0
10
-2
5
0 -4
-5
-6
-400 -500 -600 -700 -800 -900 -400 -500 -600 -700 -800 -900

E / mV E / mV

Figura 44. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH en ausencia (A) y presencia de

surfactante catiónico 15 mM (B), Britton Robinson 0.1 M, pH 8.4.

El comportamiento electroquímico observado por voltamperometría cíclica para

todos los derivados nitroimidazólicos en medio 100% acuoso se presenta como una
reacción de reducción irreversible en todo el rango de pH y al aumentar la velocidad de
barrido, no es posible obtener una corriente anódica que de cuenta de la reacción de
oxidación del anión radical nitro a su precursor nitro. De acuerdo a la literatura la

63 Paola Jara Ulloa

utilización de surfactantes para la estabilización de especies electrogeneradas, se estudia
en presencia de micelas, debido a que fundamentalmente se atribuye la estabilización del
compuesto en estudio a interacciones de tipo electrostáticas entre la micela cargada y el
compuesto de interés, o bien a la solubilización del compuesto en el core micelar.

Considerando estos antecedentes, cuando la concentración de surfactante en

solución es menor a la concentración micelar crítica (CMC) del mismo, las moléculas
anfifílicas tienden a ordenarse en las cercanías de la interfase aire/solución o bien en
las paredes del recipiente que las contiene. Al realizar un voltamperograma cíclico del 4-
NimMeOH en estas condiciones, se obtiene una señal única de reducción, irreversible al
igual que en ausencia de surfactante (Figura 44A). Ahora, si la concentración de
surfactante es mayor a la CMC, se obtienen dos señales de reducción, la primera
corresponde a la reducción monoelectrónica del RNO2 para dar RNO2•, especie de
interés. Para aislar esta señal, se realizan barridos de potencial más cortos, de manera de
obtener el par redox RNO2/RNO2• como una señal reversible (Figura 44B).

Con el propósito de dilucidar cual es el tipo de interacción entre los

nitrocompuestos y los surfactantes catiónicos, utilizados para estabilizar el anión radical
nitro, se realizó un estudio por voltamperometría cíclica en aumentando la concentración
de surfactante, en condiciones alcalinas, donde se determinó que por sobre la CMC, se
produce el cambio de mecanismo en la reducción de los nitrocompuestos.

64 Paola Jara Ulloa

 I II

[CTAB]

20 μΑ

s / CTAB

0 -300 -600 -900 -1200 -1500

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 45. Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Hg de 4-NimMeOH, en ausencia y

aumento de la concentración de CTAB, 100% Tampón Fosfato, pH 8.4.

En la figura 45, se muestran voltamperogramas cíclicos a partir de una solución de trabajo

en ausencia de surfactante, cuando la concentración de CTAB alcanza un valor de 3x10-5
M (<CMC). Este provoca la deformación del voltamperograma obtenido inicialmente, la
cual es progresiva, hasta llegar al completo desdoblamiento de la señal.

26
-800

24
A B
E / mV (Ag/AgCl)

22 señal I
-900 señal II
i / μΑ

20

-1000
18 señal I
señal II
16
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0
Log [CTAB] Log [CTAB]

Figura 46. Dependencia de la intensidad de corriente (A) y el Ep,c (B) con la concentración
de CTAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

65 Paola Jara Ulloa

 La intensidad de la corriente de reducción de la señal original (Figura 46A),
disminuyó bruscamente cerca de 1x10-4M de CTAB. A concentraciones mayores de CTAB
la disminución de la corriente no fue tan marcada. Con respecto al potencial de
reducción, este permaneció prácticamente constante con el aumento de CTAB en el
medio. (Figura 46B)

20 μΑ

-300 -400 -500 -600 -700 -800 -900

E / mV (Ag/AgCl)
(A)
50

-100

Ep,c
E / mV(Ag/AgCl)

45 ip,c -200
Ep,a
ip,a ΔEp
i / μΑ

15.0

-700
12.5

10.0
-800
B C
7.5
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5 -5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5
Log[CTAB] Log[CTAB]

Figura 47. Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Pt de 4-NimMeOH, en ausencia y

aumento de la concentración de CTAB (A). Dependencia de la intensidad de corriente (B) y
Ep,c (C) con la concentración de CTAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

Cuando se utilizó un electrodo de disco de platino, el resultado fue bastante

distinto, como se aprecia en la figura 47. La morfología del voltamperograma permaneció
inalterada tras el aumento de la concentración de CTAB en el medio, del mismo modo, no
se observaron cambios en la intensidad de corriente, ni en el valor de potencial de
reducción.

66 Paola Jara Ulloa

 I II

[Hyamina]

20 μΑ

s / Hyamina

0 -400 -800 -1200 -1600

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 48. Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Hg de 4-NimMeOH, en ausencia y

aumento de la concentración de Hyamina, Tampón Fosfato, pH 8.4.

Un comportamiento distinto, quedó en evidencia cuando el surfactante utilizado fue

Hyamina. En la figura 48, es posible observar claramente que luego de la primera adición
del surfactante al medio, cambia inmediatamente la forma del voltamperograma de
reducción del nitrocompuesto antes observada, provocando el desdoblamiento de la
señal. Tanto las intensidades de corriente, como los valores de potencial de reducción
permanecieron prácticamente constantes (Figura 49).

67 Paola Jara Ulloa

 21
A B
-800
20

E / mV (Ag/AgCl)
19
-900 señal I
señal II
18 señal I
i / μΑ

17
señal II -1000

16
-1100
15

14
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5 -5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5

Log[Hyamina] Log[Hyamina]

Figura 49. Dependencia de la intensidad de corriente y el Ep,c con la concentración de

Hyamina, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

La concentración de Hyamina en la solución de trabajo tras la primera adición, fue

de 1x10-5M, valor bajo la concentración micelar crítica encontrada para este surfactante.
Por lo tanto a esa concentración de Hyamina no hay micelas aún formadas.

Al igual que con CTAB, cuando se utilizó un electrodo de disco de platino, al

aumentar la concentración de Hyamina, los voltamperogramas permanecieron inalterados
(figura 50), y no se observaron cambios en la intensidad de corriente, ni en el valor de
potencial de reducción.

68 Paola Jara Ulloa

 A

[Hyamina]

40 μA

s / Hyamina

0 -200 -400 -600 -800 -1000

E / mV (Ag/AgCl)

45
-0.1

Ep,c
40 -0.2 Ep,a
ip,c ΔEp
Ep / V

ip,a
i / μΑ

15
-0.7

B C
10
-0.8

5
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5
Log [ Hyamina] Log[Hyamina]

Figura 50. Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Pt de 4-NimMeOH, en ausencia y

aumento de la concentración de Hyamina (A). Dependencia de la intensidad de corriente (B)
y Ep,c (C) con la concentración de CTAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

De estos resultados se puede concluir que cuando se utiliza un electrodo de

mercurio como electrodo de trabajo, no es necesaria la presencia de agregados micelares
para que ocurra la generación y estabilización del anión radical nitro en solución. Debido a
que el desdoblamiento de la señal de reducción se obtiene a concentraciones de
surfactante menores a la CMC de cada uno de ellos, dando cuenta que nuestro
compuesto es estabilizado por las cadenas alifáticas de los surfactantes utilizados. La

69 Paola Jara Ulloa

figura 51 muestra las estructuras de los surfactantes catiónicos CTAB y Hyamina.

CH3
+
N CH3 Br
CH3
A

H3C CH3 Cl
CH3
+
O N
O
CH3
H3C CH
CH3 3
B

Figura 51. Estructuras de los surfactantes catiónicos Bromuro de cetiltrimetilamonio, CTAB

(A) y Hyamina (B), utilizados para el estudio voltamperométrico de 4-NimMeOH.

Debido a lo anteriormente expuesto, se propuso repetir el estudio

voltamperométrico con un compuesto que presentara una cabeza de amonio cuaternaria y
una cadena alifática corta, Bromuro de 2-bromoetil trimetilamonio (BrETAB). La figura 52
muestra los voltamperogramas cíclicos obtenidos para 4-NimMeOH en aumento de la
concentración de BrETAB.

  CH3
+
N CH3 Br
Br
CH3

4 μA

0 -200 -400 -600 -800 -1000

E / m V (A g/A gC l)

Figura 52. Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Hg de 4-NimMeOH, en ausencia y

aumento de la concentración de BrETAB, 100% Tampón Fosfato, pH 8.4.

70 Paola Jara Ulloa

 Es posible observar que los voltamperogramas obtenidos en presencia de
concentraciones crecientes de BrETAB, permanecen prácticamente inalterados en cuanto
a su morfolgía (Figura 52), esto se confirma al analizar las gráficas de ip,c y Ep,c vs la
concentración de BrETAB (Figura 53).

-750
15
Ep,c
A B
-720

E / mV (Ag/AgCl)
12
-690
i / μA

9
-660

6 -630

ip,c -600
3
-570
0
0,0 -3
5,0x10
-2
1,0x10
-2
1,5x10 2,0x10
-2
0,0 5,0x10
-3
1,0x10
-2 -2
1,5x10 2,0x10
-2

[BrETAB] / M [BrETAB] / M

Figura 53. Dependencia de la intensidad de corriente (A) y el Ep,c (B) con la concentración
de BrETAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.

De este modo se demostró que la interacción del compuesto en estudio (4-

NimMeOH) es con las cadenas alifáticas de los surfactantes empleados y no con los
agregados micelares.

Además, se descarta que el cambio en el mecanismo de reducción se deba a un

fenómeno de adsorción de surfactantes sobre la superficie del electrodo de mercurio, ya
que el BrETAB presenta la misma cabeza de amonio que CTAB y Hyamina. Sin
embargo, no se observa el fenómeno de desdoblamiento de la señal de reducción del
derivado nitroimidazólico.

71 Paola Jara Ulloa

5,3,2.- Dispersión de luz

Se utilizó la técnica de Light scattering (Fig.54), para verificar la presencia de

micelas a las concentraciones utilizadas en las experiencias electroquímicas, debido a
que la formación de micelas se puede ver alterada por la presencia de otros compuestos
en solución. En la Tabla 7, se indican los tamaños obtenidos por triplicado para distintas
soluciones de surfactante CTAB.

CTAB tamaño/nm
10 mM en Agua 2.3 2.6 2.5 2.5 ± 0.15
10 mM en tampón BR pH 8.4 5.1 6.3 4.2 5.2 ± 0.8
10 mM + 4-NimMeOH en tampón BR pH 8.4 4.8 5.2 4.9 5.1 ± 0.6
0.03 M + 4-NimMeOH en tampón BR pH 8.4 5.1 4.8 4.8 5.0 ± 0.5

Tabla 7. Tamaño de micelas observado por Light Scattering para el surfactante catiónico
CTAB.

El tamaño del agregado micelar de CTAB observado en agua fue menor en

comparación al observado en tampón, una vez formada la micela en tampón BR, el
tamaño de esta es independiente de la concentración de CTAB del medio y del 4-
NimMeOH presente en la solución de trabajo.

Del mismo modo, las micelas de Hyamina tienen un tamaño menor que las de
CTAB, y tampoco presentan un cambio en su tamaño tras la adición del nitrocompuesto.
(Tabla 8)

Hyamina tamaño/nm
10 mM en tampón BR pH 8.4 4.1 4.2 4.1 4.13 ± 0.04
10 mM+4-NimMeOH en tampón BR pH 8.4 4.3 4.2 4.2 4.18 ± 0.06

Tabla 8. Tamaño de micelas observado por Light Scattering para el surfactante catiónico
Hyamina.

72 Paola Jara Ulloa

 40

% en abundancia
30

20 Análisis de pico por volumen

Pico área Promedio
1 100 5.2
10

0 20 40 60 80
Diámetro / nm
Figura 54. Distribución de tamaño obtenida por light scattering para CTAB.

5,3,3.- Espectrofotometría UV-Visible

Se realizaron espectros de absorción para el 4-NimMeOH, en ausencia y
presencia de concentraciones crecientes de surfactante en el medio, como muestra la
figura 55. El espectro de absorción permaneció inalterado en cuanto a la longitud de onda
máxima y el valor de absorbancia registrado para el compuesto en ausencia de
surfactante.

[CTAB]

200 300 400 500 600

λ/ nm

Figura 55. Espectros de absorbancia de 4-NimMeOH en aumento de la concentración de

CTAB.

73 Paola Jara Ulloa

 De este resultado podemos decir que, de existir la solubilización del
nitrocompuesto al interior de la micela, los espectros de absorbancia no dan cuenta de
este fenómeno, o bien el nitrocompuesto es insensible al cambio de polaridad del medio.
Por ello se decidió trabajar con una serie de solventes de distintas polaridades y
ver de que manera se comportaba el 4-NimMeOH.

≠ Solventes → ≠ λ max

200 250 300 350 400

λ/nm
Figura 56. Espectros de absorbancia de 4-NimMeOH en diferentes solventes.

Solvente λ / nm
2ButOH 292
Benceno 296
THF 304
Tolueno 295
Et-glicol 302
2PropOH 299
CH3CH2Cl2 303
CH2Cl2 301
CHCl3 294
ACN 301
EtOH 296

74 Paola Jara Ulloa

 Tampón 307

Tabla 9. Solvente utilizado y λmáx observado para 4-NimMeOH.

Al repetir los espectros de UV-Visible (Figura 56), utilizando distintos solventes
(tabla 9), se observa que existe un desplazamiento del valor de λmáx, demostrando que el
4-NimMeOH es sensible a la polaridad del medio, y que si el compuesto se encuentra en
el core de la micela, necesariamente se observaría un desplazamiento en la λmáx.
Dado que este fenómeno no ocurre, se tiene que la estabilización del anión radical
nitro no se produce por la solubilización de los compuestos en el interior apolar de la
micela, sino por una interacción electrostática con los monómeros de surfactante.

75 Paola Jara Ulloa

5,4.- Interacción del RNO2• con endobióticos y xenobióticos

Una vez interpretado el fenómeno de estabilización del RNO2•, se evaluó la

capacidad de interacción del anión radical nitro generado a partir del 4-NimMeOH con los
endobióticos Glutation y Adenina, y el xenobiótico N-acetil cisteína.(Figura 57)

O H H
N
H
HS OH
N
N N
H CH3
N N
O
N-acetil cisteína Adenina

SH H
O O O
N
HO N OH
NH2 H O
Glutatión

Figura 57. Compuestos utilizados para el estudio de interacción con RNO2•.

En cada experimento se varió la concentración de endo/xenobiótico entre 0 y 6

mM. Se prepararon soluciones blanco para cada una de los endo/xenobióticos en la
máxima concentración utilizada. Posteriormente se realizaron los barridos
voltamperométricos correspondientes, para descartar una posible interferencia en el rango
de potenciales estudiados.
Luego, mediante voltamperometría cíclica se generó el anión radical nitro (Figura
58) y se estudió la interacción con las moléculas Glutatión, Adenina, y N-acetil cisteína en
una solución de CTAB 15 mM, en tampón Britton Robinson 0.1M a pH 8.4. Los valores de
razón de corriente, Ip,a/Ip,c, del par redox RNO2/RNO2● fueron determinados para cada
voltamperograma. La velocidad de barrido utilizada para estudiar la interacción frente a
los tres compuestos fue 5000 mV/s.

76 Paola Jara Ulloa

 1.0
20
B
A
15 0.9

10

i p,a/ ip,c
0.8
i / μA

0.7
0

-5
0.6
ip,a/ip,c
-10
0.5
-500 -600 -700 -800 -900 -0.4 0.0 0.4 0.8 1.2

E / mV (Ag/AgCl) Log ν

Figura 58. A: Voltamperogramas cíclicos de 1 mM de 4-NimMeOH en tampón Britton

Robinson 0.1 M, 15 mM de CTAB, pH 8.4 a diferentes velocidades de barrido (100 – 10000
mV). B: Dependencia de la razón de corrientes (ip,a/ip,c) con el logaritmo de la velocidad de
barrido.

12

8
i / μA

-4 N-Acetilcisteína
-500 -600 -700 -800 -900

E / mV (Ag/AgCl)

12
12

8
8
i / μA

4
i / μA

0
0

Glutation Adenina
-4
-4
-500 -600 -700 -800 -900 -1000
-500 -600 -700 -800 -900

E / mV ( Ag/ AgCl) E / mV (Ag/AgCl)

Figura 59. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH 1 mM en tampón Britton Robinson 0.1

M, 15 mM de CTAB, pH 8.4 en presencia de diferentes concentraciones de
endo/xenobióticos desde 0-6mM.

77 Paola Jara Ulloa

 La razón de corrientes ip,a/ip,c refleja la tendencia de una especie
electroquímicamente generada, para dar reacciones químicas posteriores como podría
ser la interacción con endo/xenobióticos presentes en solución. En la figura 59 se
●
muestran los voltamperogramas cíclicos del par redox RNO2/RNO2 en presencia de
diferentes concentraciones de N-acetilcisteina, glutatión y adenina. De existir interacción,
se debería observar después de la adición de los compuestos, una disminución de la
●
corriente de pico anódico, correspondiente a la oxidación de RNO2 (regeneración de
●
RNO2) evidenciando que los compuestos reaccionan con el RNO2 .

En la figura 60, se muestran las razones de corriente ip,a/ip,c, estas son graficadas
en función de la concentración de los endo/xenobióticos. Se puede concluir de este
gráfico, que existe una interacción leve entre el anión radical nitro electroquímicamente
generado y los compuestos, lo cual se evidencia por la disminución de las razones de
corriente ip,a/ip,c a medida que aumenta la concentración de estos.

0.90
ip,a / ip,c

0.85

N-acetil cisteina
Glutation
Adenina
0.80
0 1 2 3 4 5 6

[endo/xeno] / mM

Figura 60. Razón de corrientes ipa/ipc del par redox RNO2/RNO2• en presencia de diferentes
concentraciones de endo/xenobióticos. Concentración de 4-NimMeOH 1mM en tampón
Britton Robinson 0.1 M, 15 mM CTAB, pH 8.4. Velocidad de barrido: 5000 mV s-1.

En términos cuantitativos N-acetilcisteina y glutatión disminuyeron la razón de

corrientes en un 5% y 7% respectivamente cuando la concentración presente en solución
fue de 6 mM.

78 Paola Jara Ulloa

5,5.- Reducción de derivados 4-nitroimidazolicos sobre GCE modificados con
NTCs.69
5,5,1.- Voltamperometría cíclica

En trabajos previos, se estudió la reducción de derivados del 4-nitroimidazol en

medio acuoso, no acuoso y mixto sobre electrodo de Hg70, sin embargo no se han
encontrado publicaciones que describan el comportamiento de estos nitrocompuestos
sobre electrodos de carbono vítreo (GCE).

En la figura 61 se muestra el voltamperograma cíclico sobre GCE para 4-

NimMeOH en medio acuoso, la reducción de este compuesto ocurrió de manera similar a
lo reportado sobre Hg. Se observó una única señal irreversible en medio acuoso. Esta
señal fue atribuida a la reducción vía cuatro electrones del grupo nitro para dar el derivado
hidroxilamínico, mecanismo global conocido y aceptado (Ec.17) para la electro-reducción
de nitrocompuestos aromáticos y heterocíclicos.

GCE -4
8 1.18 x 10 M

4
i / μA

-2
0 -200 -400 -600 -800

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 61. Voltamperograma cíclico de 4-NimMeOH 1.18×10-4 M sobre GCE, tampón Britton
Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido:100 mVs-1

La utilización de nanotubos de carbono (NTC) como modificantes de superficies de

electrodo ha sido objeto de diversas investigaciones, debido a las propiedades eléctricas,
químicas, mecánicas y estructurales51 que presenta. Además, se ha demostrado que los

79 Paola Jara Ulloa

electrodos modificados con NTC muestran atractivas propiedades electroquímicas y que
producen un efecto electrocatalítico71. Existen algunos trabajos publicados donde se
reporta el uso de NTC sobre nitrocompuestos. Por ejemplo, métodos electroquímicos
simples y sensibles han sido aplicados para la determinación de metronidazol y
cloramfenicol sobre electrodo de carbón vítreo modificado con NTC72,73
Recientemente se estudió la reducción de nitrobenceno sobre un electrodo de carbono
pirolítico modificado con NTC, con el fin de remover este nitrocompuesto desde aguas
contaminadas74

Es por esta razón y considerando las ventajas que ofrece el uso de NTC, como su
elevada conductividad eléctrica, resistencia mecánica y actividad electrocatalítica75, que
se planteó el desarrollo de electrodos de GCE modificados con NTCs (GCE/NTCs) para
evaluar el comportamiento de nuestros nitrocompuestos.

80
G C E + N TC 1m g/m L(H 2 O )
G C E + N TC 1m g/m L(D M F)
60 GCE

40 5.21 x 10 M
-6
i / μA

20
-4
1.18 x 10 M

-20

-40
0 -200 -400 -600 -800

E / m V (A g/A gC l)
Figura 62. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE, GCE/NTCs(H2O) y
GCE/NTCs(DMF). Concentración de la dispersión de NTC: 1 mg/mL, tampón, Britton
Robinson 0.1 M pH 2 . Velocidad de barrido:100 mV s-1, tpo. de acumulación: 120 s.

80 Paola Jara Ulloa

 En la figura 62 se comparan los voltamperogramas de 4-NimMeOH obtenidos
sobre GCE y GCE/NTC con dos agentes dispersantes. Utilizando una solución de 4-
NimMeOH [5.21x10-6M] en tampón Britton Robinson 0.1M a pH 2, no se encontró
respuesta sobre GCE, en cambio se observó una muy buena señal de entre 7 y 13 μA
cuando el electrodo de GCE fue modificado con NTCs usando como dispersante DMF y
H2O respectivamente. Solo cuando la solución de 4-NimMeOH fue bastante más
concentrada ≈ [1×10-4 M] se obtuvo una señal voltamperométrica aceptable sobre GCE.
En todos los casos, se observó sólo una señal de reducción, indicando que bajo estas
condiciones experimentales el mecanismo de reducción permanece inalterado.

Como se muestra en la figura 62, los electrodos modificados exhibieron no tan solo
un aumento en la intensidad de la corriente, sino también un cambio significativo en el
valor de potencial, desplazando la señal hacia valores menos negativos. La disminución
del potencial puede ser atribuida a que la transferencia electrónica se ve favorecida sobre
los NTCs en comparación con GCE sin modificar. Los resultados obtenidos para los
dispersantes empleados se muestran en la tabla 10.

Electrodo -Ep,c / mV

GCE 500
DMF 310
H2O 318

Tabla 10. Valores de potencial de pico catódico de 4-NimMeOH sobre GCE modificado con
NTC en dos agentes dispersantes.

El comportamiento electroquímico del 4-NimMeOH sobre esta superficie de

electrodo fue estudiado a través de voltamperometría cíclica aumentando la velocidad de
barrido (Figura 63). Solo una señal de reducción de tipo irreversible fue observada en todo
el rango de velocidades estudiadas. De la relación lineal entre el Log (ip,c) vs Log (v) se
obtuvo un valor de pendiente de 0.58, (inserto Fig.63) indicando un proceso de control
mixto.

81 Paola Jara Ulloa

 Con el fin de obtener una mejor repuesta de la señal de reducción del 4-NimMeOH
se estudiaron y optimizaron algunos parámetros, como el agente dispersante de los
NTCs, pH de la solución, concentración de NTCs en la dispersión y tiempo de
acumulación.

-3.6

-3.7

-3.8

Log ip
-3.9

400 -4.0

-4.1
300 -1.4 -1.2 -1.0 -0.8 -0.6

Log V
250 V/s
200
i / μA

100

0
20 V/s
-100

-200
0 -200 -400 -600 -800 -1000
E / mV (Ag/AgCl)

Figura 63. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE/NTCs(H2O). Concentración

de la dispersión de NTC: 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de
barrido: 20-250 mVs-1. Inserto: Dependencia de la corriente con la velocidad de barrido.

Los agentes dispersantes utilizados, fueron agua y DMF, observándose que los
GCE modificados con NTCs dispersos en agua presentaban una mayor sensibilidad
dentro de un mismo rango de concentración de 4-NimMeOH (Figura 64). Los valores de
sensibilidad encontrados se presentan en la tabla 11.

82 Paola Jara Ulloa

 Electrodo S / μA/μM

GCE 0.01
DMF 1.44
H2O 2.52

Tabla 11. Valores de sensibilidad para dos agentes dispersantes.

Otra condición experimental que se evaluó, fue el pH del medio, como muestra la
figura 71. La mejor respuesta a la variación de la concentración del 4-NimMeOH, se
obtuvo a pH ácido. Los valores encontrados se resumen en la tabla 12

Electrodo H2O1mg S / μA/μM - Ep,c / mV

pH 2 2.52 318
pH 7.2 0.98 660
pH 11 1.89 750

Tabla 12. Valores de sensibilidad para un electrodo GCE modificado con NTC dispersos en
agua a distintos pH. Potencial de pico catódico para 4-NimMeOH en las mismas
condiciones.

83 Paola Jara Ulloa

 12 Agua
DMF
10
GCE
i / μA 8

0
0 1 2 3 4 5 6 7 100 150 200 250 300
[4NimMeOH] / μM
Figura 64. Curvas de calibración obtenidas con electrodos modificados con NTCs en
distintos agentes dispersantes. [NTCs]: 1 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M pH 2,
tiempo de acumulación: 120 s.

pH
12

10
2
7,2
8 11
i / μA

0
0 1 2 3 4 5 6
[4NimMeOH] / μM
Figura 65. Curvas de calibración obtenidas a diferentes pHs Tampón Britton Robinson 0.1M.
Concentración de la dispersión de NTCs: 1 mg/mL, tiempo de acumulación: 120 s.

La preparación de un electrodo modificado involucra la dispersión de NTCs para

formar posteriormente una película sobre el GCE. La naturaleza y el espesor de la
película dependerán del solvente usado para preparar la dispersión. Por esta razón se
probó agua y DMF como agentes dispersantes, obteniéndose una intensidad de corriente
ligeramente superior con agua, como se observa en la figura 62.

84 Paola Jara Ulloa

 Por otra parte la homogeneidad de la película y el espesor pudieron ser regulados
con la concentración de la dispersión. Los siguientes voltamperogramas (figura 66)
muestran el efecto sobre la señal de reducción de dos concentraciones diferentes de
NTCs.

9 90
GCE
GCE + NTC (0.2 mg/mL)
GCE + NTC (4 mg/mL)
60
6

30
3

i / μA
i / μA

0
-30

-3
-60

0 -200 -400 -600 -800

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 66. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE y GCE/NTCS(H2O).

Concentración de la dispersión de NTC: 0.2 y 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH
2. Velocidad de barrido: 100 mVs-1.

De la figura 66, queda en evidencia que a concentraciones bajas de NTCs (0.2

mg/mL) el GCE no está enteramente recubierto siendo posible observar dos señales
electroquímicas debido a la reducción del 4-NimMeOH sobre GCE/NTC y GCE,
respectivamente.

En la figura 67 se presenta el efecto de concentración de la dispersión de NTCs

sobre la corriente del pico de reducción de 4-NimMeOH. De los resultados encontrados,
se propone que la formación de la película es un proceso progresivo que alcanza un
punto de saturación alrededor de una concentración de dispersión de 4 mg/mL. Por otra
parte, con dispersiones de NTCs más concentradas se producen películas inestables que
aumentan la RSD de la medida. En consecuencia se utilizó una concentración de 4

85 Paola Jara Ulloa

mg/mL de NTCs dispersos en agua de manera de obtener una señal reproducible en el
tiempo.
25

20

15
i / μA

10

0
0 2 4 6

[NTC] / mg/mL
Figura 67. Dependencia de la corriente de pico con la concentracion de NTC. [4-NimMeOH]:
3×10-6M, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 100 mVs-1, tiempo de
acumulación: 420 s.

El aumento considerable de la corriente de pico, es atribuido en parte a la gran

capacidad que tiene el GCE/NTCs para adsorber el nitrocompuesto, esto fue estudiado
registrando la dependencia de la corriente con el tiempo de acumulación del 4-
NimMeOH. La figura 68 muestra el efecto del tiempo de acumulación sobre la corriente de
pico del 4-NimMeOH (5×10-4M) utilizando una concentración de NTCs de 4 mg/mL.

La corriente de pico aumentó considerablemente durante los primeros 300 s

tendiendo a la estabilización, indicando la saturación del GCE/NTC.

Por otra parte, se observó que el valor de potencial de pico no cambió a los
diferentes tiempos de acumulación. Se utilizó para las siguientes experiencias un tiempo
de acumulación superior a los 300s (420s) de modo de obtener una óptima señal de
reducción.

86 Paola Jara Ulloa

 50 45

40

40 35

30

i / μΑ
25

30 20

15

10
0 100 200 300 400 500 600
i / μA

20 Tiempo Accumulation time / s

de acumulación

10

-10
-100 -200 -300 -400 -500 -600 -700

E / mV (Ag/AgCl)
Figura 68. Voltamperogramas lineales de 4-NimMeOH sobre electrodo GCE/NTC(H2O) a
diferentes tiempos de acumulación. Inserto: dependencia de la corriente de pico con el
tiempo de acumulación. [4-NimMeOH] : 5×10-4 M, NTCs(H2O) : 4 mg/mL, tampón Britton
Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 100 mVs-1

Por otra parte, de acuerdo al mecanismo de reducción de 4-NimMeOH (Ec.17), el

potencial de pico del 4-NimMeOH sería fuertemente dependiente de pH. Para corroborar
esta dependencia, se estudió el comportamiento del potencial de pico a diferentes pHs
entre 2-12. En la figura 69, se muestra el Ep,c vs pH, donde se aprecia una dependencia
lineal del potencial de pico, moviéndose hacia valores más negativos hasta pH cercano a
8.
La pendiente de la zona ácida Ep,c vs pH fue de 65 mV/pH. Una dependencia
similar fue obtenida sobre electrodo de Hg76. De esta similitud, es claro que el
comportamiento electroquímico del 4-NimMeOH siguió el mismo mecanismo global sobre
GCE/NTCS que sobre electrodo de Hg.

87 Paola Jara Ulloa

 0.8

-Ep / V (Ag/AgCl)
0.7

0.6

0.5

0.4

0.3

0 2 4 6 8 10 12

pH
Figura 69. Dependencia del potencial de pico con respecto al pH. [4-NimMeOH] : 3×10-6 M,
NTCs(H2O): 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2. Velocidad de barrido: 100 mV s-1

La corriente de pico catódico del 4-NimMeOH, varió linealmente con la

concentración de éste. La intensidad máxima de corriente versus la concentración de la
dispersión de NTCs. A pH 2 en tampón Britton-Robinson, a dos diferentes tiempos de
acumulación se muestra en la figura 70, observándose un comportamiento lineal para
ambos tiempos.

Además, si consideramos la pendiente de la gráfica como criterio de sensibilidad,

se observa que un aumento en el tiempo de acumulación de 2 a 7 minutos provoca un
cambio en la sensibilidad de 3.80 a 6.42 μA/μM.

88 Paola Jara Ulloa

 35 4 mg/mL (7 min)
4 mg/mL (2 min)
30

25 6.42 μA / μM
20
i / μΑ

15
3.80 μA / μM
10

0 1 2 3 4 5 6
[4NimMeOH] / μM

Figura 70. Curvas de calibración de 4-NimMeOH obtenidas sobre GCE/NTCs(H2O) a dos

tiempos de acumulación (2 y 7min). NTCs(H2O) : 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M,
pH 2 . Velocidad de barrido:100 mVs-1

La repetibilidad de un GCE/NTCs fue evaluada midiendo la respuesta

electroquímica sobre diez mediciones consecutivas. El resultado obtenido fue de 20.12 ±
0.59 μA, con un coeficiente de variación de 2.9%, para una concentración constante de 4-
NimMeOH de 3.6x 10-6M, mostrando una muy buena repetibilidad y estabilidad del film.
Una vez estudiada la repetibilidad del GCE/NTCs, se prepararon independientemente diez
electrodos, dando un coeficiente de variación de 7% entre medidas.

Prosiguiendo, se evaluó el efecto del tipo de NTCs (largos, cortos, oxidados y no

oxidados) sobre la señal de reducción de 4-NimMeBr. Considerando los parámetros
anteriormente utilizados, se modificaron electrodos con una dispersión de 4 mg/mL de
NTC en agua, luego se efectúo un estudio del tiempo de acumulación del 4-NimMeBr vs
la respuesta en intensidad de corriente.

El electrodo modificado con NTCcnox (Fig.71A) exhibió un aumento en la

intensidad de corriente hasta los dos minutos de acumulación, para luego permanecer
constante en un valor aprox. de 10 μA.

89 Paola Jara Ulloa

 En el caso de los NTCcox y NTClox (Fig.71B) se observó un aumento sostenido
hasta los 5 y 7 minutos respectivamente, alcanzando valores de corriente entre los 150 y
200 μA a igual concentración de 4-NimMeBr.

240
A B
10 200

160
8
i / μA

120

6 i / μA 80

40 4mg / mL
NTC Largos Oxidados
4 NTC cnox NTC Cortos Oxidados
0

1 2 3 4 5 6 0 2 4 6 8 10
Tiempo de acumulación / min Tiempo acumulación / min

Figura 71. Dependencia de la corriente de pico con el tiempo de acumulación. [4-NimMeBr] :

3×10-6 M, NTCs(H2O) : 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido:
100 mVs-1

Para el caso de los GC modificados con dispersiones de NTC largos no oxidados,

no fue posible realizar este estudio, debido a que una vez introducidos los electrodos
modificados a la solución de trabajo los NTC se desprendieron.

Una vez determinado el tiempo óptimo, se realizaron curvas de calibración con los
electrodos modificados con los diferentes NTC. En la figura 72 se muestran las curvas de
calibración obtenidas para un electrodo GC modificado con 4 mg/mL de NTC largos y
cortos oxidados, dispersos en agua y su comparación con el electrodo GC sin modificar.

90 Paola Jara Ulloa

 160

140

120

100 GCE
i / μA 80 NTC Lox
NTC Cox
60

40

20

0 1 2 3 4 5 6 7

[4NimMeBr] / μM
Figura 72. Curvas de calibración de 4-NimMeBr obtenidas sobre GCE/NTCs(H2O) a tiempo de
acumulación de 7min. NTCs(H2O) : 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 .
Velocidad de barrido: 100 mVs-1

Todos los electrodos de GC modificados con los distintos NTC mostraron un

aumento de sensibilidad con respecto al GC. Sin embargo la respuesta obtenida con los
NTC oxidados fue sustancialmente mayor en comparación a los no oxidados. En la tabla
13 se presentan los valores de sensibilidad encontrados.

Electrodo S / μA/μM

GCE 0.01
GCE/ NTCcox 5.34
H2O/NTClox 9.76

Tabla 13. Valores de sensibilidad para electrodo de GC modificado con diferentes NTCs.

91 Paola Jara Ulloa

5,5,2. Voltamperometría de Onda Cuadrada

Por otra parte, se repitieron los estudios utilizando Voltamperometría de Onda

Cuadrada (SWV). La figura 73 muestra los voltamperogramas obtenidos variando los
parámetros de frecuencia y amplitud.

f / Hz
30
A 50
75
150

20 μA

-150 -300 -450 -600 -750

E / mV (Ag/AgCl)

B
20 μA

5
15
25
35
50

-150 -300 -450 -600 -750

E / mV (Ag/AgCl)

Figura 73. Voltamperogramas de onda cuadrada de [4-NimMeOH]: 3×10-6M obtenidas sobre

GCE/NTCs(H2O), (A) variación de frecuencia, (B) variación de amplitud. Tampón Britton
Robinson 0.1 M, pH 2, tiempo de acumulación: 420 s.

92 Paola Jara Ulloa

 Se construyó una curva de calibración con los parámetros óptimos, una amplitud
de 25 mV y frecuencia 75 Hz, la sensibilidad alcanzó un valor de 23.5 μA/μM.
Se obtuvieron valores para el límite de detección y cuantificación de 1.14x10-7 y 3.8x10-7M
respectivamente. (Figura 74)

40

35

30
m = 14.2

25
i / μA

20

m = 23.5
15

10

5
0,4 0,8 1,2 1,6 2,0

[4NimMeOH] / μM

Figura 74. Curva de calibración de 4-NimMeOH obtenida sobre GCE/NTCs(H2O), tampón

Britton Robinson 0.1 M, pH 2.

93 Paola Jara Ulloa

6.- CONCLUSIONES.

• La síntesis y el posterior estudio electroquímico de los derivados del 4-nitroimidazol,

sustituidos en la posición 1 y 2, entregaron importantes resultados en cuanto a la
influencia de los sustituyentes sobre el mecanismo global de reducción.
Dilucidando así, que la sustitución en el nitrógeno 1 del anillo imidazólico es la que
provoca cambios significativos en el potencial de reducción del grupo nitro en todos
los medios de trabajo estudiados.

• La presencia de surfactantes catiónicos en el medio de trabajo, permitió la generación

de un anión radical nitro (RNO2•) lo suficientemente estable para ser detectado en la
escala de tiempo de la técnica de voltamperometría cíclica. Este hallazgo proporciona
una herramienta muy útil para cuantificar la formación, la estabilidad y la reactividad
del anión radical nitro con otras moléculas.

• Al realizar un estudio de solventes por espectrofotometría UV-Visible, se observó que

el λmáx. del 4-NimMeOH fue sensible a la polaridad del medio, sin embargo, no se
observó un desplazamiento en λmáx. en presencia de surfactante, determinándose que
la molécula no ingresa al interior apolar de la micela, por lo tanto no existe reparto.
Además, se propone que la disminución de la corriente y el cambio en el mecanismo
de reducción del derivado nitroimidazólico se debe a algún tipo de interacción del
compuesto con las cadenas alifáticas de las moléculas de monómero del surfactante
y no con la micela.

• Mediante la utilización de electrodos de carbono vítreo modificados con NTCs se

estudió la reducción de derivados del 4-nitroimidazol, los electrodos modificados
revelaron interesantes propiedades electroquímicas, como el aumento de la
intensidad de corriente, la disminución del potencial de reducción y una buena razón
señal/ruido en comparación con el electrodo de carbono vítreo sin modificar.
Los electrodos modificados con NTCs oxidados resultaron ser altamente
reproducibles en mediciones consecutivas, permitiendo la reutilización del electrodo
en este medio.

94 Paola Jara Ulloa

7.- PRESENTACIONES A CONGRESOS

El trabajo de investigación de esta tesis ha sido presentado en los siguientes

congresos:
Internacionales
1. XXII Congreso de la Sociedad Iberoamericana de Electroquímica (SIBAE), 3-7
Abril, La Plata, Argentina (2006). Estabilidad del anión radical nitro en sistemas
heterogéneos: influencia del pH, P. Jara-Ulloa, L. Núñez-Vergara y J.A. Squella.

2. 210th Meeting of the Electrochemical Society, Cancun, México (2006).

“Voltammetric Behaviour of a 4-Nitroimidazole Derivative: Nitro Radical Anion
Formation in Presence of Surfactants” J.A. Squella, P. Jara-Ulloa y L. Núñez-
Vergara.

3. II Iberoamericano y IV Congreso Argentino de Química Analítica, Buenos

Aires, Argentina (2007). Reducción de nitrocompuestos: Evaluación del efecto
electrocatalítico de nanotubos de carbono adsorbidos sobre carbono vítreo. Jara-
Ulloa, P.; Bollo, S.; Squella. J.A.

4. II Iberoamericano y IV Congreso Argentino de Química Analítica, Buenos

Aires, Argentina (2007). Determinación de la CMC de surfactantes catiónicos por
Voltamperometría adsortiva. Jara-Ulloa, P.; Squella, J.A.; Nuñez-Vergara, L.J.;
Bollo, S.

Nacionales
5. XXVI Jornadas Chilenas de Química, Universidad de Concepción. 10 – 13 de
Enero, Concepción, Chile (2006). Efecto de surfactantes sobre la estabilidad del
anión radical nitro generado por voltametría cíclica en medio acuoso. P. Jara-
Ulloa, L. Núñez-Vergara & J.A. Squella.

6. VIII encuentro de Química Analítica y Ambiental, Universidad Arturo Prat, 13 –

16 de Octubre, Iquique, Chile (2006). Determinación de concentraciones micelares
críticas por técnicas electroquímicas, P. Jara-Ulloa, L.J. Núñez-Vergara, J.A.
Squella, S. Bollo.

95 Paola Jara Ulloa

 7. XVII Jornadas Chilenas de Química, Chillán, Chile (2007). Estabilización del
anión radical nitro en sistemas organizados: ¿micela y/o monómero? P. Jara-Ulloa,
P.G. Molina, N.M. Correa, M.A. Zón, H. Fernández, L.J. Núñez-Vergara y J.A,
Squella.

8. XXVII Jornadas Chilenas de Química, Chillán, Chile (2007). Estabilidad del anión
radical nitro en sistemas organizados: influencia del sustituyente. P. Jara-Ulloa, L.
Núñez-Vergara y J. A. Squella.

9. XXVII Jornadas Chilenas de Química, Chillán, Chile (2007). Reducción de

nitrocompuestos sobre electrodos de carbono vítreo modificados con nanotubos
de carbono. J.A. Squella, P. Jara-Ulloa, L.J. Núñez-Vergara y S. Bollo.

10. IX encuentro de Química Analítica y Ambiental, Universidad de Concepción, 14

– 17 de Octubre, Concepción, Chile (2008). Electrodos de carbono vítreo
modificados con diferentes tipos de nanotubos de carbono: efecto sobre la
reducción de un derivado nitroimidazólico. P. Jara-Ulloa, J.A. Squella, L.J. Núñez-
Vergara y S.Bollo.

11. II Simposio de Electroquímica, Villa Alemana, 19 – 21 de Noviembre (2008).

Estudio del anión radical nitro en sistemas heterogéneos. P. Jara-Ulloa, L. Núñez-
Vergara y J. A. Squella.

ESTADÍAS DE INVESTIGACIÓN EN EL EXTRANJERO

• Universidad Nacional de Río Cuarto, Córdoba, Argentina. 22 de agosto al 22 de

septiembre de 2006. Laboratorio de Electroquímica, Facultad de Ciencias Exactas,
Físico-Químicas y Naturales.

• Universidad Nacional de Río Cuarto, Córdoba, Argentina. 19 de junio al 24 de

agosto de 2006. Laboratorio de Electroquímica, Facultad de Ciencias Exactas,
Físico-Químicas y Naturales.

96 Paola Jara Ulloa

8.- REFERENCIAS
1)J.H. Boyer, Nitroazoles, VCH Publishers, Inc., Deerfield Beach, FL., 165 (1986)
2) D.I. Edwards. Progress Med. Chem., 18, 87 (1981)
3) D.I. Edwards. J.Antimicrobiol. Chemo ther., 31, 9 (1993)
4) D.I. Edwards. Biochem. Pharmacol., 35, 53 (1986)
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