Plantas Reactores Genoma España

Sector agroalimentario
Plantas biofactoría
Informe de Vigilancia Tecnológica
Plantas biofactoría
Informe de Vigilancia
Tecnológica
El presente Informe de Vigilancia Tecnológica ha sido
realizado en el marco del convenio de colaboración
conjunta entre Genoma España y Parque Científico de
Madrid (PCM), entidad que, por delegación de la
Universidad Complutense de Madrid, gestiona el Círculo
de Innovación en Agroalimentación (CIAA), perteneciente
al Sistema de Promoción Regional madri+d.
Los autores de este informe agradecen la colaboración

ofrecida por toda la comunidad científica y empresarial
para la realización de este informe, en especial a:
- Dra. Covadonga Alonso Martí (INIA)
- D.ª Isabel Bronchalo Bronchalo (AGRENVEC)
- Dra. Sonia Castañón de la Torre (NEIKER)
- Dr. Juan Antonio García Alvarez (CNB - CSIC)
- Dra. Dolors Ludevid Múgica (IBMB - CSIC)
- Dr. Luis Enjuanes Sánchez (CNB - CSIC)
- Dr. José Angel Martínez Escribano (INIA)
- Dr. Angel Mingo Castel (Univ. Pública de Navarra)
- Dr. Ignacio Moreno Echanove (Plant Bioproducts)
- Dr. Juan Plana Durán (Fort Dodge Veterinaria)
- Dr. Fernando Ponz Ascaso (INIA)
- Dr. Javier Pozueta Romero (Instituto de
Agrobiotecnología y Recursos Naturales. UPN)
- D.ª Lucía Roda Ghisleri (Ministerio de Medio Ambiente)
- Dra. Julia Rueda Muñoz de San Pedro
(Univ. Complutense de Madrid)
La reproducción parcial de este informe está autorizada bajo

la premisa de incluir referencia al mismo, indicando: Plantas
Biofactoría. GENOMA ESPAÑA / CIAA-PCM.
Genoma España no se hace responsable del uso que se

realice de la información contenida en esta publicación. Las
opiniones que aparecen en este informe corresponden a los
expertos consultados y a los autores del mismo.
© Fundación Española para el Desarrollo

de la Investigación en Genómica
y Proteómica / Parque Científico de Madrid.
Autores: Olga Ruiz Galán (CIAA)

Esther García Iglesias (CIAA)
Lara Gago Cabezas (CIAA)
Víctor González Rumayor (CIAA)
Coordinador: Miguel Vega García (Genoma España)
Edición: Silvia Enríquez (Genoma España)

Referencia: GEN-ES05001
Fecha: Febrero 2005
Depósito Legal: M-10665-2005
ISBN: 84-609-4621-5
Diseño y realización: Spainfo, S.A.
4
PLANTAS BIOFACTORÍA
Índice de contenido
• RESUMEN EJECUTIVO 7
1. INTRODUCCIÓN. PLANTAS BIOFACTORÍA 9
2. TECNOLOGÍAS PARA LA OBTENCIÓN DE PLANTAS BIOFACTORÍA 14
2.1. Sistemas de expresión de proteínas recombinantes. 14

2.1.1. Transformación genética estable de las plantas. 15
2.1.2. Expresión transitoria. 21
2.2. Estrategias tecnológicas para optimizar la obtención
de proteínas recombinantes en plantas. 24
2.2.1. Aumento del rendimiento de producción. 24
2.2.2. Autenticidad estructural. 32
3. CULTIVOS DE INTERÉS EN AGRICULTURA MOLECULAR 35
3.1. Plantas de hoja y forrajeras. 36

3.2. Semillas de cereales y leguminosas. 37
3.3. Frutas, tubérculos y hortalizas. 38
3.4. Oleaginosas y de fibra. 39
4. MOLÉCULAS DE INTERÉS 41
4.1. Proteínas recombinantes. 41

4.1.1. Proteínas de interés biosanitario. 41
4.1.2. Proteínas de interés industrial. 55
4.2. Ingeniería metabólica. 56
4.2.1. Modificación de rutas enzimáticas existentes. 56
4.2.2. Introducción de nuevas rutas enzimáticas. 60
5. LEGISLACIÓN 61
6. ASPECTOS DE MERCADO 67
7. ASPECTOS SOCIOECONÓMICOS 74
5
8. EJEMPLOS DE GRUPOS DE INVESTIGACIÓN ESPAÑOLES 78
9. CONCLUSIONES 92
10. ANEXOS 94
Anexo I. Proyecto Pharma-Planta. 94

Anexo II. Proyectos financiados por la Unión Europea. 96
Anexo III. Centros públicos de investigación y proyectos. 102
Anexo IV. Empresas. 103
Anexo V. Patentes. 108
11. REFERENCIAS 122
12. LISTA DE ABREVIATURAS 126
13. GLOSARIO 127
6
Resumen ejecutivo
La ingeniería genética de plantas surgió a transformación del material vegetal hasta la
principios de los años 80, cuando se descubre comercialización del producto final, presenta una
cómo transferir fragmentos de información serie de factores críticos, que en ocasiones pueden
genética de un organismo vegetal a otro, llegar a ser limitantes (riesgos ambientales,
permitiendo la expresión de caracteres deseables. riesgos sobre la salud y rendimiento de
Desde entonces, el desarrollo de las tecnologías producción). Se han diseñado distintas estrategias
de transformación y regeneración de plantas ha tecnológicas que contribuyen a minimizar el
sido tal que ha permitido realizar modificaciones impacto de estos factores.
que parecían impensables.
Las aplicaciones en el campo biofarmacéutico son
Las primeras aplicaciones comerciales de la especialmente interesantes. La utilización de
modificación genética de plantas se encaminan a microorganismos modificados genéticamente
la obtención de cultivos que presenten ventajas para la obtención de moléculas de interés
agronómicas como tolerancias a herbicidas, terapéutico comenzó hace dos décadas con la
resistencias a plagas y patógenos o tolerancia a producción de insulina humana recombinante.
condiciones adversas como salinidad o sequía. En 2002, veinte años después, ya existían
El cultivo de estas plantas proporciona beneficios aproximadamente 90 fármacos desarrollados y/o
a los agricultores debido a que implican mayores producidos por métodos biotecnológicos en el
rendimientos y/o menores costes de producción. mercado, que movieron cerca de 35 billones de
dólares. Las estimaciones indican que en el año
La segunda generación de plantas transgénicas 2010 los biofármacos serán un 35% del mercado
corresponde a plantas que presentan mejores farmacéutico, con unos beneficios estimados de
propiedades organolépticas y nutricionales. Las 20 billones de dólares.
modificaciones que se realizan en estas plantas
son más complejas, ya que se encuentra Sin embargo, parece que el aumento de la
implicado un mayor número de genes. demanda de este tipo de productos será tal que
Se considera que los beneficios de este tipo de los actuales sistemas de producción no podrán
plantas repercuten tanto en los productores de hacer frente a la misma. Por ello, será necesario el
alimentos como en el consumidor final. desarrollo de nuevos sistemas de producción que
permitan la obtención de estos biofármacos en
En ambos casos se trata de plantas modificadas cantidades más elevadas y a un coste asequible.
genéticamente utilizadas para la elaboración de La utilización de plantas como biofactorías de
alimentos destinados al consumo humano y animal. estos productos se perfila como una posible
solución. En el campo específico de plantas como
Existe una tercera generación de plantas biofactorías, se estima que los primeros productos
transgénicas que corresponde a plantas llegarán al mercado en el año 2006, y que el valor
modificadas genéticamente para producir de mercado, sólo en EE.UU., alcanzará los 2.200
compuestos de alto valor añadido. En este caso no millones de euros en 2011.
se busca la producción de alimentos, sino que se
pretende que la planta se convierta en una El desarrollo de plataformas biotecnológicas de
biofactoría de productos de interés en los campos producción de proteínas recombinantes en plantas
biosanitario, farmacéutico o industrial. Este se encuentra liderado por los Estados Unidos y
informe pretende describir de manera detallada Canadá, donde ya existen productos comerciales.
cuál es el estado en el que se encuentra el Europa sufre un retraso en la implantación de
desarrollo de esta tercera generación de plantas estos sistemas, debido fundamentalmente a la
transgénicas, tanto en el ámbito tecnológico como moratoria que impedía el uso de nuevos
en lo referente a los aspectos legislativos, transgénicos. El sector se encuentra formado por
socioeconómicos y comerciales. grupos de investigación de centros públicos y
universidades, y por empresas generalmente de
La primera parte del informe analiza las pequeño y mediano tamaño.
tecnologías que se están utilizando en la
actualidad para la obtención plantas biofactoría. Con el fin de reflejar el estado en el que se
El proceso productivo, que incluye desde la encuentra actualmente este mercado se realiza
7
una descripción de algunas de las empresas tipo
dedicadas a esta actividad. Dentro de esta
descripción se incluyen las tecnologías que
utilizan, los productos en desarrollo y la fase en la
que se encuentran, así como las estrategias que
siguen en cuanto a la propiedad industrial.
La legislación aplicable a las plantas biofactoría

condiciona extraordinariamente los sistemas de
producción. La normativa europea referente al
control de las actividades en las que se produzcan
o empleen OMGs es muy estricta. Su objetivo es
asegurar que estas actividades se lleven a cabo en
condiciones en las que los riesgos para la salud y
para el medio ambiente sean mínimos. Se ha
dedicado un apartado a estudiar la legislación en
el que se incluyen referencias a la normativa
aplicable a la utilización confinada, liberación y
comercialización de OMGs, así como a los
procedimientos administrativos de autorización de
las mismas.
Por último, se analizará cuál es la posición de

nuestro país en el desarrollo de plantas
transgénicas de tercera generación. Para ello se
ha realizado un mapa de las empresas y grupos
de investigación que en la actualidad desarrollan
sus actividades en este campo. Se han recogido
los datos referentes a las líneas y proyectos de
investigación y patentes desarrolladas por estos
grupos, así como la percepción de los
investigadores principales en cuanto al futuro de
las plantas biofactoría en nuestro país.
8
1. Introducción. Plantas biofactoría

La utilización de plantas como biofactorías de elevado valor añadido. Pueden usarse plantas
productos de alto valor añadido despierta un tradicionalmente utilizadas para la obtención de
elevado interés tanto en los científicos como en las alimentos, piensos u otros productos como fibras,
empresas de biotecnología, debido a las ventajas u otras especies.
de tipo económico, técnico y de seguridad que
La modificación genética de la planta da lugar a la
presentan las plantas para ser usadas como
expresión de una nueva proteína que la planta no
sistemas de producción1.
poseía. Esta proteína puede ser el producto de interés
Cuando hablamos de plantas como biofactorías que se desea obtener, o bien puede ser una enzima
nos referimos al cultivo a escala agrícola de que modifique una ruta metabólica de la planta, y
plantas superiores que han sido transformadas de como consecuencia ésta pasa a expresar un nuevo
modo que pasen a expresar productos que no compuesto que anteriormente no producía. En el
expresaban anteriormente (o que expresaban en primer caso se habla de agricultura molecular y en
cantidades muy pequeñas) y que poseen un el segundo de ingeniería metabólica.
Agricultura molecular
La expresión “agricultura molecular” procede de la expresión en inglés “molecular farming” y consiste

en la aplicación de la biotecnología de plantas para introducir en una planta genes que codifican para
determinadas proteínas con interés biomédico o industrial para el hombre, como vacunas,
anticuerpos, biofármacos, polímeros o enzimas, de modo que la planta sea capaz de producirlos.
Ingeniería metabólica
La ingeniería metabólica consiste en la modificación de las rutas metabólicas de la planta para

incrementar la síntesis de moléculas deseables, bien mediante la introducción de genes que codifican
para enzimas que completan una ruta metabólica existente en la planta, o genes que codifican para
todas las enzimas de una ruta metabólica que no posee la planta.
Para que la planta exprese estos productos es necesario introducir los genes que los codifican, lo cual puede
hacerse mediante distintos sistemas que se indicarán más adelante. La planta transformada podrá cultivarse
en el campo tal y como se hace con los cultivos tradicionales, o bajo distintos sistemas de confinamiento o
de contención y una vez que alcance el desarrollo adecuado se recolectará.
El material vegetal recolectado contendrá el compuesto de interés y en función de su uso, puede ser
purificado para su envasado y comercialización en forma pura, o bien puede comercializarse sin purificar tal
y como ocurre con las vacunas comestibles.
1
Twyman, R. M.; Stoger, E.; Schillberg, S.; Christou, P.; Fischer, R. (2003). Molecular farming in plants: host systems and
expression technology. Trends in Biotechnology, 21, 570-578.
9
Construcción de un
vector de transferencia
Introducción
del vector en la
célula vegetal
Célula modificada
Aislamiento del genéticamente
gen de interés
Cultivo de
las células
Trasplante a un
campo de cultivo
confinado
Consumo
Elaboración de directo
fármacos
Consumo animal Consumo humano
Figura 1. Esquema general
10
Este informe se centra principalmente en la salud de las personas y los animales. En el caso
obtención de proteínas recombinantes de interés de las bacterias estos agentes son las endotoxinas
biosanitario e industrial mediante agricultura bacterianas, mientras que cuando se trata de
molecular, ya que es ésta la aplicación que concentra células de mamíferos son virus, priones y
mayor número de empresas y mayor cantidad de secuencias oncogénicas.
productos cercanos a la comercialización. Nos
referiremos a la ingeniería metabólica en el apartado Una alternativa a los cultivos celulares es la
dedicado a los productos, explicando los puntos más utilización de plantas y animales completos. En el
importantes. caso de los animales se está investigando la
expresión de las proteínas en huevos o leche, por
Las proteínas recombinantes son moléculas
ejemplo, lo cual permitiría una recolección
complejas cuya obtención a escala industrial
continua relativamente sencilla. Sin embargo, este
mediante síntesis química es muy difícil o costosa.
tipo de sistemas presenta inconvenientes relativos
Por este motivo, en la actualidad se obtienen
a la seguridad debido a la posible presencia de
mediante la utilización de cultivos celulares de
agentes contaminantes y patógenos.
microorganismos (bacterias, levaduras y hongos)
o células de organismos superiores entre los que se La utilización de plantas completas presenta
incluyen insectos, mamíferos o plantas. Uno de los ventajas de tipo económico, técnico y de
principales inconvenientes que presentan estos seguridad del producto frente a los sistemas de
sistemas es que implican costes elevados, debido a expresión que se utilizan en la actualidad para
que requieren aportes de nutrientes y energía y obtener proteínas recombinantes, y además
deben llevarse a cabo en condiciones de esterilidad.
presenta ventajas de seguridad frente los
Estos sistemas además presentan riesgos de animales transgénicos. A continuación se indican
contaminación de los productos con distintos las principales ventajas que presentan las plantas
agentes que pueden resultar peligrosos para la para su utilización como biofactorías.
VENTAJAS DE LA UTILIZACIÓN DE PLANTAS BIOFACTORÍA 2, 3, 4
• De tipo económico5, 6, 7
– Permiten usar los recursos y la infraestructura agrícola existente (maquinaria para la siembra,
cosecha y procesado del material vegetal, silos, etc.), lo que resulta en una reducción del capital
inicial que se debe invertir.
– Presentan costes de producción bajos. La energía necesaria para el crecimiento del cultivo
procede del sol y los nutrientes son el dióxido de carbono atmosférico y los minerales del suelo o
procedentes de la fertilización.
– Permite un escalado sencillo tanto para aumentar la producción como para reducirla, simplemente
aumentando o reduciendo la cantidad de terreno dedicada al cultivo.
– El cultivo de plantas produce una gran cantidad de biomasa en la que se acumula la proteína
recombinante, por lo que pueden alcanzarse producciones elevadas.
– Las líneas transgénicas pueden mantenerse durante un tiempo largo en forma de semillas, de
modo que la planta se encuentra en un estado de latencia en el que no se necesitan condiciones
de mantenimiento costosas. Por el contrario otros sistemas de expresión requieren condiciones
muy controladas o incluso es necesario reproducir las células con el consiguiente gasto de
nutrientes y energía.
– En el caso de proteínas que necesitan ser purificadas los costes de procesado son similares a los de
otros sistemas de expresión, pero en el caso de proteínas que no se purifican estos costes se eliminan.
(continúa en pág. siguiente)
2
Horn, M. E.; Woodard, S. L.; Howard, J. A. (2004). Plant molecular farming: systems and products. Plant Cell Rep., 22,
711-720.
3
Giddings, G. (2001). Transgenic plants as protein factories. Current Opinion in Biotechnology, 12, 450–454.
4
Daniell, H.; Streatfield, S. J.; Wycoff, K. (2001). Medical molecular farming:production of antibodies, biopharmaceuticals
and edible vaccines in plants. Trends in Plant Science, 6, 219-226.
5
Yoshida, K.; Shinmyo, A. (2000). Transgene expression systems in plant, a natural bioreactor. Journal of Bioscience and
Bioengineering, 90, 353-362.
6
Maliga, P. (2002). Engineering the plastid genome of higher plants. Current Opinion in Plant Biology, 5, 164-172.
7
11
VENTAJAS DE LA UTILIZACIÓN DE PLANTAS BIOFACTORÍA (continuación)
• De tipo técnico8, 9
– Las plantas son sistemas relativamente fáciles de transformar.
– Puede aumentarse la estabilidad de las proteínas recombinantes mediante su acumulación o

síntesis en determinados compartimentos celulares (orgánulos subcelulares) donde se encuentran
protegidas de la degradación.
– La síntesis de proteínas y sus modificaciones postraduccionales son semejantes a las que realizan
los animales, existiendo sólo pequeñas diferencias en cuanto a glicosilación.
– La pared celular protege a la proteína contra la degradación en el tracto gastrointestinal,

permitiendo la administración por vía oral sin purificación.
– Pueden utilizarse sistemas mediante los cuales las moléculas recombinantes se almacenen en
determinados órganos o tejidos de la planta como raíces, semillas, tubérculos, frutos, etc.
• Referentes a la seguridad de los productos obtenidos
– Las proteínas procedentes de plantas no son susceptibles de estar contaminadas por virus
animales o humanos, priones o secuencias oncogénicas que puedan afectar al ser humano o a
animales.
Aunque la utilización de plantas completas como Sin embargo, parece que algunos factores críticos
sistemas de expresión presenta ventajas muy relacionados con el medio ambiente y con la salud
importantes, existe una serie de factores críticos humana y animal necesitarán de esfuerzos
que es necesario tener en cuenta, ya que tienen adicionales, ya que no siempre es posible el
un papel fundamental en el éxito de la agricultura desarrollo de tecnologías adecuadas que permitan
molecular. Estos factores se refieren reducir su impacto. Esto hace que, de momento,
principalmente a problemas de seguridad sea necesaria la utilización de buenas prácticas de
ambiental, posibles efectos negativos sobre la cultivo y de medidas de confinamiento para poder
salud humana y animal y retos técnicos, prevenir algunos de los riesgos asociados a este
entendidos como aquellos que afectan al proceso tipo de cultivos. Además, al tratarse de riesgos
de producción y purificación. sobre la salud y sobre el medio ambiente, entra en
juego la aceptación de estos cultivos por distintos
De estos factores críticos, los retos técnicos agentes socioeconómicos. Dentro de éstos se
están siendo abordados mediante el desarrollo incluyen agentes implicados en la cadena
de tecnologías que optimizan el proceso alimentaria (agricultores y ganaderos,
productivo. productores, distribuidores, consumidores, etc.),
grupos ecologistas, legisladores y la opinión
pública en general.
8
Koprowski, H.; Yusibov, V. (2001). The green revolution: plants as heterologous expression vectors. Vaccine 19,
2735–2741.
9
Fischer, R.; Stoger, E.; Schillberg, S.; Christou, P.; Twyman, R. M. (2004). Plant-based production of biopharmaceuticals.
Current Opinion in Plant Biology, 7, 152–158.
12
FACTORES CRÍTICOS DE LAS PLANTAS BIOFACTORÍA10, 11, 12
• Ambientales
– Riesgo de escapes por flujo de polen, que dan lugar a problemas de coexistencia con otros
cultivos. El polen de las plantas modificadas genéticamente puede dispersarse por el viento,
o a través de insectos polinizadores llegando a otros cultivos en los que podrá introducir los
transgenes que contiene.
– Contaminación cruzada por mezcla de semillas. Puede tener lugar en todas las fases del proceso
de cultivo incluyendo contaminación a través de la maquinaria agrícola durante la siembra y
recolección, y en el almacenamiento, transporte y procesado. Esta mezcla de semillas puede
ocasionar problemas ambientales en caso de siembra de las mismas y podría tener implicaciones
en la salud de animales y personas si se produjera el paso a la cadena alimentaria.
– Riesgo de ingestión por los animales que existan en el campo de cultivo, como pequeños
mamíferos, aves o invertebrados.
– Riesgo de permanencia en el suelo de restos procedentes de las plantas transformadas como

semillas o brotes, a partir de los que puede volver a crecer la planta.
– Riesgo de permanencia en el medio de proteínas transgénicas potencialmente peligrosas que

podrían acumularse en otros organismos.
• Salud humana y animal
– Posible riesgo de pasar a la cadena alimentaria. Este hecho podría producir distintos problemas
en función del tipo de sustancia que se esté expresando (tolerancia en el caso de las vacunas u
otros efectos en el caso de los fármacos).
– Riesgo de contaminación con herbicidas o insecticidas que se utilizan en el cultivo de plantas.

Como consecuencia de la utilización de estos compuestos pueden quedar residuos que pueden ser
perjudiciales para la salud humana y animal en caso de ingestión.
– Riesgo de contaminación con micotoxinas. Son toxinas que se producen como consecuencia del
crecimiento de hongos sobre el material vegetal cosechado, principalmente durante el
almacenamiento. Son sustancias que presentan efectos nocivos sobre la salud animal y humana.
• Técnicos
– El tiempo necesario para la obtención de la primera cosecha de la planta que expresa la proteína
recombinante es mayor que en otros sistemas de expresión como microorganismos o células de
mamíferos. Es necesario preparar los vectores de expresión, transformar, regenerar y cultivar las
plantas, así como evaluar varias generaciones con el fin de asegurar que la expresión de estas
sustancias es estable y que la sustancia de interés es bioquímicamente activa.
– Pueden existir problemas de expresión baja para algunas proteínas.
– Las modificaciones postraduccionales que llevan a cabo las plantas no son exactas a las que
llevan a cabo los mamíferos, siendo las diferencias principalmente en la glicosilación.
– Dificultad para la dosificación en el caso de vacunas comestibles. Cuando la administración de la

molécula es mediante la ingesta de la planta, es necesario conocer con seguridad los niveles de
expresión de la molécula en la planta con el fin de poder ajustar la dosis de manera adecuada.
10
Daniell, H.; Streatfield, S. J.; Wycoff, K. (2001). Medical molecular farming:production of antibodies, biopharmaceuticals
and edible vaccines in plants. Trends in Plant Science, 6, 219-226.
11
12
13
2. Tecnologías para la obtención
de plantas biofactoría
A continuación se explican los sistemas más utilizados para la expresión de proteínas foráneas en plantas,
así como aquellos sistemas que permiten la optimización de la producción de moléculas de interés en
plantas, principalmente encaminados a aumentar el rendimiento de la proteína y a mejorar la autenticidad
estructural.
2.1. Sistemas de expresión animales o microbianas), consiguiendo que la

planta modificada pase a expresar nuevas
de proteínas
proteínas o bien que modifique la expresión de sus
recombinantes13, 14 propias proteínas.
La obtención de plantas para su utilización como En este apartado distinguiremos entre las
biofactorías de moléculas de interés se lleva a modificaciones genéticas estables transmisibles a
cabo mediante el empleo de la tecnología del ADN la descendencia y modificaciones que dan lugar a
recombinante. Esta tecnología permite introducir la expresión transitoria de proteínas
en una planta material genético procedente de recombinantes, que no se transmiten a la
otros organismos (otras especies vegetales, descendencia.
Célula
Vector transformada
Semillas
Regeneración Nueva planta

Planta transformada
transformada
Figura 2. Transformación estable.
13
Mason, H. S.; Warzecha, H.; Mor, T.; Arntzen, C. J. (2002). Edible plant vaccines: applications for prophylactic and
therapeutic molecular medicine. Trends in Molecular Medicine, 8, 324-329.
14
Koprowski, H.; Yusibov, V. (2001). The green revolution: plants as heterologous expression vectors. Vaccine, 19,
2735–2741.
14
Vector
Semillas
Planta no
transformada
Planta
transformada
Figura 3. Expresión transitoria.
2.1.1. Transformación genética La transformación genética estable de plantas

estable de las plantas puede realizarse mediante la introducción del
material genético en el núcleo celular o bien en los
Mediante transformación genética estable se plastos, que son orgánulos característicos de las
obtienen plantas modificadas genéticamente en plantas que poseen material genético que puede
las que el material genético introducido aparece ser transformado.
en todas las células de la planta y se transmite a
la descendencia. Son lo que se denomina Lo más frecuente es realizar la transformación del
“plantas transgénicas”. material nuclear. Mediante distintas técnicas que
se explicarán a continuación es posible introducir
La principal ventaja que presenta este tipo de en el núcleo de la célula el transgén de interés y
transformación es que la modificación se transmite a conseguir que éste se exprese dando lugar a la
la descendencia, tanto por reproducción sexual proteína foránea. A continuación se indican las
(mediante semillas), como por reproducción asexual principales ventajas e inconvenientes de este tipo
(mediante esquejes, micropropagación, etc.). de transformación.
VENTAJAS E INCONVENIENTES DE LA TRANSFORMACIÓN NUCLEAR
Ventajas
• Existen protocolos de transformación y regeneración para muchos vegetales, entre los que se
incluyen muchas especies comestibles.
Inconvenientes
• La inserción del material genético ocurre al azar, existiendo fenómenos que disminuyen la
producción como el efecto de posición o el silenciamiento.
• La acumulación de las proteínas recombinantes en el citoplasma puede tener efectos tóxicos para la
planta o interferir en el desarrollo.
• Es necesario utilizar marcadores para seleccionar las plantas transformadas.
• La modificación genética puede transmitirse a través del polen, lo que da lugar a riesgos de escape.
La transformación de plastos es una técnica relativamente nueva muy interesante en agricultura molecular,
debido a que presenta múltiples ventajas frente a la transformación nuclear, en lo referente a seguridad
ambiental o a los niveles de expresión.
Los plastos son orgánulos subcelulares característicos de las células vegetales, que poseen varias copias de
un cromosoma circular de pequeño tamaño denominado plastoma. Se encuentran en los distintos tejidos y
órganos de las plantas pudiendo presentar distintas morfologías y funciones. Algunos ejemplos de plastos
15
son los cloroplastos de tejidos verdes y hojas, que eficaces. Por este motivo, el interés principal
realizan la fotosíntesis, los cromoplastos de flores se está dirigiendo hacia la transformación
y frutas maduras, los amiloplastos, que aparecen de cloroplastos, aunque el potencial de transformar
en órganos de almacén como tubérculos o los cromoplastos de frutas y verduras presenta ventajas
leucoplastos, que aparecen en raíces15. obvias para la obtención de vacunas de subunidades
comestibles16.
Aunque todos los tipos de plastos presentan
varias copias del plastoma, no todos poseen la Las ventajas e inconvenientes que presenta la
misma capacidad de expresar los genes transformación genética de cloroplastos frente a la
que contienen, siendo los cloroplastos los más transformación nuclear son las siguientes:
VENTAJAS E INCONVENIENTES DE LA TRANSFORMACIÓN

DE CLOROPLASTOS17, 18, 19, 20
Ventajas
• Integración del ADN transformante mediante recombinación homóloga, lo que previene el efecto de
posición.
• Ausencia de efectos epigenéticos como silenciamiento, cosupresión, etc.
• Elevados niveles de expresión debido a que cada cloroplasto presenta un gran número de copias de
su cromosoma, y cada célula presenta un número elevado de cloroplastos. El número copias del
ADN del cloroplasto por célula puede ser hasta 10.000, lo que puede dar como resultado una
acumulación de hasta el 47% de las proteínas totales solubles.
• Las proteínas recombinantes se acumulan en el interior del cloroplasto previniendo problemas de

toxicidad o interferencia en el desarrollo de la planta.
• Permite la expresión de operones policistrónicos, por lo que se pueden introducir varios genes en un
solo evento de transformación bajo el control de un solo promotor. Esto puede ser muy interesante
en la ingeniería metabólica donde en ocasiones es necesario introducir varios genes que codifican
para enzimas distintas de una ruta metabólica y se desea que se sinteticen de manera coordinada.
• Los cloroplastos no se transmiten a través del polen ya que su herencia es materna en la mayor
parte de las plantas, disminuyendo el riesgo de contaminación cruzada debido al aislamiento del
transgén en el cloroplasto.
• Permite eliminar los marcadores que se usan para seleccionar aquellas plantas en las que se ha
introducido el ADN.
Inconvenientes
• Riesgo de transferencia horizontal de los transgenes a bacterias debido a la homología que

presentan el genoma bacteriano y el de los cloroplastos.
• La transformación de cloroplastos sólo se hace de manera rutinaria en tabaco y en el alga

C. reinhardii y aunque se ha logrado transformar cloroplastos en algunas especies comestibles como
zanahoria y tomate, todavía es necesario optimizar el proceso.
• Los cloroplastos no son capaces de llevar a cabo algunas modificaciones postraduccionales como la
glicosilación.
• No se produce la exportación de las proteínas sintetizadas hacia otros orgánulos o compartimentos

celulares.
15
Heifetz, P. B.; Tuttle, A. M. (2001). Protein expression in plastids. Current Opinion in Plant Biology, 4, 157–161.
16
17
Daniell, H.; Khan, M. S.; Alison. L. (2002). Milestones in chloroplast genetic engineering: an environmentally friendly era
in biotechnology. Trends in Plant Science, 7, 84–91.
18
Maliga, P. (2002). Engineering the plastid genome of higher plants. Current Opinion in Plant Biology, 5, 164-172.
19
Heifetz, P. B. (2000). Genetic engineering of the chloroplast. Biochimie, 82, 655-666.
20
Heifetz, P. B.; Tuttle, A. M. (2001). Protein expression in plastids. Current Opinion in Plant Biology, 4, 157–161.
16
Existen algunos ejemplos de productos obtenidos denominado plásmido Ti. El plásmido Ti es una
de plantas de tabaco en las que se han molécula de ADN circular y contiene un grupo de
transformado los cloroplastos y se han conseguido genes denominados vir, que dirigen el proceso de
rendimientos elevados21 como la producción de infección, junto con genes implicados en la
hormona del crecimiento humana (8% de la formación de los nódulos en la planta y genes
proteína soluble total o PST 22), albúmina sérica implicados en la síntesis de aminoácidos
humana (11% PST 23), fragmentos de las toxinas denominados opinas que sirven de nutrientes para
colérica y tetánica (25% PST), y producción de la bacteria. La inserción del T-DNA en la planta
una xilanasa termoestable (6% PST)24. provoca la formación de nódulos y la síntesis de
las opinas.
La transformación de cloroplastos ha tomado un
gran impulso en los dos últimos años. En 2002 se Mediante manipulación genética del plásmido Ti,
constituyó una empresa llamada Chlorogen es posible eliminar los genes implicados en la
dedicada a la obtención plantas transplastómicas formación de nódulos y de opinas y sustituirlos
mediante bombardeo con microproyectiles, para el por los genes que deseamos que exprese la
desarrollo de fármacos y otros productos. planta. Junto con los genes de interés es
necesario introducir marcadores que permitirán
A continuación se explican los sistemas de seleccionar aquellas células que hayan sido
transformación estable más utilizados, entre los infectadas y hayan integrado este material
que se encuentran la transformación con genético.
Agrobacterium, microinyección, bombardeo con
microproyectiles o transformación de protoplastos. Con estas bacterias recombinantes se pueden
Algunos de estos métodos permiten realizar transformar células, tejidos e incluso órganos de
transformación nuclear y de cloroplastos. plantas completas. Posteriormente se seleccionan
aquellas células que han sido transformadas y a
partir de ellas se regeneran plantas completas que
2.1.1.1. Transformación mediada presentarán la modificación en todas sus células.
por Agrobacterium 25 La regeneración de plantas es, en algunos casos,
un proceso dificultoso que necesita un tiempo
En la transformación mediada por Agrobacterium relativamente largo, respecto del cultivo de
se utiliza este microorganismo como vector para microorganismos o células animales, lo cual
introducir el material genético recombinante en la encarece el producto final. Por otra parte, existen
planta que se desea transformar. fenómenos de variación somaclonal asociados
al cultivo in vitro de células vegetales, que deben
Agrobacterium es una bacteria del suelo patógena ser tenidos en consideración, puesto que pueden
para plantas dicotiledóneas y algunas coníferas, afectar a la producción final.
capaz de inducir en estas plantas la formación de
nódulos y agallas que pueden producir incluso la Otro de los inconvenientes que plantea este
muerte de la planta. El mecanismo de infección de sistema es que muchas monocotiledóneas se han
Agrobacterium consiste en la inserción en la mostrado tradicionalmente como resistentes a la
planta de una parte de su material genético, infección por Agrobacterium. Las
conocido como T-DNA, y contenido a su vez en el monocotiledóneas incluyen familias tan
21
22
Staub, J. M.; Garcia, B.; Graves J.; Hajdukiewicz, P.; Hunter, P.; Nehra, N.; Paradkar, V.; Schlittler, M.; Carroll, J. A.;
Spatola, L.; Ward, D.; Ye, G.; Russell, D. A. (2000). High-yield production of a human therapeutic protein in tobacco
chloroplasts. Nature Biotechnology, 18, 333-338.
23
Fernández-San Millán, A.; Mingo-Castel, A.; Miller, M.; Daniell, H. (2003). A chloroplast transgenic approach to hyper-
express and purify Human Serum Albumin, a protein highly susceptible to proteolytic degradation. Plant Biotechnology
Journal, 1, 71-79.
24
25
Staub, J. M.; Garcia, B.; Graves J.; Hajdukiewicz, P.; Hunter, P.; Nehra, N.; Paradkar, V.; Schlittler, M.; Carroll, J. A.;
Spatola, L.; Ward, D.; Ye, G.; Russell, D. A. (2000). High-yield production of a human therapeutic protein in tobacco
chloroplasts. Nature Biotechnology, 18, 333-338.
17
importantes como las gramíneas, por lo que ha La inserción del material genético es aleatoria y
sido necesario desarrollar otros sistemas de puede ocurrir en varios sitios dentro de una
transformación. No obstante se ha conseguido misma célula, pudiendo originar problemas de
transformar mediante este método algunas silenciamiento o efectos posicionales. Por ello, es
monocotiledóneas muy importantes como maíz, importante seleccionar posteriormente plantas con
trigo y arroz. elevados niveles de expresión.
Construcción del plásmido Ti

con el gen interés
Integración del ADN

exógeno en el núcleo
Agrobacterium Infección de la célula vegetal con

Agrobacterium modificado
Figura 4. Transformación mediante Agrobacterium.
2.1.1.2. Transformación biolística26
La transformación biolística consiste en el bombardeo del tejido que se desea transformar con partículas
micrométricas o submicrométricas de oro o tungsteno recubiertas con el material genético que se desea
insertar en la planta. Estas partículas penetran a través de la pared celular y la membrana plasmática
llegando a zonas profundas de las células donde ocurre la inserción. Permite realizar la transformación del
material genético del núcleo o del sistema plastidial (de hecho, es la técnica más utilizada para la
transformación de cloroplastos y se ha probado su éxito con varias especies). Como en el caso de la
transformación con Agrobacterium, se introducen los genes con un marcador y se seleccionan aquellas
células en las que se ha insertado el material correctamente y a partir de ellas se regeneran plantas
completas que presentarán la modificación en todas sus células.
Normalmente este método implica la integración de un número de copias elevado, lo que potencia la
expresión, aunque es necesario controlar el número de copias que se inserta, ya que un nivel de expresión
muy elevado puede causar fenómenos de silenciamiento que llevan a una baja expresión. Por este motivo,
se suelen seleccionar aquellas líneas que llevan entre una y tres copias del transgén, siempre y cuando
estén en tándem.
26
Lessard, P. A.; Kulaveerasingam, H.; York, G.M.; Strong, A.; Sinskey, A. J. (2002). Manipulating Gene Expression for the
Metabolic Engineering of Plants. Metabolic Engineering, 4, 67-79.
18
Es el método de elección para la transformación de cereales como arroz, trigo y maíz, y para leguminosas
como la soja.
Percutor
Pólvora
Proyectil
Bolas de ADN
Se carga el proyectil
con los fragmentos
de ADN de interés
Célula vegetal
Los fragmentos de ADN
Inserción del ADN en el
traspasan las paredes y
cloroplasto o núcleo
membranas celulares
Figura 5. Transformación biolística.
2.1.1.3. Microinyección La incorporación del ADN puede facilitarse

mediante distintos tratamientos que alteran la
La técnica de microinyección implica la inyección permeablidad de la membrana. Entre estos
directa del material genético mediante tratamientos se incluyen la aplicación de pulsos
microcapilares o microjeringas bajo control eléctricos de elevado voltaje que inducen la
microscópico en la célula. Resulta poco efectiva formación de poros reversibles en la membrana
porque es necesario inyectar las células una a una del protoplasto (electroporación), o tratamientos
y es necesario inyectar al menos 10.000 células con agentes químicos que desestabilizan la
para tener la seguridad de que al menos una de membrana celular como el polietilenglicol (PEG).
ellas ha incorporado el material genético.
En los protoplastos los plastos se sitúan cerca de
Entre las ventajas principales de este sistema se la membrana celular, por lo que se puede
encuentra la posibilidad de introducir el material conseguir una permeabilización simultánea de la
genético en orgánulos distintos del núcleo como membrana celular y de la doble membrana de los
los plastos. plastos que permita la introducción del material
genético en estos orgánulos.
2.1.1.4. Transformación La obtención de protoplastos con capacidad

de protoplastos27 regenerativa puede hacerse a partir de distintos
tejidos de la planta, aunque en el caso de cereales
Los protoplastos son células de cualquier tejido sólo ha sido posible obtenerlos a partir de tejidos
vegetal a las que se elimina la pared celular inmaduros.
mediante procesos químicos o enzimáticos, que en
suspensión son capaces de incorporar de manera La principal desventaja de este sistema es la
natural fragmentos de ADN que se encuentren en dificultad de regenerar plantas a partir de
el medio. protoplastos.
27
Lessard, P. A.; Kulaveerasingam, H.; York, G. M.; Strong, A.; Sinskey, A. J. (2002). Manipulating gene expression for the
metabolic engineering of plants. Metabolic Engineering, 4, 67-79.
19
En algunos cereales como el maíz, se ha descrito una alternativa a la electroporación de protoplastos, que
consiste en la electroporación de tejidos. Este tipo de electroporación presenta la ventaja de que la
regeneración de plantas a partir de estos tejidos es más sencilla que a partir de protoplastos.28
COMPARACIÓN DE LOS DISTINTOS SISTEMAS DE TRANSFORMACIÓN ESTABLE
Ventajas Inconvenientes
Transformación
Agrobacterium
– Requiere regeneración mediante cultivo de tejidos.

mediada por
– Efectiva.
– Las plantas monocotiledóneas generalmente son reticentes
– Barata. a esta transformación.
– Simple. – La integración del transgén se produce al azar pudiendo
– Número de copias bajo. dar lugar a efectos de posición, silenciamiento de genes,
etc.
– Requiere regeneración mediante cultivo de tejidos.

– Riesgo de silenciamiento y/o inestabilidad de genes.
– Riesgo de pérdida de material genético en el disparo o
– Eficiencia alta.
preparación de las partículas.
Biolístico
– Simple.
– Riesgo de modificación del ADN por ataque químico del
– Permite transformar tungsteno.
monocotiledóneas.
– Riesgo de inserción doble en plastos y núcleo.
– Permite transformación
– Requiere equipos costosos.
plastidial.
– En ocasiones puede conducir a una expresión transitoria
difícil de superar.
– Integración del transgén al azar.
– Puede optimizarse la
cantidad de ADN que se
Microinyección
introduce.
– Requiere personal muy especializado.
– Permite la elección de la
– Requiere instrumental.
célula a transformar.
– Sólo una célula es transformada.
– Descarga precisa y
predecible. – Integración del transgén al azar.
– Pueden transformarse
plastos.
Protoplastos
– Permite transformación – Requiere regeneración.

plastidial.
– Sólo existen protocolos de regeneración para
– Equipos relativamente determinadas especies.
sencillos comparado con
biolísticos. – Integración del transgén al azar.
Tabla 1. Ventajas e inconvenientes de los distintos sistemas de transformación estable.
28
Alexander, P. Sorokin; Xia-Yi, Ke; Dong-Fang Chen and Malcolm C. Elliott (2000). Production of fertile transgenic wheat
plants via tissue electroporation. Plant Science, 156, 227-233.
20
2.1.2. Expresión transitoria La expresión transitoria de genes generalmente se

utiliza para evaluar la funcionalidad de las
La expresión transitoria de genes en plantas construcciones que se usan para transformar plantas
implica la expresión de proteínas recombinantes de manera estable, y para evaluar la calidad del
sin necesidad de transformación del material producto que se obtiene29. Sin embargo, debido a los
genético de la planta. El ADN recombinante no se inconvenientes que presenta la transformación
inserta en el genoma o plastoma de la planta, sino nuclear estable, principalmente en cuanto a tiempo,
que mediante distintos métodos se consigue la expresión transitoria ha ido tomando mayor
producir grandes cantidades de ARN mensajero, importancia para su utilización como sistema de
que se traduce a proteínas en el citoplasma de producción de proteínas recombinantes30. Puede
parte de las células de la planta. Una vez que el llevarse a cabo mediante la utilización de vectores
ARN mensajero es traducido a proteínas la planta virales o mediante agroinfiltración.
lo degrada, de modo que no se transmite a la
descendencia. Normalmente la expresión También es posible la expresión transitoria en
transitoria no da rendimientos muy elevados y plastos, como los sistemas in organello de
requiere un procesado rápido del tejido vegetal introducción de ADN en plastos aislados y
para evitar la degradación de la proteína métodos in vivo utilizando tecnologías de
recombinante. bombardeo de microproyectiles o microinyección.
VENTAJAS DE LA EXPRESIÓN TRANSITORIA
• Expresión rápida y flexible.

• No está influida por efectos de posición.
• Puede inducirse en plantas adultas, previniendo cualquier efecto negativo que la proteína
recombinante pudiese tener en el desarrollo de la planta.
• No es una modificación genética permanente, lo que desde el punto de vista de la seguridad es una
ventaja.
• Ideal para obtener pequeñas cantidades de proteínas “a medida” en pocas semanas31.
29
30
Current Opinion in Plant Biology, 7, 152–158..
31
Horn, M. E.; Woodard, S. L.; Howard, J. A. (2004). Plant molecular farming: systems and products. Plant Cell Report, 22,
711-720.
21
2.1.2.1. Agroinfiltración32, 33 2.1.2.2. Vectores Virales 35
Consiste en la infiltración mediante vacío de cepas La expresión transitoria de proteínas mediante

de Agrobacterium tumefaciens recombinante que vectores virales consiste en la inoculación de la
contengan los genes que se desean expresar en la planta con virus recombinantes, que contienen las
planta. Como en el caso de la transformación secuencias que se desean expresar en la planta
estable mediada por Agrobacterium, las proteínas bajo el control de promotores fuertes.
de la bacteria facilitan la transferencia de los
genes de interés a algunas de las células de la Los virus infectan la planta y utilizan su
hoja. El transgén se introduce en el núcleo celular, maquinaria de síntesis proteica para expresar la
pero no se integra en el material genético de la
secuencia que se ha introducido, dando como
planta.
resultado la acumulación de la proteína
En este caso, no es necesario incluir marcadores recombinante36. La secuencia que se desea
para seleccionar las células transformadas, ya que expresar, por tanto, nunca se integra en el
no es preciso regenerar una planta, lo que permite genoma de la planta y se expresa sólo en la planta
utilizar plásmidos de menor tamaño. La utilización infectada, sin que se transmita a la descendencia
de plásmidos permite introducir construcciones de por polen o semillas. Puede elegirse el momento
mayor tamaño que utilizando vectores virales. del desarrollo en el que se desea infectar la planta
con el fin de evitar posibles problemas que podría
Un inconveniente de la agroinfiltración es que
causar en el desarrollo la acumulación de la
permite producir elevados niveles de proteína
proteína recombinante.
recombinante pero durante períodos de tiempo muy
cortos, que generalmente son insuficientes para la
producción a escala comercial. Este hecho se debe a Pueden usarse distintos tipos de virus vegetales
que se producen fenómenos de silenciamiento para la construcción de los vectores, aunque lo
postranscripcional. Existen datos que indican que el más frecuente es utilizar virus de cadena sencilla
silenciamiento postranscripcional puede reducirse de ARN, como el virus del mosaico del tabaco, de
mediante la coexpresión junto con la proteína la alfalfa y del caupí, el virus X de la patata, el
recombinante de proteínas virales supresoras de virus del enanismo ramificado del tomate y el
éste, como es el caso de la proteína p19 del virus del potyvirus de la viruela del ciruelo. Las ventajas
enanismo ramificado del tomate, que se ha que presentan los virus para ser utilizados como
demostrado que es efectiva en Nicotiana sistemas de expresión se indican en la página
benthamiana y en Arabidopsis34. siguiente.
32
33
Fischer, R.; Vaquero-Martin, C.; Sack, M.; Drossard, J.; Emans, N.; Commandeur, U. (1999). Towards molecular farming
in the future: transient protein expression in plants. Biotechnology and Applied Biochemistry, 30, 113-116.
34
Voinnet, O.; Rivas, S.; Mestre. P.; Baulcombe. D. (2003). An enhanced transient expression system in plants based on
suppression of gene silencing by the p19 protein of tomato bushy stunt virus. The Plant Journal, 33,949-956.
35
Fischer, R.; Vaquero-Martin, C.; Sack, M.; Drossard, J.; Emans, N.; Commandeur, U. (1999). Towards molecular farming
in the future: transient protein expression in plants. Biotechnology and Applied Biochemistry, 30, 113-116.
36
Sala, F.; Rigano, M. M.; Barbante, A.; Basso, B.; Walmsley, A. M.; Castiglione, S. (2003). Vaccine antigen production in
transgenic plants: strategies, gene constructs and perspectives. Vaccine, 21, 803-808.
22
VENTAJAS E INCONVENIENTES DE LA EXPRESIÓN MEDIANTE VECTORES VIRALES
Ventajas
• Presentan genomas pequeños fácilmente manipulables.
• Poseen un elevado nivel de multiplicación que permite altos rendimientos.
• Algunos tienen un rango de hospedadores elevado, lo que permite usar un mismo vector con
distintas especies.
• Puede realizarse una infección simultánea con varios vectores, consiguiendo la producción de
distintas proteínas en una misma planta.
• Al ser virus vegetales, no existe riesgo de infección a animales o personas.
Inconvenientes
• Es necesario inocular cada generación de plantas.
• Algunas construcciones son inestables, existiendo el riesgo de que se pierdan los transgenes de un
tamaño superior a 1 kb.
Introducción
del vector
en el virus
Virus transformado
Se pone en contacto
el virus modificado
con la planta
Planta infectada
con un virus
transformado
genéticamente
Figura 6. Expresión transitoria de proteínas mediante vectores virales.
23
2.2. Estrategias tecnológicas para optimizar la obtención
de proteínas recombinantes en plantas
Como se ha indicado, uno de los factores críticos en la agricultura molecular es la obtención de una cantidad
de proteína suficientemente elevada37 y, en algunos casos, además es necesario que la proteína que se
obtiene sea estructuralmente idéntica a la proteína nativa.
Síntesis
Purificación
mani
Hu
Proteína recombinante za i
(vacuna comestible) ón
c Producto final
Autenticidad estructural
Degradación
A continuación se indican las estrategias que se Además de obtener un rendimiento elevado de la

han desarrollado que permiten aumentar el producción, en el caso de proteínas que serán
rendimiento de la producción de proteínas en utilizadas en forma pura, es necesario optimizar la
plantas y asegurar la autenticidad estructural. purificación del producto final. A continuación se
explicarán de manera detallada las principales
estrategias desarrolladas encaminadas a aumentar
la síntesis de la proteína recombinante, reducir su
2.2.1. Aumento del rendimiento
degradación y optimizar su purificación.
de producción
Para conseguir que el rendimiento final de la 2.2.1.1. Aumento de la síntesis

proteína recombinante sea elevado es necesario
optimizar todos los pasos implicados en su Para obtener una elevada producción de la
síntesis, así como asegurar su estabilidad una vez proteína recombinante, en primer lugar es
sintetizada protegiéndola de la degradación. Las necesario que la expresión de los genes
estrategias para conseguir una síntesis proteica introducidos sea elevada.
elevada se centran principalmente en optimizar la
expresión génica mediante un diseño cuidadoso El material genético que se introduce en la planta
del transgén que se va a introducir. En cuanto a la incluye el gen o genes que codifican para la
protección contra la degradación, la principal proteína de interés junto con secuencias
estrategia consiste en el direccionamiento de las reguladoras que permiten que estos genes se
proteínas hacia compartimentos celulares en los expresen correctamente y den lugar a la proteína.
que se encuentren protegidas de la degradación. Para optimizar la expresión del gen introducido es
37
24
necesario elegir de manera adecuada estas proteína en aproximadamente 24 horas. La

secuencias. Las principales secuencias reguladoras empresa CropTech Corp. desarrolló un
de la expresión son secuencias promotoras, sistema de producción utilizando este
secuencias terminadoras, y otras secuencias no promotor, que denominaron MeGa (mechanical
traducidas como secuencias líder e intrones38. gene activation) para la producción de
glucocerebrosidasa en tabaco40, 41.
39
• Secuencias promotoras . Son secuencias que
regulan la transcripción del ADN a ARN. En cuanto a los promotores inducibles
Permiten controlar en qué momento y lugar y químicamente existen varios tipos, pero no
bajo qué condiciones se expresa el gen todos pueden utilizarse en cultivo de campo.
introducido. Se pueden diferenciar varios tipos Las características que debe tener este tipo
de promotores: de promotores son: niveles basales de
expresión bajos, un tiempo de respuesta
– Promotores constitutivos. Son aquellos que rápido, elevada expresión una vez que se
hacen que el gen se transcriba en todos los activan y que el compuesto inductor no sea
tejidos y en todo momento, sin necesidad de tóxico. En la tabla 2 se indican algunos de
estímulos. Se utilizan cuando se desea que la estos promotores42.
planta produzca la proteína recombinante en
todos sus tejidos. – Promotores específicos de tejido o de órgano.
Se trata de promotores que dirigen la
– Promotores (regulados) inducibles. Son expresión del gen a determinados tejidos u
aquellos promotores que se activan bajo órganos. Se han identificado promotores
determinados estímulos, que pueden ser específicos de órganos como hojas, tubérculos,
químicos o físicos. En este tipo de promotores frutos o semillas. Cada tipo de promotor
se incluyen promotores regulados por factores presenta distintas ventajas y la elección del
ambientales o por condiciones fisiológicas de mismo dependerá del tipo de producto que se
la planta, que se activan sólo en determinados desee obtener, así como de la plataforma de
momentos del desarrollo. Son especialmente producción. Así por ejemplo, pueden utilizarse
útiles para la producción de proteínas promotores que se expresen en órganos que
recombinantes cuya acumulación en la planta se forman antes de la floración como hojas y
tiene efectos desfavorables sobre el tubérculos, previniendo la aparición en el
crecimiento, o para prevenir escapes. polen. O bien promotores específicos de
tejidos en los que la acumulación de proteínas
Un ejemplo de promotor inducible por sea elevada, ya que estos órganos presentan
estímulos físicos es el promotor de la enzima un ambiente protector frente a la degradación,
hidroxil-3-metilglutaril CoA reductasa 2 como es el caso de las semillas. La expresión
(HMGR2) de tomate. Esta enzima se activa en órganos comestibles presenta ventajas para
cuando en la planta se produce un daño la expresión de moléculas dirigidas a una
mecánico produciéndose la síntesis de la administración por vía oral43, 44.
38
Sala, F.; Rigano, M. M.; Barbante, A.; Basso, B.; Walmsley, A. M.; Castiglione, S.(2003). Vaccine antigen production in
39
40
Ma, J. K.; Drake, P.M.; Christou, P. (2003). The Production of Recombinant Pharmaceultical Proteins in Plants. Nature, 4,
794-805.
41
42
Voinnet, O.; Rivas, S.; Mestre, P.; Baulcombe, D. (2003). An enhanced transient expression system in plants based on
suppression of gene silencing by the p19 protein of tomato bushy stunt virus. The Plant Journal, 33, 949-956.
43
44
25
PROMOTORES UTILIZADOS EN AGRICULTURA MOLECULAR
Promotores constitutivos
Nombre Origen
35 S Virus del Mosaico de la Coliflor (CaMV)
Ubiquitina-1 Vegetal
Actina Vegetal
Promotores inducibles
Nombre Inductor Probado en
GVHvEcR Tebufenozida Tabaco
GVCfEcR Metoxifenozida Maíz y tabaco
AlcR Etanol Arabidopsis, tabaco y patata
ADEI Cobre Arabidopsis y tabaco
PR-1a Benzotiadiazol Tabaco
In2-2 Agroquímicos Arabidopsis
MeGa Daño mecánico Tabaco
Promotores específicos de tejido
Tejido Nombre
β-conglicinina
Opaque-2
AmA27
OsGT1
Lox de guisante
Psl de guisante
NapA de colza
Bn-III de colza
Semillas
Arc5-I de judía
Phas de judía
α-bcsp de soja
P-Lh de Lesquerella
Amy1A de arroz
GluB-1 de arroz
Z4 de maíz
Tapuro-b de trigo
Fruto 2A11 de tomate
Patatin
Tubérculos
StMPI
Hojas Lhcb3 de Arabidopsis
Polen Lat52
Tabla 2. Ejemplos de promotores utilizados en agricultura molecular45, 46.
45
46
26
• Secuencias terminadoras de la transcripción. • Eliminación del silenciamiento. El

Son secuencias que influyen en la estabilidad del silenciamiento es un conjunto de fenómenos
mRNA. Las secuencias terminadoras más epigenéticos que pueden inhibir la expresión de
utilizadas son las señales de poliadenilación los transgenes tanto a nivel transcripcional como
derivadas del gen de la nopalina sintasa de postranscripcional. Es muy importante tenerlo en
Agrobacterium tumefaciens y del gen ssu del cuenta a la hora de diseñar una planta
guisante47. Existen estudios que señalan otros transgénica, ya que puede dar lugar a la
terminadores que podrían ser más efectivos, al ausencia de expresión de la proteína
menos en dicotiledóneas, como las regiones no recombinante.
codificadoras en 3´ del gen Me1 y del gen H3 de
la histona de trigo48. El silenciamiento transcripcional se relaciona con
la inserción del transgén cerca de zonas de
• Otras secuencias. En este tipo de secuencias cromatina inactiva. La transformación de
se incluyen intrones y secuencias líder en 5’. cloroplastos es la principal estrategia para
eliminar este tipo de silenciamiento, ya que la
Los intrones son secuencias de ADN que son inserción del transgén no se produce al azar,
transcritas a ARN y que posteriormente se sino que ocurre por recombinación homóloga en
eliminan durante el proceso de maduración, de lugares determinados51.
modo que no se traducen a proteínas. No se
conoce bien el mecanismo por el que producen El silenciamiento postranscripcional en plantas
el aumento de la expresión, pero distintos parece estar relacionado con mecanismos de
estudios señalan que influyen tanto el tipo de defensa frente a virus vegetales, mediante la
intrón del que se trate, como su posición, siendo degradación del material genético de los
los más adecuados los que se encuentran en la mismos. Existen investigaciones que señalan la
región 5’ codificante. Algunos ejemplos de existencia de determinados virus que expresan
intrones que se han utilizado para aumentar la proteínas virales supresoras del silenciamiento
expresión son el intrón 1 del gen de la actina de como es el caso de la proteína p19 del virus del
arroz, el intrón 1 del gen de la ubiquitina de enanismo ramificado del tomate. Se ha
maíz, el intrón 1 del gen de la sacarosa sintasa demostrado que la coexpresión de la proteína
de maíz y el intrón 1 del gen de la alcohol recombinante de interés junto con esta proteína
deshidrogenasa de maíz49. supresora, es efectiva para reducir el
silenciamiento postranscripcional en Nicotiana
Entre las secuencias líder en 5’ no traducidas benthamiana y en Arabidopsis52.
que aumentan la expresión se encuentra la
secuencia líder en 5’ derivada del virus del Se ha descrito otro tipo de secuencias
mosaico del tabaco, denominada secuencia denominadas MARS (matrix attachment regions)
omega50. que facilitan la unión a la matriz nuclear. La
47
Ma, J. K.; Drake, P. M.; Christou, P. (2003). The Production of Recombinant Pharmaceultical Proteins in Plants. Nature, 4,
794-805.
48
49
50
Fischer, R.; Twyman, R. M.; Schillberg, S. (2003). Production of antibodies in plants and their use for global health.
Vaccine, 21, 820–825.
51
52
Voinnet, O.; Rivas, S.; Mestre. P.; Baulcombe. D. (2003). An enhanced transient expression system in plants based on
suppression of gene silencing by the p19 protein of tomato bushy stunt virus. The Plant Journal, 33,949-956.
27
inclusión de estas secuencias en los extremos del compartimentos celulares u orgánulos en los que
trasgén no sólo parece aumentar la expresión del ésta se encuentre protegida. El direccionamiento
gen, sino que además reduce los fenómenos de de proteínas se lleva a cabo mediante secuencias
silenciamiento. denominadas péptido señal que se encuentran en
la proteína y contienen información sobre el lugar
hacia el que debe dirigir55. Los compartimentos
2.2.1.2. Protección contra la degradación.
celulares que presentan un ambiente favorable
Aumento de la estabilidad53, 54
para el almacenamiento de proteínas hacia los que
se puede realizar un direccionamiento de las
El rendimiento total se refiere a la proteína
mismas son retículo endoplásmico (RE), vacuolas
almacenada en los tejidos de la planta, por lo que
y cloroplastos.
además de conseguir una elevada síntesis de la
proteína recombinante, es necesario lograr que
permanezca estable y evitar que sea degradada Existe otra estrategia para proteger a las proteínas
por los sistemas proteolíticos que posee la célula de la degradación que es la acumulación en
para eliminar las proteínas foráneas. semillas. Las semillas son órganos de la planta
que presentan un alto contenido en proteínas y un
La síntesis de las proteínas nativas de la planta se ambiente protector contra la degradación de las
produce en el citosol de la célula, donde pueden mismas debido a su bajo contenido en humedad.
ser liberadas o bien dirigirse hacia otros La acumulación en este órgano puede realizarse,
compartimentos celulares. Uno de los principales tal y como se ha indicado en el apartado dedicado
sistemas que permiten proteger a las proteínas de a los promotores, mediante el uso de promotores
la degradación es el direccionamiento hacia específicos de semillas.
DIRECCIONAMIENTO DE PROTEÍNAS HACIA COMPARTIMENTOS CELULARES
Retículo endoplásmico (RE)
Es un compartimento celular que presenta un ambiente favorable para la acumulación de proteínas

debido a la baja cantidad de proteasas que contiene, así como a su ambiente oxidante. El
direccionamiento de proteínas hacia este orgánulo permite una acumulación de varios órdenes de
magnitud mayor que la acumulación en el citoplasma. Presenta otras ventajas relacionadas con la
conformación y maduración de la proteína, que se explicarán más adelante.
Para realizar el direccionamiento hacia el RE es necesario adicionar en el extremo amino terminal de

la proteína péptidos señal. Una vez en el RE, en caso de que no existan más señales, la proteína
pasará al aparato de Golgi y de aquí al espacio que existe entre la membrana plasmática y la pared
celular (apoplasto), desde donde las proteínas de menor tamaño serán secretadas y las de mayor
tamaño quedarán retenidas.
Para conseguir que las proteínas queden retenidas en el RE se adiciona un péptido denominado H/KDEL en
el extremo carboxilo terminal, consiguiendo que las proteínas que han pasado al aparato de Golgi regresen
al RE. Este péptido es la señal que llevan las proteínas residentes en el RE y su adición a las proteínas evita
que se produzcan las modificaciones que ocurren en el aparato de Golgi56, 57.
(continúa en página siguiente)
53
54
794-805.
55
56
57
28
DIRECCIONAMIENTO DE PROTEÍNAS HACIA COMPARTIMENTOS CELULARES (continuación)
Vacuolas
Las células vegetales poseen distintos tipos de vacuolas con diferentes funciones, entre las que se
incluyen vacuolas de acumulación de proteínas. La acumulación de proteínas en estas vacuolas se
produce mediante secuencias específicas denominadas determinantes de direccionamiento vacuolar
C-terminal (ct-VSD en sus siglas en inglés), que dirigen a las proteínas procedentes del RE o del
aparato de Golgi hacia la vacuola. Se han identificado secuencias ct-VSD en pro-regiones de proteínas
de almacenamiento como en la lectina de la cebada y la albúmina 2S de la nuez de brasil, y en
proteínas relacionadas con patogénesis como la osmotina, chitinasa y β-1,3-glucanasa.
A pesar de la identificación de estas secuencias, los datos sobre el direccionamiento de proteínas

recombinantes a este tipo de vacuolas parecen insuficientes para el desarrollo de un sistema de
acumulación de proteínas en elevada concentración en estos orgánulos58, 59.
Cloroplastos
En el apartado dedicado a las tecnologías de transformación se han explicado en detalle las

tecnologías que permiten la expresión de proteínas en cloroplastos mediante la inserción del material
genético que codifica para las mismas en el material genético del cloroplasto. Otra alternativa que
permite acumular proteínas en este orgánulo es el direccionamiento de proteínas sintetizadas en el
citosol hacia el cloroplasto, mediante la adición en el extremo amino terminal de la secuencia de los
23 primeros aminoácidos de la subunidad pequeña de la proteína rubisco de guisante60.
2.2.1.3. Aumento del rendimiento coste de su extracción y purificación es muy

de la purificación elevado, pudiendo llegar a ser el 95% del coste de
producción, principalmente en proteínas en las
Puede ocurrir que el producto de interés que se que se requiere un grado de pureza alto. El grado
produce en una planta pueda utilizarse sin de pureza dependerá del tipo de uso que tendrá la
purificar, como sería el caso de la expresión proteína recombinante. En el caso de productos de
productos de administración en tejidos uso terapéutico que se administrarán por vía
comestibles. No obstante, lo más frecuente es que parenteral se necesita un grado de pureza muy
el producto deba ser extraído y purificado. elevado y se deben cumplir las indicaciones de la
agencia de control correspondiente (FDA,
La extracción del producto de interés incluye una EMEA, etc.). En los productos para uso industrial
serie de etapas comunes en la extracción de la como enzimas, por ejemplo, generalmente no se
proteína que son el pre-procesamiento del requiere un grado de pureza tan alto.
material mediante molienda o troceado, la
extracción de las proteínas y una posterior Un elevado contenido de proteína facilita la
purificación61. purificación, pero como se ha indicado, no siempre
es posible conseguirlo, de modo que es necesario
La etapa de purificación de las proteínas el desarrollo de métodos de purificación que
recombinantes es una etapa clave, debido a que el permitan recuperar gran parte de la proteína a
58
Yoshida, K.; Matsui, T.; Shinmyo, A. (2004). The plant vesicular transport engineering for production of useful
recombinant proteins. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 28, 167-171.
59
Jiang, L.; Sun, S-M. (2002). Membrane anchors for vacuolar targeting: application in plant bioreactors. Trends in
Biotechnology, 20, 99-102.
60
61
Nikolov, Z. L.; Woodard, S. L. (2004). Downstream processing of recombinant proteins from transgenic feedstock.
Current Opinion in Biotechnology, 15, 479-486.
29
costes económicos. A continuación se indican lipídicos del grano, pasando a formar parte de
algunas de las estrategias: esta estructura. Posteriormente las semillas se
molturan y mediante centrifugación se separa
• Proteínas de fusión. Consiste en fusionar la la fracción lipídica en la que está incluida la
proteína de interés a una proteína que presenta proteína de fusión.
afinidad por distintos componentes celulares.
A continuación se indican algunos ejemplos: La purificación de la proteína recombinante se
realiza finalmente mediante tratamiento con
– Proteínas de fusión con oleosinas. Las una endoproteasa que rompe la proteína de
oleosinas son proteínas lipofílicas que se fusión, quedando la proteína recombinante
expresan en semillas oleaginosas y forman libre y la oleosina unida a los cuerpos lipídicos,
parte de estructuras denominadas cuerpos que se separan de nuevo por centrifugación.
lipídicos, en los que se almacenan aceites. La La proteína de fusión permanece estable en
fusión se realiza mediante ingeniería genética las semillas desecadas durante largos períodos
añadiendo al gen de la proteína de interés el de tiempo y en los cuerpos lipídicos durante
gen de la oleosina, y se combina con una 3 ó 4 semanas de media62. Es un método
expresión dirigida en el grano, donde la patentado por la empresa SemBioSys
concentración de aceite es mayor. Genetics Inc.; que se ha utilizado para la
producción de hirudina, proteína
La presencia de la oleosina hace que la anticoagulante producida por las glándulas
proteína de fusión se dirija hacia los cuerpos salivares de la sanguijuela.
Secuencia genética Secuencia genética

de la oleosina de la proteína
de interés
Material
genético Célula modificada
de la planta genéticamente
Proteína de
interés
Oleosina
Cártamo
Cártamo modificado
genéticamente Cuerpo lipídico
Semillas
Adición de
la proteasa
Fracción lipídica
Fracción proteica
Molturación
de las semillas
Centrifugación
Figura 7. Proteínas de fusión con oleosinas.
62
Van Rooijen, G. J.; Moloney, M. M. (1995). Plant seed oil-bodies as carriers for foreign proteins. Biotechnology, 13, 72-77.
30
– Fusión de oleosinas con la proteína A para distintos y no exista contacto entre ambas
purificación de anticuerpos. Esta tecnología es durante el crecimiento de la planta. Una vez que
una adaptación de la fusión con oleosinas para se muele el grano y las proteínas entran en
la purificación de anticuerpos producidos en contacto, se forman complejos entre el
cártamo. En la planta se producen dos proteínas anticuerpo y la proteína A que está anclada a los
recombinantes que son el anticuerpo de interés cuerpos lipídicos a través de la oleosina. Al igual
y una proteína de fusión compuesta por una que sucede con la hirudina, se separa la fase
oleosina fusionada a la proteína A, que es una lipídica y, en este caso, mediante tratamiento
proteína con gran afinidad por los anticuerpos. con ácido se produce la disociación de los
La producción de las proteínas se dirige para complejos formados por el anticuerpo y la
que se sinteticen en compartimentos celulares proteína A unida a la oleosina.
Secuencia genética Secuencia genética

de la oleosina de la Proteína A
Célula modificada
genéticamente
Material
genético
de la planta Anticuerpo
Retículo endoplásmico
Cártamo
Proteína A
Oleosina
Cártamo modificado Cuerpo lipídico

genéticamente
Semillas
Complejos Anticuerpo
y Proteína A-Oleosina Anticuerpos libres
Acidificación
y lavados
Molturación
de las semillas
Anticuerpo
Proteína A
Oleosina
Figura 8. Fusión de oleosinas con la proteína A.
31
– Fusión de la proteína recombinante a 2.2.2. Autenticidad estructural 66
dominios de membrana. Los dominios de
membrana permiten anclar la proteína de Existen proteínas relativamente simples como es
fusión a la membrana plasmática, que se
el caso de la insulina, el interferón o la hormona
puede aislar de una manera sencilla. Una vez
de crecimiento humano que no requieren un
aisladas las membranas en las que se
procesamiento postraduccional o plegamientos
encuentra la proteína de fusión, ésta se extrae
para tener actividad biológica, pero en la mayor
mediante el uso de detergentes y disoluciones
parte de los casos este tipo de modificaciones son
reguladoras. Además, el anclaje de las
necesarias para que la proteína sea activa. Las
proteínas a la membrana las protege de la
plantas son capaces de realizar algunas de estas
degradación. Existen distintos dominios con
modificaciones postraduccionales, siendo ésta una
estas funciones como el dominio de membrana
de sus principales ventajas frente a otros sistemas
del receptor de la célula T humana63, o los
de expresión como bacterias y levaduras.
motivos dilisina o diarginina64.
Los anticuerpos son un ejemplo de proteínas

• Direccionamiento a la vía secretora. Existen
formadas por varias cadenas que deben plegarse y
dos estrategias descritas recientemente que son
ensamblarse con el fin de que la molécula sea
la rizosecreción y la filosecreción y consisten en
funcional. El retículo endoplásmico posee el
la secreción de la proteína recombinante por
ambiente necesario para que se produzca el
exudados de las raíces o de las hojas. Estas
plegado y ensamblado de las cadenas, por lo que
estrategias permiten obviar el paso de
es preciso el direccionamiento de las cadenas que
extracción de los tejidos, aunque presentan
forman los anticuerpos hacia este compartimento.
otros inconvenientes relacionados con la
recolección de los exudados.
En el retículo endoplásmico además del plegado y
ensamblado de las cadenas de los anticuerpos se
En el caso de la rizosecreción puede dirigirse la
producción de la proteína recombinante hacia las produce una modificación postraduccional
raíces e inducirse la formación de raíces aéreas, denominada glicosilación.
de modo que la proteína puede recuperarse
mediante cultivo hidropónico. La glicosilación consiste en la adición de
precursores de oligosacáridos, denominados
En el caso de las secreciones por las hojas se N-glicanos, en aminoácidos específicos de la
trata de la gutación, que es un fenómeno que cadena polipeptídica. Las proteínas en el retículo
ocurre de manera natural en las plantas. La endoplásmico se van transportando hacia el
gutación consiste en el exudado de gotas de aparato de Golgi y durante este transporte el
líquido en los márgenes de las hojas, N-glicano añadido va sufriendo reacciones de
principalmente en estructuras denominadas maduración que consisten en la eliminación y
hidátodos, aunque puede ocurrir también a adición de distintos residuos de azúcares.
través de la cutícula y de los estomas. Mediante
el direccionamiento de la proteína recombinante La N-glicosilación en plantas es ligeramente diferente
hacia el retículo endoplásmico, se consigue la a la glicosilación que realizan los mamíferos debido a
secreción de la proteína hacia el apoplasto de las las modificaciones que ocurren en el aparato de Golgi
hojas, de donde pasa al fluido secretado lejano. Las diferencias consisten en la adición de
mediante la gutación65. residuos de xilosa y cambios en los enlaces que unen
las fucosas, que en mamíferos son de tipo α-(1,6) y
Ambos sistemas constituyen sistemas de en plantas son de tipo α-(1,3). Además, en el caso
producción de proteínas recombinantes de mamíferos se añade ácido siálico, que parece que
continuos y no destructivos. está implicado en tiempos más largos de eliminación
63
64
65
Komarnytsky, S.; Borisjuk, N. V.; Borisjuk, L. G.; Alam, M. Z.; Raskin, I. (2000). Production of Recombinant Proteins in Tobacco
Guttation Fluid. Plant Physiology, 124, 927–933.
66
Gomord, V.; Faye, L. (2004). Posttranslational modification of therapeutic proteins in plants. Current Opinion in Plant
32
de las proteínas del torrente circulatorio. Estas dar lugar a la aparición de respuestas alérgicas en
diferencias, aunque parecen pequeñas, podrían tener personas, debido a que los residuos de fucosa
efectos en la actividad, la distribución y la vida media α-(1,3) y xilosa forman parte de epítopos de
de las proteínas recombinantes. determinados alérgenos de plantas y se han
encontrado anticuerpos en suero humano que son
Existen estudios que indican la existencia de reactivos contra estos residuos. Aunque la
diferencias en la glicosilación entre distintas existencia de anticuerpos contra este tipo de
especies, y dentro de una misma especie en glicanos en el suero no implica una reacción
diferentes estados del desarrollo. Este hecho debe adversa, parece que su presencia podría inducir
ser tenido en cuenta a la hora de elegir la planta una eliminación más rápida de este tipo de
que se usará como biofactoría, aunque todas las proteínas del torrente sanguíneo, lo cual unido a la
especies que se han usado hasta ahora para ausencia del ácido siálico, que aumenta el tiempo
producir proteínas terapéuticas tienen la de eliminación, podría comprometer su eficacia
capacidad de asociar los residuos de fucosa y de terapéutica in vivo 68.
67
xilosa tal y como se ha indicado .
Todo esto ha llevado a la búsqueda de estrategias
Se ha considerado también la posibilidad de que que permitan “humanizar” el patrón de
los glicanos específicos de las plantas pudiesen glicosilación de las proteínas en plantas.
ESTRATEGIAS DE “HUMANIZACIÓN” DE PROTEÍNAS EN PLANTAS
• Almacenamiento de las proteínas en el retículo endoplásmico, evitando que pasen al aparato

de Golgi donde se añaden este tipo de residuos. Se consigue mediante la adición de secuencias
H/KDEL, como se ha explicado en el apartado de protección contra la degradación.
• Inhibición de las enzimas glicosiltransferasas de plantas, que son las enzimas que catalizan
la unión de los residuos de N-glicanos. Se han clonado los genes de varias enzimas de este tipo y se
ha comprobado en el musgo Physcomitrella patens, que el bloqueo de los genes de dos de estas
enzimas previene la producción de los epítopos específicos de plantas sin afectar a la secreción de la
proteína.
• Expresión de glicosiltransferasas de mamíferos en las plantas. La expresión de estas enzimas

en plantas permitiría completar la maquinaria del aparato de Golgi para la maduración de proteínas
y podría competir con la maquinaria que realiza las modificaciones específicas de las plantas.
• Eliminación de las secuencias de reconocimiento para la N-glicosilación. Esta estrategia se

utiliza en aquellos casos en los que no se requiere la glicosilación de la proteína para que sea
funcional69.
67
Elbers, I. J. W.; Stoopen, G. M.; Bakker, H.; H. Stevens, L.; Bardor, M.; Molthoff, J. W.; Jordi, W. J. R. M.; Bosch, D.;
Lommen, A. (2001). Influence of growth conditions and developmental stage on N-glycan heterogeneity of transgenic
immunoglobulin G and endogenous proteins in tobacco leaves. Plant Physiology, 126 1314–1322.
68
794-805.
69
Stoger, E.; Sack, M.; Fischer, R.; Christou, P. (2002). Plantibodies: applications, advantages and bottlenecks. Current
Opinion in Biotechnology, 13, 161-166.
33
TECNOLOGÍAS DISEÑADAS PARA REDUCIR EL IMPACTO DE LOS FACTORES
CRÍTICOS DE LAS PLANTAS BIOFACTORÍA
Factores Críticos Tecnologías
Uso de promotores constitutivos, inducibles y específicos de tejido.
Secuencias terminadoras.
Intrones y secuencias líder.
Eliminación del silenciamiento.

Baja producción Direccionamiento a orgánulos (retículo endoplásmico, vacuolas,
membranas celulares y cloroplastos).
Transformación de cloroplastos.
Proteínas de fusión.
Direccionamiento a la vía secretora.
Direccionamiento a retículo endoplásmico.
Inhibición de las enzimas implicadas en la glicosilación en plantas.

Autenticidad
estructural Expresión de enzimas implicadas en la glicosilación en mamíferos.
Inhibición de la glicosilación mediante la eliminación de los lugares de

glicosilación.
Tiempos de
Expresión transitoria.
desarrollo largos
Transformación de cloroplastos.
Riesgos por flujo
Expresión transitoria.
de polen
Androesterilidad.
Promotores inducibles tras el cosechado por daño mecánico.

Riesgo de ingestión
por animales Expresión de la proteína en forma inactiva que debe ser procesada
silvestres (proteínas de fusión).
Riesgo de
contaminación Uso de genes “terminator”.
de semillas
Riesgo de entrada en la
Promotores inducibles tras el cosechado.
cadena alimentaria
Direccionamiento a retículo endoplásmico.
Inhibición de las enzimas implicadas en la glicosilación en plantas.

Riesgos de
alergias Expresión de enzimas implicadas en la glicosilación en mamíferos.
Inhibición de la glicosilación mediante la eliminación de los lugares de

glicosilación.
Tabla 3. Resumen de las tecnologías diseñadas para reducir el impacto de los factores críticos de las plantas biofactoría.
34
3. Cultivos de interés en agricultura

molecular
Existe un número elevado de cultivos, entre los cuanto a pureza. Por ejemplo, para proteínas que
que se incluyen tabaco, cereales, tienen un elevado valor económico se podría
leguminosas, frutas, hortalizas, etc., que son justificar la utilización de plantas cuyo cultivo resulte
susceptibles de ser utilizados como biofactorías de más caro, o para proteínas que se administren por
moléculas de interés. vía oral sería necesario usar plantas comestibles70.
Por tanto, la elección del cultivo que se va a utilizar
Aunque existen una serie de factores importantes a para la expresión de una proteína recombinante
tener en cuenta a la hora de realizar la elección del debe hacerse de manera individual para cada tipo de
cultivo, como el rendimiento, la estabilidad del tejido proteína.
en el que se expresa la proteína, el coste de
almacenaje y distribución, la facilidad de purificación, Una vez seleccionado el cultivo, en función del
riesgos ambientales, etc., no existe una norma órgano o tejido en el que se desee expresar la
general que pueda seguirse, ya que no todas las proteína recombinante se deberán utilizar los
proteínas recombinantes tendrán el mismo precio en promotores más adecuados tal y como se ha
el mercado ni tienen los mismos requerimientos en explicado en el apartado de tecnologías.
FACTORES A TENER EN CUENTA PARA LA ELECCIÓN DE UN CULTIVO PARA SU USO

COMO UNA BIOFACTORÍA
• Disponibilidad de protocolos de transformación que permitan expresar la proteína que se desea

obtener de la manera más sencilla posible.
• Velocidad de escalado.
• Rendimiento del cultivo por unidad de superficie cultivada (rendimiento de biomasa).
• Rendimiento de la proteína transgénica por unidad de biomasa cosechada.
• Coste del cultivo (necesidad de invernaderos o requerimientos de nutrientes especiales).
• Existencia de infraestructura que permita la recolección y procesado.
• Estabilidad de la proteína en el tejido en el que se acumula.
• Coste del almacenamiento y transporte del órgano o tejido de la planta en el que se encuentra la
proteína recombinante.
• Coste de purificación.
• Presencia de sustancias tóxicas que haya que eliminar en el procesado.
• Riesgos ambientales de escapes a través de polen o de consumo por animales herbívoros o insectos
del tejido que contiene la proteína recombinante.
70
794-805.
35
A continuación se indican los cultivos más usados proteínas es necesario realizar un procesado
en agricultura molecular. La clasificación no se ha inmediato tras la recolección y, si esto no es
realizado teniendo en cuenta la familia a la que posible, debe desecarse o congelarse el tejido.
pertenecen, sino el órgano en el que se expresan
las proteínas71. Otros posibles inconvenientes que puede presentar la
expresión de las proteínas recombinantes en las
hojas estarían relacionados con una posible
interferencia en el desarrollo de la planta o con
3.1. Plantas de hoja
riesgos ambientales debido al consumo de estas
y forrajeras hojas por insectos o animales herbívoros.
En este grupo de cultivos se incluyen aquellas plantas

que se usan en agricultura molecular en las que se
produce la acumulación de proteínas en la parte aérea Tabaco72
de la planta, principalmente en el tejido foliar, como es
El tabaco (Nicotiana tabacum) es un cultivo con
el caso del tabaco, alfalfa, lechuga o soja.
una gran importancia en biotecnología de plantas
ya que se utiliza como modelo de experimentación
Las ventajas que presenta este tipo de plantas en
debido principalmente a la facilidad que presenta
general son el elevado rendimiento en biomasa, el
para ser transformado. Éste es el motivo principal
gran potencial para escalado que poseen y la por el que el tabaco es el cultivo más utilizado en
existencia de infraestructura para su procesado. agricultura molecular, ya que existen distintos
protocolos de expresión de proteínas
El inconveniente principal que presentan es debido recombinantes que pueden usarse de manera
al elevado contenido en agua que posee el tejido rutinaria en este cultivo. En el siguiente cuadro se
foliar, que hace que las proteínas sean inestables y indican las principales ventajas e inconvenientes
pueda producirse una disminución del que presenta el tabaco para ser usado como
rendimiento. Para evitar o reducir esta pérdida de biofactoría de proteínas recombinantes.
VENTAJAS E INCONVENIENTES DEL TABACO COMO BIOFACTORÍA
Ventajas
• Existe una tecnología muy desarrollada para la transferencia y expresión de genes en tabaco.
• Única especie en la que la transformación de cloroplastos se hace de manera rutinaria.
• Posee un alto rendimiento de biomasa.
• Produce gran cantidad de semillas.
• Fácil reproducción.
• Potencial para un escalado rápido.
• Disponibilidad de infraestructuras para el procesado a gran escala.
• No es una planta comestible, por lo que se reduce el riesgo de paso a la cadena alimentaria.
• No es necesario completar el ciclo biológico para obtener la proteína recombinante, lo que
disminuye el riesgo de contaminación cruzada.
Desventajas
• Baja estabilidad de las proteínas en el tejido una vez cosechado, por lo que debe ser congelado o
secado para su transporte o procesado.
• Posee compuestos fenólicos que se liberan durante la extracción de las proteínas recombinantes.
• Produce elevados niveles de alcaloides tóxicos, aunque existen variedades con bajo contenido en alcaloides.
• No es comestible, de modo que es necesario purificar la proteína.
71
72
794-805.
36
En la mayor parte de los casos se usa Existe una compañía canadiense llamada
transformación nuclear para la producción de Medicago, que ha aislado nuevos promotores que
proteínas en tejido foliar pero, como se ha permiten acumular niveles elevados de proteínas
indicado en el apartado de tecnologías, puede en las hojas de alfalfa.
realizarse un direccionamiento hacia la vía
secretora consiguiendo que las proteínas se
exuden por las hojas o por las raíces. Esta
Otras especies
tecnología está bajo desarrollo comercial para la
producción de fosfatasa alcalina humana
secretada por la empresa Phytomedics Inc. Existen otras especies de plantas de hoja que se
Otras empresas que han elegido el tabaco como están usando para producir proteínas
plataforma son Planet Biotechnology, recombinantes como por ejemplo la lechuga, la
Meristem Therapeutics, Plant Biotechnology soja y las espinacas. Estas plantas presentan la
Inc y Chlorogen, así como la empresa española ventaja frente a la alfalfa y el tabaco de ser
Plant Bioproducts. comestibles. Se están utilizando para la expresión
de antígenos para elaborar vacunas comestibles.
Como se ha indicado en el apartado de tecnologías En el caso de la lechuga se han realizado ensayos
se puede hacer transformación de cloroplastos de clínicos para una vacuna contra el virus de la
manera rutinaria generalmente mediante hepatitis B73 y el caso de las espinacas se ha
bombardeo con microproyectiles con las ventajas expresado un antígeno del antrax74.
que presenta este tipo de transformación.
La soja al igual que la alfalfa pertenece a la familia
de las leguminosas y puede fijar nitrógeno de la
Alfalfa atmósfera. Se ha utilizado para producir la fitasa

de un hongo llamado Aspergillus.
La alfalfa (Medicago sativa) es una planta

perteneciente a la familia de las leguminosas, que
posee un enorme rendimiento de biomasa debido 3.2. Semillas de cereales
a que es perenne. Esto significa que la planta
y leguminosas
puede ser segada sin que muera, pudiendo
realizarse hasta nueve siegas por año, tras las
En este tipo de cultivos se incluyen plantas en las
cuales la planta vuelve a crecer produciendo hojas
que la acumulación de la proteína recombinante
exactamente iguales a las que se segaron.
se realiza en las semillas como es el caso de las
Además, se puede propagar de manera
leguminosas de grano y los cereales. Estos
vegetativa, lo que permite la obtención de
“clones” idénticos, sin necesidad de que exista cultivos se caracterizan por producir semillas que
floración o formación de semillas. Es además una presentan un elevado contenido de proteínas, que
planta capaz de fijar el nitrógeno atmosférico, de pueden secarse fácilmente y almacenarse a
modo que permite reducir los aportes de nitrógeno temperatura ambiente sin pérdida de propiedades
en forma de abonos. durante muchos meses, debido a que presentan
un ambiente protector frente a la degradación
La alfalfa se emplea para alimentación animal, lo proteica. La utilización de promotores específicos

cual tiene la ventaja de que podría utilizarse para de semillas hace que la producción en este tipo de
la expresión de vacunas comestibles para cultivos pueda llegar a ser muy elevada.
animales, pero tiene el inconveniente de que
puede pasar a la cadena alimentaria. Otro Los cereales en los que se ha investigado son
inconveniente que presenta esta planta es que arroz, trigo y maíz, y entre las leguminosas
contiene grandes cantidades de ácido oxálico. destacan el guisante y la soja.
73
Kapusta, J.; Modelska, A.; Figlerowicz, M.; Pniewski, T.; Letellier, M.; Lisowa, O.; Yusibov, V.; Koprowski, H.;
Plucienniczak, A.; Legocki, A. B. (1999). A plant-derived edible vaccine against hepatitis B virus. The FASEB Journal, 13,
1796-1799.
74
Sussman, H. E. (2003). Spinach makes a safer anthrax vaccine. Drug Discovery Today, 8, 428-430.
37
Desde el punto de vista económico la soja y el La principal desventaja que presenta la patata es
maíz son los cultivos más eficientes para la que aunque los tubérculos pueden consumirse
producción de proteínas recombinantes. crudos, son poco palatables, por lo que sería
necesario cocinarlos ligeramente lo que puede
El maíz es el cereal elegido por Prodigene Inc llevar a una pérdida de proteínas por
para la producción de proteínas. Las ventajas que desnaturalización.
presenta este cereal son el elevado rendimiento
en biomasa y la existencia de infraestructuras y Se han realizado al menos tres estudios clínicos
maquinaria para su recolección y transformación. hasta el momento en los que se han administrado
patatas transgénicas que expresan proteínas de
interés biosanitario a personas.
3.3. Frutas, tubérculos

y hortalizas75
Hortalizas
En este grupo se incluyen plantas en las que la
acumulación de la proteína recombinante se hace La hortaliza más utilizada para expresar proteínas
en órganos comestibles de la planta, que pueden recombinantes es el tomate. Al igual que ocurre
consumirse crudos o con un procesado mínimo, con la patata, existen sistemas de expresión de
como es el caso de las frutas, tubérculos y proteínas recombinantes muy eficientes y se
hortalizas. El interés de expresar proteínas dispone de promotores específicos para la
recombinantes en órganos comestibles es la expresión en el fruto. Otras ventajas son la
obtención de productos que puedan administrarse posibilidad de consumo en crudo y la posibilidad
por vía oral sin necesidad de purificación, lo que de expresar varios antígenos en una misma planta
les hace especialmente útiles para la obtención de mediante cruzamiento.
vacunas de subunidades, aditivos y proteínas
utilizadas en inmunoterapia pasiva tópica. Entre los inconvenientes principales se encuentra
el bajo contenido en proteínas que presenta el
fruto. Además algunos frutos pueden contener
elevadas cantidades de ácidos, que son
Tubérculos
incompatibles con muchos antígenos y pueden
hacer que los frutos no sean adecuados para su
Los principales tubérculos en los que se pueden
administración a niños de corta edad. Otro
expresar proteínas recombinantes son patatas y
inconveniente es la ausencia de un sistema
zanahorias.
in vitro para evaluar la expresión de la proteína
recombinante en el fruto.
La patata es una planta muy útil para expresar
proteínas recombinantes, ya que es fácil de
transformar y existen promotores específicos que
permiten expresar las proteínas en el tubérculo. Frutas
Además se puede propagar de manera clonal
mediante la siembra de tubérculos sin que exista Existe un gran interés en expresar proteínas
floración ni formación de semillas, previniendo el recombinantes en bananas, debido a que el
riesgo de contaminación cruzada. banano es un árbol muy cultivado en países en
75
Mason, H. S.; Warzecha, H.; Mor, T.; Arntzen, C. J. (2002). Edible plant vaccines: applications for prophylactic and
therapeutic molecular medicine. Trends in Molecular Medicine, 8, 324-329.
38
desarrollo. Este árbol puede ser propagado de

manera clonal y una vez que ha alcanzado la
madurez produce frutos de manera abundante con
ciclos de 10 a 12 meses. Estos frutos pueden ser
consumidos tanto por adultos como por niños.
Este cultivo presenta algunos inconvenientes ya

que no existen sistemas de transformación
eficientes y se dispone de pocos datos sobre
expresión génica, especialmente en lo referente a
promotores específicos del fruto. Además requiere
espacios muy grandes que resultan muy caros si
es necesario cultivar en invernadero.
3.4. Oleaginosas y fibra
En este apartado se incluyen especies que se

caracterizan por producir semillas con un elevado
contenido en aceites como soja o cánola y otras
que además producen fibras como es el caso del
algodón y el lino. Este tipo de plantas es muy
interesante para su utilización en ingeniería
metabólica de lípidos, ya que de manera natural
contienen rutas de síntesis de compuestos
lipídicos y producen éstos en cantidades elevadas.
Además, como se ha indicado existen estrategias
de purificación que se basan en el anclaje de la
proteína recombinante a cuerpos lipídicos que
conviene utilizar en plantas que produzcan
semillas con alto contenido en aceites.
Las especies productoras de fibras como el lino

tienen interés en ingeniería metabólica para la
producción de materiales formados por
combinación de fibras y bioplásticos76.
76
Wróbel, M.; Zebrowski, J.; Szopa, J. (2004). Polyhydroxybutyrate synthesis in transgenic flax. Journal of Biotechnology,
107, 41-54.
39
VENTAJAS E INCONVENIENTES DE LOS CULTIVOS UTILIZADOS
EN AGRICULTURA MOLECULAR
Plantas de hoja
– Elevado rendimiento de biomasa.

Ventajas
– Gran potencial para el escalado.

– Existencia de infraestructura para su procesamiento.
– Se puede cosechar antes de la floración previniendo la liberación de polen y los riesgos de
contaminación cruzada que esto implica.
Inconvenientes
– Elevado contenido en agua que hace las proteínas inestables.

– Necesidad de congelado o desecación inmediatos de las hojas para evitar la degradación.
– La acumulación de proteínas recombinantes en las hojas podría interferir en el desarrollo
de la planta.
– Riesgos ambientales por un posible consumo de las hojas por animales herbívoros o insectos.
Semillas de cereales y leguminosas
– Permiten almacenar las proteínas en las semillas de manera estable durante años incluso a
Ventajas
temperatura ambiente.
– No contienen los compuestos fenólicos que presentan las hojas de tabaco.
– La exposición a herbívoros es menor que en plantas de hoja.
Inconvenientes
– Es necesario que ocurra un ciclo floral para producir semillas.
– La purificación es más compleja que en hojas y tiene un coste mayor.
Frutas, tubérculos y hortalizas
– Son órganos que pueden consumirse crudos o semicocinados, permitiendo la producción de

vacunas de subunidades, nutracéuticos y anticuerpos para aplicaciones orales.
Ventajas
– Los tubérculos pueden almacenarse a temperatura ambiente.

– No presentan compuestos tóxicos.
– Purificación más económica que en semillas.
Inconvenientes
– Muchas necesitan cultivarse en invernadero, lo que aumenta el coste.
Fibra y oleaginosas
– Muy útiles para la purificación mediante fusión a oleosinas.

Ventajas
– Existencia de infraestructura para su procesamiento.

– Permiten almacenar las proteínas en las semillas de manera estable durante años incluso a
temperatura ambiente.
Inconvenientes
– La fibra y el aceite pueden interferir en el procesado por lo que se aplica para proteínas que no
necesitan estar muy purificadas.
– Es necesario que ocurra un ciclo floral para producir semillas.
Tabla 4. Ventajas e inconvenientes de los distintos cultivos utilizados en agricultura molecular.
40
4. Moléculas de interés
El número de moléculas que potencialmente se pueden obtener utilizando plantas modificadas
genéticamente como biofactorías es muy elevado. Como se ha indicado se pueden diferenciar a grandes
rasgos dos tipos de biofactorías. Por una parte, aquellas en las que la modificación genética conduce a la
expresión de una proteína foránea, que es la molécula de interés; y aquellas en las que la modificación
genética conduce a la modificación del metabolismo de la planta, como resultado de la cual se sintetiza un
compuesto que es la molécula de interés.
MOLÉCULAS DE INTERÉS
Proteínas Ingeniería metabólica

recombinantes
Interés Interés Modificación de Introducción de

biosanitario industrial rutas enzimáticas nuevas rutas
existentes enzimáticas
Vacunas Anticuerpos Biofármacos
4.1. Proteínas recombinantes Esta complejidad estructural hace que la obtención

de proteínas mediante síntesis química sea
prácticamente imposible, excepto para pequeñas
Las proteínas son moléculas complejas formadas
cadenas peptídicas, de modo que sea necesario
por pequeñas subunidades denominadas
utilizar sistemas vivos.
aminoácidos, cuya secuencia se encuentra
codificada en los genes. En muchos casos, para
que la proteína sea funcional, es necesario que
ocurra una serie de modificaciones 4.1.1. Proteínas de interés
postraduccionales. Éstas pueden ser relativamente biosanitario
sencillas como el establecimiento de puentes
disulfuro y puentes de hidrógeno entre distintos Las plantas presentan un gran potencial para la
aminoácidos que conducen a la adquisición de una obtención de moléculas para uso terapéutico
estructura tridimensional adecuada. Otro tipo de debido a sus ventajas en cuanto a seguridad,
modificaciones más complejas incluye la capacidad de producción y coste. Las principales
modificación de aminoácidos concretos y la adición proteínas de interés biosanitario que pueden
de determinados grupos como fosfatos obtenerse mediante la modificación genética de
(fosforilación) o hidratos de carbono plantas son antígenos para elaborar vacunas,
(glicosilación), procesos proteolíticos y otros anticuerpos y fragmentos de anticuerpos,
procesos no enzimáticos. Estas modificaciones proteínas estructurales y otro tipo de biofármacos.
más complejas en muchas ocasiones ocurren en En la tabla 5 se incluyen las proteínas de interés
determinados orgánulos subcelulares y no son sanitario que se están expresando actualmente en
comunes en todos los organismos. plantas.
41
PROTEÍNAS DE INTERÉS BIOSANITARIO EXPRESADAS EN PLANTAS
Proteínas de Interés Biosanitario
Contra enfermedades infecciosas.
Vacunas Contra tumores.
Contra enfermedades autoinmunes.
Inmunoglobulina G.
Anticuerpos Inmunoglobulina A secretora.
Fragmentos de anticuerpos.
Productos sanguíneos humanos.
Hormonas.
Reguladores del crecimiento.
Biofármacos Enzimas para uso terapéutico.
Antitumorales.
Antivirales.
Analgésicos opiáceos.
Proteínas estructurales Colágeno y gelatina.
Tabla 5. Proteínas de interés biosanitario expresadas en plantas.
4.1.1.1. Vacunas77 cantidades del antígeno que servirán para elaborar

la vacuna contra ese patógeno.
Una vacuna consiste en una preparación de un
organismo patógeno completo (atenuado o El antígeno producido en la planta puede
muerto), o de alguno de sus componentes, que se purificarse para su administración por vía
denominan antígenos, que administrado sea capaz parenteral, tal y como se hace en otros sistemas
de inducir una respuesta inmune duradera y de expresión, o puede realizarse la expresión en
protectora contra este patógeno. En el caso de plantas o en tejidos comestibles que puedan
que se administre el organismo completo muerto, consumirse crudos o con un procesado mínimo,
se trata de vacunas inactivadas, y si está vivo evitando la etapa de purificación. En este último
pero atenuado, se habla de vacunas atenuadas. caso se habla de vacunas comestibles.
En el caso de las vacunas elaboradas a partir de
componentes del patógeno que dan lugar a una Además de las ventajas generales de la expresión
respuesta inmune en lugar del patógeno completo, de proteínas en plantas, la expresión de proteínas
se habla de vacunas de subunidades. o péptidos antigénicos en plantas comestibles
presenta ventajas adicionales relacionadas con la
Mediante la tecnología del ADN recombinante es facilidad de administración y almacenamiento y
posible identificar y aislar los genes del organismo con la eliminación de la fase de purificación, que
patógeno que codifican para proteínas capaces de suponen una reducción en el coste. A continuación
inducir la respuesta inmune (antígenos). Estos se incluye un cuadro con las principales ventajas
genes pueden introducirse en plantas y fabricar de la expresión de antígenos en plantas para la
una biofactoría capaz de producir grandes elaboración de vacunas comestibles78.
77
Sala, F.; Rigano, M. M.; Barbante, A.; Basso, B.; Walmsley, A. M.; Castiglione, S.(2003). Vaccine antigen production in
78
Streatfield, S. J., Howard, J. A. (2003). Plant-based vaccines. International Journal for Parasitology, 33, 479-493.
42
VENTAJAS DE LAS VACUNAS COMESTIBLES
• Permiten una administración en una forma segura y palatable, tal y como se hace con un alimento o
con un pienso en el caso de los animales.
• Al evitar el uso de jeringuillas y agujas se reducen los costes de material y personal asociados, así
como los riesgos relacionados con este tipo de administración.
• Su expresión en órganos que se puedan almacenar a temperatura ambiente (semillas de cereales o

tubérculos) permitiría eliminar los costes que conlleva la cadena del frío.
• Es posible expresar más de un antígeno por planta pudiendo administrarse varias vacunas de forma
simultánea.
• En el caso de los animales, al evitarse las inyecciones se previenen posibles pérdidas de calidad en
las canales de animales de abasto.
• Posibilidad de inmunización de animales silvestres reservorio de enfermedades como la rabia

(murciélagos y ratas).
Todas estas características hacen que este tipo de Por último, la producción de vacunas en plantas
vacunas sea muy interesante para su aplicación a comestibles presenta el riesgo de que éstas pasen
gran escala, por ejemplo para realizar a la cadena alimentaria con las implicaciones que
vacunaciones en zonas subdesarrolladas o para esto tendría para la salud de las personas. La
vacunaciones masivas en caso de epidemias o ingestión accidental de este tipo de plantas podría
riesgo de ataques terroristas. dar lugar a la inducción de tolerancia oral, que
consiste en la inhibición de la respuesta inmune
Los principales retos técnicos de la expresión de del organismo frente a determinados antígenos
antígenos en plantas para elaborar vacunas presentados por vía oral, como consecuencia de
comestibles se refieren a la concentración de una exposición repetida a los mismos. Para evitar
antígeno. En primer lugar, es necesario conseguir estos riesgos es necesario realizar un control muy
una concentración elevada del antígeno, con el fin estricto de los cultivos y las plantas una vez
de reducir la cantidad de tejido vegetal que debe cosechadas.
ingerirse para obtener una dosis efectiva. Por otra
parte, debe conseguirse una concentración A continuación se incluyen varias tablas en las que
homogénea para que se pueda ajustar la dosis de se recogen los antígenos que se han expresado en
manera adecuada. plantas para la elaboración de vacunas contra
enfermedades infecciosas. Las tablas 6 y 7
La administración por vía oral supone que la contienen información sobre plantas transgénicas
proteína debe ser resistente a los jugos gástricos que expresan antígenos para elaborar vacunas
e intestinales, lo cual puede conseguirse mediante contra enfermedades humanas y animales. Las
la expresión de las proteínas en semillas, donde tablas 8 y 9 se refieren a expresión mediante
existe una matriz de polímeros de hidratos de vectores virales de antígenos para elaborar vacunas
carbono que la protegen. contra enfermedades humanas y animales.
43
ANTÍGENOS PARA ELABORAR VACUNAS CONTRA ENFERMEDADES
HUMANAS EXPRESADOS EN PLANTAS TRANSGÉNICAS
Enfermedades humanas
Nivel de expresión
Agente
Antígeno Planta Órgano
patógeno Proteína Peso fresco
soluble total (%) (g)
Hojas 0,001 0,0002

Tabaco
E. coli Cloroplastos 2,5 —
Subunidad B de la
enterotoxigénica79
toxina termolábil
(*) Patata Tubérculo 0,2 0,001
Maíz Semillas 10 0,1
E. coli Subunidad A
Tabaco Hojas 8 1
enteropatógena estructural del BFP
Patata Tubérculo 0,3 0,002
Subunidad B de la
Vibrio cholerae Tabaco Hojas 4 0,5
toxina colérica
Tomate Hojas y frutos 0,04 0,005
Tabaco Hojas 0,07 0,0008
Patata Tubérculo 0,002 —

Antígeno de
superficie
Hepatitis B Patata Tubérculo 0,006 0,00004
Lechuga Hojas — 0,0000006
Proteína media Patata Tubérculo 0,001 0,000009
Tabaco Hojas 0,2 0,03

Proteína
Virus Norwalk
de la cápsida
Sarampión Hemaglutinina Tabaco Hojas — —
Citomegalovirus
Glicoproteína B Tabaco Semillas 0,1 0,00007
humano
Virus respiratorio
Proteína de fusión Tomate Fruto — 0,003
sincitial
Bacillus anthracis Antígeno protector Tabaco Hojas — —
Fragmento TetC de
Clostridium tetani Tabaco Cloroplastos 25 —
la toxina colérica
Péptido de la región
V3 de la proteína
VIH80 gp120 fusionada con Patata Tubérculos 0,0041 —
la subunidad B de la
toxina colérica
Rotavirus81 VP7 Patata Hojas 38,4 —

82
Tabla 6. Antígenos de enfermedades humanas expresados en plantas transgénicas .
(*) Enfermedad humana y animal.
79
Tregoning, J.; Maliga, P.; Dougan, G.; Nixon, P. J. (2004). New advances in the production of edible plant vaccines:
chloroplast expression of a tetanus vaccine antigen, TetC. Phytochemistry, 65, 989-994.
80
Kim, T-G.; Gruber, A.; Langridge, W. H. R. (2004). HIV-1 gp120 V3 cholera toxin B subunit fusion gene expression in
transgenic potato. Protein Expression and Purification, 37, 196-202.
81
Wu, Y-Z.; Li, J-T.; Mou, Z-R.; Fei, L.; Ni, B.; Geng, M.; Jia, Z-C.; Zhou, W.; Zou, L-Y.; Yan Tang, Y. (2003). Oral immunization with
rotavirus VP7 expressed in transgenic potatoes induced high titers of mucosal neutralizing IgA. Virology, 313, 337-342.
82
Streatfield, S. J.; Howard, J. A. (2003). Plant-based vaccines. International Journal for Parasitology, 33, 479-493.
44

ANIMALES EXPRESADOS EN PLANTAS TRANSGÉNICAS
Enfermedades animales
Nivel de expresión
Agente
Antígeno Planta Órgano
Hojas y
Virus de la rabia(*) Glicoproteína Tomate 1 0,1
frutos
Arabidopsis Hojas — —
Proteína estructural
Alfalfa Hojas — —
VP1
Patata Hojas 0,01 0,001
Fiebre aftosa
Péptido de la proteína
estructural VP1
Alfalfa Hojas 0,004 0,0005
fusionado
a β-glucuronidasa
Arabidopsis Hojas 0,06 0,008
Virus de la Patata Tubérculo 0,07 0,0005

gastroenteritis Glicoproteína S
transmisible porcina Tabaco Hojas 0,2 0,03
Maíz Semillas 2 0,02
Rotavirus grupo A Proteína VP6 de la

bovino cápsida
Leucotoxina fusionada
Pasteurelosis Trébol
a una proteína Hojas 0,5 0,0009
neumónica bovina blanco
fluorescente
Enfermedad
Proteína estructural
hemorrágica de los Patata Hojas 0,3 0,04
VP60
conejos
Péptido de la proteína
de la cápsida VP2
Arabidopsis Hojas 0,1 0,0003
fusionado a
Parvovirus canino 83 β—glucuronidasa
Péptido 2L21 fusionado

con la subunidad B de Tabaco Hojas 31 7,49 mg/g
la toxina colérica
Virus de la diarrea
Epítopo neutralizador Tabaco — — —
epidémica porcina84
Virus de la bronquitis
Proteína S de IBV Patata Tubérculo — —
infecciosa aviar85
Cacahuete Hojas — —
Peste bovina86, 87 Hemaglutinina
Tabaco — 0,75 —
Tabla 7. Antígenos de enfermedades animales expresados en plantas transgénicas88.

83
Molina, A.; Hervás-Stubbs, S.; Daniell, H.; Mingo-Castel, A. M.; Veramendi, J. (2004). High-yield expression of a viral
peptide animal vaccine in transgenic tobacco chloroplasts. Plant Biotechnology Journal, 2, 141-153.
84
Bae, J-L.; Lee, J-G.; Kang, T-J.; Jang, H-S.; Jang, Y-S.; Yang, M-S. (2003). Induction of antigen-specific systemic and
mucosal immune responses by feeding animals transgenic plants expressing the antigen. Vaccine, 21, 4052–4058.
85
Ji-Yong Zhou, Li-Qin Cheng, Xiao-Juan Zheng, Jian-Xiang Wu, Shao-Bin Shang, Jin-Yong Wang and Ji-Gang Chen (2004).
Generation of the transgenic potato expressing full-length spike protein of infectious bronchitis virus. Journal of
86
Khandelwal, A.; Renukaradhya, G. J.; Rajasekhar, M.; Sita, G. L.; Shaila, M. S. (2004). Systemic and oral immunogenicity of
hemagglutinin protein of rinderpest virus expressed by transgenic peanut plants in a mouse model. Virology, 323, 284-291.
87
Khandelwa,l A.; Sita, G. L.; Shaila, M. S. (2003). Expression of hemagglutinin protein of rinderpest virus in transgenic
tobacco and immunogenicity of plant-derived protein in a mouse model. Virology, 308,207-215.
88
45
HUMANAS EXPRESADOS MEDIANTE VECTORES VIRALES
Enfermedades humanas
Nivel de expresión
Agente
Antígeno Virus** Planta
E. coli Subunidad B de la
TMV Tabaco 0,75 -
enterotoxigénica89 toxina termolábil
Región hipervariable
de la proteína 2 de la
Hojas de
Hepatitis C cubierta fusionada a la TMV 0,04 0,005
tabaco
sub B de la toxina
colérica
Hojas de
Rotavirus Proteína VP6 PVX — 0,005
tabaco
Péptido de la proteína Hojas

CMV — —
gp41 de caupí
Péptido de la región
Hojas de
V3 de la proteína AMV — —
tabaco
gp120
Péptido de la región V3 Hojas de
TBSV — 0,03
de la proteína gp120 tabaco
VIH tipo 1 Hojas de

CMV — 0,002
Péptido de la proteína caupí
transmembrana gp41 Hojas de
PVX — —
tabaco
Nucleocápsida Hojas de
TBSV 0,4 0,05
proteína p24 tabaco
Hojas de 2,5 mg/25 g de

Proteína p2490 TMV —
tabaco hojas
Péptido de la proteína Hojas de

Rinovirus tipo 14 CMV — —
VP1 caupí
Virus respiratorio Péptidos de la proteína Hojas de

AMV — 0,006
sincitial G tabaco
Hojas de
Péptido D2 de la CMV — 0,005
caupí
Staphylococcus aureus proteína de unión a
fibronectina FnBP Hojas de
PVX — 0,0003
tabaco
Hojas de
CMV — 0,005
Pseudomonas Péptido de la caupí
aeruginosa proteína F Hojas de
TMV — —
tabaco
Plasmodium Péptidos de la proteína Hojas de

TMV — 0,003
falciparum del Circumsporozoito tabaco
Virus del papiloma Hojas de

Oncoproteína E7 PVX — 0,0004
humano tipo 16 tabaco
Fragmento Fv de la Hojas de
Linfoma de la célula B TMV — 0,003
inmunoglobulina tabaco
Tabla 8. Antígenos de enfermedades humanas expresados mediante vectores virales91.
89
Wagner, B.; Hufnagl, K.; Radauer, C.; Wagner, S.; Baier, K.; Scheiner, O.; Wiedermann, U.; Breiteneder, H. (2004). Expression
of the B subunit of the heat-labile enterotoxin of Escherichia coli in tobacco mosaic virus-infected Nicotiana benthamiana plants
and its characterization as mucosal immunogen and adjuvant. Journal of Immunological Methods, 287, 203-215.
90
Perez-Filgueira, D. M.; Brayfield, B. P.; Phiri, S.; Borca, M. V.; Wood, C.; Morris, T. J. (2004). Preserved antigenicity of
HIV-1 p24 produced and purified in high yields from plants inoculated with a tobacco mosaic virus (TMV)-derived vector.
Journal of Virological Methods, 121, 201-208.
91
46

ANIMALES EXPRESADOS MEDIANTE VECTORES VIRALES
Enfermedades animales
Nivel de expresión
Agente
Antígeno Virus** Planta
Péptidos de la Hojas de
TMV y
Virus de la rabia(*) glicoproteína y tabaco y - 0,0005
AMV
nucleoproteína espinaca
Proteína estructural Hojas de

TMV - 0,02
VP1 tabaco
Fiebre aftosa
Péptido de la
Hojas de
proteína estructural CMV - -
caupí
VP1
Virus de la enteritis Péptido de la

Hojas de
del visón (visones, proteína de la CMV - 0,002
caupí
gatos y perros) cápsida VP2
Enfermedad
Proteína estructural Hojas de
hemorrágica de los PPP - -
VP60 tabaco
conejos
Hojas de
PPP - -
Péptido de la tabaco
Parvovirus canino
proteína de la
(perros)
cápsida VP2 Hojas de
CMV - 0,002
caupí
Virus de la hepatitis Péptido de la Hojas de

TMV - -
del ratón glicoproteína S tabaco
Herpesvirus bovino Hojas de

Glicoproteína D TMV - -
tipo I92 tabaco
Virus de la diarrea Epítopo Hojas de

TMV 5 -
epidémica porcina93 neutralizador tabaco
Tabla 9. Antígenos de enfermedades animales expresados mediante vectores virales94.

**
AMV: Virus del mosaico de la alfalfa.
CMV: Virus del mosaico del caupí.
PPP: Potyvirus de la viruela del ciruelo.
PVX: Virus X de la patata.
TBSV: Virus del enanismo ramificado del tomate.
TMV: Virus del mosaico del tabaco.
92
Pérez-Filgueira, D.M.; Zamorano, P.I.; Domınguez, M.G.; Taboga, O.A.; del Médico Zajac, M.P.; Puntel, M.; Romera, S.A.;
Morris, T.J.; Borca, M.V.; Sadir, A.M.; (2003). Bovine Herpes Virus gD protein produced in plants using a recombinant tobacco
mosaic virus (TMV) vector possesses authentic antigenicity. Vaccine, 21, 4201–4209.
93
Kang, T-J.; Kang, K-H.; Kim, J-A.; Kwon, T-H.; Jang, Y-S.; Yang, M-S. (2004). High-level expression of the neutralizing
epitope of porcine epidemic diarrhea virus by a tobacco mosaic virus-based vector. Protein Expression and Purification, 38,
129–135.
94
47
Además de la expresión de antígenos para la elaboración de vacunas contra patógenos bacterianos y virales,
es posible expresar antígenos para elaborar vacunas contra otro tipo de afecciones como enfermedades
autoinmunes y contra tumores humanos95.
VACUNAS CONTRA ENFERMEDADES AUTOINMUNES
Las enfermedades autoinmunes son aquellas en las que el sistema inmune reconoce como extrañas
algunas estructuras propias y reacciona contra ellas produciendo lo que se conoce como
autoanticuerpos. Algunos ejemplos son la artritis, la esclerosis múltiple, la miastenia gravis o la
diabetes tipo I.
Como se ha indicado, la administración por vía oral de antígenos puede dar lugar a fenómenos de
tolerancia. En el caso de las enfermedades autoinmunes, el fenómeno de tolerancia oral provocado
por la administración de autoantígenos por vía oral podría conducir a una disminución de la respuesta
inmune alterada, lo cual podría mejorar los síntomas.
Existen trabajos pioneros en la producción de autoantígenos en plantas, principalmente contra la
diabetes tipo I, como la expresión de la enzima ácido glutámico decarboxilasa (GAD, en sus siglas en
inglés) y la IL-4, que se expresan mediante fusión con la subunidad B de la toxina colérica96.
También se ha producido la expresión en plantas de alérgenos, que podrían aplicarse para el
desarrollo de vacunas para el tratamiento de las alergias tipo I, mediante la inducción de tolerancia
por vía oral. Algunos ejemplos son la expresión mediante un vector viral de alérgenos del abedul (la
proteína Bet v 1), del látex (las proteínas Hev b 3 y Hev b 1), y de la manzana (la proteína Mal d 2),
en N.benthamiana97.
VACUNAS ANTITUMORALES
En la superficie de algunos tumores, como melanoma y cáncer de mama, aparecen determinadas

proteínas denominadas antígenos tumorales contra los que algunas personas pueden desarrollar
anticuerpos. En la actualidad se está investigando sobre la posibilidad de usar estos antígenos para la
elaboración de vacunas y sobre su producción mediante distintos sistemas. Un ejemplo de un
antígeno de este tipo es el antígeno GA733-2, producido en plantas de tabaco mediante la utilización
del virus del mosaico del tabaco como vector viral98.
95
Sala, F.; Rigano, M.M.; Barbante, A.; Basso, B.; Walmsley, A.M.; Castiglione, S.(2003). Vaccine antigen production in transgenic
plants: strategies, gene constructs and perspectives. Vaccine, 21, 803-808.
96
Ma, S.; Huang, Y.; Yin, Z.; Menassa, R.; Brandle, J. E.; Jevnikar, A. M. (2004). Induction of oral tolerance to prevent diabetes
with transgenic plants requires glutamic acid decarboxylase (GAD) and IL-4, human GAD65. PNAS, 101, 5680-5685.
97
Wagner, B.; Fuchs, H.; Adhami, F.; Ma, Y.; Scheiner, O.; Breiteneder, H. (2004). Plant virus expression systems for transient
production of recombinant allergens in Nicotiana benthamiana. Methods, 32, 227-234.
98
Verch, T,, Hooper, D. C.; Kiyatkin, A.; Steplewski, Z.; Koprowski, H. (2004). Immunization with a plant-produced colorectal
cancer antigen. Cancer Immunology, Immunotherapy, 53, 92-99.
48
4.1.1.2. Anticuerpos99 idénticas y dos cadenas ligeras idénticas, unidas

mediante puentes disulfuro. Cada tipo de cadena
Los anticuerpos son glicoproteínas producidas por presenta una serie de dominios constantes y otros
el sistema inmune de los vertebrados superiores, dominios variables, que son los responsables del
capaces de reconocer y unir antígenos diana de reconocimiento y unión del antígeno. Las cadenas
manera altamente específica. Esta capacidad de pesadas presentan cuatro dominios, dos de los
reconocer y unir de manera específica distintas cuales forman una bisagra denominada región Fc,
moléculas hace que los anticuerpos puedan que permite que el anticuerpo adopte una
utilizarse para gran cantidad de aplicaciones que estructura típica en forma de Y. En la región Fc se
incluyen el diagnóstico, tratamiento y prevención encuentra un residuo de asparagina conservado
de distintas enfermedades infecciosas, que es el lugar en el que se produce la
autoinmunes y otro tipo de trastornos100. glicosilación.
Son moléculas complejas formadas por distintas Además de este tipo de Igs existen otras
cadenas polipeptídicas que se encuentran moléculas derivadas con capacidad de unir el
plegadas y ensambladas. Es fundamental que el antígeno. Dentro de estas moléculas derivadas se
plegamiento y ensamblaje sean correctos, ya que incluyen moléculas de menor tamaño (fragmentos
de lo contrario el reconocimiento del antígeno no de anticuerpos), así como otras de mayor tamaño
se producirá de manera adecuada. La estructura como la IgA secretora que es un dímero de las Igs
típica de un anticuerpo es la de las típicas. En la figura 9 se incluyen algunos tipos de
inmunoglobulinas (Igs) séricas. Consisten en anticuerpos y fragmentos de anticuerpos
tetrámeros formados por dos cadenas pesadas expresados en plantas.
99
Fischer, R.; Twyman, R. M.; Schillberg, S. (2003). Production of antibodies in plants and their use for global health.
Vaccine 21, 820–825.
100
794-805.
49
Fragmentos de anticuerpo
IgG Cadena larga sencilla de tipo camélido
Fragmento Fab’ Fragmento Fab Minibody Diabody
Dominio
variable
sencillo scFv scFv biespecífico scFv de fusión scAbs
scFv unido al scFv unido a los

péptido líder péptidos líder y KDEL IgA
IgA. Dímero de IgG unidas por los extremos

constantes mediante dos cadenas polipeptídicas
Región constante de Cadena J
denominadas componente secretor y cadena J.
la cadena pesada
Fragmentos de anticuerpos tipo camélido. Igs
características de los camélidos, formadas Región variable de Componente
exclusivamente por dos cadenas pesadas que la cadena pesada secretor
carecen de uno de los dominios.
Región constante de Punto de
Fragmentos Fab y F(ab’). Extremos N terminal de las
la cadena ligera glicosilación
dos cadenas pesadas y de las dos cadenas ligeras.
Minibodis y diabodis. Dímeros que se forman Proteína de

de manera espontánea. Región variable de
fusión
la cadena ligera
Fragmentos Fv de cadena sencilla (scFv). Contienen
regiones variables de las cadenas ligera y pesada Bisagra Péptido líder
unidas por una cadena peptídica flexible. Existen
también scFv biespecíficos y de fusión con proteínas
como enzimas o toxinas. Puente disulfuro Péptido KDEL
Figura 9. Anticuerpos y fragmentos de anticuerpos producidos en plantas.
50
Los fragmentos de anticuerpos en ocasiones son completo de las cadenas ligeras y pesadas que
más efectivos como fármacos que los anticuerpos forman el anticuerpo, lo que lleva a su
completos, ya que penetran mejor en los tejidos degradación. Tan solo se ha conseguido una
que los anticuerpos completos y se eliminan de los acumulación de anticuerpos recombinantes en el
tejidos de manera más rápida. citosol en el caso de cadenas polipeptídicas
sencillas o scFvs. Para que se produzca un plegado
Las cadenas ligeras, pesadas y el componente y ensamblaje correcto de las cadenas
secretor y la cadena de ensamblaje de los polipeptídicas es necesario dirigirlas hacia el
anticuerpos secretores están codificadas por retículo endoplásmico tal y como se ha indicado
distintos genes, de modo que para conseguir que en el apartado de tecnologías, mediante la adición
una planta exprese este tipo de moléculas es de secuencias diseñadas a este efecto en el
necesario introducir todos los genes en la planta extremo amino terminal de la proteína.
que se desea usar como biofactoría. Existen dos
estrategias para conseguirlo. La primera consiste La glicosilación es especialmente importante en
en introducir los genes que codifican para las los anticuerpos y, como se ha indicado en el
cadenas en distintas plantas y luego realizar apartado de tecnologías, el direccionamiento hacia
cruzamientos entre las plantas, seleccionando el retículo endoplásmico permite que se realice
aquellas que posean todos los transgenes que se una glicosilación adecuada.
desea. Otra estrategia es utilizar métodos que
permitan introducir todos los transgenes Se han utilizado distintas plantas para expresar
necesarios, como por ejemplo la coinfección de la anticuerpos y se han llevado a cabo numerosas
planta con distintos vectores virales. La síntesis de comparaciones para determinar los parámetros
este tipo de inmunoglobulinas mediante células de óptimos para la expresión. Existen varios tipos de
mamíferos requiere de dos tipos celulares anticuerpos recombinantes producidos en plantas
distintos. que han pasado la fase preclínica de ensayos y se
encuentran en fases de ensayo clínico, algunos en
La acumulación de anticuerpos en el citosol de la fase II101. A continuación se incluye una tabla con los
célula no es posible, debido a que en este anticuerpos y fragmentos de anticuerpos que se han
ambiente no se produce un ensamblado correcto o obtenido utilizando plantas como biofactorías.
101
794-805.
51
ANTICUERPOS Y FRAGMENTOS DE ANTICUERPOS OBTENIDOS UTILIZANDO
Nivel de
Nombre o tipo
Aplicación Antígeno Planta Órgano expresión
de anticuerpo
máximo
Antígeno Guy 13 (IgAS) 500 µg/g

Tratamiento contra
estreptocócico Nicotiana tabacum Hojas
la caries dental
superficial I/ II IgG 1 1,1% en PST
Diagnóstico glóbulos
rojos de donantes y IgG anti-humano C5-1 (IgG) Alfalfa — 1% PST
receptores
Hojas 900 ng/g

Trigo
Semillas 1,5 µg/g
29,0 µg/g
scFvT84.66
Hojas
(scFv)
Antígeno Arroz 27,0 µg/g
Tratamiento del
carcinoembriónico
cáncer
(CEA) Semillas 32 µg/g
Guisante Semillas 9 µg/g
T84.66 (IgG) Nicotiana tabacum Hojas 1,0 µg/g

agroinfiltrado con
102
T84.66/GS8 Agrobacterium Hojas —
Tratamiento del Nicotiana

Vacuna idiotípica 38C13 (scFv) Hojas 30,2 µg/g
linfoma de célula B benthamiana
Tratamiento del Antígeno Nicotiana

CO17-1A (IgG) — —
cáncer de colon de superficie benthamiana
Vacuna contra 100 µg/ml en

Tabaco infectado
el linfoma — scFv — fluido
con el TMV
no-Hodgkins103 intersticial
Virus del herpes Anti-HSV-2

Proteína HSV-2 Soja — —
simplex 2 (IgG)
scFv Nicotiana tabacum Hojas 0,01% PST
Afecciones cardiacas, Nicotiana tabacum Hojas 0,044% PST

miastenia, MAK33 IgG1
polimiosistis, Arabidopsis thaliana Hojas 0,2-0,4% PST
enfermedad de
Creatina kinasa MAK33 Fab Arabidopsis thaliana — 6,53% PST
McArdle, miopatías
humana
inflamatorias y 6-25 µg/mg
desórdenes MAK33 scFv N. tabacum —
PST
mitocondriales,
distrofia muscular Arabidopsis thaliana — 1,3% PST
Fab
N. tabacum — 0,044% PST
Sustancia P Nicotiana
— dAb Hojas 1% PST
(neuropéptido) benthamiana
Anticuerpo
Nicotiana
Actividad antirrábica Virus de la rabia monoclonal Hojas 0,07% PST
benthamiana
mAb S057
Inmunización pasiva Arabidopsis
Zealerona scFv — —
de los animales thaliana
Vacunas inmuno-
Tabaco infectado
contraceptivas para Epítopo ZP3 ZP3 — —
con el TMV*
herbívoros
Tabla 10. Anticuerpos y fragmentos de anticuerpos expresados en plantas104, 105, 106. *TMV: Virus del mosaico del tabaco.
102
Vaquero, C.; Sack, M. Schuster, F.; Finnern, R.; Drossard, J.; Schumann, D.; Reimann, A.; Fischer, R. (2002).
A carcinoembryonic antigen-specific diabody produced in tobacco. FASEB J., 16, 408-410.
103
McCormic, A. A.; Reinl, S. J.; Cameron, T. I.; Vojdani, F.; Fronefield, M.; Levy, R.; Tusé, D. (2003). Individualized human scFv
vaccines produced in plants: humoral anti-idiotype responses in vaccinated mice confirm relevance to the tumor Ig. Journal of
Immunological Methods, 278, 95-104.
(Ver notas 104, 105 y 106 en página siguiente)
52
4.1.1.3. Biofármacos La utilización de la biotecnología permitió obtener

estos productos de forma más segura, a través del
Además de anticuerpos y vacunas existen otras cultivo en biorreactores de células de
proteínas con interés biosanitario que pueden microorganismos o de mamíferos modificados
expresarse en plantas como productos genéticamente, pero aún así estos sistemas
sanguíneos, hormonas, reguladores del presentan riesgos de contaminación con toxinas o
crecimiento y enzimas con potencial terapéutico virus peligrosos para la salud de las personas y los
para tratar distintas enfermedades. animales. Además, según algunas previsiones, se
estima que para 2010 este tipo de fármacos
Según la Sociedad Española de Biotecnología en el ocupará un 35% del mercado farmacéutico. Este
año 2000 el número de proteínas y péptidos aumento de la demanda posiblemente no pueda
terapéuticos fabricados mediante técnicas de ser cubierto por los actuales sistemas de
ingeniería genética en el mercado eran obtención.
aproximadamente 50, con unas ventas anuales del
orden de decenas de miles de millones de dólares. Las plantas debido a sus características
En la mayor parte de los casos no se trata de de seguridad, capacidad de producción
fármacos nuevos, sino que son proteínas humanas, y coste, podrían ser muy adecuadas para la
que hasta la década de los 80 se obtenían en producción de este tipo de productos.
muchos casos a partir de sangre de donantes o de A continuación en la tabla 11 se indican las
órganos humanos, o a partir de animales, con el proteínas de interés biosanitario que se han
consiguiente riesgo de contaminación. expresado en plantas modificadas.
104
Daniell, H.; Streatfield, S. J.; Wycoff, K. (2001). Medical molecular farming: production of antibodies,
biopharmaceuticals and edible vaccines in plants. Trends in Plant Science, 6, 219-226.
105
Gomord, V.; Sourrouielle, C.; Fitchette, A-C.; Bardor, M.; Pagny, S.; Lerouge, P.; Faye, L. (2004). Production and glycosilation
of plant-made pharmaceuticals: the antibodies as a challenge. Plant Biotechnology Journal, 2, 83-100.
106
Schillberg, S.; Fischer, R.; Emans, N. (2003). “Molecular farming” of antibodies in plants. Naturwissenschaften, 90, 145-155.
53
PROTEÍNAS BIOFARMACÉUTICAS EXPRESADAS EN PLANTAS
Proteína Aplicación Planta Nivel de expresión
Proteína C humana Anticoagulante Tabaco <0,1%PST
0,3% proteína
Hirudina humana Inhibidor de la trombina Cánola
de la semilla
Tabaco 7% PST
Somatotropina humana Hormona de crecimiento Cloroplastos
8% PST
de tabaco107,108
Factor estimulante de las colonias

Tratamiento de la neutropenia Tabaco —
de granulocitos macrófagos
Tratamiento contra tumores y

Factor de necrosis tumoral α Patata109 15 µg/g
enfermedades infecciosas
Eritropoyetina humana Anemia Tabaco <0,01% PST
0,1% de la proteína
Encefalinas humanas Analgésicos opiáceos Arabidopsis
de la semilla
Factor de crecimiento Reparación de heridas y

Tabaco <0,01% PST
epidérmico humano control de proliferación celular
Interferón α Arroz, cánola —

Tratamiento de la hepatitis
Interferón β CyB Tabaco <0,01% PF
Tabaco 0,02% PST

Cirrosis hepática, quemaduras,
Albúmina sérica humana
cirugía 110
Tabaco 11% PST
Hemoglobina α y β humanas Sustituto sanguíneo Tabaco 0,05% PS
Colágeno homotrimérico
Colágeno Tabaco <0,01% PF
humano
Fibrosis quística,
Antitripsina α-1 humana enfermedades hepáticas y Arroz —
hemorragias
Inhibidor de la tripsina para

Aprotinina humana Maíz —
cirugía de transplantes
Antimicrobiano Patata 0,1% PST

Lactoferrina humana Fortificación de fórmulas
infantiles Arroz111 0,5% arroz descascarillado
Enzima conversora de la Tabaco,

Hipertensión —
angiotensina tomate
Nicotiana
Tricosantina Terapia VIH 2% PST
bethamiana
Glucocerebrosidasa Enfermedad de Gaucher Tabaco 1-10% PST
Insuficiencia pancreática ligada

Lipasa gástrica de perro112 Tabaco 0,5-1 mg PF
a fibrosis quística
Tabla 11. Proteínas de interés biofarmacéutico expresadas en plantas113.
107
108
Staub, J. M.; Garcia, B.; Graves J.; Hajdukiewicz, P.; Hunter, P.; Nehra, N.; Paradkar, V.; Schlittler, M.; Carroll, J. A.; Spatola, L.;
Ward, D.; Ye, G.; Russell, D. A. (2000). High-yield production of a human therapeutic protein in tobacco chloroplasts. Nature
109
Ohya, K.; Itchoda, N.; Ohashi, K.; Onuma, M.; Sugimoto, C.; Matsumura, T. (2002). Expression of biologically active human
tumor necrosis factor-alpha in transgenic potato plant. Journal of Interferon and Cytokine Research. 22, 371-378.
110
Fernández-San Millán, A.; Mingo-Castel, A.; Miller, M, Daniell, H. (2003). A chloroplast transgenic approach to hyper-express and
purify Human Serum Albumin, a protein highly susceptible to proteolytic degradation. Plant Biotechnology Journal, 1, 71-79.
111
Nandi, S.; Suzuki, Y. A.; Huang, J.; Yalda, D.; Pham, P.; Wu, L.; Bartley, G.; Huang, N.; Lönnerdal, B. (2002). Expression of
human lactoferrin in transgenic rice grains for the application in infant formula. Plant Science, 163, 713-722.
112
Mokrzycki-Issartel, N, Bouchon, B.; Farrer, S.; Berland, P.; Laparra, H, Madelmont, J-C.; Theisen, M. (2003). A transient tobacco
expression system coupled to MALDI-TOF-MS allows validation of the impact of differential targeting on structure and activity of
a recombinant therapeutic glycoprotein produced in plants. FEBS Letters, 552, 170-176.
113
Daniell, H.; Streatfield, S. J.; Wycoff, K. (2001). Medical molecular farming:production of antibodies, biopharmaceuticals and
edible vaccines in plants. Trends in Plant Science, 6, 219-226.
54
4.1.2. Proteínas de interés Las enzimas se utilizan en muchos procesos

industrial industriales, siendo de gran importancia en
industrias como las del papel y la madera,
Existen distintas proteínas que pueden industria textil, industria química, elaboración de
obtenerse mediante la utilización detergentes y producción de alimentos y piensos
de plantas con aplicaciones en la industria. En para animales114. En estas industrias las enzimas
este tipo de proteínas se incluyen enzimas de se necesitan en cantidades elevadas, lo que hace
interés industrial, péptidos capaces de formar necesario que su coste sea bajo115.
polímeros y otras proteínas que pueden utilizarse
como suplementos para alimentación animal y En la tabla 12 se incluyen ejemplos de enzimas de
humana como por ejemplo las proteínas de la interés industrial producidas en plantas, así como
leche. sus aplicaciones.
ENZIMAS DE INTERÉS INDUSTRIAL EXPRESADAS EN PLANTAS
Enzima Aplicación industrial Planta Cantidad
Industria textil (decoloración de

Lacasa fibras), clarificación de zumos y Maíz 10 g/kg grano
“bioglue” para madera
Tabaco 0,3% PST

Procesado del almidón, Nicotiana
5,0% PST
α-amilasa clarificación de vinos y zumos, benthamiana
industria de detergentes
Vicia
5 U/kg semillas
narbonensis
Producción de etanol, industria Tabaco 0,3% PST

textil, de papel y pulpa y
Glucanasa Cebada —
producción de piensos para
animales Arabidopsis 26% PST
4,1% PST
Tabaco —
Bioconversión de paredes
Xilanasa celulares, eliminación de lignina 3-6%
residual en producción de papel y
Colza 2 kU/kg semilla
mejora de la digestibilidad de las
plantas para piensos animales Guisante 8 kU/kg semilla
Xilanasa Cloroplastos
6% PST
termoestable de tabaco
Elaboración de piensos para Tabaco 14,4%

Fitasa animales. Liberación del fósforo
de los fitatos Soja —
Tabaco
Quimosina Elaboración de queso 1-0,5%
Patata
Transglutaminasa116 Procesado de alimentos Arroz —
Tabla 12. Enzimas de interés industrial expresadas en plantas117.
114
Giddings, G. (2001). Transgenic plants as protein factories. Current Opinion in Biotechnology, 12, 450–454.
115
Horn, M. E.; Woodard, S. L.; Howard, J. A. (2004). Plant molecular farming: systems and products. Plant Cell Rep.; 22,
711-720.
116
Capell, T.; Claparols, I.; Del Duca, S.; Bassie, L.; Miro, B.; Rodriguez-Montesinos, J.; Christou, P.; Serafini-Fracassini, D.
(2004) Producing transglutaminases by molecular farming in plants. Amino Acids, 26, 419-423.
117
Biesgen, C.; Hillebrand, H.; Herbers, K. (2002). Technical enzymes produced in transgenic plants. Phytochemistry
Reviews 1, 79–85.
55
Entre los polímeros basados en proteínas 4.2. Ingeniería metabólica
recombinantes se encuentran la elastina, el
colágeno y las proteínas de la seda de la araña.
La ingeniería metabólica de plantas consiste en
la modificación de las rutas enzimáticas de la
El colágeno es una proteína estructural muy utilizada planta con el fin de modificar el contenido de
en las industrias cosmética, farmacéutica y médica, determinados compuestos. Las modificaciones
para la elaboración de implantes, piel y cartílago que pueden realizarse incluyen el aumento del
artificial, injertos de huesos, etc. Un producto contenido de productos deseables, la
relacionado muy utilizado es la gelatina, que tiene disminución del contenido de productos
aplicaciones como estabilizante de vacunas y indeseables o la producción de nuevos
fármacos, para elaborar cápsulas, etc. En la compuestos que la planta no sintetizaba
actualidad su obtención es a partir de fuentes anteriormente. Para ello, puede actuarse sobre
animales lo cual lleva asociado riesgos de transmisión las rutas existentes en la planta o introducir
de enfermedades y de rechazos en el caso de los
rutas metabólicas completas que den lugar a la
implantes debido a que pueden desencadenar una
producción de compuestos nuevos.
respuesta inmune en las personas.
El colágeno está formado por tres cadenas que se

asocian formando una triple hélice. Mediante la
4.2.1. Modificación de rutas
introducción de los genes de las cadenas que enzimáticas existentes119, 120
forman la molécula se ha conseguido expresar en
plantas de tabaco las cadenas, que de manera Aunque el término “ingeniería metabólica” da idea
espontánea se ensamblan adquiriendo la de un conocimiento preciso de los sistemas que se
conformación en triple hélice de colágeno. En la están modificando, esto no siempre es así. Las
actualidad hay varias empresas interesadas en plantas pueden producir una gran cantidad de
llevar al mercado esta molécula118 (ProdiGene, compuestos de cuyas rutas de síntesis se conoce
Medicago, Meristem Therapeutics). muy poco. Existe una regulación muy estricta para
conseguir que en la planta exista un equilibrio
Otras proteínas con interés para la elaboración de entre los distintos compuestos y el conocimiento
polímeros son las espidroinas, proteínas que forman de estos mecanismos de regulación es muy
la seda de la tela de las arañas. La seda de la araña limitado. Muchas de las rutas se encuentran
se considera que es la fibra natural más fuerte que relacionadas de manera que los productos de unas
existe, es insoluble en la mayor parte de los son los sustratos de otras y, en ocasiones, varias
disolventes, incluyendo ácidos y bases diluidas, y rutas distintas conducen a la obtención del mismo
resistente a gran cantidad de enzimas proteolíticas, producto. En este caso, la actuación sobre una
por lo que tiene un gran interés industrial. Su ruta podría provocar que se active otra para
obtención en cantidades elevadas a partir de arañas compensar el cambio. Por estos motivos en la
no es posible, por lo que su producción mediante mayor parte de los casos las modificaciones se
plantas sería muy importante. De momento se han hacen por “ensayo y error”.
conseguido expresar dos tipos de espidroinas en
tabaco y patata acumulando más del 2% de la Las estrategias que pueden usarse para modificar
proteína soluble total, aunque no se ha logrado el metabolismo de las plantas dependen del tipo
formar fibras a partir de ellas. de modificación que se desee hacer.
118
794-805.
119
Capell, T.; Christou, P. (2004). Progress in plant metabolic engineering. Current Opinion in Biotechnology, 15,148–154.
120
Trethewey, R. N. (2004). Metabolite profiling as an aid to metabolic engineering in plants. Current Opinion in Plant
Biology, 7, 196–201.
56
síntesis de compuestos para poder realizar

Estrategias para disminuir la cantidad de modificaciones.
un compuesto no deseado.
Pueden modificarse las rutas de síntesis de
• Bloqueo de la síntesis de una de las enzimas componentes esenciales para la supervivencia de
de la ruta enzimática. Puede hacerse la célula vegetal (metabolismo primario) o las
reduciendo el nivel de ARN mensajero rutas de síntesis de otros componentes que no son
mediante antisentidos, cosupresión o imprescindibles para la supervivencia de la célula,
tecnologías de interferencia de ARN. pero sí para la supervivencia de la planta completa
(metabolismo secundario).
• Bloqueo de algunas de las enzimas de la
ruta mediante expresión de anticuerpos
Los componentes del metabolismo primario cuya
dirigidos contra ella.
modificación mediante ingeniería genética
• Diversificación del flujo hacia una ruta despierta mayor interés son los hidratos de
competitiva. carbono y los lípidos debido a sus aplicaciones
alimentarias e industriales.
• Incremento de la degradación del
compuesto que se desea eliminar.
Hidratos de carbono
El hidrato de carbono de reserva más abundante

en las plantas es el almidón y se encuentra en
Estrategias para aumentar la producción
distintos órganos como semillas, frutas, tubérculos
de compuestos normalmente producidos
y raíces. Se utiliza en la industria alimentaria y en
por la planta. Es lo más frecuente.
la elaboración de adhesivos, plásticos y polímeros,
y como sustrato fermentable para la obtención de
• Transferencia de una ruta o parte de una
etanol y otro tipo de compuestos químicos.
ruta metabólica de otro organismo.
• Superación de pasos limitantes de la ruta El almidón es un polímero de glucosa formado por

mediante el bloqueo de rutas competitivas y dos tipos de moléculas denominadas amilosa y
disminución de la degradación del amilopectina. La diferencia entre estas moléculas
compuesto de interés mediante es que la amilosa es una cadena lineal de glucosa,
modificaciones de la expresión de uno o mientras que la amilopectina presenta
varios genes. ramificaciones. Debido a esta diferencia, cada tipo
de molécula tiene distintas propiedades físico-
• Modificación de la expresión de los genes
químicas y el contenido relativo de cada una de
reguladores que controlan los genes de
ellas determinará las propiedades físico-químicas
biosíntesis de las distintas enzimas de la ruta.
del almidón121.
En su forma nativa el almidón tiene un número de

aplicaciones limitadas. Para conseguir que tenga
La regulación de los flujos metabólicos no está propiedades adecuadas para otro tipo de
sólo limitada por la expresión de los genes de las aplicaciones debe someterse a distintos
enzimas. Existen otros factores que influyen de tratamientos y en ocasiones es necesario realizar
manera muy importante como son la regulación modificaciones químicas.
de la actividad enzimática y la compartimentación
y transporte, tanto de las enzimas como de los Mediante la ingeniería metabólica es posible
precursores para la síntesis de los productos modificar la composición del contenido de amilosa
finales (puede ocurrir que se exprese una enzima y amilopectina del almidón, consiguiendo
en un lugar de la célula en el que no tenga acceso almidones que poseen propiedades funcionales
a los sustratos adecuados). Por este motivo, es mejoradas sin necesidad de realizar
necesario un mayor conocimiento de las rutas de modificaciones químicas.
121
Jobling, S. (2004). Improving starch for food and industrial applications. Current Opinion in Plant Biology, 7, 210-218.
57
En maíz y trigo existen mutantes naturales que Los objetivos de la ingeniería metabólica de lípidos
producen almidón que contiene exclusivamente se refieren al contenido y composición de ácidos
amilopectina. Esto se debe a que presentan daños grasos, y a la modificación de otros lípidos
en los genes que codifican para una enzima minoritarios. Se busca incrementar el contenido
involucrada específicamente en la síntesis de de determinados ácidos grasos y aumentar el
amilosa y, como consecuencia, sólo pueden contenido en aceite de las semillas.
sintetizar amilopectina. Mediante la inhibición de
los genes que codifican para esta enzima se ha Los componentes principales de los aceites
conseguido obtener variedades de patata que no vegetales son los ácidos grasos. Existen más de
contienen amilosa. 200 tipos de ácidos grasos, que se diferencian en
la longitud de la cadena y la presencia de dobles
Otro ejemplo es la obtención de tubérculos de enlaces o grupos químicos como hidroxilos, epoxi,
patata con mayor contenido en amilosa mediante acetilenos, ciclopropenos, furanos, etc., algunas
el bloqueo de la síntesis de las enzimas de cuyas rutas de síntesis se han conseguido
ramificantes responsables de la síntesis de identificar. Dentro de estos ácidos grasos sólo
amilopectina. Estos almidones con alto contenido unos pocos se producen en cantidades elevadas
en amilosa se utilizan por ejemplo para la (esteárico, linoleico, palmítico, laúrico y oleíco),
elaboración de cartón corrugado y papel y para la mientras que el resto son muy raros.
elaboración de caramelos.
En el caso de la industria alimentaria interesa
aumentar el nivel de determinados ácidos grasos
saludables, entre los que se incluyen los ácidos
El Dr. Pozueta (CSIC y Universidad Pública
de Navarra) es uno de los líderes a nivel grasos poliinsaturados, y mejorar la estabilidad de
mundial en ingeniería metabólica en los aceites para reducir la necesidad de
almidón. Su grupo ha descubierto las rutas hidrogenación. En cuanto a los ácidos grasos con
enzimáticas precursoras de la producción de propiedades saludables se han modificado plantas
almidón en plantas, habiendo conseguido del género Brassica y tabaco para que produzcan
plantas transgénicas con un alto contenido ácido γ-linoleico.
en almidón y alto balance
amilosa/amilopectina.
Para las aplicaciones industriales el interés se
centra en aumentar la expresión de ácidos grasos
poco frecuentes con propiedades funcionales
atractivas e incrementar el contenido de aceite en
Otro hidrato de carbono con importancia es la las semillas para reducir los costes de producción.
inulina, que es un compuesto de reserva que se
utiliza como sustituto de grasas en la elaboración Algunos ejemplos de cultivos de oleaginosas con
de alimentos bajos en calorías. Este hidrato de contenido en ácidos grasos modificado son cánola
carbono sólo se puede obtener de manera con alto contenido en ácido laúrico para elaborar
comercial de la achicoria. Mediante ingeniería detergentes, con alto contenido en ácido esteárico
metabólica se han introducido los genes que para elaboración de grasas, y con alto contenido
codifican para las enzimas de la ruta de síntesis de en oleato para usos en alimentación y como aceite
la inulina en otras plantas como patata o hidráulico.
remolacha.
Por último, señalar la introducción de dos genes

implicados en la síntesis de ceras en jojoba, que es
Lípidos
la única planta capaz de acumular este tipo de
compuestos, en Arabidopsis, consiguiéndose en esta
Los lípidos tienen gran importancia para su planta una acumulación de hasta un 70% de ceras
utilización, no solo en la industria alimentaria, sino en las semillas maduras. La transferencia de estos
también para la elaboración de productos que se genes a otros cultivos comerciales permitiría la
utilizan en otras industrias como detergentes y obtención de estos compuestos para distintas
jabones, recubrimientos, pinturas, lubricantes, aplicaciones entre las que se encuentran la
plásticos, derivados químicos, etc. elaboración de lubricantes industriales y cosméticos.
58
Productos del metabolismo secundario o producir suplementos dietéticos122. Las rutas

mejor conocidas son las de la formación de
flavonoides y antocianinas y las de los alcaloides,
En el metabolismo secundario se incluyen aquellas
debido a que existen sustancias de interés
rutas de síntesis de moléculas que no son
farmacéutico que pertenecen a estos grupos de
importantes para la supervivencia de la célula,
compuestos.
pero sí para la supervivencia de la planta
completa, como pigmentos de flores y frutos,
aromas, sabores, componentes tóxicos, etc. A continuación, en la tabla 13 se indican algunas de
Muchas de estas sustancias se utilizan para la las modificaciones que se han realizado en plantas
producción de medicinas, colorantes, insecticidas, mediante ingeniería metabólica para acumular
aromas y fragancias, y para enriquecer alimentos compuestos del metabolismo secundario.
EXPRESIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS
Compuesto Enzima Planta
Fitoeno sintasa de Erwinia uredovora Tomate

Licopeno
S-adenosil metionina descarboxilasa Tomate
Arabidopsis
Vitamina E (tocoferol) γ-tocoferol metil transferasa
Maíz
Fitoeno sintasa de narciso y

Vitamina A (β-caroteno) fitoeno desaturasa de Erwinia uredovora Arroz
Licopeno-β-ciclasa de narciso
Astaxantina β-Caroteno cetolasa de algas Tabaco
Flavonol Chalcona isomerasa de petunia Tomate
Arabidopsis
Isoflavonas Isoflavona sintasa Tabaco
Maíz
Caempferol Genes reguladores Lc y C1 de maíz Tomate
Quercetina Genes CH1 de petunia Tomate
Tabla 13. Ingeniería metabólica de plantas para la expresión de metabolitos secundarios123, 124.
Lignina compuestos químicos contaminantes, por lo que

existe interés en eliminar o reducir su contenido.
Un ejemplo de la utilización de la ingeniería Se han caracterizado varias enzimas de su ruta
metabólica para disminuir el contenido de un de síntesis y se ha conseguido reducir el
compuesto en una planta es la reducción de contenido de la lignina mediante la regulación de
lignina. La lignina es un polímero complejo que las enzimas 4-coumarata-CoA ligasa (4CL) o la
impregna la pared celular de muchas células cinnamil alcohol deshidrogenasa (CAD). Existen
vegetales confiriéndoles resistencia mecánica, ensayos de campo con álamo temblón con
siendo responsable de la dureza de la madera. contenido en lignina modificado. Otras especies
Para la producción de pulpa y papel a partir de la que se están barajando para realizar
madera es necesario extraer este compuesto, lo modificaciones de este tipo son chopos,
cual resulta costoso y da lugar a la formación de eucaliptos y pinos125, 126, 127.
122
Verpoorte, S. R.; Memelink, J. (2002). Engineering secondary metabolite production in plant. Current Opinion in Biotechnology,
13, 181-187.
123
Tucker, G. (2003). Nutritional enhancement of plants. Current Opinion in Biotechnology, 14, 221-225.
124
Forkmann, G.; Martens, S. (2001). Metabolic engineering and applications of flavonoids. Current Opinion in Biotechnology, 12,
155-60.
125
Mckeon, T. A. (2003). 4. Genetically modified crops for industrial products and processes and their effects on human health.
Trends in Food Science & Technology, 14, 229-241.
126
Capell, T.; Christou, P. (2004). Progress in plant metabolic engineering. Current Opinion in Biotechnology, 15, 148–154.
127
Peña, L.; and Séguin, A. (2001). Recent advances in the genetic transformation of trees. Trends in Biotechnology, 19, 500-506.
59
4.2.2. Introducción de nuevas rutas acetacetil-CoA reductasa y la PHA sintasa. Mediante
enzimáticas128 la introducción de los tres genes bacterianos que
codifican para las enzimas implicadas en su síntesis
en plastos de Arabidopsis, se ha conseguido la
La introducción en la planta de nuevas rutas que ésta
acumulación de este polímero en una cantidad
no poseía de manera natural, es la aplicación de la
superior al 40% en peso seco. La acumulación de
ingeniería metabólica que mayor éxito ha tenido.
este polímero en Arabidopsis no da lugar a
Esto se debe a que, generalmente, la planta no
problemas de fertilidad o crecimiento, pero en las
dispone de métodos de regulación endógena sobre
plantas que presentan altos contenidos se observan
rutas que no posee de manera natural.
fenómenos de clorosis.
Por tanto, para conseguir una producción adecuada

Este polímero se ha conseguido expresar en otras
es necesario asegurar que la actividad enzimática
plantas como alfalfa, mediante transformación
que se ha introducido es suficiente y que existen
cloroplástica de hoja, pero no se han logrado
sustratos disponibles. Además es necesario prevenir
producciones tan elevadas como en Arabidopsis.
la degradación del producto por las enzimas
Otras especies que se han considerado interesantes
endógenas de la planta.
para la producción de este compuesto son las
oleaginosas, ya que el PHB deriva del mismo
Existen distintos ejemplos de rutas completas que se
precursor que los aceites.
han introducido en plantas que permiten que sean
utilizadas como biofactorías de compuestos de
Recientemente se ha realizado la introducción de los
interés, como la producción de bioplásticos en
genes de la síntesis del PHB en plantas de lino
distintas especies, la producción de vitamina A en
oleaginoso (Linum usitatissimum). El lino oleaginoso
arroz y la alteración de la composición de los ácidos
es una planta que se utiliza para producir fibras de
grasos.
estopa. La producción en una misma planta de fibras
de estopa y PHB es muy interesante ya que se
Bioplásticos129 obtienen materiales formados por una matriz del
polímero reforzada con las fibras del lino, que según
los resultados parece que mejoran las propiedades
Un ejemplo de introducción de una ruta biosintética extensibles de estas fibras130.
completa es la producción de polímeros de
polihidroxialcanoatos (PHAs) en plantas transgénicas.
El inconveniente que presenta el PHB es que es un
Los PHAs son macromoléculas sintetizadas por
polímero frágil con pocos usos potenciales. Existe
bacterias que se acumulan en el citoplasma
otro copolímero denominado poli(3-hidroxibutirato-
formando gránulos y pueden alcanzar hasta un 90%
co-3-hidroxilvalerato) conocido con el nombre de
del peso seco celular. Estas moléculas muestran
Biopol, con propiedades más adecuadas que el PHB,
propiedades parecidas a algunos plásticos como el
que se ha producido en Arabidopsis y colza.
polipropileno, por lo que han despertado gran
interés, debido a que son biodegradables y
Algunas de las compañías interesadas en la
reciclables.
producción de PHAs son Monsanto, que está
trabajando en soja y colza, Zeneca Seeds, que
El PHA mejor estudiado es el poli(3-hidroxibutirato)
trabaja con colza131 y la empresa Metabolix, que se
(PHB). En la síntesis de este compuesto están
encuentra trabajando con mijo perenne, tabaco y
implicadas tres enzimas, que son la 3-cetotiolasa, la
alfalfa.
128
Trethewey, R. N. (2004). Metabolite profiling as an aid to metabolic engineering in plants. Current Opinion in Plant
Biology, 7, 196–201.
129
Capell, T.; Christou, P. (2004). Progress in plant metabolic engineering. Current Opinion in Biotechnology, 15, 148–154.
130
Wróbel, M.; Zebrowski, J.; Szopa, J. (2004). Polyhydroxybutyrate synthesis in transgenic flax. Journal of Biotechnology,
107, 41-54.
131
Reddy, C. S. K.; Rashmi, R. G.; Kalia, V. C. (2003). Polyhydroxyalkanoates: an overview. Bioresource Technology, 87,
137-146.
60
5. Legislación
Para asegurar que la aplicación de las técnicas de En este Reglamento se contemplan los aspectos
modificación genética para obtener organismos necesarios para la aplicación de la Ley. Incluye las
modificados genéticamente se hace en condiciones normas sobre información, vigilancia y control de
en las que los riesgos para la salud o para el medio las actividades de utilización confinada, liberación
ambiente sean mínimos, se ha adoptado una serie voluntaria y comercialización de OMGs, las
de medidas de garantía y control de las actividades responsabilidades, infracciones y sanciones, así
en las que se produzcan o empleen OMG. como la composición y competencias del Consejo
Interministerial de Organismos Modificados
La regulación en el ámbito de la Unión Europea se Genéticamente y de la Comisión Nacional de
realiza a través de dos Directivas básicas, que han Bioseguridad.
sido modificadas posteriormente debido a
desarrollos y adaptaciones al progreso técnico:
Este Reglamento define la utilización confinada
como “cualquier actividad por la que se modifique
• Directiva 90/219/CEE modificada por la el material genético de un organismo o por la que
Directiva 98/81/CE relativa a la utilización éste, así modificado, se cultive, almacene,
confinada de microorganismos modificados emplee, transporte, destruya o elimine, siempre
genéticamente.
que en la realización de tales actividades se
utilicen medidas de confinamiento, con el fin de
• Directiva 2001/18/CE sobre la liberación limitar su contacto con la población y el medio
intencional en el medio ambiente de organismos ambiente”.
modificados genéticamente por la que se deroga
la Directiva 90/220/CEE. Es el principal
Las actividades de utilización confinada se
instrumento legislativo en virtud del cual los
clasifican en cuatro tipos en función del riesgo
ensayos experimentales y el comercio de OMG y
para la salud humana y el medio ambiente. A cada
de productos que contengan OMG son
uno de estos tipos se le asigna el grado de
autorizados en la Comunidad Europea.
confinamiento suficiente para proteger la salud
humana y el medio ambiente. El Reglamento
Estas Directivas han sido incorporadas a la
incluye los requisitos habituales mínimos y las
legislación española a través de la Ley 9/2003, y
medidas necesarias para cada grado de
el Real Decreto 178/2004. La Ley 9/2003
confinamiento para las actividades de laboratorio,
establece el régimen jurídico de la utilización
las actividades en invernaderos y semilleros y
confinada, liberación voluntaria y comercialización
de organismos modificados genéticamente y el para actividades distintas de las de laboratorio.
Real Decreto 178/2004 incorpora las Directivas y
Decisiones de la Comisión de desarrollo y A continuación se incluye una tabla con las
adaptación posteriores y aprueba el Reglamento notificaciones de utilizaciones confinadas llevadas a
General para el Desarrollo y Ejecución de la Ley cabo en España relacionadas con la agricultura
9/2003. molecular.
61
NOTIFICACIONES DE UTILIZACIONES CONFINADAS LLEVADAS A CABO EN ESPAÑA
RELACIONADAS CON LA AGRICULTURA MOLECULAR
Nº de Fecha Objeto de Tipo Comunicación

Empresa Lugar OMG
notificación recepción modificación OMG* o autorización
Dpto. Mejora
A/ES/02/04 Genética y
10-02-02 Madrid Diversos Diversos 1y2
(a, b, c, d) Biotecnología
(INIA)
Universidad Producción
Nicotiana
A/ES/02/06 27-06-02 Pública de Navarra de proteínas 1 A C Navarra
tabacum
Navarra humanas
Producción
inóculo de
E. coli vector viral
A/ES/02/12 29-11-02 Agrenvec Madrid Arabidopsis TuMV 1 A C Madrid
thaliana Evaluación
infectividad
de plásmidos
Inoculación
Potyvirus del potyvirus
del MG en A C Cataluña
A/ES/03/15 Agrenvec Tarragona 1
mosaico plantas del 01-12-03
del nabo género
Brassica
Instituto de Producción
Biología Arroz y de proteínas
A/ES/03/17 20-11-03 Barcelona 1
Molecular de tabaco de interés
Barcelona terapéutico
Tabla 14. Notificaciones de utilizaciones confinadas llevadas a cabo en España relacionadas con la agricultura molecular.
*
Tipo 1: riesgo nulo o insignificante.
Tipo 2: bajo riesgo.
Tipo 3: riesgo moderado.
Tipo 4: alto riesgo.
En este Reglamento se define la liberación autorización expresa previa a la liberación y un

voluntaria como “la introducción deliberada en el plan de seguimiento con vistas a detectar los
medio ambiente de un organismo o combinación efectos de los OMGs sobre la salud humana o el
de OMGs, sin que hayan sido adoptadas medidas medio ambiente equivalentes, al menos, a los
específicas de confinamiento para limitar su previstos en la Ley 9/2003 y en este Reglamento.
contacto con la población y el medio ambiente y Además, deben prever los requisitos oportunos del
proporcionar a éstos un elevado nivel de tratamiento de nuevos datos, información al
seguridad”. público, datos sobre resultados de la liberación e
intercambios de información.
No será de aplicación a las sustancias y
compuestos medicinales de uso humano que En este caso, el órgano competente para su
consistan en OMGs o en combinaciones de éstos, autorización solicitará al Consejo Interministerial
o que contengan dichos organismos, siempre que de OMGs un informe sobre la evaluación del riesgo
su liberación voluntaria sea distinta a su para la salud humana y el medio ambiente.
comercialización y esté autorizada por otras
normas comunitarias o por la legislación española A continuación, en la tabla 15 se incluyen las
dictada para su cumplimiento. Estas normas notificaciones de liberaciones voluntarias llevadas
deben prever una evaluación del riesgo para la a cabo en España relacionadas con la agricultura
salud humana y el medio ambiente, una molecular.
62
NOTIFICACIONES DE LIBERACIONES VOLUNTARIAS LLEVADAS A CABO EN ESPAÑA

RELACIONADAS CON LA AGRICULTURA MOLECULAR
Superficie
Nº de Comunidad Objeto de Período de Fecha
Empresa OMG de
notificación Autónoma modificación liberación aprobación
liberación
Expresión lipasa
TEZIER Abril-octubre Sustituida
B/ES/97/24 Tabaco Valencia gástrica de
IBERICA 1997 B/ES/97/33
perro
Resistencia a
CLAUSE Mayo-
kanamicina
B/ES/97/32 Ibérica/ Tabaco Andalucía octubre 2.000 m2 7/31/1997
Producción de
BIOCEM 1997
colágeno
CLAUSE Expresión lipasa

Abril-octubre
B/ES/97/33 Ibérica/ Tabaco Andalucía gástrica de 60.000 m2 7/31/1997
1997
BIOCEM perro
Univ. Cambio de
Mayo-agosto Nav:
B/ES/99/15 Pública de Patata Navarra metabolismo de 300 m2
1999 23/06/99
Navarra carbohidratos
Producción
de proteínas
Potyvirus a partir 15 de junio-
Agrenvec, del mosaico de la 15 de Cat:
B/ES/03/40 Cataluña 30.000 m2
S. L. del nabo inoculación del septiembre 19/03/04
(TuMV) virus modificado 2003
en plantas del
género Brassica
Tabla 15. Notificaciones de liberaciones voluntarias llevadas a cabo en España relacionadas con la agricultura molecular.
Según el artículo 3 de la Ley 9/2003, la Modificados Genéticamente, adscrito al

autorización de comercialización de OMGs o Ministerio de Medio Ambiente. Dicho Consejo está
productos que los contengan, la autorización de compuesto por representantes de los Ministerios
los ensayos de campo relacionados con el examen de Medio Ambiente; Agricultura, Pesca y
técnico para la inscripción en el Registro de Alimentación; Sanidad y Consumo; Economía y
Variedades Comerciales y la vigilancia, control y Hacienda; Industria, Turismo y Comercio;
sanción, son competencias de la Administración Educación y Ciencia e Interior, todos ellos con
General del Estado (AGE). rango de Director General. El Consejo funciona en
coordinación con la Comisión Nacional de
También corresponde a la Administración General Bioseguridad, y es responsable de la coordinación
del Estado la concesión de autorizaciones de e intercambio de información con las Comunidades
utilización confinada y de liberación voluntaria de Autónomas y con la Comisión Europea.
OMGs en los siguientes casos:
Las Comunidades Autónomas son competentes
• Incorporación a medicamentos de uso humano o en la concesión de autorizaciones, (salvo los casos
veterinario, a productos y artículos sanitarios y a que corresponden a la Administración General del
aquellos que por afectar al ser humano pueden Estado) de utilización confinada y de liberación
suponer un riesgo para la salud de las personas. voluntaria de OMGs con fines de investigación y
desarrollo y cualquier otro distinto de la
comercialización; y en la vigilancia, el control, y la
• Supuestos derivados de la Ley 13/1986 de
imposición de sanciones de estas actividades, con
Fomento y Coordinación de la Investigación
excepción de las que son de competencia estatal,
Científica y Técnica cuando los programas de
según lo que se ha indicado anteriormente.
investigación sean ejecutados por las
instituciones, entes u órganos del propio Estado.
Las actividades de evaluación de riesgo de los
organismos modificados genéticamente están
Estas autorizaciones son otorgadas por el
adscritas al Ministerio de Medio Ambiente,
Consejo Interministerial de Organismos
63
conforme a lo establecido en el Real Decreto
1477/2004 por el que se desarrolla la estructura
orgánica básica del Ministerio de Medio Ambiente.
La Comisión Nacional de Bioseguridad es un

órgano colegiado de carácter consultivo cuya
función es informar sobre las solicitudes de
autorización correspondientes a organismos
modificados genéticamente. Está adscrita al
Ministerio de Medio Ambiente y compuesta por
representantes de los diferentes Ministerios
implicados y por representantes de las
Comunidades Autónomas, así como de personas e
instituciones expertas en la materia.
Además de esta normativa encaminada a

garantizar que los riesgos para la salud o el medio
ambiente derivados de las actividades en las que
se produzcan o empleen OMGs sean mínimos, es
necesaria la regulación de la coexistencia de los
cultivos de OMGs y otros tipos de cultivos
incluidos los convencionales y los ecológicos.
No existe una normativa que regule este aspecto,

pero sí se ha elaborado una Recomendación de la
Comisión (2003/556/CE), sobre las Directrices
para la elaboración de estrategias y mejores
prácticas nacionales a fin de garantizar la
coexistencia de los cultivos modificados
genéticamente con la agricultura convencional y
la agricultura ecológica. Debido a las condiciones
específicas de cada país miembro, la Comisión no
es partidaria de la elaboración de una normativa
comunitaria, sino que deja libertad a cada estado
miembro para elaborar su propia normativa
nacional. Esta Recomendación ofrece una serie
de principios y factores que deben tenerse en
cuenta para la elaboración de estrategias de
coexistencia.
En España aún no se ha aprobado una normativa

sobre coexistencia aunque existe un borrador muy
avanzado del Ministerio de Agricultura, Pesca y
Alimentación.
A continuación se incluyen tres cuadros en los que

se indican los procedimientos administrativos de
autorización de las actividades de utilización
confinada, liberación voluntaria y comercialización
de organismos modificados genéticamente.
64
UTILIZACIÓN CONFINADA DE ORGANISMOS MODIFICADOS

GENÉTICAMENTE - RD 178/2004
SOLICITANTE CC.AA. AGE*
Evaluación del riesgo de la actividad Comisión Regional

para la salud humana y el medio de Bioseguridad
ambiente Director General de
Comprobación Calidad y Evaluación
Comunicación a la Administración documental Ambiental
de la utilización de instalaciones
específicas
Secretario del Consejo
Art. 3 Ley 9/2003 Interministerial de OGMs
TIPO 1 TIPO 2 TIPOS 3 y 4
Comisión Nacional de
Bioseguridad
Mínimo
45 días
€
Mínimo Mínimo Recibo tasas Informe de conformidad
90 días 45 días
RESOLUCIÓN DE AUTORIZACIÓN
Emisión resolución
* Administración General del Estado. Comunicación de primera utilización de instalaciones.

TIPO DE ACTIVIDADES: Comunicación de utilizaciones confinadas sucesivas.
TIPO 1: RIESGO NULO O INSIGNIFICANTE Inicio de la actividad en primera utilización.
TIPO 2: BAJO RIESGO Inicio de actividad en utilizaciones sucesivas.
TIPO 3: RIESGO MODERADO Autorización expresa para primera utilización.
TIPO 4: ALTO RIESGO
Autorización expresa para sucesivas utilizaciones.
Fuente: AGRENVEC.
LIBERACIÓN VOLUNTARIA EN EL MEDIO AMBIENTE DE OGMs CON FINES

DISTINTOS A LA COMERCIALIZACIÓN - RD 178/2004
SOLICITANTE CC.AA. AGE
Comisión Regional
COMISIÓN
de Bioseguridad Director General EUROPEA
Estudio Evaluación Resumen de Calidad y 30 días
técnico del riesgo en inglés Comprobación Evaluación
documental Información
Ambiental
pública
Solicitud de autorización Secretario del Consejo

Art. 3 Ley 9/2003
Interministerial de OGMs
Comisión Nacional
Mínimo
90 días
€ Recibo tasas de Bioseguridad
RESOLUCIÓN DE AUTORIZACIÓN Emisión resolución

Informe de conformidad
Informe de resultados
Solicitud de autorización de liberación voluntaria en el medio ambiente.

Autorización expresa con condiciones particulares.
Inicio de la liberación voluntaria.
Fuente: AGRENVEC.
65
PROCEDIMIENTO DE COMERCIALIZACIÓN DE OMGs
66
Informe de evaluación + Notificación completa (30 días) Envío inmediato del SNIF*
Comisión
Formulación de observaciones y/u objeciones, Envío informe de evaluación
petición de información adicional (60 días) Europea
Observaciones
Estados
Consulta pública
miembros
Toma de Consejo (Página web JRC,
decisión Europeo 30 días)
final
Envío Informe de
Contestación a observaciones, inmediato evaluación
objeciones y envío de del SNIF de España
información adicional Informe ERMA**
Consejo
Informe de evaluación (90 días) Interministerial
Solicitud de informe
y/u objeciones, petición de

Formulación de observaciones
de OGMs
información adicional (60 días)

Envío de la notificación
Envío de la Comisión
o Formulación de
ecib notificación Nacional de
se de r observaciones ¿?
Notificador Acu Bioseguridad
(Informe
Preceptivo)
Comunidades
Autónomas
Solicitud de información adicional
Información adicional
*SNIF: Formato resumen de la notificación
**ERMA: Evaluación de riesgos medioambientales
Fuente: Ministerio de Medio Ambiente

6. Aspectos de mercado 132
Descripción del sector No obstante, las primeras moléculas procedentes de

plantas como biofactorías que se han comercializado
La agricultura molecular puede considerarse un no han sido biofármacos, sino las enzimas
subsector dentro de la biotecnología formado producidas por Prodigene y comercializadas por
principalmente por grupos de investigación de Sigma Aldrich. Esto se debe a que a la producción
centros públicos y de universidades y por de moléculas de interés industrial se le aplica una
empresas, en su mayoría de pequeño tamaño, normativa menos estricta que la que se aplica a
aunque existen algunas con un tamaño mayor y moléculas biofarmacéuticas.
un número de empleados en torno a 50 personas.
La relación entre los centros de investigación y las
empresas es muy estrecha, y en muchos casos los Empresas
centros de investigación proporcionan a las
empresas distintos servicios o los componentes La base del sector la constituyen las denominadas
técnicos de la plataforma de producción, “empresas plataforma”, que son aquellas
incluyendo herramientas de transformación, capaces de llevar a cabo la mayor parte de los
expresión, etc. procesos necesarios para la obtención de
proteínas recombinantes en plantas (incluyendo
Como se ha indicado, el principal interés las tecnologías básicas de transformación y los
de la utilización de plantas como biofactorías sistemas que permiten optimizar la producción y
es la obtención de proteínas recombinantes de purificación). Para poder operar con libertad
interés biosanitario, debido a la creciente necesitan tener el control sobre la propiedad
demanda de este tipo de productos y a la industrial, lo cual puede hacerse a través del
dificultad que entraña su obtención, y es en este desarrollo de tecnología o bien licenciando la que
sentido en el que se orientan la mayor parte de otros han patentado. Dentro de las empresas
las empresas. plataforma se diferencian dos grupos:
• Empresas con experiencia, con productos en fase de ensayo clínico o cercanos a esta fase. Se
formaron a finales de los años 90, son de tamaño mediano y contienen en sus plantillas científicos
cualificados, expertos en normativa y empresarios. Operan como plataformas de producción
completas y son capaces de producir moléculas a pequeña escala. Muchas de estas empresas han
tenido problemas financieros y la mayor parte dependen de inversores privados. A medida que los
productos avancen en los ensayos clínicos el valor de estas empresas irá aumentando, aunque es
posible que algunas desaparezcan, como ha ocurrido con CropTech. Algunos ejemplos son Large
Scale Biology, Meristem Therapeutics, Planet Biotechnology, Prodigene, Sembiosys
Genetics, Icon Genetics, Medicago, Plantechno y SunGene.
• Empresas de reciente creación, de pequeño tamaño, con menos de 10 empleados. Son

principalmente “spin-off” de centros de investigación de universidades o centros públicos. Dentro de
este grupo se incluyen desde empresas que desarrollan tecnologías hasta empresas que desarrollan
productos. Su financiación es mediante inversores semilla y subvenciones de gobiernos locales. Es
posible que aquellas empresas que desarrollan tecnologías en un futuro sean capaces de desarrollar
plataformas de producción completas o bien que se integren en empresas de mayor tamaño
dedicadas a la agricultura molecular. Dentro de este grupo se encuentran las empresas españolas
que en la actualidad se dedican a agricultura molecular como Agrenvec, Era Plantech y Plant
Bioproducts.
132
Arcand, F.; Arnison, P. (2004). Development of Novel Protein-Production Systems and Economic Opportunities &
Regulatory Challenges for Canada. www.plantpharma.org/documents/NPPS_040412.pdf.
67
Existe otro tipo de empresas dedicadas al La estrategia más adecuada para empresas
desarrollo de productos, creadas específicamente pequeñas y centros de investigación parece ser el
para este fin como “spin-out” o filiales a partir de desarrollo de la mayor cantidad posible de
otras empresas del sector farmacéutico o de la patentes en las áreas donde existan menos. Esto
biotecnología en general. No poseen una permitiría establecer acuerdos de co-licencia con
plataforma completa de producción y su objetivo los dueños de patentes dominantes, situándose en
es el desarrollo de nuevos sistemas de producción una posición defensiva más fuerte en tecnologías
o de nuevos productos de su propiedad. Es posible que facilitan la aprobación del producto, la
que el número de empresas de este tipo aumente seguridad y eficacia y la producción de biomasa.
debido a alianzas y acuerdos de licencia de
patentes en el caso de que continúe la tendencia
al desarrollo de este tipo de productos. Algunos Evolución del sector
ejemplos son Agracetus o Calgene.
Como se ha indicado a lo largo del informe, el
principal interés del sector se centra en el
Propiedad Industrial desarrollo de moléculas de interés biosanitario.
Existen ya algunos productos que han superado
Como se ha indicado para la obtención de una las etapas preclínicas y en la actualidad están en
planta que pueda usarse como una biofactoría de fase de ensayo clínico, por lo que es posible que
moléculas de interés es necesaria la utilización de en los próximos años algunos de ellos alcancen el
distintas tecnologías. Por una parte se encuentran mercado. El tiempo empleado en el desarrollo de
las tecnologías de transformación, más generales este tipo de productos implica la inmovilización del
y menos dominantes; y por otra, tecnologías capital durante periodos relativamente largos.
relacionadas con la optimización de la producción
y la mejora de la purificación y el confinamiento, A medida que se avanza en las investigaciones es
que son más específicas para cada combinación de necesario realizar nuevos aportes de capital. Por
planta/plataforma. este motivo es posible que algunas empresas
pasen a desarrollar productos no farmacéuticos
La libertad de operación puede conseguirse con un tiempo de aprobación menor y una entrada
mediante el desarrollo de actividades en el mercado más rápida, que generará
investigadoras que conduzcan a la obtención de beneficios de manera más temprana.
patentes. En caso de que la tecnología que se
necesite pertenezca a otra organización también Teniendo en cuenta estos puntos es previsible que
puede lograrse estableciendo acuerdos o alianzas, la evolución del sector se oriente hacia:
o a través del pago de licencias. Es necesario
evaluar el coste que implica el desarrollo de
• La continuación en el desarrollo de productos
tecnologías originales patentables, frente al coste
farmacéuticos, solos o en sociedad con compañías
que supone licenciar tecnologías ya existentes. Es
biofarmacéuticas. Pueden establecerse relaciones
posible que el establecimiento de acuerdos con los
entre empresas, incluyendo la subcontratación de
propietarios de la tecnología o incluso la licencia
empresas de agricultura molecular por
de la patente, sean más beneficiosos que la
farmacéuticas para el desarrollo de productos
inversión que supone el desarrollo de la
concretos y, en algunos casos, la compra de estas
tecnología.
empresas de modo que pasen a ser unidades
integradas dentro de las biofarmacéuticas.
Sin embargo, la obtención de patentes de Excepcionalmente, algunas empresas dedicadas al
tecnologías originales permite a la empresa elegir desarrollo de plantas como biofactorías de
entre varias posibilidades: moléculas de interés terapéutico, crecerán para
convertirse en empresas farmacéuticas integradas.
• Una estrategia monopolista para evitar que otros
exploten su tecnología. • El desarrollo de productos no farmacéuticos. En
este tipo de productos se incluyen productos de
• Una estrategia de licencias que les proporcione
interés industrial, productos dedicados al
ingresos procedentes de las ventas de otras
cuidado personal y reactivos de laboratorio. Son
empresas.
productos que requieren un tiempo de
• El establecimiento de colaboraciones que les aprobación menor que los farmacéuticos, de
permitan acceder a la tecnología de otras modo que podrán entrar antes en el mercado y
empresas. generar ingresos.
68
• El desarrollo de productos en tejidos comestibles completado la fase I de ensayo clínico), contra

para la elaboración de productos farmacéuticos o no papilomavirus y contra parvovirus.
farmacéuticos cuya administración pueda realizarse
sin necesidad de purificación, bien por vía oral o por Colaboraciones:
vía dérmica. Este tipo de productos, como se ha
indicado, presentan ventajas económicas porque
• Colaboración con ProdiGene Inc., para el
evitan la etapa de purificación, pero existen algunos
desarrollo de anticuerpos terapéuticos.
retos técnicos y obstáculos legislativos.
Prodigene desarrollará las construcciones
genéticas para la transformación y Large
A continuación se indican algunos ejemplos de Scale Biology Corp. usará sus tecnologías de
empresas que poseen productos en fase de bioprocesamiento y extracción para purificar
ensayo clínico, relativamente cercanos a la los anticuerpos de manera eficiente y
comercialización. económica.
• Colaboración con el US Naval Medical Research

LARGE SCALE BIOLOGY CORP. Center, en el estudio de nuevas proteínas
California, Estados Unidos capaces de estimular el crecimento de las células
www.lsbc.com de la médula ósea y células madre.
Es una empresa estadounidense de tamaño Su estrategia de protección de su propiedad

medio, con 130 profesionales, fundada en 1987. industrial está encaminada a asegurarse libertad
Se dedica a la investigación, análisis, de operación en todas sus áreas de negocio. En el
manufactura y comercialización de proteínas. campo de GENEWARE® poseen 17 patentes
estadounidenses y 47 en otros países, cuyas
Mantiene colaboraciones con distintos centros y duraciones están entre 2011 y 2018. Poseen otras
empresas entre los que se encuentran algunas patentes relacionadas con proteómica, genómica y
relacionadas con la agricultura molecular como biomanufactura.
Dow AgroSciences LLC, Prodigene Inc. o
Plant Bioscience Ltd.
MERISTEM THERAPEUTICS
Clermont-Ferrand, Francia (subsidiaria en
Poseen una tecnología basada en la utilización
Massachusetts, Estados Unidos)
de vectores virales denominada GENEWARE®.
www.meristem-therapeutics.com
Ésta permite testar la función de nuevos genes,
las proteínas codificadas por ellos, la producción
en masa y purificación de proteínas Es una empresa de tamaño medio con alrededor
recombinantes en plantas de tabaco y la de 60 trabajadores, de los cuales 40 son
evaluación de la expresión transitoria de genes científicos. Fundada en 1997 para desarrollar un
foráneos. Usan el virus del mosaico del tabaco y programa de investigación denominado Molecular
tienen autorización de APHIS (Animal and Plant Pharming®, que se inició en 1992 por el Grupo
Health Inspection Service) para realizar ensayos Limagrain y cuyo objetivo se centraba en la
de campo con este virus. producción de proteínas terapéuticas
recombinantes derivadas de plantas. El Grupo
Limagrain contribuyó con su propiedad industrial,
Poseen varios productos en distintas fases de
desarrollo y colaboraciones para el desarrollo de resultados científicos, material y know-how. En la
otros productos nuevos: actualidad es líder en la producción de proteínas

terapéuticas recombinantes en plantas para la
industria farmacéutica.
Desarrollo de productos:
Mantiene colaboraciones con distintas empresas

• α-galactosidasa A para el tratamiento de la
como Stallergenes, para evaluar la viabilidad
enfermedad de Fabry (en fase de ensayo
industrial y producción de dos alérgenos de
clínico), lipasa ácida lisosomal (LAL en sus
ácaros en plantas; con Mitsubishi Pharma
siglas en inglés), para terapia cardiovascular y
Corp y Eli Lilly Co., para la producción de
una nueva generación de compuestos
proteínas recombinantes en plantas, y con el
biológicos como aprotinina e interferón.
Grupo Limagrain, que les proporciona
• Vacunas personalizadas contra el linfoma infraestructuras agrícolas y su banco de
no-Hodgkins (en la actualidad se ha germoplasma.
69
Posee una plataforma denominada Molecular plantas (incluyendo lipasa, lactoferrina,
Pharming® Platform Technology, que incluye hemoglobina y colágeno) y herramientas de la
desde la tecnología de transformación biología molecular (promotores y vectores
(agroinfiltración y transformación estable de para aumentar la expresión de proteínas
tabaco y maíz) hasta la fase final de purificación. recombinantes en plantas dicotiledóneas y
monocotiledóneas).
Poseen varios productos en distintas fases de
• Patentes relacionadas con la extracción y
desarrollo:
purificación.
• Lipasa gástrica para el tratamiento de la • Patentes relacionadas con la producción de

insuficiencia exocrina pancreática en pacientes plantas (aumento de la producción e inhibición
afectados por fibrosis quística o patologías de la germinación).
pancreáticas, expresada en maíz. Se han
realizado los ensayos clínicos en fase I siendo Además han firmado acuerdos de licencia
satisfactorios, por lo que en la actualidad se exclusivos y no exclusivos de patentes con otras
encuentra en fase II en Alemania y Francia y empresas como Von Schawen, Japan
se espera que esté en el mercado en Europa Tobacco, Pangene, Calgene y Mogen
entre 2007-2008. Han obtenido el “orphan Licensing y con la fundación Cornell Research
drug status” en Europa. Foundation.
• Albúmina sérica humana. Han conseguido

producir cantidades de miligramos en tabaco,
con un correcto patrón de plegado. Colaboran PLANET BIOTECHNOLOGY INC.
con la empresa Pangene, para el desarrollo de California, Estados Unidos
una técnica que permita su expresión en maíz. www.planetbiotechnology.com
• Lactoferrina en fase I de ensayos clínicos, para

Es una empresa estadounidense
tratamiento de infecciones gastrointestinales y
dedicada a la investigación, desarrollo y
síndrome del ojo seco en maíz.
comercialización de nuevos productos
• Alérgenos recombinantes de los ácaros del terapéuticos y preventivos basados en
polvo. anticuerpos monoclonales obtenidos de plantas
genéticamente modificadas.
• Producción de colágeno humano en plantas.
Han conseguido producir cantidades de
Poseen una tecnología para la producción de
gramos en tabaco. Producen dos tipos de
inmunoglobulina A (Protected-SIgA™) en
colágeno, una forma hidroxilada, que forma
plantas transgénicas. Es la primera empresa en
fibras y es estable a temperaturas con
el mundo que ha conseguido producir y testar
relevancia biológica y un tipo no hidroxilado
clínicamente de manera exitosa un anticuerpo
que podría usarse como pegamento biológico.
en plantas de tabaco.
• Se encuentran investigando la producción de
otras proteínas recombinantes complejas Se han centrado en el desarrollo de drogas
como la hemoglobina humana en tabaco y preventivas y terapéuticas en tres mercados
anticuerpos monoclonales, de los que han médicos amplios no referidos a enfermedades
conseguido obtener cantidades de miligramos mortales. Poseen tres productos en desarrollo:
de anticuerpos monoclonales completos y
conformados en tabaco. • CaroRx™. Anticuerpo para prevenir la caries
dental. Están en ensayos en fase II para
Poseen una autorización de APHIS para realizar desarrollar IgGs.
ensayos de campo con maíz.
• RhinoRx™. Anticuerpo para tratar los
catarros debidos a rinovirus. Ensayos en fase
En cuanto a su estrategia en el ámbito de la
I. Anti-ICAM-1 SIgA tópico para rinovirus en
propiedad industrial, poseen patentes pertenecientes
tabaco.
a distintas familias, entre las que se incluyen:
• DoxoRx™. Anticuerpo para el tratamiento de
• Patentes que cubren la producción y la alopecia inducida por el tratamiento
aislamiento de distintas clases de proteínas en quimioterapéutico.
70
– Lacasa. Es una enzima redox que se usa

PRODIGENE INC como blanqueante en distintas industrias.
Texas, Estados Unidos
www.prodigene.com Su propiedad industrial les permite tener una
posición fuerte frente a empresas competidoras.
Es una empresa estadounidense pionera en el Combinan el desarrollo y comercialización de los
uso de plantas transgénicas para producir productos de los que son propietarios de
proteínas recombinantes con uso en el campo manera independiente, con colaboraciones y
farmacéutico, industrial y de la salud animal. Es alianzas con otras compañías para la fabricación
la primera empresa que ha desarrollado y de proteínas de interés terapéutico e industrial.
comercializado este tipo de productos.
Han colaborado con empresas farmacéuticas y Existen otras empresas que han desarrollado
dedicadas a la agricultura molecular como tecnologías específicas para mejorar alguno de los
Genencor Inc, Pharmaceutical Inc., Large puntos para optimizar la producción de proteínas
Scale Biology Corp., Avant recombinantes en plantas. A continuación se
Immunotherapeutics Inc., Eli Lilly & Co. y indican algunas de ellas:
Stauffer Biotech.
Son propietarios de una plataforma tecnológica

SEMBIOSYS GENETICS INC.
para la expresión de proteínas recombinantes en
Alberta, Canadá
maíz. Su sistema de producción abarca desde el
www.sembiosys.ca
aislamiento del gen de interés hasta la purificación
de la proteína producida por este gen. Es una empresa canadiense cuya actividad se
centra en el desarrollo, comercialización y
Poseen una gran cantidad de productos en
producción de proteínas de interés farmacéutico
desarrollo: y no farmacéutico en plantas mediante la
utilización de herramientas de la ingeniería
• Vacunas. Han desarrollado vacunas contra la
genética y su plataforma tecnológica
hepatitis B y contra la gastroenteritis
denominada cuerpo lipídico-oleosina.
bacteriana (gastroenteritis del “viajero”) que
se encuentran en fase I de ensayo clínico. La plataforma cuerpo lipídico-oleosina está
Están desarrollando otras vacunas contra el dirigida a la producción y purificación de
virus de la gastroenteritis transmisible porcina proteínas recombinantes en cártamo, que es
y se encuentran colaborando en proyectos una planta oleaginosa. Esta plataforma permite
para el desarrollo de otras vacunas animales una purificación eficiente y económica de las
que son confidenciales. proteínas recombinantes mediante el anclaje de
• Productos terapéuticos humanos. Han las mismas a los cuerpos lipídicos lo que permite
comercializado una proteína terapéutica que una recuperación y purificación simultánea,
se utiliza en cirugía para prevenir las pérdidas junto con una producción a gran escala.
de sangre denominada aprotinina bajo el
Poseen colaboraciones con Dow Agrosciences
nombre de AproliZean™.
y en 2003 firmaron un acuerdo con Syngenta
• Anticuerpos. Participation AG, que le permite a Syngenta
usar su tecnología para la producción de sus
• Productos para usos no clínicos:
compuestos biológicos.
– TrypZean™ (tripsina). Es una enzima
proteasa que se utiliza como intermediario Han desarrollado varios productos y sistemas de
en la industria farmacéutica en el proceso de desarrollo de productos basados en esta
fabricación de determinados productos. plataforma:
– AproliZean™ (aprotinina). Es un inhibidor de

• Stratosome™ Biologics System y Affinity
proteasas que se usa como reactivo en
Capture System. Esta tecnología permite la
cultivos celulares.
producción y purificación de proteínas
– Avidina. Es una molécula utilizada como recombinantes dirigiendo las mismas hacia los
reactivo de diagnóstico y posee aplicaciones cuerpos lipídicos y purificando éstos
en la purificación de proteínas. posteriormente.
71
• StratoCapture™ Purification System. Sistema El científico principal y creador de la empresa,
basado en la unión de la proteína A a las Henry Daniell, patentó por primera vez la
oleosinas que permite la purificación sencilla expresión de genes en cloroplastos en 1988.
de anticuerpos producidos en plantas. Desde entonces, ha patentado distintas
tecnologías relacionadas con la transformación
Además pretenden utilizar su plataforma para de cloroplastos y secuencias reguladoras de la
optimizar la producción de las siguientes expresión de los genes introducidos
proteínas: exclusivamente en estos orgánulos. Por tanto,
las patentes más antiguas y dominantes en este
campo son de su propiedad.
• Insulina. Se encuentra en fase de
investigación, y creen que podría estar en el
Sus estrategias de mercado se centran en el
mercado a partir de 2008-2009.
desarrollo de proteínas de interés farmacéutico,
• Apolipoproteína A-I y A-IMIlano para reducir y bien mediante la licencia de su tecnología para
estabilizar la formación de placas de ateroma co-desarrollar estos productos o bien
que se asocian con enfermedades proporcionando la tecnología a empresas del
cardiovasculares. Estos productos se sector farmacéutico para el desarrollo y
encuentran en fase de investigación y se fabricación de proteínas de interés sin licenciar
espera que puedan estar en el mercado en su tecnología. Otra posibilidad que barajan es la
2011. asociación con otras empresas pertenecientes a
mercados distintos del farmacéutico, como el
desarrollo de alimentos o piensos, y productos
Poseen una cartera de patentes que les permite
industriales, con posibilidad de licenciar su
la comercialización en exclusiva de su
tecnología de transformación de cloroplastos.
plataforma de producción.
Por último, mencionaremos tres empresas

CHLOROGEN
españolas dedicadas a la agricultura molecular:
Missouri, Estados Unidos
www.chlorogen.com
AGRENVEC
Empresa estadounidense fundada en 2002 que Madrid, España
se dedica a la transformación de cloroplastos www.agrenvec.es
para el desarrollo de fármacos y otros
productos.
Nace en 2001 como una spin-off, a partir de la
licencia de una patente del INIA (Instituto
Ha conseguido expresar distintos tipos de Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y
proteínas con interés terapéutico e industrial en Alimentaria) y con la participación de la
cloroplastos de tabaco, entre los que se empresa de capital riesgo NAJETI España. La
encuentran: iniciativa de Agrenvec ha sido respaldada por el
CDTI (Centro para el Desarrollo Tecnológico
• Medicamentos y vacunas: albúmina sérica Industrial), del Ministerio de Ciencia y
humana para usos terapéuticos y no Tecnología, a través de la concesión de un
terapéuticos, interferón para enfermedades proyecto NEOTEC, para la creación de nuevas
hepáticas, factor de crecimiento tipo insulina empresas de base tecnológica.
(insulin-like growth factor) para tratamiento
de diabetes, y vacunas contra cólera, antrax y Poseen una plataforma tecnológica basada en la
peste. utilización de vectores virales para la utilización
de plantas como biofactorías. Utilizan el vector
• Biopolímeros: han expresado en tabaco viral p35Tunos-vec01 derivado del virus del
proteínas que producen polímeros para usos mosaico del nabo (virus TuMV).
industriales, como la elastina y el 4HB, que es
un componente de un polímero de cristal Las moléculas producidas en plantas biofactoría
líquido denominado zenita. de interés para esta empresa son
principalmente enzimas con aplicaciones en los
Poseen una autorización de APHIS para el campos industrial, agrícola, terapéutico y
cultivo de tabaco. medioambiental.
72
Ha establecido colaboraciones con centros públicos

de investigación y con empresas privadas de PLANT BIOPRODUCTS, S.L.
biotecnología, lo que le permite el uso de Madrid, España
tecnologías complementarias y el desarrollo de www.plantbioproducts.com
nuevos productos no disponibles en el mercado.
Es una empresa creada en marzo de 2003 a
partir de una idea empresarial de Ignacio
ERA PLANTECH Moreno Echanove.
Barcelona, España
www.eraplantech.com En junio de 2004 firmaron un convenio de
colaboración con el departamento de
Es una empresa ubicada en la Bioincubadora del Biotecnología del Instituto Nacional de
Parque Científico de Barcelona, que produce Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria
péptidos y proteínas recombinantes de interés (INIA) que permite la incubación de su proyecto
terapéutico o industrial en plantas. de I+D en dicho centro. La firma de este
convenio fue auspiciada por la Fundación
Sus principales socios son Advancell —gestión Genoma España, que además le presta apoyo
y desarrollo de negocio— y BCN Emprèn, que financiero y oferta de servicios. Posteriormente
es una empresa de capital riesgo. se han sumado a este proyecto el Instituto
Nacional de Investigaciones Agropecuarias de
Posee una plataforma tecnológica denominada Argentina (INTA) y un profesor titular de la
ZERA™, que permite la acumulación de Universidad Pública de Navarra.
proteínas y péptidos en las plantas. Utiliza
dominios de almacenamiento en el retículo El proyecto consiste en el desarrollo de una
endoplásmico, consiguiendo una acumulación plataforma tecnológica basada en la
elevada de la proteína recombinante. La modificación genética de cloroplastos de plantas
plataforma incluye todas las etapas del proceso superiores para producción de aplicaciones
de obtención de proteínas recombinantes en comerciales en las que se utilizará el material
plantas, incluyendo la transformación mediante vegetal en bruto. Algunos ejemplos de estas
Agrobacterium, la purificación y la validación de aplicaciones son la utilización de celulasas para
las proteínas diana. Ha conseguido producir con la conversión de biomasa celulásica en
éxito calcitonina en plantas de tabaco. bioalcohol o la producción de antígenos
vacunales de administración oral.
En la actualidad se encuentra optimizando la
tecnología ZERA™ para asegurar su viabilidad y
En la actualidad se encuentra trabajando en
competitividad, para lo cual se le ha concedido
varios productos con el fin de validar sus logros
un proyecto NEOTEC. Está investigando en
tecnológicos, a la vez que desarrolla sus
nuevos sistemas de expresión constitutiva,
primeras aplicaciones industriales. Estos
expresión específica en semillas y la elaboración
productos son un antígeno que protege frente a
de una cartera de productos propios.
la enfermedad hemorrágica del conejo y un
antígeno inmunocompetente para el control de
Sus científicos fundadores son Dolors Ludevid y
la fiebre aftosa bovina.
Margarita Torrent, y cuenta con los
investigadores Blanca Llompart y Miriam
Bastida. En Biospain 2004 se realizó la Se encuentra interesada en colaborar con
presentación del nuevo Director General de la empresas e instituciones que dispongan de
empresa, François Arcand. productos y/o aplicaciones de su propiedad
compatibles con la expresión genética en
Posee una solicitud de patente para la cloroplastos y que deseen utilizar una
producción de péptidos y proteínas por plataforma sencilla de producción para validar
acumulación de las mismas en cuerpos proteicos sus aplicaciones.
derivados del retículo endoplásmico, mediante la
utilización de dominios de la proteína γ-zeina, Sus colaboradores científicos son José Ángel
capaz de dirigir y retener la proteína hacia el Martínez Escribano (investigador del Dpto. de
retículo endoplásmico. (US 20040005660: Biotecnología del INIA), Daniel Mariano Pérez
Production of peptides and proteins by Filgueira (investigador asociado del INIA) y Jon
accumulation in plant endoplasmic reticulum- Veramendi Charola (profesor titular de la
derived protein bodies). Universidad Pública de Navarra).
73
7. Aspectos socioeconómicos
La utilización de plantas como biofactorías tiene múltiples ventajas sobre otros tipos de sistemas de
producción, pero presenta una serie de factores críticos que deben ser tenidos en cuenta. Entre ellos se
encuentran los riesgos para el medio ambiente y para la salud que puedan producirse como consecuencia
del cultivo de este tipo de plantas al aire libre. Otros derivan de la posibilidad de pasar a la cadena
alimentaria 133.
El abordaje de algunos de estos factores críticos puede llevarse a cabo mediante el desarrollo de estrategias
tecnológicas. En otros casos, será necesario el establecimiento de técnicas de cultivo especiales como el cultivo
con medidas de confinamiento, como invernaderos con barreras contra polen y animales, túneles de plástico e
incluso minas y cuevas. En cualquier caso, la adopción de estas medidas lleva asociada un coste económico.
En 2002 la empresa Prodigene se vio implicada en dos casos de contaminación de cultivos de soja
con maíz modificado genéticamente que se había cultivado anteriormente en esos campos. La
empresa realizó ensayos de campo con un maíz modificado para producir un antígeno para elaborar
una vacuna contra el virus de la gastroenteritis transmisible porcina. Tras la recolección de este maíz
se realizó una nueva siembra, que en este caso fue de soja, pero no se llevó a cabo una limpieza
correcta de dos de los campos, de modo que quedaron restos de maíz transgénico, que creció junto
con la soja contaminando este cultivo. Inspectores del APHIS que realizaban controles de campo,
detectaron la contaminación e indicaron la necesidad de destruir las semillas y plantas dentro de un
radio de 1.320 pies del lugar donde se había realizado el ensayo. En uno de los campos se llevó a
cabo esta destrucción, bajo la supervisión de inspectores del APHIS, pero en el otro se llegó a
recolectar la soja. Esta soja contaminada con el maíz transgénico fue enviada a un elevador de grano,
donde se mezcló con 500.000 celemines de soja procedente de otros campos, por lo que fue
necesario que el USDA destruyese toda la soja que había en el elevador. Como consecuencia de estos
incidentes, la empresa Prodigene fue condenada a pagar una multa de 250.000 dólares y ha debido
reembolsar al USDA el coste que tuvo la adquisición y destrucción de la soja contaminada en los
elevadores de grano 134.
En el incidente que ocurrió con la empresa todavía no presentaban semillas por lo que la
Prodigene la cantidad de maíz que contaminó el cantidad de proteína que se encontraba en esos
elevador de grano fue muy pequeña, ya que en el 650 gramos de tejido era realmente muy
campo de cultivo se contabilizaron menos de 10 pequeña, y en 500.000 celemines de soja era una
plantas. Se estima que al elevador de grano debió cantidad casi inapreciable. Posteriormente la FDA
llegar aproximadamente el equivalente a 650 admitió en una nota de prensa que aunque el
gramos de tejido de maíz, ya que durante la material procedente del maíz nunca debió haber
recolección de la soja se separan las hojas de las contaminado la soja, no había existido riesgo para
legumbres, que son las que se llevan al silo, de la salud humana ya que éste se hubiese derivado
modo que la mayor parte de las plantas de maíz de una ingesta elevada del producto que podría
se debieron eliminar durante el cosechado. haber provocado reacciones alérgicas 135.
Además, la proteína transgénica que producían
estas plantas llevaba un promotor específico de Este incidente ha marcado un hito importante.
semilla, por lo que era en este tejido en el que se Para algunos grupos demuestra el gran riesgo que
acumulaba. Las plantas de maíz en el momento de supone el cultivo de plantas como biofactorías de
la recolección no habían alcanzado la madurez y productos farmacéuticos, frente a otros para los
133
Huot, M. F (2003). Plant Molecular Farming: Issues and Challenges for Canadian Regulators. Option Consommateurs.
134
www.aphis.usda.gov/brs/compliance9.html
135
U.S. Food and Drug Administration. FDA Action on Corn Bioengineered to Produce Pharmaceutical Material. November
19, 2002. www.fda.gov/bbs/topics/ANSWERS/2002/ANS01174.html
74
que se demuestra la eficacia de las medidas de una adaptación de las infraestructuras y desarrollar
control de las autoridades. En cualquier caso, nuevos procedimientos de cultivo y recolección, que
parece que este incidente se derivó de unas malas cambiarían el concepto que se tiene actualmente de
prácticas agrícolas, más que de otro tipo de la agricultura. En el caso de plantas biofactoría, la
factores críticos. empresa propietaria es dueña no sólo de las
semillas, sino de todo lo que se produzca a partir
El grupo de trabajo de la Biotechnology Industry de ellas. El cultivo de estas plantas debe realizarse
Organization (BIO en sus siglas en inglés) ha tal y como la empresa indique.
desarrollado guías de prácticas genéricas de
confinamiento, que contienen una serie de Las relaciones que se establecen entre las
medidas de control de la exposición
empresas propietarias de las plantas y los
complementarias que incluyen:
agricultores pueden ser de varios tipos. Una
posibilidad es que el agricultor propietario de la
• Aplicación de sistemas de Análisis de Contención tierra realice el cultivo de las plantas transgénicas
y Puntos de Control Crítico (CACCP en sus siglas siguiendo las normas marcadas por la empresa,
en inglés) para el diseño de prácticas de cultivo
que debe encargarse de su entrenamiento. Otra
que aseguren un alto grado de seguridad,
opción es que la empresa se encargue de todo el
adaptados a cada combinación de planta,
proceso de cultivo de las plantas mediante la
plataforma y producto.
contratación y entrenamiento de personal y pague
un precio al agricultor por el uso de sus tierras.
• Medidas de confinamiento agronómico. Son
procedimientos estándar de operación
Para analizar la rentabilidad de la agricultura
específicos para cada combinación de planta y
molecular para el agricultor, en el caso de que sea
plataforma de producción, que se pueden
éste el que se encargue de cultivar las plantas
considerar el equivalente a las Buenas Prácticas
transgénicas, es necesario tener en cuenta
de Fabricación y por analogía se llaman Buenas
Prácticas Agronómicas. Su diseño debe hacerse distintos factores:136
en función de la naturaleza y riesgo del producto
que se desea producir. • Cantidad de terreno dedicado.
• Viabilidad del sistema de producción.

• Medidas de bioconfinamiento. Son propiedades
de la biofactoría que previenen algunos riesgos • Inversiones del productor en tiempo y dinero
de escape, como la transformación de que requiera el cultivo.
cloroplastos, la utilización de promotores • Responsabilidad del agricultor en caso de
inducibles tras la recolección o la esterilidad
contaminación.
masculina, que se utiliza para evitar el flujo de
polen. • Seguros.
• Implicación en la distribución.
Estas medidas han sido adoptadas por la gran
mayoría de las empresas pertenecientes a esta • Pérdida de independencia.
organización dedicadas a la agricultura molecular • Efectos potenciales de la agricultura molecular
y es probable que se conviertan en estándares en la salud del agricultor.
industriales y que sean adoptadas por otras
empresas no pertenecientes a esta organización y • Infraestructura administrativa, científica y
por centros de investigación públicos. reglamentación.
Como se ha indicado, unas malas prácticas Aunque existen empresas propietarias de

agrícolas pueden dar lugar a problemas muy biofactorías que han optado por este tipo de
serios que pueden llegar a hundir a una pequeña relación con grupos de agricultores especializados,
empresa. Es muy importante aplicar todas las parece que la tendencia se dirige hacia el alquiler
medidas necesarias para evitar posibles de las tierras al agricultor y contratación de
contaminaciones. Para ello, es necesario realizar personal especializado para las labores de cultivo.
136
Huot, M. F. (2003). Plant Molecular Farming: Issues and Challenges for Canadian Regulators. Option Consommateurs.
75
Otro de los factores críticos que se indicaban es el • Certificación de las fuentes de la cadena
riesgo de contaminación de la cadena alimentaria. alimentaria.
Esto hace que, a la hora de evaluar la aceptación
• Monitorización y control rigurosos con
de las plantas como biofactorías, sea necesario
programas de auditoría que permitan verificar
tener en cuenta a otros agentes muy importantes
que las medidas de contención y confinamiento
que son aquellos implicados en la producción de
son efectivas.
alimentos. La US National Food Processing
Association 137 (NFPA en sus siglas en inglés), ha • Mejora de las actividades de inspección.
manifestado su opinión con respecto a la Sugieren que las inspecciones deben llevarse a
utilización de plantas para producir compuestos de cabo al menos en las fases críticas de la
interés farmacéutico e industrial. En esta producción, incluyendo etapas como el cultivo,
asociación, aunque entienden los beneficios de la polinización y cosechado de las plantas, así
producción de dichos compuestos en plantas, como en el procesado y eliminación de los
creen que el principal objetivo del gobierno debe residuos.
ser mantener un suministro de alimentos seguro y
sano. Opinan que la presencia accidental de este • Establecimiento de un sistema de análisis de
tipo de productos en la cadena alimentaria, debido peligros y puntos de control crítico semejante al
a los riesgos para la salud que presentan, podría que se utiliza en la industria alimentaria para
desencadenar nuevas crisis alimentarias como las realizar un análisis sistemático que permita
que han sucedido en los últimos años detectar los peligros potenciales y las medidas
(encefalopatía espongiforme bovina, dioxinas en de prevención relevantes.
pollos, etc). Por este motivo, demandan una
tolerancia cero a la presencia de estos compuestos Como se ha indicado, algunas de estas medidas
en los alimentos. Para conseguir esto exigen que como la monitorización, la redundancia en los
se asegure una protección contra la contaminación sistemas de confinamiento, la segregación
del 100%, mediante el empleo de plantas no geográfica de cosechas en el caso del maíz y la
comestibles para la expresión de proteínas aplicación de sistemas de Análisis de Contención y
recombinantes. Sólo en el caso de que esto no Puntos de Control Crítico, están siendo llevadas a
fuese posible aceptarían la utilización de especies cabo por las empresas pertenecientes a la
comestibles, pero con unas medidas de control Biotechnology Industry Organization 139.
muy estrictas entre las que incluyen138:
Por último, es necesario tener en cuenta cuál es la

• Sistemas de contención redundantes en función opinión de los consumidores sobre este tipo de
del riesgo, que deben incluir tanto el riesgo plantas. La percepción social de los OMGs es muy
debido a la especificidad biológica de la planta diferente en función de cuál sea su uso. Según el
(exposición) como el riesgo debido a la proteína Comité Asesor de Ética en la Investigación
que se está produciendo. Científica y Técnica de la Fundación Española para
• Segregación geográfica de cultivos. la Ciencia y la Tecnología (FECYT), en el caso de

las plantas modificadas genéticamente para la
• Fenotipos diferenciales que permitan distinguir a producción de alimentos existe una percepción
simple vista las biofactorías de la planta no negativa y un cierto rechazo que en algunos casos
transformada. se deben a cierta subjetividad, desinformación e
incluso manipulación. En este tipo de plantas las
• Desarrollo de normativas de obligado
modificaciones genéticas realizadas le
cumplimiento en lugar de guías de
proporcionan a la planta ventajas para el
recomendaciones.
desarrollo y supervivencia de los cultivos, como
• Seguros de responsabilidades. tolerancia a herbicidas o resistencia frente a
137
Asociación estadounidense representante de una gran parte de la industria de transformación de alimentos en temas de
política científica y pública, relacionados con la seguridad alimentaria, la nutrición y otros aspectos relacionados con el
consumidor.
138
www.nfpa-food.org/content/regulatory/comments_view.asp?id=43
139
Arcand, F.; Arnison, P. (2004). Development of Novel Protein-Production Systems and Economic Opportunities &
Regulatory Challenges for Canada. www.plantpharma.org/documents/NPPS_040412.pdf.
76
plagas, que los consumidores no consideran como

un beneficio directo. En muchos casos,
únicamente perciben los riesgos medioambientales
y sanitarios, debidos a la posibilidad de que se
produzcan alergias u otras reacciones adversas
por el consumo de estos organismos. También
creen que sólo se benefician las grandes
compañías propietarias de las semillas. Sin
embargo, en el caso de los OMGs para uso
farmacéutico no existe esta percepción negativa y
el consumidor considera que hay beneficios
directos y se posiciona favorablemente frente a
este tipo de productos140.
En el caso de la utilización de plantas como

biofactorías para producir compuestos de interés
farmacéutico es difícil saber en qué sentido se
decantará la opinión pública. Por una parte, cabría
esperar la aceptación de los productos finales y
por otra, es posible que la liberación al medio
ambiente de este tipo de plantas genere cierto
rechazo debido a los efectos que podrían tener
sobre el medio ambiente y al riesgo que existe de
pasar a la cadena alimentaria.
140
Comité Asesor de Ética en la Investigación Científica y Técnica (2004) Informe sobre OMGs en la agricultura y la
alimentación. Fundación Española para la Ciencia y la Tecnología.
77
8. Ejemplos de grupos
de investigación españoles
CASO PRÁCTICO 1
Nombre de la institución o empresa: Universidad Pública de Navarra, Dpto. Producción Agraria,
Área de Producción Vegetal.
Dirección web: www.unavarra.es/produccionagraria
GRUPO DE INVESTIGACIÓN: Agrobiotecnología Vegetal. Investigador principal: Ángel Mingo Castel
Personal: Área de experiencia: Formación:

1 Catedrático, 1 Titular, 1 Común a todo el personal: 2 Biólogos
Ayudante, 1 Asociado y 5 Transformación genética nuclear y plastidial 7 Ingenieros
Becarios Biotecnología vegetal Agrónomos
Colaboración externa: Inmunología Biólogo
1 Ayudante Agronomía Ingeniero Agrónomo
1 Técnico
PRINCIPALES LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN DEL GRUPO
– Producción de proteínas de interés farmacéutico mediante transformación plastidial en tabaco.

– Producción de vacunas en plantas mediante transformación cloroplástica en tabaco.
– Transformación plastidial de maíz.
PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN FINANCIADOS Y COSTE
Proyecto de investigación: Organismo Coste

– Producción de antígenos vacunales en plantas mediante transformación
cloroplástica (2003-05). CICYT 69.920 €
– Producción de cardiotrofina-1 en plantas de tabaco mediante
transformación plastidial (2004-05). Gobierno de Navarra 29.345 €
– Producción de albúmina humana, factor insulínico (IGF-I) e interferón
Gobierno de Navarra 50.000 €
(IFN alfa 2b) en plantas transplastómicas de tabaco (2005-2006).
OFERTA DE SERVICIOS A EMPRESAS
Transformación plastidial de plantas en las que el “riesgo ambiental” es despreciable y los rendimientos obtenidos son “record”.
BARRERAS Y LIMITACIONES EN LA INVESTIGACIÓN
– Falta de “masa crítica mínima necesaria” en investigadores postdoctorales para competir a nivel internacional y que permita
suplir áreas de conocimiento colaterales deficitarias, pero necesarias para entrar en la fase de “desarrollo del producto”, tales
como la de ingeniería químico-farmacéutica.
– Falta de financiación suficiente.
– Dificultad en la transformación plastidial de especies distintas del tabaco.
– Vacunación con plantas por vía oral: baja inducción de respuesta inmune con respecto a la vía parenteral.
DIFICULTADES PARA EL DESARROLLO E IMPLANTACIÓN DE LA AGRICULTURA MOLECULAR
– No existe legislación europea específica para la producción de biofármacos en plantas. Un aspecto clave es si se va a permitir el
empleo de platas comestibles o sólo plantas que no entran en la cadena alimentaria. Este aspecto supedita la investigación
desde su inicio. Esta legislación es demasiado restrictiva y no está justificada por datos científicos, lo que constituye una pesada
e innecesaria carga para el progreso.
– Bajos niveles de expresión de la proteína recombinante.
– Alto coste de los sistemas de purificación.
HITOS Y PLAZOS EN LA IMPLANTACIÓN DE LA AGRICULTURA MOLECULAR
Si se eliminan las barreras legislativas actuales:

– Primeras explotaciones comerciales: 3 años.
– Primeros fármacos en el mercado: 5 años.
78
CASO PRÁCTICO 2
Nombre de la institución o empresa: Instituto de Agrobiotecnología y Recursos Naturales.
Universidad Pública de Navarra.
Dirección web: www.unavarra.es/invest/biotec.htm
GRUPO DE INVESTIGACIÓN: Metabolismo. Investigador principal: Javier Pozueta Romero*

1 Investigador Científico Ingeniería metabólica (biología molecular, bioquímica y Biólogos
2 “Ramón y Cajal” y 2 pre-docs metabolismo), en plantas y bacterias: metabolismo glucídico.
Metabolismo del almidón y glucógeno en plantas y bacterias, respectivamente.

Nudix hidrolasas: nuevas herramientas moleculares para el Comisión Interministerial de Ciencia y 140.000 euros
control de los niveles intracelulares de azúcares-nucleótidos Tecnología (CICYT). (2005-2007)
y del metabolismo glucídico en plantas transgénicas. Empresas privadas (farmacéuticas y
40.000 euros/año
agroalimentarias).
PATENTES O SOLICITUDES DE PATENTES
Número Título Año

PCT/ES01/00021 Plant ADPglucose pyrophosphatase, method for the production thereof, its use in the production 2000
of assay devices and for obtaining transgenic plants.
PCT/ES02/00174 Bacterial ADPglucose pyrophosphatase, method of production, use in the manufacture of testing 2001
devices and in the production of transgenic plants and bacteria.
PCT/JP03/03189 Production of UDPglucose pyrophosphatase. 2001
PCT/ES03/00363 Azúcar-nucleótido pirofosfatasa/fosfodiesterasa vegetal, procedimiento de obtención, uso en la
fabricación de dispositivos de ensayo y en la obtención de plantas transgénicas.
ES200400257 Procedimiento de producción de sacarosa sintasa recombinante a partir de Escherichia coli y su uso 2004
en la fabricación de kits de determinación de sacarosa, producción de azúcares-nucleótidos y
obtención de plantas transgénicas con alto contenido en almidón y alto balance amilosa/amilopectina.
Nuestro equipo no presta servicios a empresas. Sin embargo, hemos firmado 2 contratos de colaboración con sendas empresas cuyo
objeto es identificar y expresar genes que codifican para enzimas reguladoras del metabolismo glucídico en plantas y en mamíferos.
LÍNEAS FUTURAS DE INTERÉS
– Aunque no se trata de una línea de investigación, creemos que la metabolómica es una herramienta futura cuya utilización
englobará a un prometedor y amplio conjunto de líneas de investigación.
– La creación de nanobiosensores y dispositivos dependientes de reacciones enzimáticas para la medida de metabolitos resulta atractiva y
muy vinculada al tipo de investigación llevada a cabo en nuestro laboratorio. En colaboración con un equipo de ingenieros de la Universidad
Pública de Navarra, acabamos de solicitar un proyecto de investigación correspondiente a la Acción Estratégica de Nanociencia y
Nanotecnología en el marco del Plan Nacional de Investigación Científica, Desarrollo e Innovación Tecnológica (2004-2007).
– Obtención de plantas transgénicas productoras de almidones con cantidades y calidades alteradas. Nos gustaría desarrollar en
múltiples especies la tecnología ya disponible en nuestro laboratorio. Garantizando la productividad actual, tal tecnología
permitiría reducir la superficie de cultivo del planeta a una superficie equivalente a la península Ibérica.
– Ausencia de planes estratégicos sólidos y definidos en centros tecnológicos que orienten sus investigaciones hacia problemas concretos.
Esto dificulta la creación de grupos y líneas de investigación cohesionados, con capacidad de generar alianzas y actividades
complementarias, debidamente apoyados por personal técnico y con especializaciones definidas.
– Dificultad en transmisión del conocimiento a la sociedad. Los centros tecnológicos no están debidamente dotados de personal adecuado
para esta actividad. Ello limita en gran medida la interacción entre los centros tecnológicos.
– Ausencia de estímulos para la figura del “investigador emprendedor”. La mayor parte de los investigadores españoles llevan a cabo su
investigación dentro del ámbito de lo público. La legislación actual impide en gran medida que el investigador “público” pueda
desarrollar sus ideas e invenciones en el ámbito privado. Por tanto, investigadores pertenecientes a los Centros Tecnológicos Públicos
(acaparadores de una gran cantidad del conocimiento) se ven impedidos para generar más investigación fuera del ámbito público.
Finalmente la investigación llevada a cabo en España está delimitada por la inversión del estado.
Rechazo social a “lo molecular”, “lo manipulable” y “lo intangible”. Es preciso educar, informar y hacer ver la necesidad de la implantación
de la agricultura molecular. Los programas de enseñanza y los medios de comunicación serán fundamentales.
– Comunicación y educación: 5 años.

– Legislación: 10 años.
– Primeras explotaciones comerciales: 15 años.
* Este grupo de investigación colabora con PLANT BIOPRODUCTS, S.L.
79
CASO PRÁCTICO 3
Nombre de la institución o empresa: Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria
y Alimentaria (INIA), Dpto. Biotecnología.
Dirección web: www.inia.es
GRUPO DE INVESTIGACIÓN: Grupo de Vacunas. Investigador principal: José Ángel Martínez Escribano

1 Investigador A2 Virología Biólogos
3 Posdoctorales Biofactorías Veterinarios
1 Predoctoral Diagnóstico Otros
1 Técnico de laboratorio Vacunas
Vacunas de nueva generación.

Interacción virus-célula y Biofactorías.

– Producción de reactivos para el control y profilaxis del síndrome
Proyecto PETRI
respiratorio y reproductivo del ganado porcino (PRRS) en un 115.000 €
95-0624-OP.
sistema libre de cultivos celulares. Años 2003-2004.
– Desarrollos biotecnológicos para la utilización rentable de Proyecto del plan estratégico 160.000 €
plantas como biofactorías. Años 2004-2008. del INIA CPE03-022-C5.
– Desarrollo de vacunas recombinantes mejoradas. Proyecto Sectorial de Recursos y
Años 2002-2004. 125.000 €
Tecnologías Agrarias RTA01-057
– Caracterización de los mecanismos inmunológicos relevantes
en protección frente al virus de la Peste porcina africana: Proyecto CICYT. AGL 2004 - 130.000 €
desarrollo de nuevas estrategias vacunales. Años 2004-2007. 07857-C03-02/GAN.
– Development of African swine fever virus vaccines.
Referencia: 75813. Años 2005-2009. Wellcome Trust Foundation. 309.000 €

200302845 Sistema para producir péptidos y proteínas multiméricos y sus aplicaciones. 2003
200302958 Proteína de fusión con direccionamiento de antígenos vacunales a células presentadoras 2003
de antígeno y sus aplicaciones.
200302634 Dispositivo para cría de larvas. 2003
TENDENCIAS EN LA INVESTIGACIÓN EN AGRICULTURA MOLECULAR
– Producción de vacunas.
– Producción de moléculas terapéuticas.
– Producción de enzimas industriales.
– Moléculas de fusión que mejoran eficacia inmunológica.

– Estrategias para acumular establemente proteínas expresadas en plantas.
– Transformación nuclear y cloroplástica.
– Vector derivado del virus del mosaico del tabaco como sistema de expresión transitoria en plantas.
– Desarrollo de tecnología de transformación cloroplástica propia para producción de vacunas y enzimas industriales.
– Personal.
– Instalaciones adecuadas fundamentalmente para el escalado semiproductivo.
– Falta de interés por parte de empresas farmacéuticas e industriales de diverso tipo para la financiación de proyectos de desarrollo con
esta tecnología.
– Percepción social negativa con repercusión en la legislación.

– Inmovilismo dentro del sector agrícola para cambiar procesos productivos.
– Legislación: 5 años
– Primeras explotaciones comerciales: 7 años
– Primeros fármacos o productos industriales en el mercado: 10 años
80
CASO PRÁCTICO 4
Nombre de la institución o empresa: AGRENVEC S.L.
Dirección web: www.agrenvec.es
Investigador principal: Alicia Romero Lorca

2 Doctores Biotecnología vegetal Biólogos
2 Ingenieros Virología vegetal Ingenieros Agrónomos
2 Técnicos Laboratorio Agronomía
Expresión de proteínas recombinantes en plantas mediante vectores virales.

– Generación de un nuevo vector viral basado en MVCV. IMADE 26.188 €
– Utilización de plantas como biofactorías para la producción de enzimas industriales. MIN-PROFIT 53.156 €

ES2125842 Clones y vectores infectivos de plantas derivados del Virus del Mosaico del Nabo (TuMV) 1997
(explotación de la licencia INIA).
– Incremento en el rendimiento: aumento del nivel de expresión y de la estabilidad de la proteína recombinante.

– Generación de nuevos vectores virales.
– Duplicación de las características de bioseguridad de la tecnología.
– Expresión de proteínas recombinantes en plantas, de manera muy rápida y económica, sin limitación en la cantidad de producto.
– Realización de proyectos de I+D cooperativa bajo contrato.
– Expresión de proteínas terapéuticas y anticuerpos.

– Biorremediación.
– Infracapitalización: falta de acceso a financiación. Capital riesgo poco desarrollado y business angels poco familiarizados con el sector y
con la tecnología. Falta de adecuación de las convocatorias de ayudas públicas a las características y posibilidades de las empresas de
base tecnológica. Demasiada orientación hacia empresas de estructura “tradicional”. Burocratización excesiva de los procedimientos
administrativos en la gestión de ayudas.
– El procedimiento administrativo en la obtención de permisos para trabajar con organismos recombinantes puede generar retrasos de
años en los planes de I+D, imposibles de soportar por empresas de reciente creación, ya lastradas con los problemas añadidos en el
punto anterior. De nada sirve financiar parcialmente proyectos de I+D si no se pueden ejecutar por la falta de permisos.
– Falta de adaptación de las condiciones marcadas en los permisos a los ciclos de cultivo de las distintas especies vegetales.
– Falta de coordinación entre los distintos programas e iniciativas nacionales y regionales.
– Falta de instalaciones de apoyo (Parques científicos, clusters, etc).
– Atomización del sector.
– Legislación restrictiva y procedimientos esclerotizados, tanto en la evaluación previa del riesgo como en los protocolos de control y
seguimiento. Alto riesgo de deslocalización hacia países que apuestan decididamente por la biotecnología y con costes menores.
– Falta de interés REAL de las Administraciones y del sector Agrario por reconvertir una parte de la agricultura convencional, dependiente
de ayudas europeas, hacia una agricultura dirigida a la obtención de moléculas de alto valor añadido para los mercados farmacéutico,
químico, industrial, etc.
– Desconocimiento tecnológico por parte de los agentes que participarían en ese proceso de implantación: cooperativas, agricultores,
Administraciones, Industria, etc.
– Primeras explotaciones comerciales: 1 año
– Primeros fármacos en el mercado: 5 años
81
CASO PRÁCTICO 5
Nombre de la institución o empresa: PLANT BIOPRODUCTS, S.L.
Dirección web: www.plantbioproducts.com
Investigador principal: Ignacio Moreno Echanove

1 investigador Transformación genética Biólogos
Biotecnología vegetal Ingenieros Agrónomos
Virología
Desarrollo de sistemas de expresión mediante transformación genética de cloroplastos. Extracción y ensayo de enzimas y
antígenos vacunales expresados en cloroplastos de tabaco.
Proyecto de investigación Organismo Coste

– Expresión de enzimas en cloroplastos de tabaco. Genoma España 110.000 €
– Utilización de extractos de producción agraria en bruto con fines industriales.

– Utilización de extractos de producción agraria en bruto para sanidad animal.
– Extractos de plantas enriquecidos en actividades enzimáticas de interés industrial.

– Servicio de expresión genética en cloroplastos utilizando nuestros vectores de transformación.
– Obtención de otras enzimas de interés industrial.

– Producción de vacunas y otros productos para sanidad humana.
– Falta de financiación, especialmente para la contratación de personal cualificado para I+D y suficientemente motivado económicamente.
– Costes y tiempo necesario para registrar productos, autorizaciones para cultivo y comercialización de productos derivados de OMGs.
– Desarrollo de sistemas industriales de producción vegetal en condiciones de confinamiento (ingeniería): necesidades financieras para la
construcción de plantas piloto para cultivo continuo en condiciones de confinamiento.
– Novedad de la Legislación e inseguridad en la forma de aplicación de ésta.
– Desarrollo de producción industrial (escala piloto): 2-3 años

– Desarrollo de producción industrial (escala comercial): 3-5 años
82
CASO PRÁCTICO 6
Nombre de la institución o empresa: Instituto Vasco de Investigación y Desarrollo Agrario-Neiker.
Dirección web: www.neiker.net
Área: Transformación Genética del Dpto. Biotecnología. Investigador principal: Enrique Ritter Azpitarte

1 Jefe de Departamento Biotecnología vegetal Transformación genética Biólogos
3 Investigadores Doctores Biología Molecular Bioquímicos
4 Becarios pre-doctorales Genómica Funcional Ingenieros agrónomos
Microbiología
– Producción de proteínas con actividad farmacológica en sistemas vegetales y bacterianos.

– Producción de enzimas industriales de interés agronómico en sistemas heterólogos.
– Aislamiento de nuevos genes de resistencia frente a estrés biótico y abiótico.
– Estudio de las MLPs de diferentes plantas lactíferas y desarrollo de un sistema de producción de proteínas heterólogas basado en
estos genes.
– Desarrollo de herramientas genómicas y post-genómicas en hongos patógenos, análisis del transcriptoma mediante microarrays,
biofilms fúngicos, proteomics en hongos patógenos, dimorfismo en hongos patógenos, expresión heteróloga en levaduras de
interés industrial, mecanismos de resistencia al cobre en Yarrowia lipolytica.

– Identificación y Producción de proteínas de interés farmacéutico o agroalimentario, Departamento Industria
utilizando técnicas recombinantes. 2005-2007. del Gobierno Vasco. 427.182 €
– Desarrollo de prototipos de “biofactorias” para “molecular farming” basado en plantas Departamento Industria
lactíferas y análisis de su potencial como nuevas fuentes de péptidos antimicrobianos. 509.450 €
del Gobierno Vasco.
2005-2007.
– Nuevas tecnologías para la elaboración de medicamentos de última generación y Comisión Europea 150.000 €
compuestos biotecnológicos. CIC-BIOGUNE 2003-2004.
– Producción de enzimas para aplicaciones en el sector agroalimentario mediante técnicas
recombinantes. CIC-BIOGUNE 2003-2004. Comisión Europea 40.000 €
– Resistant wild potatoes as source for novel genes mediating resistance against fungal,
viral and nematode diseases. INCO-Project PL ICA4-1999-30052. 2000-2003. Instituto Pasteur (París) 219.195 €
– Novel approaches for the control of fungal disease. QLK2-2000-2003. Wellcome Trust 1.000.000 €
– Molecular analysis of biofilm formation in the human pathogenic fungi Candida albicans
and Candida glabrata. IP-DCPTR50. 2001-2004. Unión Europea 100.000 €
– Negative regulation of hyphal development in Candida albicans. 1999-2001. Unión Europea —
– New targets for antifungal therapy- molecular biology of dimorphism in the human Departamento de
pathogen Candida albicans. BIOMED N. BMH4-CT96-0310. 1996-1999. Agricultura y Pesca del —
Gobierno Vasco.

ES 2094 088 Identificación, clonación y utilización de una región de DNA amplificada en cepas de Penicillium 1994
chrysogenum superproductoras de penicilina.
P9701346 Un procedimiento para incrementar la producción de penicilina en Penicillium chrysogenum mediante 1997
la inactivación del gen Lys2”.
P9900731 Una proteasa extracelular de Acremonium chrysogenum con actividad CPC-acetilhidrolasa y su utilización 1999
para la síntesis de derivados desacetilados de cefalosporina C e inactivación del gen para aumentar
la producción de cefalosporina.
WO 00/61767 Extracellular protease from Acremonium chrysogenum with CPC-acetyl hydrolase activity and its 2000
utilization in the synthesis of deacetylated derivatives of cephalosporin C and inactivation
of the gene for increasing production of cephalosporin.
SD-07 Génes impliqués dans la formation de biofilms par la levure pathogène Candida albicans. 2003
– Desarrollo de sistemas de transformación de plantas para la producción de proteínas y sustancias de interés farmacológico o
agroalimentario.
– Cribado de genotecas de origen vegetal mediante Phage display para la obtención de péptidos antimicrobianos: Nuevas
aproximaciones para el control de las enfermedades fúngicas humanas.
Detección de transgenes en alimentos comercializados.
(Continúa en página siguiente)
83
CASO PRÁCTICO 6 (continuación)
– Utilización de plantas como “biofactorías” para la producción de diferentes sustancias de interés, principalmente proteínas y péptidos de
interés alimenticio y/o farmacológico.
– Establecimiento de cultivos in vitro de plantas lactíferas y sistemas de transformación específicos.
– Exploración y explotación de genomas vegetales mediante aproximaciones “genome-wide” para búsqueda de proteínas antibióticas y
nuevos productos de interés farmacológico.
– Falta de financiación.
– Voluntad política negativa ante el cultivo de plantas transgénicas en el campo.
– Limitación de ensayos en sistemas confinados.
– Falta de tradición en el empleo de la biología molecular como herramienta para investigaciones agronómicas.
– Ausencia de legislación que regule el cultivo de transgénicos. Aparición y desaparición de moratorias no válidas ante la ausencia
de legislación.
– Percepción negativa de la manipulación molecular entre los propios agentes encargados de su implantación.
– Falta de información o información sesgada hacia la opinión pública.
– Percepción negativa por parte de los agricultores ante el cultivo de transgénicos.
– Percepción negativa por parte de los consumidores ante los alimentos transgénicos.
– Decreto Ley que regule la convivencia entre alimentos transgénicos y no transgénicos: 1 año
– Legislación que regule el cultivo de plantas transgénicas: 3 años
– Primeras explotaciones comerciales de plantas transgénicas productoras de proteínas de interés para uso humano: 10 años
– Primeros productos purificados para uso humano en el mercado: 15 años
84
CASO PRÁCTICO 7
Nombre de la institución o empresa: Centro Nacional de Biotecnología (CNB) – CSIC,
Dpto. Genética Molecular de Plantas.
Dirección web: www.cnb.uam.es
Investigador principal: Juan Antonio García Álvarez

1 Profesor de Investigación CSIC Biotecnología vegetal Biólogos
1 Contratada Ramón y Cajal Virología Bioquímicos
3 Investigadores post-doctorales Ingenieros Agrónomos
4 becarios pre-doctorales
1 Ayudante titulada CSIC
– Silenciamiento de RNA y otros mecanismos de defensa de las plantas frente a virus.

– Mecanismo de infección de virus de plantas.
– Determinantes de patogenicidad virales.
– Vectores de expresión en plantas basados en virus.

– El virus de la sharka como agente patógeno y como vector de expresión:
factores implicados en su interacción con las plantas. Plan Nacional de I+D+I 260.100 €
– Virus-induced gene silencing: unravelling the basis of a mechanism and its
exploitation for the analysis of a multitude of individual gene functions in plants. Unión Europea 285.305 €
– Targeting immunostimulating-structure production in plants. Unión Europea 243.549 €
– Development of intervention strategies against SARS in a European-Chinese
taskforce. Unión Europea 260.052 €

P9800623 Sistema de presentación de antígenos basado en el virus de la sharka. 1998
P9900698 DNA recombinante derivado del virus de la sharka y vector de expresión de proteínas heterólogas 1999
basado en dicho DNA recombinante.
PCT/EP 01/10026 Producción del antígeno VP60, o de un fragmento del mismo, del virus de la enfermedad 2001
hemorrágica de los conejos en plantas y vacuna contra la enfermedad hemorrágica vírica
de los conejos que comprende dicho antígeno.
– Mejoras agronómicas de las plantas.

– Mejora de la calidad de los productos de las plantas.
– Las plantas como biofactorías de nuevos productos.
– Desarrollo de vectores de expresión en plantas.

– Desarrollo de estrategias para interferir con enfermedades virales de plantas.
– Falta de estabilidad en las fuentes de financiación.

– Falta de plazas estables para el personal científico.
Aceptación social.
85
CASO PRÁCTICO 8
Grupo: Biotecnología de Virus Vegetales. Investigador principal: Fernando Ponz Ascaso

2 investigadores, 1 técnico grado medio Biotecnología de virus vegetales 2 químicos
2 investigadores postdoctorales 3 biólogos
1 becario predoctoral 1 ing. técnico agrícola
(sólo 1,5 personas dedicadas a Agricultura Molecular)
Plantas como biofactorías empleando vectores virales.

Desarrollos biotecnológicos para la utilización rentable de INIA 74.100 €
plantas como biofactorías (CPE03-022-C5-5).

9701522 Clones y vectores infectivos de plantas derivados del virus del mosaico del nabo. —
– Mejoras de la capacidad de expresión de proteínas foráneas en plantas empleando los vectores derivados del virus del mosaico del nabo.
– Expresión de proteínas de distintos orígenes con utilidades diversas.
Los vectores están licenciados por el INIA a la empresa AGRENVEC.
La principal barrera que nosotros experimentamos en esta área es la falta de financiación específica. Al tratarse de proyectos
fundamentalmente de desarrollo tecnológico, al no haber fuentes específicas de financiación para ellos, profundizar en ellos con las
fuentes normales de financiación del Plan Nacional nos obligaría a renunciar (problema de los EJCs) a trabajar en los proyectos de
investigación de naturaleza más básica, cosa que no deseamos hacer. La sensación en el grupo es que, pese a que éste es un caso
claro de un desarrollo tecnológico derivado de un esfuerzo de investigación básica, no está previsto en un grupo de un OPI público
como el nuestro que se pueda continuar en la profundización de la D, si no es renunciando a hacer más I, lo cual encontramos
bastante paradójico, puesto que no podríamos haber hecho esta D concreta si no hubiéramos estado muy implicados en la I.
En el ámbito de los grupos de investigación, lo expresado en el cuadro anterior. En el campo de las aplicaciones prácticas, el
principal obstáculo es la deficiente estructura empresarial del sector de la producción agraria (fragmentación y pequeño tamaño de
las empresas, falta de capitalización, ausencia de mentalidad innovadora, etc.). La producción agraria española está diseñada de
una manera no sostenible, muy subvencionada y sin un buen entorno de implementación de nuevas ideas tecnológicas. En
resumen, el ambiente productor es muy adecuado para la agricultura molecular.
Sin un cambio casi drástico de escenario empresarial agrario, lo más probable es que la implantación no se produzca. Si se
produjese (muy improbable) un cambio efectivo de actitud por parte de los poderes públicos de tal forma que se pudiera crear un
entorno favorable a la inversión en agricultura molecular, quizá se podrían apreciar mejoras en unos 3-5 años. La legislación y
otras cuestiones relacionadas pueden mejorar, pero no son en estos momentos el principal obstáculo. La estructura empresarial de
la producción agraria española es poco compatible con el desarrollo biotecnológico propio. Cultivar plantas transgénicas de
compañías multinacionales no exige demasiado cambio en las estructuras productivas, pero implementar desarrollos propios es
otra historia.
86
CASO PRÁCTICO 9
Nombre de la institución o empresa: Instituto de Biología Molecular de Barcelona (IBMB)-CSIC,
Dpto. de Genética Molecular.
Dirección web: www.ibmb.csic.es
Grupo: Transporte subcelular de proteínas vegetales. Investigador principal: Dolores Ludevid Múgica

2 investigadores Transformación genética Bioquímicos
4 becarios pre-post Biotecnología vegetal Biólogos
Biología celular vegetal Ingenieros agrónomos
Expresión proteínas heterólogas en plantas
Señales de transporte subcelular de proteínas vegetales. Expresión de proteínas terapéuticas en plantas. Biología celular vegetal.
Proteómica.

Molecular Farming: Producción de proteínas de interés terapéutico en
plantas (BIO-2004-03202). CYCIT(2004-7) 158.000 €
Producción de proteínas de interés terapéutico en plantas de arroz y tabaco. Empresa ERA PLANTECH S.L (2004-6) 71.000 €

WO2004 003207 Production of peptides and proteins by accumulation in plant endoplasmic reticulum-derived 2002
US2004 005660 protein bodies.
WO97 28247 — —
Las tendencias generales se focalizan fundamentalmente en los siguientes objetivos: 1) Resistencia a patógenos 2) Mejora
productiva/nutritiva de plantas comestibles (food/feed) 3) Resistencia a sequedad y suelos salinos 4) Producción de proteínas
terapéuticas. Nuestro grupo trabaja en esta última.
Herramientas que se utilizan:
– Genómica: secuenciación de genomas vegetales de interés agroalimentario. Nodulación.
– Genómica funcional: genes implicados en resistencia a patógenos, sequedad, salinidad, fotosíntesis.
– Proteómica.
– Metabolómica: regulación de rutas metabólicas y metabolitos secundarios.
– Genética/Desarrollo vegetal/floración.
– Secuencias reguladoras: Promotores (FTO).

– Nuevas tecnologías de transformación vegetal. (FTO).
– Diversidad vegetal: identificación y cultivo de nuevas especies vegetales con rasgos de interés comercial.
– Tecnologías de producción de proteínas terapéuticas de alto valor añadido a costes bajos/ vacunas comestibles/productos
industriales/nutritivos.
– Marcadores genéticos para cultivares de interés agroalimentario. Mejora genética.
– Interés en la maduración de frutos.
– Know-how relativos al down-processing de biomasa vegetal: sistemas de homogenización, tratamiento de sólidos, bioquímica
(purificación de extractos proteicos, lípidos, azúcares y metabolitos secundarios).
– Interés en algas (biomasa). Por ejemplo: empresas de cosmética, alimentación animal.
– Plantas GM de cultivos extensivos para la producción de productos industriales (biopolímeros, enzimas industriales,…).
– Plantas GM para la producción de proteínas terapéuticas (vacunas, anticuerpos, citoquinas, hormonas).
– Plantas GM productoras de complementos alimentarios para alimentación humana y animal.
– Agricultura sostenible. Aprovechamiento de biomasa-energía.
– Plantas GM para cultivo extensivo de plantas resistentes a desecación.
– Escasa dotación presupuestaria por parte de la administración en proyectos de investigación de agricultura molecular. Este
aspecto es especialmente grave en un país con una climatología idónea para cultivos sostenibles.
– Falta de flexibilidad y dinero para la contratación de personal cualificado.
– Falta de contacto con la realidad: interacción agricultor/empresa-investigador.
– Crear puestos de trabajo especializados y multidisciplinares (abogado/científico) que detecten y gestionen posibles transferencias
de tecnología (para la propia institución pública o para empresas interesadas).
(Continúa en página siguiente)
87
CASO PRÁCTICO 9 (continuación)
– Legislación compleja y poco clara.

– Falta de mecanismos de control sanitario y medioambiental. Mecanismos de control científicamente rigurosos y reconocidos
socialmente. Acompañados además por un seguimiento en campo/ invernadero, durante el procesamiento del vegetal y del
producto final (controles moleculares específicos, analítica concreta….).
– Falta de información al consumidor.
– Desarrollo de Sistemas seguros de confinamiento.
88
CASO PRÁCTICO 10
Nombre de la institución o empresa: FORT DODGE VETERINARIA, S.A.
Investigador principal: Juan Plana Durán (Departamento de I+D)

15 investigadores Transformación genética Biólogos
Biotecnología vegetal Ingenieros agrónomos
Virología Veterinarios
Bioquímicos
Vacunas:
– Convencionales.
– DNA Recombinantes.

Biosafe coronavirus vaccine vector for the prevention of human infections
European Commission
of the enteric and respiratory tract. Referencia: QLRT-2000-00874. —
Framework Program
1999-2002. 2000-2003.
Biosafe coronavirus vector-based vaccine for prevention of foot-and-mouth European Commission —
disease. Referencia: QLRT-2001-00825. 2001-2004. Framework Program
Trageting immunocomplex production in plants. European Commission —
Referencia:QLRT-2001-01050. 2001-2004. Framework Program
Epidemiology and control of classical swine fever (CSF) in wild boar and
potential use of a newly developed live marker vaccine. European Commission —
Referencia: SSPE-CT-2003-501599. 2004-2008. Framework Program
Development of intervention strategies against SARS in a European-Chinese European Commission —
taskforce. Referencia: FP6-2003-SSP-SARS. 2004-2007. Framework Program

P 9301973 Vaccine for preventing the porcine reproductive and respiratory syndrome. 1994
P 9401493 Recombinant rabbit haemorrhagic disease virus (RHDV) capsids and proteins, diagnostic kits 1995
and vaccines containing said recombinant products.
P 9502370 Recombinant adenoviruses which express antigens of the porcine transmissible gastroenteritis 1995
PCT/ES96/00185 virus (TGEV) and their use in the formulation of vaccines.
9600620 Vectors based on recombinant defective viral genomes and their use in the formulation of vaccines. 1996
P9902673 Clones y vectores infectivos derivados de coronavirus y sus aplicaciones. 1999
P200002161 Producción del antígeno VP60, o de un fragmento del mismo, del virus de la enfermedad 2000
hemorrágica de los conejos en plantas y vacuna contra la enfermedad hemorrágica vírica
de los conejos que comprende dicho antígeno.
Expresión de proteínas y anticuerpos en plantas.
Desarrollo de “edible vaccines” (vacunas comestibles).
Ninguna dificultad en nuestra empresa.
Dificultad para registro.
89
CASO PRÁCTICO 11
Nombre de la institución o empresa: Centro Nacional de Biotecnología (CNB). CSIC,
Dpto. Biología Molecular y Celular.
Dirección web: www.cnb.uam.es
Investigador principal: Luis Enjuanes Sánchez

1 profesores titulares Virología Biólogos
6 investigadores
5 becarios pre-post
Biología de coronavirus, incluyendo mecanismos de replicación, transcripción, encapsidación, desarrollo de vectores para vacunas.

Diseño de vacunas para la protección del ganado porcino frente a infecciones — —
entéricas y respiratorias. 1999-2000.
Desarrollo de un vector vacunal para la especie porcina basado en genomas de
CAM 28.940 €
coronavirus. Referencia: CAM 07B/0020/99. 2000.
Generic coronavirus vaccine vectors for protection of farm animals against
mucosal infections. Referencia: QLRT-1999-00002. 2000-2002. UE 238.000 €
Immunotherapy of enteric infections by rotaviruses and coronaviruses using
plantibodies. Referencia: QLRT-1999-30739. 2000-2002. UE 246.730 €
Biosafe coronavirus vaccine vector for the prevention of human infections of the
enteric and respiratory tracts. UE 263.860 €
Referencia: QLRT-2000-00874. 2001-2004.
Ingeniería de genomas de coronavirus para el diseño de vectores bioseguros. CICYT 252.570 €
Referencia: BIO2001-1699. 2001-2004
Biosafe coronavirus vector-based vaccine for prevention of foot-and-mouth UE 256.742 €
disease. Referencia: QLRT-2001-00825. 2002-2005.
Targeting immunocomplex production in plants. UE 248.105 €
Referencia: QLRT-2001-01050. 2002-2005.
Development of intervention strategies against SARS in a European-Chinese UE 380.000 €
taskforce. Referencia: FP6-2003-SSP-2.2-SARS. 2004-2007.
PATENTES O SOLICITUDES DE PATENTES:

PCT/EP 00/12063 Infectious clone. 2000
(P 55171)
200200158 Secuencia de ácido nucleico que comprende la señal de encapsidación del RNA de un coronavirus 2002
del grupo 1 y sus aplicaciones.
Diseño de vacunas para salud animal, caracterización del genoma de las especies de interés en alimentación, mejora y transferencia de
embriones, proteómica, genómica.
Diseño de vacunas recombinantes seguras.
Estudios básicos sobre la biología de coronavirus (incluyendo coronavirus porcinos y humanos).
– Falta de instalaciones de seguridad biológica.

– Dificultad en las autorizaciones para el trabajo con patógenos.
Mejora del sistema de patentes europeo en comparación con el americano.
– Legislación: 1 año
90
CASO PRÁCTICO 12
Investigador principal: Covadonga Alonso Martí

1 Contratado posdoctoral Virología molecular Biólogos
1 becario predoctoral Biología Molecular
Identificación de dianas terapeúticas para estrategias de interferencia antiviral mediante:

– Estudios proteómicos de las interacciones virus-hospedador.
– Caracterización de los mecanismos de apoptosis.
– Función de las proteínas motoras microtubulares en el transporte intracelular de los virus.

Estudio de las interacciones patógeno- hospedador del virus de la Peste porcina
africana mediante técnicas de proteómica y microscopía confocal IO2004-00690. Proyecto CICYT 46.000 €
Año 2005. Proyecto del plan
Desarrollos biotecnológicos para la utilización rentable de plantas como estratégico del INIA 160.000 €
biofactorías. Años 2004-2008. CPE03-022-C5
Estudio de la interacción virus-célula mediante análisis proteómico de la
Proyecto CICYT 133.500 €
infección por el virus de la Peste porcina africana. AGL2002-00668.
Development of African swine fever virus vaccines. Referencia: 75813. Wellcome Trust
Años 2005-2009. Foundation 309.000 €
Producción de reactivos para el control y profilaxis del síndrome respiratorio y
reproductivo del ganado porcino (PRRS) en un sistema libre de cultivos Proyecto PETRI 115.000 €
celulares. Años 2003-2004. 95-0624-OP.
– Vacunas.
– Biofactorías en la producción de moléculas de interés diagnóstico o terapéutico.
Identificación de moléculas diana de interés diagnóstico o terapéutico mediante estudios proteómicos.
Desarrollo de moléculas antivirales.
– Falta de financiación.
– Falta de personal.
– Legislación más permisiva.

– Falta de implantación de la innovación en el sector agrícola.
91
9. Conclusiones
La ingeniería genética ha permitido convertir en tecnológicas que permiten eliminar algunos
biofactorías de productos como enzimas, riesgos ambientales, como la expresión transitoria
antibióticos, vacunas, anticuerpos u hormonas, a de las proteínas recombinantes, su confinamiento
distintos organismos entre los que se incluyen en orgánulos como cloroplastos, que no se
bacterias o levaduras, o a cultivos celulares de transmiten por polen o la utilización de
animales como insectos o mamíferos. promotores que sólo se activan ante determinados
estímulos físicos o químicos, limitando su
Desde hace años se investiga la posibilidad de
producción a momentos determinados.
utilizar plantas completas para la producción de
estos compuestos de interés, debido a que De estos desarrollos tecnológicos, la expresión de
presentan múltiples ventajas económicas, técnicas proteínas foráneas en cloroplastos de tabaco aparece
y de seguridad, que hacen que puedan como uno de los más ventajosos. Los cloroplastos son
considerarse como una alternativa a otros orgánulos que no se transmiten a través del polen, ya
sistemas de producción más costosos o con que su herencia es materna, de modo que el riesgo de
riesgos de contaminación por agentes patógenos: contaminación de otros cultivos es muy pequeño. La
transformación de cloroplastos permite niveles de
• Ventajas técnicas. Las plantas son sistemas
expresión elevados, ya que cada célula vegetal
sencillos de transformar genéticamente, y
contiene gran cantidad de estos orgánulos. Además, la
existen protocolos de transformación y
proteína recombinante se encuentra protegida de la
regeneración para múltiples especies. Se
degradación y su acumulación dentro del cloroplasto
conocen secuencias específicas que permiten la
no afecta al desarrollo normal de la planta.
acumulación de proteínas en tejidos y órganos
fáciles de recolectar, almacenar y procesar, o en El tabaco se utiliza como modelo de experimentación
orgánulos donde las proteínas se encuentran debido a que es fácilmente transformable y existe
protegidas de la degradación, lo cual aumenta una tecnología muy avanzada para la transferencia y
su rendimiento de producción. expresión de genes. Por otra parte se trata de una
planta no comestible, claramente diferenciada de las
• Ventajas económicas. El cultivo de plantas es
que lo son, por lo que el riesgo de contaminación de
económico y sencillo, ya que existen
infraestructuras y maquinaria específica para su la cadena alimentaria es muy bajo. Además, produce
cultivo, recolección y procesado. un elevado rendimiento de biomasa y se dispone de

infraestructuras para su cultivo y procesado a gran
• Ventajas referentes a la seguridad del producto. escala.
Se trata de organismos eucariotas, más
cercanos a los seres humanos que bacterias y Por otra parte, la transformación de otros tipos de
levaduras, que no presentan patógenos que plastos de frutas despierta un gran interés para la
puedan afectar al hombre o los animales, como obtención de vacunas comestibles.
es el caso de las toxinas bacterianas, virus,
El número de empresas dedicadas al desarrollo de
priones o secuencias oncogénicas.
plataformas biotecnológicas de producción de
Sin embargo, existen una serie de retos que pueden proteínas recombinantes en plantas se encuentra
tener una incidencia en el desarrollo de plantas liderado por Estados Unidos y Canadá, donde se
biofactoría. Estos retos derivan, por una parte, de sitúan aproximadamente el 60%. En Europa,
aspectos relacionados con la seguridad, tanto aunque existen empresas que están realizando
medioambiental como sanitaria (salud humana y investigaciones, y algunas ya tienen productos en
animal). En segundo lugar existen una serie de retos fase de ensayo clínico, la situación es de retraso
relacionados con el proceso productivo, referentes a frente a estos países.
rendimiento de la producción y purificación de los
El principal motivo de este retraso es la moratoria
productos de interés.
que hasta hace unos meses impedía la aprobación
Se han desarrollado distintas tecnologías que de nuevos transgénicos en Europa, lo cual ha
permiten aumentar la expresión de proteínas y condicionado profundamente el sector
mejorar la purificación, situando el rendimiento biotecnológico en los países miembros. Esta
del conjunto del proceso en niveles competitivos moratoria ha tenido una influencia notable en
con los sistemas tradicionales de producción. retrasar el desarrollo de la agricultura molecular en
Asimismo se han desarrollado estrategias Europa, dado que las plantas biofactoría se
92
encuentran en una fase más temprana de como lo son los biorreactores en los que se
desarrollo que otros OGMs (Organismos cultivan microorganismos o células animales.
Modificados Genéticamente). La incidencia de la
moratoria se ha visto reflejada en tres ejes clave: la Por otra parte se encuentra la gran barrera que
planificación de la política científica, la inversión supone la ausencia de una legislación específica
privada y la masa crítica del sector. para uso no alimentario. Algunos investigadores
consideran que la normativa actual que regula las
Por una parte ha afectado a la planificación de la actividades en las que se produzcan o empleen
política científica, tanto europea, a través de sus OMGs es demasiado restrictiva y no está
Programas Marco, como a las políticas científicas justificada por datos científicos. Esta normativa
de los estados miembros. Así, el apoyo a la condiciona extraordinariamente la investigación, lo
investigación en plantas transgénicas ha quedado cual unido a la falta de financiación ha llevado a
relegado a la investigación con fines básicos y los algunos grupos a abandonar sus líneas de
proyectos con fines aplicados como el desarrollo investigación en este campo.
de plantas biofactoría se han visto excluidos de las
áreas prioritarias de I+D+i. No obstante, parece que en Europa se están
produciendo ciertos cambios que podrían auspiciar
En segundo lugar, la combinación de la moratoria un mejor futuro. La moratoria finalizó el 19 de
con las barreras administrativas ha provocado que mayo del pasado año, con la autorización por la
las industrias farmacéuticas y agroalimentarias no Comisión Europea de la importación y procesado
apuesten por la utilización de estos sistemas para de maíz dulce modificado genéticamente de la
la obtención de productos, con la consiguiente línea Bt11 de Syngenta, aunque todavía no se ha
desinversión privada en la I+D de este sector. De concedido la autorización para su cultivo.
hecho, algunas de las empresas europeas de
mayor tamaño han decidido trasladarse a Estados Por otra parte, existe un proyecto europeo
Unidos y Canadá, donde tienen más facilidades denominado Consorcio Pharma-Planta, fundado por
para llevar a cabo sus investigaciones y desarrollar la Comisión Europea como parte del Sexto Programa
sus productos. Marco en el área denominada “Plant Platforms for
Immunotherapeutic Biomolecule Production”. Este
Por último, y como resultado de este ambiente de proyecto cuenta con 12 millones de euros y en él
incertidumbre y de la falta de financiación tanto participan 39 equipos de investigación de 11 países
pública como privada en Europa, se ha producido europeos (ninguno español) y Sudáfrica. Su objetivo
un abandono paulatino por parte de algunos es el desarrollo de estrategias eficientes y seguras
grupos de las líneas de investigación relacionadas para la producción de proteínas terapéuticas en
con la agricultura molecular, lo que ha conducido a plantas para la obtención de tratamientos para
una pérdida de masa crítica, imprescindible para enfermedades humanas como SIDA, diabetes, rabia
asegurar la competitividad del sector. o tuberculosis.
Los investigadores españoles consultados acerca Por último, es imprescindible disponer de un

de las plantas biofactoría coinciden al señalar que entorno legal y administrativo claramente definido
la falta de financiación pública o procedente de y estable que permita la participación de los
empresas farmacéuticas, junto con la dificultad distintos agentes del sector (empresas, grupos de
para la autorización de usos confinados y investigación, inversores privados) desde el
liberaciones voluntarias, son las principales perfecto conocimiento de las reglas del juego. Esto
barreras y limitaciones con las que se encuentran permitirá la correcta valoración de las
en la investigación. oportunidades de futuro y ayudará a definir y
afianzar sus posicionamientos.
Otro punto de coincidencia es el rechazo por parte
de la opinión pública de este tipo de plantas. A efectos de aprobación y coexistencia será
Cuando se habla de plantas modificadas necesario considerar cada plataforma de manera
genéticamente se genera un cierto temor o independiente, entendiendo una plataforma como la
rechazo en la opinión pública, debido a que la combinación de planta, tecnología y producto, ya que
aplicación principal de las plantas es la obtención es esta combinación la que determina los riesgos
de alimentos. El riesgo de que estos productos para la salud y el medio ambiente. Por otro lado,
puedan contaminar la cadena alimentaria hace resulta altamente conveniente la definición de
que productores de alimentos y consumidores se estrategias específicas de apoyo al desarrollo de
opongan a su uso. Sin embargo, las plantas estas tecnologías por parte de las Administraciones
biofactoría no están destinadas a la producción de Públicas, así como el establecimiento de programas
alimentos, sino que se trata de biofactorías, tal y de información pública.
93
10. Anexos
ANEXO I. Proyecto Pharma-Planta
www.pharma-planta.org
El Proyecto Pharma-Planta es un consorcio de

39 equipos de investigación académicos y de
empresas, de 11 países europeos y Sudáfrica. El
proyecto ha sido fundado por la Comisión Europea
como parte del Sexto Programa Marco en el área
denominada “Plant platforms for
immunotherapeutic biomolecule production” y
cuenta con 12 millones de Euros para la
investigación del uso de plantas modificadas
genéticamente para el desarrollo de tratamientos
para enfermedades humanas como SIDA,
diabetes, rabia y tuberculosis.
Sus objetivos son el desarrollo de estrategias

eficientes y seguras para la producción de
proteínas terapéuticas en plantas, así como la
definición de los procedimientos y métodos que
permitan la producción de estas proteínas de
acuerdo con la normativa, de modo que
finalmente puedan obtenerse productos con una
pureza y calidad suficiente para poder realizar
ensayos clínicos.
El proyecto se encuentra coordinado por el

St Georges Hospital en Londres y por el Instituto
Fraunhofer en Alemania y en él participan
expertos en las áreas de biología molecular,
biología de plantas, inmunología, tecnologías de
expresión de proteínas recombinantes,
biotecnología de plantas, vacunas, evaluación de
riesgos y gestión de la propiedad industrial.
A continuación se incluye una tabla con los
participantes en este proyecto.
94
CENTROS DE INVESTIGACIÓN DEL CONSORCIO PHARMA-PLANTA
País Institución Página web
Fraunhofer Institute of Molecular Biology

www.ime.fraunhofer.de
and Applied Ecology
Institute of Molecular Biotechnology,

www.biotec.rwth-aachen.de
RWTH - University of Aachen
Alemania University of Heidelberg www.uni-heidelberg.de
University of Münster www.uni-muenster.de
Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research

www.ipk-gatersleben.de
(IPK)
University of Natural Resources and Applied Life

Austria www.boku.ac.at
Sciences
Flanders Interuniversity Institute

www.vib.be
for Biotechnology
Bélgica
Université Catholique de Louvain www.ucl.ac.be
Centre de Coopération Internationale en Recherche

www.cirad.fr
Agronomique pour le Développment (CIRAD)
Francia Université Blaise Pascal Clermont-Ferrand II www2.univ-bpclermont.fr
Institut National de la Recherche Agronomique (INRA) www.inra.fr
Grecia Agricultural University of Athens www.aua.gr
National University of Ireland www.nui.ie

Irlanda
Trinity College www.tcd.ie
Universita Degli Studi di Verona www.univr.it
Italia Ente per le Nuove Tecnologie, l'Energia e l'Ambiente www.enea.it
Consiglio Nazionale Delle Ricerche www.cnr.it
John Innes Centre www.jic.bbsrc.ac.uk
Centre for the Management of Intellectual Property

www.mihr.org
in Health Research and Development (MIHR)
St George's Hospital Medical School www.sghms.ac.uk
Reino Oxford Brookes University www.brookes.ac.uk

Unido
University of Warwick www.warwick.ac.uk
University of Cambridge www.cam.ac.uk
University of Glasgow www.gla.ac.uk
University of Leeds www.leeds.ac.uk
Suiza Université de Neuchâtel www.unine.ch
95
ANEXO II. Proyectos financiados por la Unión Europea
96
Proyecto Coordinador País Colaboradores País Duración Referencia
Fraunhofer-
Gesellschaft zur
Recombinant pharmaceuticals LSHB-CT-2003-
Forderung der Alemania — — 2004-2009
from plants for human health. 503565
Angewandten
Forschung e.V.
National Research Council Of Italy Italia
The Chancellor, Masters and

Scholars of the University of Reino Unido
Cambridge
Biochemical and genetic
approaches to study Reino Universite de Neuchatel Suiza HPRN-CT-2002-
University of Leeds 2002-2005
bio-molecular interactions Unido 00262
in plants.
Uppsala University Suecia
Wageningen University Holanda
Weizmann Institute of Science Israel
Mechanisms of transgene The Chancellor,

integration and expression Masters and
Reino HPRN-CT-2002-
in crop plant plastids: Scholars of the — — 2002-2005
Unido 00262
underpinning a technology for University
improving human health. of Cambridge
CSIC-CNB España
Targeting immunocomplex Reino QLK2-CT-2002-
Jonh Innes Centre 2002-2005
production in plants. Unido Fort dodge veterinaria/ 01050
España
Laboratorios sobrino
The Royal Veterinary

Plant center: molecular plant QLK3-CT-2000-
and Agricultural Dinamarca — — 2001-2004
physiology research and training. 60078
University
Manipulation of transport of
Reino QLK3-CT-2000-
soluble proteins to vacuolar University of Leeds — — 2001-2003
Unido 52080
compartments.
Univ. Of Newcastle Upon Tyne Reino Unido
Universite de Paris
Francia
V 'Rene Descartes
EUREXpress, a European Universidad Miguel

España
Consortium for large-scale gene Hernandez de Elche QLG2-CT-1999-
Fondazione Telethon Italia 2000-2003
expression analysis by RNA 00793
in situ hybridization. Universidad de Murcia España
Medical Research Council Reino Unido
Max-Planck-Gesellschaft
Zur Foerderung Der Alemania
Wissenschaften E.V.
John Innes Centre Reino Unido
Immunotherapy of enteric International Centre for Genetic

Italia
infections by rotaviruses Engineering and Biotechnology QLK2-CT-2000-
CSIC-CNB España 2000-2003
and coronaviruses using 00739
plantibodies. Fort Dodge Veterinaria SA España
Aachen University of Technology Alemania
Institut National de la
Francia
Recherche Agronomique
The Royal Veterinary and

Dinamarca
Agricultural University
Unilever Uk Central Resources Ltd Reino Unido

Upgrading of sugar beet pectins
University Of Groningen Holanda QLK3-CT-1999-
by enzymatic modification and DANISCO A/S Dinamarca 2000-2003
00089
molecular farming.
University Of Leeds Reino Unido
University Of Rome
Italia
“La Sapienza”
University Of Stirling Reino Unido
97
98
Standardization of the Universidade do Porto Portugal

Immunodiagnosis and Scottish Crop
Reino
Qualification of Plant Viruses by Research Univ. Degli Studi di Bari Italia 1998-2002 SMT4982246
Unido
Development of Synthetic Institute (SCRI)
Antigens. Rheinisch-Westfälische
Technische Hochschule Aachen Alemania
(RWTH)
Nederlandse Algemene
Keuringsdienst voor Zaaizaad en Holanda
Pootgoed van Landbouwgewassen
Standardization of the
Immunodiagnosis and Scottish Crop Benaki Phytopathological
Reino Grecia
Qualification of Plant Viruses Research Institute 1998-2002 SMT4982246
Unido
by Development of Synthetic Institute (SCRI)
Antigens.
Agritest Srl Italia
Adgen Ltd. Reino Unido
Dienst Landbouwkundig
Onderzoek. Centrum voor Holanda
Plantenveredelings
Dienst Institut National de la

Francia
Biopharmaceuticals produced in Landbouwkundig Recherche Agronomique (INRA)
plants: proteins involved in the Onderzoek Instituut Holanda 1998-2001 BIO4980255
regulation of fertility in animals. voor Dierhouderij en University Of Agricultural
Dierengezondheid Austria
Sciences-Vienna
VITROPLANT
Austria
Pflanzenbiotechnologie GmbH
BBSRC John Innes Centre Reino Unido
Production of diagnostic and Rhein.-Westf. Centre National de la Recherche

Francia
therapeutic antibodies in plants Technische Alemania Scientifique (C.N.R.S) 1997-2001 FAIR973110
by molecular farming. Hochschule Aachen
United Medical and Dental
Schools of Guy's and Reino Unido
St.Thomas's Hospital
Université de Rouen - Haute

Francia
The development of a vaccine United Medical and Normandie
against mucosal Dental Schools of Reino
University of Göteborg Suecia 1997-2001 BMH4972345
infection with SIV/HIV in non- Guy's and Unido
human and human primates. St.Thomas's Hospital
Biomedical Primate Research Centre Holanda
Biocem SA. Laboratoire de Biologie

Francia
Cellulaire et Moléculaire
Cooperative Verkoop-en
Produktievereniging van
Holanda
Aarappelmeel en Derivaten
'AVEBE' BA
Dienst Landbouwkundig Onderzoek Holanda

Vrije Universiteit
Engineering high quality crops by
Brussel
optimizing lysine, methionine and Bélgica Freie Universitaet Berlin Alemania 1997-2000 BIO4972182
Instituut Moleculaire
cystine content.
Biologie
Max-Planck-Gesellschaft Zur
Alemania
Foerderung der Wissenschaften E.V
University Of Bristol Reino Unido
Universität Bern Suiza
Weizmann Institute of Science Israel
Rhein.-Westf.
Molecular farming of therapeutic
Technische Alemania — — 1997 FAIR965860
antibodies in plants.
Hochschule Aachen
University of Agricultural
Austria
Sciences-Vienna
Expression of animal virus antigens Reino Wageningen Universit Holanda

Jonh Innes Centre 1996-1999 BIO4960304
in plants using viral vectors. Unido
Fort dodge veterinaria S.A. España
CSIC-CNB España
Institute for Animal Science and

Processing technology for recovery Holanda
Unilever UK Central Reino Health Research
of recombinant antibody produced 1996-1999 FAIR961039
Resources Ltd Unido
in crop plants. Technischen Hochschule Aachen Alemania
99
100
Center for Renewable Energy
Grecia
Sources
Centre National de la I.N.R.A. - Centre de Versailles Francia

Tree improvement based on Recherche
Francia 1995-1999 FAIR950424
lignin engineering. Scientifique Empresa Nacional de Celulosas
(C.N.R.S) S.A.- Centro de Investigacion de España
Ence - CIE
Zeneca Group Plc Reino Unido
Danish Veterinary Institute

Dinamarca
for Virus Research
The plant as a factory for the
Reino Institute for Animal
production of oral vaccines and Axis Genetics plc Holanda 1995-1998 FAIR950720
Unido Science and Health Research
diagnostics.
Immunologia y Genetica
España
Aplicada S.A.
Eurogenetics Nv Bélgica
Novo Norddisk Dinamarca
Rijksuniversiteit Gent Bélgica
Universite De Geneve Suiza

Structure, function and industrial
University of Reino
applications of plant laccases and Universite Paul Sabatier de 1994-1998 FAIR21661
Edinburgh Unido Francia
peroxidases. Toulouse III
University Of Copenhagen Dinamarca
Università degli Studi di Catania Italia
Université de Rouen - Haute

Francia
Normandie
Rhein.-Westf.
Molecular farming of therapeutic
Technische Alemania — — 1997 FAIR965860
antibodies in plants.
Hochschule Aachen
Novel approaches for a mass

production of plant extension Gesellschaft für
which is a bovine collagen and Biotechnologische
GREENTECH SA Francia Alemania 1997 BIO4979054
gelatin substitute by Entwicklung und Consulting
overexpression in transgenic GmbH
plants or in fermentation process.
Bundesanstalt für
Züchtungsforschung Alemania
an Kulturpflanze
Centre for Plant Breeding Res. Holanda
Ente per le Nuove Tecnologie

Italia
l'Energia e l'Ambiente (ENEA)
A flexible approach to endow Wageningen Institut National de la Recherche

Holanda Francia 1993-1995 BIO2920239
plants with new properties. University Agronomique (INRA)
Rheinisch-Westfälische
Technische Hochschule Aachen Alemania
(RWTH)
University Of Hamburg Alemania
Universiteit Gent Bélgica
101
ANEXO III. Centros públicos de investigación y proyectos
102
Centro Proyecto Duración
Targeting immunocomplex production in plants* 2002-2005

Centro Nacional de Biotecnología
(CNB-CSIC) Dpto. Biología Molecular Immunotherapy of enteric infections by rotaviruses and coronaviruses using plantibodies* 2000-2003
y Celular
Expression of animal virus antigens in plants using viral vectors 1996-1999
Targeting immunocomplex production in plants 2002-2005

Centro Nacional de Biotecnología
Diseño de un vector de expresión basado en el virus de la sharka y su empleo para producir en plantas
(CNB-CSIC) 1997-1999
antígenos de agentes patógenos para la preparación de vacunas
Dpto: Genética Molecular de Plantas
Expression of animal virus antigens in plants using viral vectors 1996-1999
Instituto de Biología Molecular de Producción de proteínas de interés terapéutico en plantas 2001-2004

Barcelona. Dpto. Genética molecular
de plantas (grupo de transporte
subcelular de proteínas vegetales) Producción y mejora de la acumulación de proteínas de interés agronómico y metabólico en plantas 1998-2001
Instituto Nacional de Investigación

y Tecnología Agraria y Alimentaria Utilización de plantas como biofactorías. Desarrollo de sistemas de sobreproducción
2001-2003
(INIA) Dpto: Biotecnología de xenoproteínas de interés vacunal
(grupo de vacunas)
Instituto Nacional de Investigación Aplicaciones biotecnológicas de los virus vegetales: expresión heteróloga de biomoléculas de interés
1998-2000
y Tecnología Agraria y Alimentaria industrial en plantas
(INIA) Dpto: Biotecnología (grupo Desarrollo de vacunas comestibles contra el virus de la fiebre hemorrágica del conejo usando un vector
de biotecnología de virus vegetales) 1998-2000
viral para plantas basado en el potyvirus del mosaico del nabo
Instituto Nacional de Investigación y
Tecnología Agraria y Alimentaria (INIA) Expresión de péptidos vacunales del virus del sarampión en plantas transgénicas 2000
Dpto: Biotecnología (grupo de apoptosis)
Instituto Vasco de Investigación y MEDIBIO: New technologies for producing pharmaceuticals using plant systems 2003-2004
Desarrollo Agrario (NEIKER)
Departamento de Biotecnología BIOPHAR – Production of enzymes for applications in food industries using recombinant techniques
Universidad Pública de Navarra

Dpto. Producción Agraria Producción de antígenos vacunales en plantas mediante transformación cloroplástica 2002
(grupo de agrobiotecnología vegetal)
Universidad de Oviedo Expresión de un antígeno vírico en plantas de patata: optimización de una vacuna contra la enfermedad
1999-2000
Dpto. Bioquímica y Biología Molecular hemorrágica del conejo
* En estos proyectos colabora Fort Dodge Veterinaria, S.A.

ANEXO IV. Empresas
SISTEMA DE
EMPRESA PAÍS MOLÉCULAS
EXPRESIÓN
Agracetus
USA Maíz y algodón Proteínas terapéuticas
www.agracetus.com
Agrenvec
España Virus TuMV Enzimas industriales
www.agrenvec.es
Bayer Cropscience Cánola, algodón

Alemania —
www.bayercropscience.com y arroz
Biopolímeros
Basf Plant Science GmbH
Alemania Cánola
www.basf.de/en
Vitaminas
Lactoferrina humana
Biocem S.A./Biogemma S.A. Francia Maíz y tabaco Lipasa gástrica
Vacuna contra la rabia
Anticuerpos del VIH
Biolex (Epicyte)
USA Maíz Anticuerpos del Herpes Simplex
www.biolex.com
Microbicidas
Bioplanta Gmbh
Alemania Tabaco Anticuerpos
www.bioplanta-leipzig.de
Biosecure Crops
Canadá Patata Anticuerpos monoclonales
www.growmax.biz
Calgene Inc USA Cloroplasto Xilanasas
Cellectis S.A.
Francia Plantas Fármacos
www.cellectis.com
Ceres Inc
USA — —
www.ceresbiotechnology.com
Interferones
Chlorogen Factores de crecimiento

USA Tabaco
www.chlorogen.com
Biopolímeros (elastina)
Vacunas contra antrax,

peste y cólera
Chromatin Inc
USA Fármacos
www.chromatininc.com
Factor intrínseco humano

Cobento Biotech Aps
Dinamarca Arabidopsis
www.cobento.com
Transcobalamina humana
CropDesign
Bélgica Arroz —
www.cropdesign.com
Vacunas de uso veterinario

Dow Agrosciences
USA Maíz
www.dowagro.com
Anticuerpos de uso veterinario
103
SISTEMA DE
EXPRESIÓN
Emlay And Associates USA Cártamo Fármacos
Era Plantech
España Tabaco Calcitonina
www.eraplantech.com
Farmacule Bioindustries Tabaco, banana,

Biopolímeros y proteínas de
Pty Ltd Australia caña de azúcar y
interés terapéutico e industrial
www.farmacule.com leguminosas
Fibrogen Inc Colágeno y gelatina

USA Tabaco y cebada
www.fibrogen.com recombinantes
Potyvirus de la Proteína VP60 de la fiebre

Fort Dodge Veterianaria España
viruela del ciruelo hemorrágica del conejo
Genecor International
USA — Enzimas industriales
www.genencor.com
Genomine Inc Vacunas animales y

Corea del Sur Tomates y tabaco
www.genomine.com humanas comestibles
Greenovation Biotech GmbH

Alemania Maíz Factor IX
www.greenovation.com
Greentec GmbH Alemania — Colágeno y gelatina bovina
Fármacos
Melón coreano,
Guardian Biotechnologies
Canadá tabaco, cánola y Vacunas
www.guardianbio.com
mostaza
Hormonas
Enzimas de restricción
Interferón α y β
Somatotropina
Anticuerpos de cadena sencilla
Anticuerpos monoclonales
Antígenos
Icon Genetics Ag
Alemania/USA Tabaco
www.icongenetics.com
Glucocerebrosidasa
Taumatina
Álbumina
ADNasa
Inhibidor de ARNasa
Insulina
Ingenasa
España — —
www.ingenasa.es
Maíz, trigo, cebada,

KWS Saat AG.
Alemania caña de azúcar y Inulina
www.kws.de
patata
104
SISTEMA DE
EXPRESIÓN
Kosan Bioscience Inc. Enzimas

USA Tabaco
www.kosan.com (poliquétido sintasas)
Vacuna contra el cáncer

Large Scale Biology
USA Tabaco
www.lsbc.com
α-Galactosidasa
Limagrain Group
Francia Maíz —
www.limagrain.com
Lactoferrina
Lisozima
Maltagen Forschung GmbH
Alemania Cebada
www.maltagen.de
Vacuna contra hepatitis
Maxigen Inc
USA — —
www.maxygen.com
Proteínas plasmáticas
Nutracéuticos
Medicago
Canadá Alfalfa Enzimas industriales
www.medicago.com
Colágeno
Mendel Biotechnology
USA — —
www.mendelbio.com
Lipasa gástrica
Meristem Therapeutics HSA como excipiente

Francia Tabaco y maíz
www.meristem-therapeutics.com para vacunas
Lactoferrina
Metabolix Tabaco, alfalfa

USA Biopolímeros (PHAs)
www.metabolix.com y mijo
Anticuerpos y fragmentos de
MPB Cologne GmbH Alemania Patata y cánola
anticuerpos
Monsanto Protein Technology

USA Maíz Avicidina (MAbs)
www.mpt.monsanto.com
Neorx Corporation Proteínas terapéuticas

USA —
www.neorx.com contra el cáncer. Avidicina
Vacunas comestibles de uso

veterinario
Hormonas (diagnóstico del hipo

e hipertiroidismo)
Nexgen Biotechnologies, Inc
Corea del Sur Melón coreano
www.nexgenbiotech.com
Proteínas para el
diagnóstico de HFRS
EGF
Novartis
Multinacional Plantas Enzimas
www.novartis.com
105
SISTEMA DE
EXPRESIÓN
Anticuerpos recombinantes de
Novoplant GmbH Guisante,
Alemania cadena sencilla de uso
www.novoplant.com patata y soja
veterinario
Interleukina-3
Interferón β
Orf Genetics Lechuga Eritropoyetina

Islandia
www.orfgenetics.com y cebada
Stem cell factor (SCF)
Factor estimulante de las

colonias de granulocitos
macrófagos
Phylogix
USA — —
www.phylogix.com
Phytomedics Tabaco y
USA Proteínas terapéuticas
www.phytomedics.com tomate
Pioneer Hi-Bred Biopolímeros

International Inc Multinacional Cánola
www.pioneer.com Enzimas
Planet Biotechnology IgGs contra la caries y

USA Tabaco
www.planetbiotechnology.com resfriado común
Antígenos de la enfermedad
Plant Bioproducts, S. L.
España Cloroplastos hemorrágica del conejo y fiebre
www.plantbioproducts.com
aftosa bovina
Enzimas con aplicaciones

industriales
Plantechno Srl
Italia Arroz y trigo
www.plantechno.com
Proteínas humanas terapéuticas
y de diagnóstico
Plantgenix
USA — —
www.plantgenix.com
GAD & citoquininas contra

Plantigen Inc diabetes tipo I
Canadá Tabaco
www.lhsc.on.ca/plantigen
IL-10
Planton GmbH
Alemania Patata Péptidos antimicrobianos
www.planton.de
Prairie Plant Systems Inc Glicoproteína B

Canadá Tabaco
www.prairieplant.com de hCMV
Vacunas contra Hepatitis B

Prodigene
USA Maíz
www.prodigene.com
Aprotinina
Progenco Co Reino Girasol, maíz y

Proteínas terapéuticas
www.progenco.com Unido tabaco
Fármacos
Sembiosys Genetics Inc.
Canadá Cártamo
www.sembiosys.ca
Cuerpos lipídicos
Serological Corporation
USA — —
www.serologicals.com
106
SISTEMA DE
EXPRESIÓN
Avidina
Stauffer Biotech USA Maíz
β-Glucuronidasa
Subterra*
USA Tabaco Glicoproteína B de hCMV
www.subterrallc.com
Tocoferoles
Tomate,
Sungene GmbH & Co. patatas, tabaco,
Alemania Vitamina K
www.sungene.de cánola y
Arabidopsis
Enzimas industriales
Péptidos
Syngene Biotek Canadá Tabaco y patatas
antimicrobianos
Syngenta Biopharma
Suiza Cártamo Anticuerpos
www.syngenta.com/en/biopharma
Toxin Alert
Canadá Tabaco y patata Anticuerpos
www.toxinalert.com
Unicrop
Finlandia Cebada
www.unicrop.fi
Proteínas de interés terapéuticos
Alternativos a antibióticos
Ventria Bioscience
USA Arroz de uso veterinario: lactoferrina
www.ventriabio.com
y lisozima
Yissum Research
Tabaco Clorofilasa recombinante
Development Co Israel
y tomate terapéutica
www.yissum.co.il
* Joint venture con Prairie Plant Systems Inc.
107
ANEXO V. Patentes
108
Métodos de transformación nuclear
Nº de patente Título de patente Solicitante Año
Commercial use of Arabidopsis for the production of human and animal therapeutic and diagnostic
WO03012035 Icon Genetics 2003
proteins
US6599513 Products for topical applications comprising oil bodies SemBioSys Genetics Inc. 2003
US6509453 Oil bodies and associated proteins as affinity matrices SemBioSys Genetics Inc. 2003
WO02088369 Processes and vectors for amplification or expression of nucleic acid sequences of interest in plants Icon Genetics 2002
Method for expression of biosynthetic genes in plant seeds using novel multiple expression
WO02057464 BASF Plant Science 2002
constructs
US6420548 Method for regulating transcription of foreign genes Medicago 2002
Methods and products for controlling the immune response of a mammal to glutamic acid
US6388850 London Health Sciences 2002
decarboxylase
US6388068 Method for producing foreign polypeptide in plant intercellular fluid Noda Institute for Scientific Research 2002
US6344600 Method for producing human haemoglobin proteins using plant cells Meristem Therapeutics 2002
US2002108149 Methods of increasing polypeptide accumulation in plants Pioneer Hi-Breed Intl. 2002
Method for carrying out the controlled post-harvest production of proteins in host
WO0138508 MPB Cologne 2001
organisms
WO0120974 Quantitative transient protein expression in plant tissue culture Penn State Research Foundation 2001
Application of alpha amylase gene promoter and a signal sequence in the production of
US6288302 National Science Council 2001
recombinant proteins in transgenic plants and transgenic plant seeds
US6284956 Plant selectable marker and plant transformation method Applied Phytologics 2001
US6284946 Banana DNA associated with fruit development Boyce Thompson Inst. 2001
US6210742 Uses of oil bodies SemBioSys Genetics Inc. 2001
US6183762 Oil body based personal care products SemBioSys Genetics Inc. 2001
WO0008142 Fibrous proteins and their production MPB Cologne 2000
US6146645 Uses of oil bodies SemBioSys Genetics Inc. 2000
US6066781 Production of mature proteins in plants Applied Phytologics 2000
Washington State Univ. Research

US6020169 Production of secreted foreign polypeptides in plant cell culture 2000
Foundation
CA2385348 Promoter for regulating expression of foreign genes Medicago 2000
WO9916890 Production of proteins in plant seeds Univ. of California 1999
Recombinant DNA: transformed microorganisms, plant cells and plants: a process for introducing an inducible
EP337532 Mogen Intl.141 1999
property in plants, and a process for producing a polypeptide or protein by means of plants or plant cells
US5994628 Process for protein production in plants Univ. of California 1999
US5948682 Preparation of heterologous proteins on oil bodies SemBioSys Genetics Inc. 1999
US5939288 Plant secretory signal peptides and nectarins Iowa State Univ. 1999
US5990385 Protein production in transgenic alfalfa plants Medicago 1999
US5856452 Oil bodies and associated proteins as affinity matrices SemBioSys Genetics Inc. 1999
CA2353071 Oil bodies as topical delivery vehicles for active agents SemBioSys Genetics Inc. 1999
CA2290278 Oil body based personal care products SemBioSys Genetics Inc. 1999
US5804417 Recombinant production of proteins using 7B2 protein Novartis 1998
US5792922 Oil-body protein cis-elements as regulatory signals SemBioSys Genetics Inc. 1998
US5763748 Production of heterologous proteins in plants and plant cells Mogen Intl. 1998
US5714474 Production of enzymes in seeds and their use Mogen Intl. 1998
109
141
Actualmente pertenece a Syngenta.
110
CA2296008 Rice beta-glucanase enzymes and genes Univ. of California 1998
CA2286861 Method for cleavage of fusion proteins SemBioSys Genetics Inc. 1998
US5689056 HMG2 promoter expression system Virginia Tech Intellectual Properties 1997
US5677474 Producing commercially valuable polypeptides with genetically transformed endosperm tissue Washington Univ. 1997
HMG2 promoter expression system and post-harvest production of gene products in plants and Virginia Tech Intellectual
US5670349 1997
plant cell cultures Properties
US5650554 Oil-body proteins as carriers of high-value peptides in plants SemBioSys Genetics Inc. 1997
The Rubber Research Inst of

US5580768 Method for the production of proteins in plant fluids 1996
Malaysia/ Univ. of Hertfordshire
US5543576 Production of enzymes in seeds and their use Mogen Intl. 1996
Process for the production of biologically active peptide via the expression of modified storage seed
US5487991 Plant Genetic Systems Inc. 1996
protein genes in transgenic plants
The Rubber Research Inst of

EP598589 Method for the production of proteins in plant fluids 1995
Malaysia/ Univ. of Hertfordshire
US5460952 Gene expression system comprising the promoter region of the alpha amylase genes National Science Council of ROC 1995
Process for the production of biologically active peptide via the expression of modified storage seed
CA1337048 Krebbers et al. 1995
protein genes in transgenic plants
Métodos de transformación de cloroplastos e ingeniería de cloroplastos
WO03004658 Gene expression in plastids based on replicating vectors Icon Genetics 2003
US6642053 Genetic engineering of plant chloroplasts Auburn Univ. 2003
US6515206 Plastid transformation of Brassica Calgene 2003
US6512162 Expression of eukaryotic peptides in plant plastids Calgene 2003
WO02057466 Processes and vectors for plastid transformation of higher plants Icon Genetics 2002
WO02055651 Processes and vectors for plastid transformation Icon Genetics 2002
EP01245149 Plastid transformation of Lycopersicon plants Greenovation Biotech GmbH 2002
US6492578 Expression of herbicide tolerance genes in plant plastids Calgene 2002
US6472586 Nuclear-encoded transcriptional system in plastids of higher plants Rutgers Univ. 2002
US6362398 ClpP plastid promoter sequence Syngenta 2002

DNA constructs and methods for stably transforming plastids of multicellular plants and
US6338168 Rutgers Univ. 2002
expressing recombinant proteins therein
Marker free transgenic plants engineering the chloroplast genome without the use of antibiotic
US20020137214 Auburn Univ. 2002
selection
WO0129241 Methods and vectors for site-specific recombination in plant cell plastids Calgene 2001
WO0170939 Methods for transforming plant plastids and making transplastomic plants Icon Genetics 2001
WO0121782 Enhancer elements for increased translation in plant plastids Calgene 2001
WO0104331 Enhanced expression of proteins Calgene 2001
US6297054 Editing-based selectable plastid marker genes Rutgers Univ. 2001
US6218145 Bacterial expression system based on plastid or mitochondrial promoter combinations Monsanto 2001
WO020612 Therapeutically active proteins in plants Novartis 2000

Translation control elements for high-level protein expression in the plastids of higher plants and
WO007431 Rutgers Univ. 2000
ethods of use thereof
WO0003012 Expression of eukaryotic peptides in plant plastids Calgene 2000
US6013860 Expression of enzymes involved in cellulose modification Calgene 2000
111
112
WO199910513 Universal chloroplast integration and expression vectors, transformed plants and products thereof Auburn Univ. 1999
US5925806 Controlled expression of transgenic constructs in plant plastids Calgene 1999
DNA constructs and methods for stably transforming plastids of multicellular plants and
US5877402 Rutgers Univ. 1999
expressing recombinant proteins therein
US586642 Enhanced expression in a plant plastid Calgene 1999
WO985559 Plastid promoters for transgene expression in the plastids of higher plants Rutgers Univ. 1998
WO9811235 Transgenic plants expressing cellulolytic enzymes Novartis 1998
WO9732977 Plastid transformation in Arabidopsis thaliana Rutgers Univ. 1997
US5576198 Controlled expression of transgenic constructs in plant plastids Calgene 1996
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US5545817 Enhanced expression in a plant plastid Calgene 1996
US5451513 Method for stably transforming plastids of multicellular plants Rutgers Univ. 1995
Métodos de purificación de productos
Métodos purificación de productos
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WO02068927 Using viruses to detect or purify proteins Icon Genetics 2002
WO0205922 Method for extracting proteins from plants in pure form MPB Cologne 2002
US6441147 Method for recovering proteins from the interstitial fluid of plant tissues Large Scale Biology 2002
WO0198473 Method for isolating and purifying and resulting protein Meristem Therapeutics 2001
WO0196543 Method of increasing recovery of heterologous active enzymes produced in plants Prodigene Inc. /Genencor 2001
WO0121270 Methods of producing recombinant proteins Prodigene Inc. 2001
US6284875 Method for recovering proteins from the interstitial fluid of plant tissues Large Scale Biology 2001
WO9839461 Methods of commercial production and extraction of protein from seed Prodigene Inc. 1998
US5532142 Method of isolation and purification of fusion polypeptides Univ. of Texas 1996
113
Otras tecnologías
114
Otras tecnologías: promotores, marcadores, confinamiento, direccionamiento, etc.
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WO02096192 Process of producing environmentally safe transgenic organisms Icon Genetics 2002
WO0236786 Method of selecting plant promoters to control transgene expression Medicago 2002
WO0216624 Reduction of transmission of transgenes in plants Inst. of Molecular Agrobiology 2002
WO0210160 Processes and vectors for producing transgenic plants Icon Genetics 2002
WO02097080 Amplification vectors based on trans-splicing Icon Genetics 2002
WO02057468 Method for secretory production of glycoprotein having human-type sugar chain using plant cell Fujiyama et al. 2002
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Materials and methods for amplifying and enhancing transcribing of polynucleotides in plants and
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portions thereof
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WO0183792 Plant transcription factors and enhanced gene expression Applied Phytologics 2001
WO0173085 Expression vectors for concentrating a recombinantly produced protein in different cell compartments MPB Cologne 2001
A construct capable of release in closed circular form from a larger nucleotide sequence
WO0172996 permitting site specific expression and/or developmentally regulated expression of selected Queensland Univ. of Technology 2001
genetic sequences
WO0155434 Inhibition of carbohydrate-modified enzymes in host organisms MPB Cologne 2001
WO0116340 Flax seed specific promoters SemBioSys Genetics Inc. 2001
EP1141350 Methods and genetic compositions to limit -outcrossing and gene flow in crop plants Dow AgroSciences 2001
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US6100092 Materials and methods for amplifying polynucleotides in plants Rutgers Univ. /Phytomedics 2000
WO9967406 Plant selectable marker and plant transformation method Applied Phytologics 1999
CA2354195 Methods and genetic compositions to limit outcrossing and undesired gene flow in crop plants Dow AgroSciences 1999
Producción de vacunas
Producción de vacunas
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US6528063 Recombinant vaccines against IBDV Meristem Therapeutics 2003
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US6406885 Plants and plant cells expressing histidine tagged intimin Henry M. Jackson Foundation 2002
US2002058312 Expression cassettes and methods for delivery of animal vaccines Prodigene Inc. 2002
WO0195934 The use of plant oil-bodies in vaccine delivery systems SemBioSys Genetics Inc. 2001
Veterinary Infectious Disease
WO0194392 Recombinant subunit proteins from porcine parovirus produced in plants 2001
Organization (VIDO)
WO0168682 Self antigen vaccines for treating B cell lymphomas and other cancers Large Scale Biology 2001
WO0155169 Transgenic plant-based vaccines Loma Linda Univ. 2001
Method of stimulating an immune response by administration of host organisms that express
US6261561 Henry M. Jackson Foundation 2001
intimin alone or as a fusion protein with one or more other antigens
US6194560 Oral immunization with transgenic plants Texas A & M Univ. 2001
CN1286120 Cholera vaccine prepared from transgenic carrot and its preparing process Chinese Inst of Microbiology 2001
WO0020612 Therapeutically active proteins in plants Novartis 2000
US6042832 Polypeptides fused with alfalfa mosiac virus or ilarvirus capsid Thomas Jefferson Univ. 2000
WO9937784 Porcine reproductive and respiratory syndrome oral vaccine production in plants Univ. of Guelph. 1999
WO9918225 Expression of cholera toxin B subunit in transgenic plants and efficacy thereof in oral vaccines Loma Linda Univ. 1999
Agriculture and Agri-Food Canada
CA2319141 Porcine reproductive and respiratory syndrome oral vaccine production in plants 1999
(AAFC)
CA2221843 Porcine reproductive and respiratory syndrome oral vaccine production in plants 1998
(AAFC)
WO9743428 Transgenic plants expressing rabies glycoprotein G, and glycoproteins thus obtained Biocem 1997
US5686079 Oral immunization by transgenic plants Washington Univ. 1997
US5612487 Anti-viral vaccines expressed in plants Edible Vaccines Inc.142 1997
US5484719 Vaccines produced and administered through edible plants Edible Vaccines Inc. 1996
WO9420135 Vaccines expressed in plants Prodigene Inc. 1994
115
142
Actualmente pertenece a Prodigene.
Producción de anticuerpos
116
Producción de anticuerpos
WO0250289 Methods for the production of multimeric proteins and related compositions SemBioSys Genetics 2002
WO02101006 Production of proteins in plants Icon Genetics 2002
US6417429 Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies Scripps Research Inst. 2002
Institute für Pflanzengenetik und
US6403371 Cassettes for the expression of storable proteins in plants 2002
Kulturpflanzenforschung (IPK)
US6391280 J chain polypeptide targeting molecule linked to an imaging agent Epicyte Pharmaceuticals143 2002
US6303341 Method for producing immunoglobulins containing protection proteins in plants and their use Planet Biotechnology 2001
US6251392 Epithelial cell targeting agents Epicyte Pharmaceuticals Inc. 2001
US6140075 Method for producing antibodies and protein toxins in plant cells Monsanto 2000
US6080560 Method for producing antibodies in plant cells Monsanto 2000
US6046037 Method for producing immunoglobulins containing protection proteins in plants and their use Planet Biotechnology 2000
US6045774 J chain polypeptide targeting molecule linked to an imaging agent Epicyte Pharmaceuticals 2000
WO9920310 J-chain and analogues as epithelial cell targeting conjugates Epicyte Pharmaceutical Inc. 1999
EP946717 Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies Scripts Research Inst. 1999
US5959177 Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies Scripts Research Inst. 1999
WO9830592 Novel epithelial tissue targeting agent Epicyte Pharmaceutical Inc. 1998
WO9742313 Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies Scripts Research Inst. 1997
WO972900 Cassettes for the expression of storable proteins in plants 1997
US5639947 Compositions containing glycopolypeptide multimers and methods of making same in plants Scripps Research Inst. 1997
CA2252454 Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies Scripts Research Inst. 1997
WO9621012 Method for producing immunoglobulins containing protection proteins in plants and their use Planet Biotechnology 1996
United Medical and Dental
CA2208783 Methods for producing immunoglobulins containing protection proteins in plants and their use Schools of Guy's/St. Thomas's 1996
hospitals
Compositions containing plant-produced glycopolypeptide multimers, multimeric proteins and
US5202422 Scripps Research Inst. 1993
method of their use
143
Actualmente pertenece a Biolex.
Producción de proteínas
US6569831 Recombinant lactoferrin, methods of production from plants and uses Meristem Therapeutics 2003
Korea Inst of Science and
JP5041990 Tobacco for producing human insulin protein and its production 2003
Technology
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US20020162140 Expression of recombinant human acetylcholinesterase in transgenic plants Univ. of Arizona 2002
WO0194393 Synthetic spider silk proteins and the expression thereof in transgenic plants 2001
Method for the manufacture of recombinant unhydroxylated collagen polypeptide fibres obtained
WO0177422 Meristem Therapeutics 2001
thereby
WO0114571 Commercial production of chymosin in plants SemBioSys Genetics Inc. 2001
US6303766 Soybean phytase and nucleic acid encoding the same Virginia Tech 2001
US6288304 Expression of somatotropin in plant seeds SemBioSys Genetics Inc. 2001
FR2809413 Production of recombinant allergens in plants D. Exp Ind. Des Tabacs et Allum 2001
WO0000624 Production of urokinase in plant-based expression systems CropTech 2000
US6137032 Xylanase obtained from an anaerobic fungus 2000
(AAFC)
US6127145 Production of alpha 1-antitrypsin in plants Applied Phytologics 2000
US6087558 Commercial production of proteases in plants Prodigene Inc. 2000
US6022846 Expression of phytase in plants Mogen Intl. 2000
CA2309342 Protein production in transgenic plant seeds Academia Sinica 2000
CA2368854 Barley gene for thioredoxin and NADP-thioredoxin reductase Univ. of California 2000
CA2368744 Value-added traits in grain and seed transformed with thioredoxin Univ. of California 2000
WO9953037 Optimized nucleotide sequence encoding organophosphorus hydrolase and methods of use for same Prodigene 1999
Method for producing, by plant cells, “-1-antitrypsin and its alleles, and products containing the
EP1051503 Groupe Limagrain Holding 1999
resulting “-1-antitrypsin
Wisconsin Alumni Research
US5981835 Transgenic plants as an alternative source of lignocellulosic-degrading enzymes 1999
Foundation
US5948667 Xylanase obtained from an anaerobic fungus 1999
(AAFC)
117
118
US5929304 Production of lysosomal enzymes in plant-based expression systems CropTech 1999

Cleaning compositions containing plant cell wall degrading enzymes and their use in cleaning
US5872091 Genencor 1999
methods
US5855881 Mammalian alcohol dehydrogenase and aldehyde dehydrogenase production in plants Loike et al. 1999
WO9850543 Recombinant lactoferrin, methods of production from plants and uses Biocem 1998
WO9827202 Recombinant collagen and derived proteins produced by plants, methods for obtaining them and uses Meristem Therapeutics 1998
Pancreatic lipases and/or recombinant colipases and derived polypeptides produced by plants,
WO9817807 Biocem 1998
methods for obtaining them and use thereof
EP862641 Commercial production of avidin in plants Prodigene Inc. 1998
EP859852 Commercial production of aprotinin in plants Prodigene Inc. 1998
US5804694 Commercial production of B-glucuronidase in plants Prodigene Inc. 1998
WO9717455 Commercial production of avidin in plants Prodigene Inc 1997
WO9717454 Commercial production of beta-glucuronidase in plants Prodigene Inc. 1997
WO9717453 Commercial production of aprotinin in plants Prodigene Inc. 1997
CA2233538 Commercial production of aprotinin in plants Prodigene Inc. 1997
Recombinant preduodenal lipases and polypeptide derivatives produced by plants, processes for
WO9633277 Meristem Therapeutics 1996
obtaining them and their uses
KR9607190 Human interlukin-6 producing tobacco 1996
technology
KR9309562 Plant for producing IL-2 1993
Technology
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Ingeniería metabólica: producción de bioplásticos
US6620601 Methods for transformation of plants, transformed plants and processes for preparation of polyesters Riken 2003
US6586658 Modification of fatty acid metabolism in plants Metabolix 2003
WO0240690 Production of medium chain length polyhydroxyalkanoates from fatty acid biosynthetic pathways Metabolix 2002
US6492134 Method for producing polyhydroxyalkanoates in recombinant organisms Univ. Laval /AAFC 2002
US6475734 Polyhydroxyalkanoate synthase genes Pioneer Hi-Breed Intl. 2002
USRE37543 DNA sequence useful for the production of polyhydroxyalkanoates Monsanto 2002
US6329183 Polyhydroxyalkanoate production from polyols Metabolix 2001
US6323010 Polyhydroxyalkanoate biopolymer compositions Metabolix 2001
US6262340 Production of polyketides in plants Kosan Biosciences Inc. 2001
WO0068409 Methods for purifying polyhydroxyalkanoates Metabolix 2000
WO0043523 Transgenic systems for the manufacture of poly(3-hydroxy-butyrate-co-3-hydroxyhexanoate Metabolix 2000
Plant cells and plants transformed with Streptococcus mutans gene encoding glucosyltransferase
US6127603 Pioneer Hi-Breed Intl. 2000
C enzyme
D enzymes
US6103956 Polyhydroxyalkanoate synthesis in plants Univ. of Minnesota 2000
US6091002 Polyhydroxyalkanoates of narrow molecular weight distribution prepared in transgenic plants Monsanto 2000
B enzymes
US6083729 Methods for isolating polyhydroxyalkanoates from plants Metabolix 2000
US6228623 Polyhydroxyalkanoates of narrow molecular weight distribution prepared in transgenic plants Monsanto 2000
WO9945122 Modification of fatty acid metabolism in plants Metabolix 1999
WO9914313 Biological systems for manufacture of polyhydroxyalkanoate polymers containing 4-hydroxyacids Metabolix 1999
Methods of optimizing substrate pools and biosynthesis of poly-B-hydroxybutyrate-co-poly-B-
WO9800557 Monsanto 1998
hydroxyvalerate in bacteria and plants
Massachusetts Institute of
EP482077 Method for producing polyester biopolymers 1998
Technology (MIT)
119
120

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Technology (MIT)
US5750848 DNA sequence useful for the production of polyhydroxyalkanoates Monsanto 1998
US5663063 Method for producing polyester biopolymers 1997
Technology (MIT)
US5661026 Gene encoding bacterial beta-ketothiolase 1997
Technology (MIT)
US5534432 Polyhydroxybutyrate polymerase 1996
Technology (MIT)
US5512669 Gene encoding bacterial acetoacetyl-CoA reductase 1996
Technology (MIT)
US5480794 Overproduction and purification of soluable PHA synthase 1996
Technology (MIT)
Processes for producing polyhydroxybutyrate and related polyhydroxyalkanoates in the plastids of
WO9505472 Michigan State Univ. 1995
higher plants
US5459258 Polysaccharide based biodegradable thermoplastic materials 1995
Technology (MIT)
WO9302187 Transgenic plants producing polyhydroxyalkanoates Michigan State Univ. 1993
US5250430 Polyhydroxyalkanoate polymerase 1993
Technology (MIT)
US5245023 Method for producing novel polyester biopolymers 1993
Technology (MIT)
US5229279 Method for producing novel polyester biopolymers 1993
Technology (MIT)
WO9219747 Production of polyhydroxy alkanoate in plants Zeneca 1992
Ingeniería metabólica: otras rutas metabólicas
Ingeniería metabólica: otras rutas metabólicas
US6538181 Glycogen biosynthetic enzymes in plants Calgene 2003
US6451576 Sesquiterpene synthases from grand fir (Abies grandis), and methods of use Washington State Univ. 2002
US6429014 Monoterpene synthases from grand fir (Abies grandis) Washington State Univ. 2002
Univ of Calif./
US6342380 Germacrene C synthase gene of Lycopersicon esculentum 2002
Washington State Univ.
WO0159136 Production of non-cariogenic sugars in transgenic plants 2001
US6287835 Transacylases of the paclitaxel biosynthetic pathway Washington State Univ. 2001
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144
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WO9937794 Methods and composition for modulating flavonoid content Hindustan Lever Ltd 1999
US5994114 Compositions and methods for taxol biosynthesis Washington State Univ. 1999
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US5365017 Method and composition for increasing sterol accumulation in higher plants Amoco Corp 1994
US5306862 Method and composition for increasing sterol accumulation in higher plants Amoco Corp 1994
144
Adquirida por Unilever.
145
Adquirida por BP.
121
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12. Lista de abreviaturas
ADN Ácido desoxirribonucleico.
AGE Administración General del Estado.
AMV Virus del mosaico de la alfalfa.
APHIS Animal and Plant Health Inspection Service.
ARN Ácido ribonucleico.
BIO Biotechnology Industry Organization.
CACCP Análisis de contención y puntos de control crítico.
CICYT Comisión Interministerial de Ciencia y Tecnología.
CMV Virus del mosaico del caupí.
EMEA European Medicines Agency.
FECYT Fundación Española para la Ciencia y la Tecnología.
FDA Food and Drug Administration.
HMGR2 Hidroxil-3-metilglutaril Coenzima A reductasa 2.
Ig Inmunoglobulina.
MARS Matrix attachment regions.
mRNA ARN mensajero.
NFPA United States National Food Processing Association.
OMG Organismo modificado genéticamente.
PHA Polihidroxilalcanoato.
PHB Poli (3-hidroxibutirato).
PPP Potyvirus de la viruela del ciruelo.
PST Proteína soluble total.
PVX Virus X de la patata.
RE Retículo endoplásmico.
TBSV Virus del enanismo ramificado del tomate.
TMV Virus del mosaico del tabaco.
TuMV Potyvirus del mosaico del nabo.
USDA United States Department of Agriculture.
126
13. Glosario
• Agrobacterium tumefaciens: Bacteria • Cultivo hidropónico: Sistema de cultivo de
patógena de plantas capaz de insertar en éstas plantas en el que el suministro de los nutrientes
una parte de su material genético a través de se realiza a través de una disolución embebida
heridas. Esta capacidad se aprovecha para en un sustrato inerte.
introducir genes en plantas, sustituyendo
algunos de los genes que contiene la bacteria • Efectos de posición: Variaciones en los niveles
por los genes de interés. de expresión de un transgén debidos al lugar de
inserción del mismo en el genoma de la planta.
• Alérgeno: Sustancia capaz de desencadenar
una respuesta inmune en determinados • Efectos epigenéticos: Modificaciones no
organismos. mutacionales, generalmente no heredables y de
carácter no permanente.
• Anticuerpo: Proteína sintetizada por el sistema
inmunológico como respuesta a la presencia de • Electroporación: Aplicación de pulsos eléctricos
una sustancia extraña, a la que se une de de elevado voltaje que inducen la formación de
manera selectiva. poros reversibles en la membrana de
protoplastos u otras células, a través de los
• Antígeno: Sustancia capaz de desencadenar la cuales puede introducirse material genético en la
producción de anticuerpos por el sistema célula.
inmunológico.
• Epítopo: Cualquier estructura o secuencia que
• Aparato de Golgi: Compartimento celular es reconocida por un anticuerpo. También
implicado en la glicosilación y direccionamiento denominado determinante antigénico.
de proteínas, formado por un conjunto de
vesículas y sacos aplanados limitados por • Expresión transitoria: Expresión de genes
membranas. foráneos sin necesidad de que se produzca
integración de estos genes en el genoma de la
• Apoplasto: Espacio que existe entre la pared célula transformada.
celular y la membrana plasmática en la célula
vegetal. • Glicosilación: Adición covalente de moléculas
de azúcares denominadas glicanos a
• Ácido ribonucleico mensajero (mRNA): determinados aminoácidos de cadenas
Molécula de ARN transcrita a partir de una polipeptídicas.
molécula de ADN, que puede ser traducida a una
cadena polipéptidica cuya secuencia de • Hirudina: Anticoagulante natural obtenido a
aminoácidos viene codificada en su secuencia. partir de la sanguijuela.
• Autenticidad estructural: Característica de la • Intrón: Fragmento de ADN de los genes de

proteína recombinante por la que su estructura eucariotas que se transcribe a ARN y es
es idéntica a la de la proteína nativa, eliminado durante la maduración del mRNA, por
conservando su función biológica. lo que no se traduce a proteínas.
• Citosol: Porción fluida del citoplasma. • Lignina: Molécula orgánica compleja que
imparte rigidez y fortaleza a las paredes
• Cloroplasto: Orgánulo subcelular característico secundarias de la célula vegetal.
de las células vegetales en cuyo interior se
realiza la fotosíntesis, que contiene su propio • Lipofílico: Que presenta afinidad por las grasas.
material genético.
• Micotoxina: Sustancia tóxica producida por
• Confinamiento: Se refiere a las medidas de hongos que tiene efectos negativos agudos y/o
tipo agronómico o biológico que se utilizan con crónicos sobre la salud de los animales y de los
el fin de limitar el contacto de un organismo seres humanos. Varias de ellas están clasificadas
cuyo material genético ha sido modificado con la como carcinógenos o posibles carcinógenos para
población y el medio ambiente. los seres humanos.
127
• Micropropagación: Multiplicación in vitro y/o • Proteína foránea: Proteína procedente de otro
regeneración de materiales vegetales en organismo.
condiciones asépticas en medios de cultivo que
contienen los nutrientes esenciales para el • Protoplasto: Célula a la que se ha eliminado la
crecimiento. pared celular mediante procesos químicos o
enzimáticos. En suspensión son capaces de
• Modificaciones postraduccionales: Conjunto incorporar de manera natural fragmentos de
de modificaciones que pueden producirse en las ADN que se encuentren en el medio.
proteínas una vez sintetizadas, encaminadas a
que adquieran una configuración adecuada. • Recombinación homóloga: Proceso por el cual
se pueden intercambiar fragmentos entre dos
• Neutropenia: Déficit anormal de células moléculas de ADN a través de secuencias
neutrófilas en la sangre como consecuencia del idénticas de nucleótidos.
cual las personas afectadas son más
susceptibles a infecciones. • Retículo endoplásmico: Sistema membranoso
formado por una red de sáculos o cisternas
• Oleosinas: Proteínas lipofílicas implicadas en la aplanados y vesículas que se encuentra en el
formación de estructuras de almacén de lípidos. citoplasma celular. Interviene en la síntesis y el
transporte de proteínas.
• Oligosacárido: Hidrato de carbono formado por

la unión de entre dos y diez monosacáridos. • Secuencia líder: Secuencia que aparece en el
mRNA en el extremo 5’ que no es traducida a
proteínas.
• Operón policistrónico: Conjunto de genes
controlados por un único promotor que se
• Secuencias oncogénicas: Secuencias que
transcriben en un único mRNA.
codifican genes que estimulan la reproducción
celular provocando crecimientos incontrolados
• Péptido señal: Secuencia de 15 a 30 que causan la formación de tumores.
aminoácidos situada en el extremo amino
terminal de una proteína que contiene
• Silenciamiento: Conjunto de fenómenos que
información acerca del destino final de la
pueden inhibir la expresión de los transgenes
proteína en la célula.
insertados en una planta.
• Plantas transplastómicas: Plantas

• Somatotropina: Hormona secretada por
transgénicas en las que el gen foráneo se ha
mamíferos que estimula la síntesis de proteínas
insertado en el material genético de los
y el crecimiento de los huesos largos en piernas
cloroplastos en lugar de en el núcleo celular.
y brazos. También denominada hormona de
crecimiento.
• Plásmido Ti: Molécula de ADN circular de la
bacteria Agrobacterium tumefaciens que • Traducción: Proceso mediante el cual se
contiene los genes responsables de la inducción produce la síntesis de polipéptidos a partir de un
de tumores en plantas. Se utiliza como vector mRNA que codifica la secuencia de aminoácidos
para introducir ADN foráneo en plantas. de los mismos.
• Plastoma: Material genético de los cloroplastos. • Transcripción: Proceso mediante el cual se

forma una molécula de mRNA a partir de un
• Prión: Agente infeccioso responsable de varias molde de ADN.
enfermedades neurodegenerativas en los
mamíferos entre las que se encuentra la • Transgén: Gen procedente de un organismo
encefalopatía espongiforme bovina o “mal de las que se ha incorporado en el genoma de otro.
vacas locas”.
• Vacuna: Preparación de un organismo patógeno
• Promotor: Secuencia de ADN adyacente al gen muerto o atenuado, o de determinantes
necesaria para que éste sea transcrito a ARN. antigénicos derivados, capaz de inducir una
También denominado secuencia promotora. respuesta inmune duradera y protectora contra
ese patógeno.
• Proteína recombinante: Proteína cuya
secuencia de aminoácidos está codificada por un • Vacuna atenuada: Vacuna producida a partir
gen clonado. de un organismo patógeno vivo que ha sido
128
modificado para obtener una forma menos

virulenta.
• Vacuna de subunidades: Vacuna elaborada a

partir de proteínas u otras moléculas
procedentes de un organismo patógeno, capaces
de inducir una respuesta inmune. Estas
moléculas pueden obtenerse mediante
purificación a partir del organismo patógeno o
pueden sintetizarse artificialmente.
• Vacuna inactivada: Vacuna elaborada a partir

de organismos patógenos completos tratados
para eliminar su capacidad infectiva.
• Vacuola: Estructura muy abundante en células

vegetales, que consiste en una cavidad rodeada
de una membrana en la que se acumulan
distintos productos.
• Variación somaclonal: Cambios genéticos o

epigenéticos que aparecen de forma espontánea
en el cultivo in vitro de tejidos.
• Vector: Vehículo de transferencia de un gen

foráneo a un organismo hospedador, que
contiene todos los elementos necesarios para su
expresión. Suelen ser virus o plásmidos
modificados por ingeniería genética.
129
Orense, 69, planta 2ª - 28020 Madrid
Teléfono: 91 449 12 50 • Fax: 91 571 54 89
www.gen-es.org

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Sector agroalimentario

Los autores de este informe agradecen la colaboración

La reproducción parcial de este informe está autorizada bajo

Genoma España no se hace responsable del uso que se

© Fundación Española para el Desarrollo

Autores: Olga Ruiz Galán (CIAA)

Coordinador: Miguel Vega García (Genoma España)

Edición: Silvia Enríquez (Genoma España)

1. INTRODUCCIÓN. PLANTAS BIOFACTORÍA 9

2. TECNOLOGÍAS PARA LA OBTENCIÓN DE PLANTAS BIOFACTORÍA 14

2.1. Sistemas de expresión de proteínas recombinantes. 14

3. CULTIVOS DE INTERÉS EN AGRICULTURA MOLECULAR 35

3.1. Plantas de hoja y forrajeras. 36

4.1. Proteínas recombinantes. 41

Anexo I. Proyecto Pharma-Planta. 94

11. REFERENCIAS 122

12. LISTA DE ABREVIATURAS 126

13. GLOSARIO 127

La legislación aplicable a las plantas biofactoría

Por último, se analizará cuál es la posición de

1. Introducción. Plantas biofactoría

La expresión “agricultura molecular” procede de la expresión en inglés “molecular farming” y consiste

La ingeniería metabólica consiste en la modificación de las rutas metabólicas de la planta para

Consumo animal Consumo humano

Figura 1. Esquema general

VENTAJAS DE LA UTILIZACIÓN DE PLANTAS BIOFACTORÍA 2, 3, 4

(continúa en pág. siguiente)

– Puede aumentarse la estabilidad de las proteínas recombinantes mediante su acumulación o

– La pared celular protege a la proteína contra la degradación en el tracto gastrointestinal,

• Referentes a la seguridad de los productos obtenidos

FACTORES CRÍTICOS DE LAS PLANTAS BIOFACTORÍA10, 11, 12

– Riesgo de permanencia en el suelo de restos procedentes de las plantas transformadas como

– Riesgo de permanencia en el medio de proteínas transgénicas potencialmente peligrosas que

• Salud humana y animal

– Riesgo de contaminación con herbicidas o insecticidas que se utilizan en el cultivo de plantas.

– Pueden existir problemas de expresión baja para algunas proteínas.

– Dificultad para la dosificación en el caso de vacunas comestibles. Cuando la administración de la

2.1. Sistemas de expresión animales o microbianas), consiguiendo que la

Regeneración Nueva planta

Figura 2. Transformación estable.

Figura 3. Expresión transitoria.

2.1.1. Transformación genética La transformación genética estable de plantas

VENTAJAS E INCONVENIENTES DE LA TRANSFORMACIÓN NUCLEAR

• Es necesario utilizar marcadores para seleccionar las plantas transformadas.

VENTAJAS E INCONVENIENTES DE LA TRANSFORMACIÓN

• Ausencia de efectos epigenéticos como silenciamiento, cosupresión, etc.

• Las proteínas recombinantes se acumulan en el interior del cloroplasto previniendo problemas de

• Riesgo de transferencia horizontal de los transgenes a bacterias debido a la homología que

• La transformación de cloroplastos sólo se hace de manera rutinaria en tabaco y en el alga

• No se produce la exportación de las proteínas sintetizadas hacia otros orgánulos o compartimentos

Construcción del plásmido Ti

Integración del ADN

Agrobacterium Infección de la célula vegetal con

Figura 4. Transformación mediante Agrobacterium.

2.1.1.2. Transformación biolística26

Figura 5. Transformación biolística.

2.1.1.3. Microinyección La incorporación del ADN puede facilitarse

2.1.1.4. Transformación La obtención de protoplastos con capacidad

COMPARACIÓN DE LOS DISTINTOS SISTEMAS DE TRANSFORMACIÓN ESTABLE

– Requiere regeneración mediante cultivo de tejidos.

– Requiere regeneración mediante cultivo de tejidos.

– Permite transformación – Requiere regeneración.

Tabla 1. Ventajas e inconvenientes de los distintos sistemas de transformación estable.

2.1.2. Expresión transitoria La expresión transitoria de genes generalmente se