PREPARACIÓN DE AUTOVACUNAS CONTRA PAPILOMATOSIS BOVINA

Facultad de Ciencias Farmacéuticas, Bioquímicas y Biotecnológicas, Programa Profesional de Ingeniería

Biotecnológica, Universidad Católica de Santa María, Urb. San José s/n, Yanahuara, Arequipa, Perú.

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RESUMEN

La brucelosis bovina (BB) es una enfermedad infectocontagiosa, producida por la bacteria Brucella
abortus, que afecta principalmente a las hembras bovinas en edad reproductiva, provocando abortos.
Esta patología, además, es una zoonosis (se trasmite al ser humano) y causa una enfermedad invalidante
si no es tratada. Con la presencia de la enfermedad las explotaciones ganaderas se ven afectadas
económicamente, dada su influencia en la producción, los litros de leche producida y en un aumento de
animales a eliminar por problemas de fertilidad. En esta práctica se realizó un análisis inmunológico, para
detectar la brucelosis bovina, se denomina prueba de anillo en leche o MRT, para esto se obtuvieron 8
muestras de diferentes mercados de la ciudad de Arequipa, esta enfermedad si no es controlada cauda
perdidas económicas en empresas agrícolas especialmente en la industria lechera, la prueba se
fundamenta en la unión del antígeno al anticuerpo que se genera al haber una infección en el
organismo, si la crema se colorea de azul es que la muestra de leche presenta la enfermedad.

Ninguna muestra presento el antígeno de brucelosis bovina por lo que concluye que muestras son
negativas y que Arequipa está libre de esta enfermedad.

Palabras clave: brucelosis bovina, MRT, producción, análisis inmunológico.

ABSTRACT

Bovine brucellosis (BB ) is an infectious disease caused by the bacterium Brucella abortus , which mainly
affects bovine females of reproductive age , causing abortions . This condition also is a zoonosis (is
transmitted to humans ) and cause a disabling disease if not treated . With the presence of the disease
livestock farms are economically affected , given their influence on production , liters of milk produced
and in higher animals to eliminate fertility problems. In this lab an immunological analysis was
performed to detect brucellosis is called milk ring test or MRT to this 8 samples of different markets of
the city of Arequipa was obtained , this disease if not controlled cauda economic losses in agricultural
enterprises especially in the dairy industry , the test is based on the binding of antigen to antibody
generated to be an infection in the body, if the cream is colored blue is that the milk sample has the
disease.

No sample antigen presenting brucellosis therefore concluded that samples are negative and Arequipa is
free from this disease.

Keywords: bovine brucellosis, MRT, production, immunological analysis

INTRODUCCIÓN revestidas por epitelio plano estratificado. Esta

enfermedad es ocasionada por un Papiloma
La Papilomatosis Bovina, la cual es una
virus de ADN que infecta las células basales del
enfermedad de origen viral caracterizada por
epitelio (queratinocitos o fibroblastos). Este
alteración de la piel y las mucosas que están
patógeno es de considerable especificidad en
cuanto al huésped. Los primeros síntomas a
nivel histólogo se caracterizan por una
hiperplasia benigna del estroma y del epitelio,
que se produce durante periodos de
inmunodeficiencia, presencia de agentes
patógenos adicionales y algunos cofactores que
pueden inducir una transformación maligna de
la neoplasia (Fennery. et, al. 1996).
La papilomatosis también conocida como
verruga, es una enfermedad que afecta por
temporadas, cuando esta se presenta se
propaga o se disemina rápidamente en una
comunidad, induciendo a los ganaderos y
campesinos a la utilización de métodos
empíricos y en algunos casos se muestra una
falta de acciones de manejo en dicha
enfermedad. A esto se suma el poco
conocimiento que tienen los productores
ganaderos en relación a la diseminación
síntomas y control de la enfermedad.
La verruga ocasiona pérdidas económicas tanto
en producción lechera así como en la obtención
de ingreso a través de la venta de animales en
pie, ya que este padecimiento afecta la
presentación de los bovinos, depreciando su
valor económico, convirtiéndose así en un
problema que deteriora el ingreso familiar.
La poca atención a esta enfermedad no ha
permitido el estricto control que se merece,
generando un gran riesgo, ya que cada vez
toma mayor fuerza, pudiendo llegar a
convertirse en epidemia y por consiguiente
agravar su control, por tal motivo estamos
realizando el presente estudio con el fin de
determinar los tratamientos alternativos
potenciales en el control de la papilomatosis
bovina.
Se desarrollara método para preparar una
vacuna específica para esta enfermedad.
TEORÍA
La papilomatosis es una enfermedad viral,
infecciosa, que se puede transmitir entre los
bovinos, son más susceptibles los becerros y
afecta a todas las especies particularmente a
los ovinos, caprinos, porcinos, equinos y
ciervos. Se caracteriza por la presencia de
papilomas en la piel, ya sea agrupados, con
apariencia de racimos carnosos o dispersos. No
es una zoonosis, aunque el hombre puede sufrir
de papilomatosis.
La enfermedad tiene una distribución
geográfica mundial; en México se presenta con
mayor incidencia en zonas semidesérticas y
tropicales, aumentando en la época de verano,
debido a la proliferación de insectos.
Etiología
Es un virus de la familia Papoviridae, género
Papilomavirus con seis serotipos, entre los
cuales no necesariamente hay inmunidad
cruzada, tal vez por tener diferente
composición de DNA, mide 55nm y tiene un
período de incubación de tres a ocho semanas.
El papilomavirus es específico del hospedador y
en los bovinos algunos serotipos poseen
especificidad de sitio y de tipo de lesión, en los
becerros el tipo más frecuente se presenta en
cabeza y cuello.
Se han identificado seis de estos virus, de los
cuales el subgrupo A (BVP1, BVP2 y BVP5)
produce fibropapilomas; y el subgrupo B (BVP3,
BVP4 y BVP6) produce papilomas epiteliales.
Los distintos serotipos virales tienen diferente
predilección y especificidad.
La localización, extensión y duración de la lesión
dependen del serotipo viral involucrado:
BVP 1: Se presentan fibropapilomas frondosos
en pezón y pene. Además provoca
fibropapilomas en forma de hoja en la piel de la
ubre.
BVP 1 y BVP 2: Se presentan fibropapilomas en
la cabeza, cuello, espalda y en la parte anterior
y ventroabdominal del cuerpo.
BVP 2: Se presentan fibropapilomas en forma
de coliflor en la región anogenital y abdominal,
esta asociado con el cáncer de vejiga.
BVP 3: Se presenta papiloma cutáneo.
BVP 4: Se presenta papiloma en el esófago, en
el surco esofágico, rumen, retículo y en el
intestino delgado. Tiene especificidad de
localización en la parte alta del aparato
digestivo provocando papilomas orales en el
adulto; puede volverse maligno en animales
alimentados con helecho.
BVP 5: Se presentan fibropapilomas en forma
de granos de arroz de la ubre y los pezones.
BVP 6: Se presentan papilomas frondosos en
forma de hoja en la ubre y los pezones.
Otros papilomas con distribución regional y que
pueden tener una identidad antigénica
diferente:
BVP 4: Probablemente este causando
papilomas bucales, en su mayoría en animales
adultos y al parecer con una incidencia elevada
de hasta 16% en algunas áreas.
Papilomas de laringe en becerros.
Se ha observado la presencia de papilomavirus
en el carcinoma epidermoide del ojo.
Los papilomas alimentarios asociados con BVP 4
y los del pezón en forma de granos de arroz
asociados con BVP 5, se presentan en las vacas
y persisten en animales de cualquier edad.
Aunque en cada papiloma no se detecta más de
un tipo de BVP, un mismo animal puede tener
papilomas en diferentes partes del cuerpo
asociados a diferentes tipos de BVP.
Epidemiología
Los papilomas son tumores benignos que se
presenta en todas las especies, pero es más
frecuente en bovinos y equinos jóvenes, los
animales más susceptibles son los becerros de
menos de seis meses de edad especialmente
cuando están estabulados, pero también se
presenta en animales adultos recién
incorporados a la región.
La desnutrición, la mala higiene y las malas
instalaciones, como la ausencia de
sombreaderos, provocan estrés y todo esto
deprime el sistema inmunocompetente, por lo
que pueden ser factores desencadenantes para
que se presente la enfermedad. Otros factores
pueden causar inmunosupresión y por lo tanto
desencadenar la infección. La inmunosupresión
puede influir en la presencia y la gravedad de la
enfermedad o la infección latente se convierte
en enfermedad clínica, cuando se administran
fármacos inmunosupresores.
El virus ingresa a un hato, ya sea por animales
enfermos de reciente adquisición o por
materiales contaminados. La transmisión puede
ser por contacto directo con animales
infectados, el virus puede penetrar a través de
heridas cutáneas, y a través de fomites, como
aretadores, cuerdas, agujas, instrumental de
cirugía, etc., los papilomas pueden aparecer
alrededor de los aretes de las orejas, en las
marcas de fuego, pueden trasmitirse por
instrumentos de tatuaje, tijeras para descornar,
después de procedimientos como la prueba de
tuberculina, se han registrado extensos brotes
por la palpación rectal. El virus puede
permanecer vivo en objetos inanimados como
paredes o tubería de metal, infectando a los
animales cuando éstos se frotan con ellos,
también aparecen en los rasguños sufridos con
las cercas de alambre.
El virus puede permanecer viable a
temperatura ambiente durante tres a ocho
semanas. La enfermedad es más frecuente en
ganado estabulado o con problemas de
sobrepoblación. En verano la proliferación de
insectos puede aumentar la incidencia de esta
enfermedad pudiendo complicarse con una
miasis.
Experimentalmente la enfermedad se puede
reproducir aplicando el sobrenadante de una
suspensión de tejido procedente de un
papiloma, ya sea por medio de una inyección
intradérmica o la aplicación sobre la piel
escarificada, la lesión queda limitada al sitio de
inoculación, se han trasmitido papilomas
cutáneos y bucales. El periodo de incubación es
de 3 a 8 semanas después de la inoculación
experimental, pero por lo general es mayor en
el caso de exposición natural.
Patogenia
El virus se propaga con la sangre o exudados de
animales infectados a través de soluciones de
continuidad de la piel o mediante vectores u
objetos contaminados. El virus infecta los
queratinocitos basales del epitelio y replica su
genoma en los estratos granular y de
diferenciación espinosa, causando un
crecimiento excesivo en forma de coliflor, los
papilomas son el resultado de una hiperplasia
de las células basales sin producción de
antígeno viral, los fibropapilomas son
frecuentes en vacas. Se han demostrado
infecciones latentes en piel y linfocitos. Se han
registrado infecciones congénitas en becerros de 5ml estos se llevaron a refrigeración de 2-8
pero son poco frecuentes. ᵒC. has su aplicación.

Se considera que la elevada prevalecia de Dosis y aplicación

papilomas de la laringe en becerros de engorda
Se recomienda realizar una dosis de 5ml de la
enfermos de difteria de los terneros se debe a
vacuna, pero en 4 aplicaciones cada 7 días, el
la penetración del virus por las úlceras por
primer día 0,5ml el segundo 1 ml, la tercera de
donde también entra el Fusobacterium
1,5ml y la cuarta de 2 ml.
nodosus, de tal forma que pueden presentarse
las dos enfermedades al mismo tiempo en el RESULTADOS
mismo animal.
Se desarrolló una autovacuna para
Microscópicamente el tumor contiene tejido
papilomatosis, también se estableció de dosis y
epitelial y conjuntivo y puede corresponder a aplicación de esta vacuna como muestra la
un papiloma o un fibropapiloma, según la Tabla1. La vacuna está en la etapa de
proporción relativa de tejido epitelial y incubación como se muestra en la Imagen1,
conjuntivo presente, los papilomas contienen para posteriormente realizar el control de
poco tejido conjuntivo, mientras los calidad y poder aplicarla en el animal.
fibropapilomas están formados sobre todo de
éste, con escasa cantidad de tejido epitelial. Los
papilomas están. formados de una epidermis
hiperplásica con escaso tejido dérmico,
mientras que en los fibropapilomas hay
tendencia a un predominio del componente
dérmico

MATERIALES Y MÉTODO

Tratamiento de muestra Imagen 1. Tubo que contiene la autovacuna

para papilomatosis.
Los papilomas se obtuvieron por donación de
los laboratorios labvetsur, fueron lavados con
agua destilada, se retiró suciedades que
Aplicación Días Cantidad (ml)
poseían. Se pesó 1g de papiloma, se trituro la
muestra en un mortero agregando 0.5ml de 1 1 0.5
agua destilada, esta mezcla se dejó en reposo 2 7 1
por 15min. 3 14 1.5
4 21 2
Elaboración de vacuna

Se empleó 1ml de la suspensión que se Tabla 1. Indica la dosis y aplicación de la vacuna

desarrolló previamente, agregándolo a un tubo para lograr un efecto favorable en el animal.
y se adiciono 9ml de formol al 10%. Se llevó a la
incubadora por 4 días a 37 ᵒC. CONCLUSIONES

Control de calidad Se desarrolló una autovacuna utilizando

Se realizó un cultivo de la vacuna en Agar
sangre dejando incubar por 24h a 37 ᵒC.
Luego de realizar el control de calidad se
centrifugo la suspensión y se deposito en tubos
papilomas procedentes de un animal.
La autovacuna teóricamente y en la práctica
tiene una eficacia muy elevada.
La metodología para la desarrollar esta vacuna
es muy sencilla de realizar.
REFERENCIAS

 Vázquez, R., Escudero, C., Domenech, Ana. Y Gómez, Duato. 2012. Papilomatosis bovina:
epidemiologia y diversidad de papilovirus bovino (BPV).
file:///C:/Users/Midwar/Downloads/41086-55495-2-PB.pdf

 Paz Zurita, Carlos. 2011. Estudio de la papilomatosis en cinco propiedades de ganadería de

leche, en el canton de Pedro Vicente en la provincia de Pichincha.
http://dspace.udla.edu.ec/bitstream/33000/173/1/TMVZ-2011-9.pdf

 Oswaldo, C., Delgado, A.,Falcon, Nestor. 2011. Efectividad de la vacuna contra la enfermedad de
Newcastle en el control dela papilomatosis bovina.
http://www.scielo.org.pe/pdf/rivep/v22n4/a13v22n4

 Zalaya, V., Acevedo, J. y Chavarria, D. 2007. Tratamiento alternativo potenciales en el control de

la papilomatosis bovina en la municipalidad de durante en el II semestre.
https://www.unan.edu.ni/dir_invest/web_judc/proyectos_matagalpa/pdf/ensayos/pap
iloma_bovino.pdf

 http://www.sag.cl/ambitos-de-accion/brucelosis-bovina-bb

ANEXO

Cuestionario

1. Que es una vacuna

2. Indique las diferencia entre vacuna atenuada, vacuna a virus vivo y vacuna a virus muerto

3. A que se llama bacteriana

4. Que es un anticuerpo monoclonal y anticuerpo policlonal
5. Que es una vacuna monoclonal
6. Que es una vacuna policlonal
7. Que es una vacuna vectorizada
8. Que es un toxoide