Diagnosticul citopatologic în

afecţiunile sistemului limfoid

LIMFADENOPATII

Diagnostic citopatologic 2013

 Localizarea Limfonodurilor
superficiale la câine
• Submandibular: grup de 2-4 limfonoduri localizate
în partea ventrală a ramurii recurbate a mandibulei
• Prescapular (cervical): grup de 2-3 limfonoduri
localizate în dreptul articulaţiei scapulo-humerale, în
faţa muşchiului supraspinos
• Axilar: 1-2 limfonoduri localizate caudal şi medial
faţă de articulaţia scapulo-humerală
• Inghinal superficial: 2 limfonoduri localizate în
spaţiul dintre peretele abdominal şi faţa medială a
coapsei
• Popliteu: un limfonod localizat în spatele articulaţiei
grasetului Diagnostic citopatologic 2013
Limfonodurile superficiale la
câine

Diagnostic citopatologic 2013

 GENERALITĂŢI
• LIMFADENOPATIE=afecţiune a
limfonodului care implică mărirea volumului
acestuia
• Limfadenopatiile pot fi asociate cu:
Hiperplazia reactivă a ţesutului limfoid
Inflamaţii – LIMFADENITE
Tumori primare ale sistemului hematopoietic –
LIMFOAME
Tumori secundare - METASTAZE
Diagnostic citopatologic 2013
• PAAF şi examenul citologic al
limfonodurilor mărite sunt foarte
frecvent folosite în practica
curentă, permiţând stabilirea unui
diagnostic rapid, minim invaziv,
ieftin şi repetitiv

Diagnostic citopatologic 2013

• Prin examen citologic, la aproximativ 90% din
câinii cu limfadenopatie şi la 65-75% dintre pisici
se poate stabili un diagnostic definitiv.
• Dacă examenul citologic este neconcludent se
recomandă excizia chirurgicală a limfonodului şi
examen histologic.
• Datele anamnetice sunt deosebit de importante în
evaluarea ţesutului limfoid, având în vedere că
acesta reacţionează la o gamă variată de stimuli
(ex. imunizările pot determina hiperplazie
paracorticală difuză în care limfocitele au aspect
tumoral).
Diagnostic citopatologic 2013
• Şansele ca un câine cu poliadenopatie să aibă
limfom sunt mai mari comparativ cu unul care are
doar un singur limfonod mărit.
• Mărirea limfonodurilor la pisicile tinere este cel
mai adesea expresia unor boli proliferative non-
neoplazice, decât a limfoamelor.

Diagnostic citopatologic 2013

• În caz de poliadenopatie trebuie făcute
frotiuri din mai multe limfonoduri.
• În cazul unor procese inflamatorii cu diferite
localizări se recomandă examinarea citologică
a unui limfonod loco-regional şi a unui
limfonod de la distanţă.
• În general, dacă limfonodul nu este mărit în
volum nu se recomandă examen citologic.

Diagnostic citopatologic 2013

• În general, la examinarea limfonodurilor putem
întâlni 4 pattern-uri citomorfologice:
Limfonod normal

Limfadenopatie reactivă

Limfadenită

Procese tumorale

Diagnostic citopatologic 2013

 LIMFONOD NORMAL
• La examenul citologic al unui limfonod normal se
constată O POPULAŢIE HETEROGENĂ de
celule limfocitare şi nelimfocitare.
• Componenta limfocitară (90-95%):
Limfocite - în majoritate mature, bine diferenţiate
Prolimfocite
limfocite medii (centrocite, centroblaste)
limfocite mari ( imunoblaste, limfoblaste)

Diagnostic citopatologic 2013

 Limfocitele
mature
7-10 µ, cu nucleul de
dimesiunile unei hematii (5-
7 µ), cromatină densă,
intens bazofilă, fără nucleol
şi citoplasmă puţină, slab
bazofilă; au atât origine T
cât şi B celulară (dificil de
identificat în frotiu).

Diagnostic citopatologic 2013

Centrocitele (aprox. 10 µ)
au nucleul clivat, cu
cromatină densă, iar
nucleolul nu se distinge.

Centroblastele sunt celule

mari, cu diametrul
nucleului de aprox. 15-20 µ,
cromatină palidă,
pulverulentă şi numeroşi
nucleoli dispuşi la periferia
nucleului.
Diagnostic citopatologic 2013
Imunoblastele sunt cele mai
mari celule limfoide (nucleu
de aprox 20-25 µ). Au
citoplasmă abundentă, slab
bazofilă, uneori vacuolizată,
cromatină pulverulentă şi de
regulă un singur nucleol
proeminent.

Limfoblastele sunt celule

medii spre mari (15-20 µ), cu
nucleu rotund, cu citoplasmă
în cantitate variabilă,
cromatină fină, omogenă şi
1-2 nucleoli inconstant
decelabili.
Diagnostic citopatologic 2013
Pot fi prezente şi
plasmocite în număr
variabil (0-5%).
Sunt celule mici, cu
aspect bipolar, cu
nucleu excentric,
hipercrom şi un halou
perinuclear optic gol
(corespunzător
aparatului Golgi).

Diagnostic citopatologic 2013

 LIMFONOD NORMAL
• Componenta nelimfocitară (5-10%):
Neutrofile
Eozinofile
Macrofage
Mastocite
Celule de suport – celule dendritice

Diagnostic citopatologic 2013

 LIMFADENOPATIA REACTIVĂ
• Ţesutul limfoid reacţionează la diverşi
stimuli antigenici (bacterieni, imuni,
tumorali, micotici).
• Limfonodul reactiv prezintă o populaţie
celulară heterogenă, conţine limfocite în
toate stadiile de diferenţiere.

Diagnostic citopatologic 2013

 LIMFADENOPATIA REACTIVĂ
• Se impune diagnostic diferenţial între
limfoame şi hiperplazia reactivă a ţesutului
limfoid.
• Limfonodul neoplazic prezintă o populaţie
monomorfă de celule, într-un anumit stadiu
de diferenţiere.

Diagnostic citopatologic 2013

 LIMFADENOPATIE
REACTIVĂ/TUMORALĂ

Diagnostic citopatologic 2013

 LIMFADENOPATIA REACTIVĂ
• Uneori, limfonodul reactiv prezintă o
celularitate similară cu a limfonodului
normal, dar cu un număr mai mare de
prolimfocite / limfoblaste, la care se adaugă
un număr semnificativ de plasmocite, dar în
funcţie de agentul patogen implicat pot fi
prezente şi alte tipuri de celule (neutrofile,
eozinofile).

Diagnostic citopatologic 2013

 LIMFADENOPATIA REACTIVĂ
• La pisici, în cazul infecţiilor cu retrovirusuri
(FIV, FeLV), poate apărea o hiperplazie
reactivă caracterizată printr-o populaţie
celulară heterogenă, alcătuită din
centrocite, centroblaste, imunoblaste,
plasmocite, macrofage.
• Un număr mare de plasmocite denotă o
stimulare antigenică cronică sau o
hipergamaglobulinemie.
Diagnostic citopatologic 2013
Plasmocitele pot
conţine corpusculi
Russel în citoplasmă
(acumulări de
imunoglobuline).
Plasmocitele cu
corpusculi Russel
sunt cunoscute ca
celule Mott.

Diagnostic citopatologic 2013

 •ÎN LIMFADENOPATIA

REACTIVĂ LIMFONODUL NU
ESTE DUREROS LA PALPARE

Diagnostic citopatologic 2013

 LIMFADENITE
• Din punct de vedere citologic, în procesele
inflamatorii aspectele sunt de multe ori similare
cu cele descrise în limfadenopatia reactivă, la
care se adaugă un număr mare de celule
inflamatorii specifice diferitelor tipuri evolutive şi
morfologice de inflamaţie:
neutrofile-inflamaţie supurativă
macrofage/monocite-inflamaţii cronice
eozinofile/mastocite-stări de hipersensibilitate
• La pisică limfadenita eozinofilică poate fi
asociată cu complexul granulomului eozinofilic
felin.
Diagnostic citopatologic 2013
 • ÎN LIMFADENOPATIA
INFLAMATORIE LIMFONODUL

ESTE DUREROS LA PALPARE

Diagnostic citopatologic 2013

 PROCESELE TUMORALE
• Neoplaziile ţesutului limfoid sunt relativ frecvente la
câine şi pisică, putând afecta numeroase ţesuturi:
limfonoduri, splină, timus, intestin, măduvă
hematoformatoare.
• Populaţia de celule limfoide se remarcă prin
monomorfism (uneori dimorfism).
• Morfologia celulelor variază în funcţie de gradul de
diferenţiere şi de tipul celulelor limfocitare
implicate: limfoamele cu celule imature, blastice,
sunt uşor de diagnosticat citologic, limfoamele cu
celule mature, bine diferenţiate sunt dificil de
diagnosticat citologic.
Diagnostic citopatologic 2013
Protocolul CITOLOGIC folosit
în evaluarea LIMFOAMELOR
Determinarea dimensiunilor celulelor , pe
baza comparării dimensiunilor nucleului
cu eritrocitul
Celule mici 1-1,5 :1
Celule medii 2-2,5:1
Celule mari 3:1

Diagnostic citopatologic 2013

Protocolul CITOLOGIC folosit
în evaluarea LIMFOAMELOR
Determinarea formei nucleului şi poziţia
acestuia în celulă
Rotund – sferic, cu suprafaţa netedă
Rotund neregulat – cu un număr redus de
adâncituri superficiale
Convolut – cu câteva adânciruri mai
pronunţate pe suprafaţă
Poziţionat central sau excentric
Diagnostic citopatologic 2013
Protocolul CITOLOGIC folosit
în evaluarea LIMFOAMELOR
Determinarea numărului, dimensiunilor
şi localizării nucleolilor
Unul sau mai mulţi nucleoli
De dimensiuni mari sau mici
Indistinct sau proeminent
Poziţionat central sau periferic

Diagnostic citopatologic 2013

 Protocolul CITOLOGIC folosit
în evaluarea LIMFOAMELOR
Descrierea citoplasmei
• Cantitate
Redusă, dispusă uniform în jurul nucleului
În cantitate moderată
Abundentă – x2 dimensiunile nucleului
Poziţionat central sau periferic
• Tinctorialitate
Palidă, slab bazofilă
Bazofilie moderată
Intens bazofilă
Diagnostic citopatologic 2013
 Protocolul CITOLOGIC folosit
în evaluarea LIMFOAMELOR
Estimarea indicelui mitotic prin
identificarea numărului de mitoze pe 5
câmpuri microscopice la obiectiv x40
Redus: 0-1 mitoze
Moderat: 2-3 mitoze
Ridicat: >3 mitoze

Diagnostic citopatologic 2013

 Protocolul CITOLOGIC folosit
în evaluarea LIMFOAMELOR
Stabilirea gradului tumoral pe baza
dimensiunilor celulelor şi a indicelui mitotic
Joasă malignitate – celule de dimensiuni mici,
indice mitotic redus
Medie malignitate - celule de dimensiuni medii,
indice mitotic moderat
Înaltă malignitate – celule de dimensiuni medii
sau mari, indice mitotic ridicat

Diagnostic citopatologic 2013

 CLASIFICAREA CITOLOGICĂ A
LIMFOAMELOR LA CÂINE
Limfoame de joasă malignitate
 Limfomul limfocitar
 Limfomul limfo-plasmocitar
 Limfomul centrocitic
Limfoame de medie malignitate
 Limfomul centrocitic/centroblastic
Limfoame de înaltă malignitate
 Limfomul imunoblastic
 Limfomul limfoblastic
Diagnostic citopatologic 2013
 PROCESELE TUMORALE
• Din punct de vedere citologic, 80-90% dintre
celule sunt limfocite mari, imature, blastice, cu
raport N:C mare, cromatină grosieră şi nucleoli
evidenţi.

Diagnostic citopatologic 2013

• Limfomul centrocitic se caracterizează prin preponderenţa
centrocitelor în frotiu. Centrocitele sunt celule de talie mică
(x1-2 eritrocite), cu nucleu clivat, cu cromatina condensată. Nu
se observă nucleoli, dar prezintă cromocentrii intens bazofili.
• Limfomul centroblastic se caracterizează prin preponderenţa
centroblastelor în frotiu. Acestea sunt celule de talie mai mare,
cu nucleu clivat sau neclivat, cromatină mai puţin condensată
şi 2-4 nucleoli dispuşi la periferia nucleului.
• Limfomul imunoblastic se caracterizează prin preponderenţa
în frotiu a unei populaţii de celule mari (x 3-4 eritrocite), cu
nucleu rotund sau ovalar, cromatină fină şi un singur nucleol
mare, evident, dispus uşor excentric. Citoplasma, bazofilă, este
abundentă şi dispusă de asemenea uşor excentric faşă de
nucleu.

Diagnostic citopatologic 2013

• Limfomul limfoblastic se caracterizează prin preponderenţa
limfoblastelor în frotiu. Acestea se prezintă morfologic sub
două aspecte:
• celule mici, neclivate, cu citoplasmă puţină şi cromatină
condensată
• celule mari (x 4-5 eritrocite), cu nucleu uşor clivat, eucromatic
şi citoplasmă puţină, slab bazofilă. Nucleolii de regulă lipsesc
sau apar ocazional şi sunt dificil de identificat.

Diagnostic citopatologic 2013

PROCESELE TUMORALE SECUNDARE
• Procesele tumorale secundare, metastazele, sunt
rezultatul diseminării celulelor neoplazice din
tumora primară, pe cale hematogenă sau limfatică.
• Din punct de vedere citologic, în procesele
tumorale secundare patternul citologic general
limfonodal este de tip reactiv, la care se adaugă
prezenţa celulelor specifice tumorii primare.
• În cazul metastazelor vechi ţesutul limfonodal
poate fi înlocuit în totalitate cu celule tumorale.

Diagnostic citopatologic 2013

 PROCESELE TUMORALE
• Teoretic, toate tumorile maligne pot metastaza în
limfonoduri, dar frecvenţa cea mai mare o au
carcinoamele, mastocitoamele şi melanoamele.
• Carcinoamele metastazează mult mai frecvent în
limfonod, comparativ cu sarcoamele.
• În caz de metastază a carcinomului scvamocelular
sunt prezente numeroase neutrofile, deoarece
keratina induce proces inflamator.
• Absenţa celulelor tumorale din frotiu NU exclude
diagnosticul de metastază.
Diagnostic citopatologic 2013