Efectos de la concentración y efecto del pH

Reactivos R.E.1 R.E.2 R.E.3 R.E.4 R.E.5

Agua destilada (µ l) 90 80 60 20 ……

Sustrato 0.5 0.5 0.5 0.5 0

Pre Por 5 minutos
incubar
enzima 10 20 40 80 100

Resultados

Absorbancia Blanco 1 blanco blanco Blanco Blanco

tubo 2 tubo 3 tubo 4 tubo 5 tubo
640 nm 0.938 0.845 0.880 0.914 0.871

Absorbancia Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 Muestra 4 Muestra 5

640 nm 0.934 0.804 0.751 0.729 0.743
Diferencia de las absor. 0.004 0.041 0.129 0.185 0.128
( abs B – abs M )

Tabla n ° 1 resultados de concentración y velocidad máxima

ABSORVANCIA Abs = a.b.[C] VELOCIDAD

mg/ml.min MAXIMA

0.004 0.00767 0.01534

0.041 0.0786 0.01572
0.129 0.2476 0.00495
0.185 0.3550 0.07101
0.128 0.2456 0.04912

Ejemplo del cálculo de la concentración informe anterior, tenemos de dato velocidad

0.5210

Abs = a.b.[𝐶]
𝐴𝑏𝑠
=[𝐶]𝑖 ;
𝑎.𝑏
0.004
= 0.00767
0.5210
𝑑[𝑆]
Ejemplo del cálculo de la Velocidad máxima 𝑑𝑇
, tiempo 5 minutos
0.0767
V1 = 5
= 0.01534
RESULTADO DE LA CONCENTRACION

Tabla n ° 2 resultados de Volumen Vs Absorbancia

Volumen Absorbancia
0.01 0.01472
0.02 0.01572
0.04 0.00495
0.08 0.07101
0.1 0.04912

0.1 VOLUMEN VS ABSORBANCIA

0.08
ABSORBANCIA

0.06
0.04
0.02
0
0 2 4 6 8 10
VOLUMEN

Grafica N ° 1 Absorbancia VS Velocidad

Tabla n ° 3 de la velocidad máxima vs volumen

Volumen Velocidad
0.01 0.01534
0.02 0.01572
0.04 0.00495
0.08 0.07101
0.1 0.04912

volumen vs velocidad
0.08
0.07
0.06
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12

Grafica N ° 2 Volumen VS Velocidad

Resultados del Ph

Tabla n ° 4 resultados de Ph Vs Absorbancia

Absorbancia Ph
0.026 3
0.151 5
0.232 7
0.054 8
0.019 10

Tabla n ° 5 resultados de concentración y velocidad máxima

ABSORVANCIA Abs = a.b.[C] VELOCIDAD

mg/ml.min MAXIMA

0.026 0.0499 0.00998

0.151 0.2898 0.05798
0.232 0.4452 0.08904
0.054 0.1036 0.02072
0.019 0.0364 0.00728

velocidad vs Ph
0.1
0.09
0.08
0.07
0.06
velocidad

0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
0 2 4 6 8 10 12
Ph

Grafica N ° 3 Ph VS Velocidad
Discusiones

 La actividad enzimática aumenta , hasta alcanzar la velocidad máxima , punto donde

la enzima se satura , debido a que la enzima tiene todos sus sitios activos
 Las enzimas actúan dentro de límites estrechos de pH (pH óptimo de la reacción). Por
ejemplo, la pepsina (enzima estomacal) tiene un pH óptimo de 2, al graficar su
actividad enzimática para valores crecientes de pH, comenzando desde la zona ácida,
se obtiene una curva en forma de campana. El máximo de la curva corresponde al pH
óptimo en el cual la enzima tiene su máxima actividad. En medios muy ácidos o muy
alcalinos, la enzima se desnaturaliza y se inactiva.
 En la gráfica n ᴼ 1 no se podría determinar la velocidad máxima ya que no se conoce lo
suficiente puntos para poder observar hasta dónde va la curva.

Conclusión
 Se logró determinar el ph óptimo el cual fue 7 con una absorbancia de 0.232
 Se logró realizar correctamente la gráfica de la velocidad vs volumen.