UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

CATEDRA DE INMUNOLOGIA
INFORME DE PRÁCTICA

Nombre: CRUZ ROMÁN VLADIMIR SEBASTIÁN

Curso: P1 – Calderón
Fecha: 22/07/2018
Tema: Inmunidad Humoral

OBJETIVO:

 Entender los procesos moleculares implicados en la producción de anticuerpos,

su relación y su contribución en el mantenimiento de la inmunidad adaptativa.

 Determinar la presencia de anticuerpos anti Helicobacter pylori mediante

inmunocromatografía

MATERIAES

 Alcohol
 Algodón
 Jeringuillas de 10 ml
 Tubos con anticoagulante (EDTA)
 Torniquete
 Marcador de laboratorio.
 Kit de Inmunocromatografía para H. pylori
 Guantes estériles

INTRODUCCION:
La inmunocromatografía es una de las técnicas de inmunodiagnóstico más modernas
cuyas principales ventajas son la simplicidad y rapidez de la prueba. Cada vez son más
las aplicaciones de esta técnica, tanto en el ámbito de los test, debido a que no es necesario
reactivos ni instrumentación adicional, como en el campo clínico.

Se puede realizar mediante un dispositivo simple desarrollado para detectar la presencia

(o la ausencia) de un compuesto objetivo en la muestra (la matriz). Este tipo de pruebas
son utilizadas comúnmente para el diagnóstico médico tanto para pruebas en casa, o de
empleo en el laboratorio. Se presenta en un formato de tira, en el cual la muestra problema
fluye a lo largo de un sustrato sólido por medio de una acción capilar.

La inmunocromatografía se basa en la migración de una muestra a través de una

membrana de nitrocelulosa. La muestra es añadida en la zona del conjugado, el cual está
formado por un anticuerpo específico contra uno de los epítopos del antígeno a detectar
y un reactivo de detección. Si la muestra contiene el antígeno problema, éste se unirá al
conjugado formando un complejo inmune y migrará a través de la membrana de
nitrocelulosa. Si no, migrarán el conjugado y la muestra sin unirse.

La zona de captura está formada por un segundo anticuerpo específico contra otro epítopo
del antígeno. Al llegar la muestra a esta zona, los complejos formados por la unión del
antígeno y conjugado quedarán retenidos y la línea se coloreará en este caso como rosa o
azul (muestras positivas). En el caso contrario las muestras son negativas.
La zona control está formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de
detección. Cuando el resto de muestra alcanza esta zona, el anticuerpo se unirá al
conjugado libre que no ha quedado retenido en la zona de captura. Esta línea es un control
de que el ensayo ha funcionado bien, porque se colorea siempre, con muestras positivas
y negativas.

MÉTODOS:

1. Trabajar con guantes todo el tiempo.

2. Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.
3. Extraer 2 ml de sangre mediante punción venosa idónea, es decir, con las medidas de
asepsia indispensables.
4. Colocar delicadamente la sangre en un tubo tratado con anticoagulante (EDTA).
5. Centrifugar la sangre durante 10 minutos a 3.000 r.pm.
6. Cuidadosamente, con micropipeta, dispensar 10 microlitros de plasma en el pocillo S
de la placa individual y accionar el cronómetro.
7. Observar el cambio de coloración de la cinta
8. Cuando se han cumplido los 10 minutos observar si la banda C está de color púrpura.
Eso indica que el procedimiento técnico fue correctamente realizado.
9. Observar si hay coloración púrpura en la zona T de la cinta. Eso indica que la prueba
es positiva para la presencia de anticuerpos anti-helicobacter. Pero la banda C también
debe estar coloreada.
10. Si ninguna de las bandas (C, T) está coloreada la técnica ha fallado.
11. Si solo la banda T está coloreada la técnica ha fallado.

RESULTADOS

La prueba de helicobacter pylori es una inmunoprueba cualitativa que se basa en la

migración de inmunocomplejos a través de una membrana sólida. El resultado debe ser
leído a los 10 minutos No lea el resultado después de 20 minutos. La interpretación que
se debe dar es:
Positivo.- Aparición de dos líneas rojas distintas. Una línea roja que debe estar en la
región de la línea de control (c) Y la otra línea roja debe estar en la región de la línea de
prueba (t).
Negativo.- Una línea aparece en la región de la línea control (c).
No Válido.- La línea de control (c) no aparece.
CONCLUSIONES

1. La inmunocromatografía es una prueba utilizada para la detección de anticuerpos

en el plasma o suero. Con este objetivo se utilizan moléculas móviles (oro
coloidal, u otras) recubiertas con el antígeno al que deben estar dirigidos los
anticuerpos.
2. Las moléculas inmóviles pueden estar ubicadas en dos tipos de bandas, una de
ellas denominada control, tendrá anticuerpos dirigidos contra el antígeno que
recubre la molécula móvil, por lo que esta banda siempre se teñirá.
3. La segunda banda estará cubierta por anticuerpos denominados anti humano,
porque están dirigidos contra el anticuerpo que estamos buscando, por lo que esta
banda se teñirá solo si el paciente ha desarrollado una respuesta inmunitaria
humoral
4. Las pruebas de inmunocromatografía no solo sirven para la detección de
anticuerpos, también son utilizadas para la detección de antígenos, en este caso la
molécula móvil estará recubierta con anticuerpos.

ANEXOS

Imagen 1: Inmunoprueba negativa (Una línea aparece en la región de la línea control C)

Imagen 2: Inmunoprueba positiva (Aparición de dos líneas rojas distintas)

BIBLIOGRAFÍA

1. Guía de Laboratorio Carrera de Medicina. Inmunidad Humoral. Quito; 2018.

2. Universitario S. PRUEBA RAPIDA PARA LA DETECCION DE

ANTICUERPOS PARA HELICOBACTER PYLORI [Internet]. Bolivia; 2018
[citado 22 Julio 2018]. Disponible de:
http://www.ssucbba.org/_admin/pdf/HELICOBACTER.pdf

FIRMA DEL ALUMNO