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EXTRACCIÓN DEL ADN A PARTIR DE UNA MUESTRA ORAL

Enjuagar con
COLECCIÓN DE Extraer las Adicionar un
1 LAS CÉLULAS DE
LA MUCOSA ORAL
células de la
mucosa oral
Gatorate para
la colección de
mL de buffer de
lisis
estas

Repetir los dos


Colocar la mezcla Centrifugar
pasos anteriores Mezclar con el
2 LISIS CELULAR
con células (1ml) en
un tubo de
(10000 rpm por
30s) y eliminar el
hasta recolectar
70 μL de pellet
vortex
(30segundos)
microcentrífuga sobrenadante
celular

Recuperar el
3 DIGESTIÓN
PROTEICA
Adicionar
proteínasa K
Incubar a
56ºC
Centrifugar a
10000rpm (10
precipitado y colocarlo
en un tubo de
(20μL) (20minutos) minutos) microcentrifuga con
etanol helado al 70 %

Volver a
Colocarlo en baño Resuspender el Eliminar el sobrenadante
centrifugar y Observar el precipitado
María a 60ºC (5 ADN con 30μL y adicionar 0.5 mL de
minutos) eliminar el etanol helado al 70% formado
de buffer TE
sobrenadante

Adicionar Mezclar por Transferir la mezcla a un Colocar el tubo

4 PRECIPITACIÓN
DEL ADN
NaCl 2,5 M
(100 μL)
inversión 5
veces
tubo de 5mL y adicionar
el alcohol absoluto
helado (1mL)
suavemente sobre una
gradilla y esperar
(5minutos)