UNIVERSIDAD

NACIONAL AUTÓNOMA
DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS
SUPERIORES
ZARAGOZA

BIOQUÍMICA CELULAR Y DE LOS TEJIDOS I

LABORATORIO

INFORME
Cinética enzimática

EQUIPO 1
Integrantes
Almazán Rivas Aimée Monserrat
Barrios Rubí Aarón Antonio
De Los Santos Páez Andrés

GRUPO
2453
Objetivos

● Analizar algunos factores que modifican la velocidad de la reacción que es

catalizada por la invertasa.
● Demostrar la relación lineal entre la velocidad de reacción y la concentración de la
enzima presente.
● Determinar cómo influye el pH del medio sobre la velocidad de una reacción
enzimática y su efecto sobre el carácter iónico de la enzima y del sustrato
● Demostrar que la temperatura afecta las reacciones enzimáticas
● Observar el efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad de la reacción
enzimática y determinar km, Vmax, por los métodos conocidos

Marco teórico

La invertasa (β-fructofuranosidasa, EC 3.2.1.26), conocida también con el nombre de

sacarasa, es una enzima que cataliza la hidrólisis de los terminales no reductores β-d-
fructofuranosílicos de los fructofuranósidos, rompiendo el enlace β-d-fructofuranosil.
Entre los sustratos sobre los que actúa, el más significativo es la sacarosa, de ahí que la
enzima se conozca también, como ya se ha señalado, con el nombre de sacarasa. Esta
enzima hidroliza la fructosa y la glucosa mediante la siguiente reacción reversible:

Sacarosa ↔ Fructosa + Glucosa

Estos glúcidos, además de ser ampliamente utilizados en la industria alimentaria, son

fuentes principales de carbono y energía para organismos procariontes y eucariontes.
El nombre de invertasa hace referencia a que los productos de la reacción son conocidos
como "azúcares invertidos" debido al cambio rotacional que modifica sus propiedades
ópticas; de una rotación positiva o dextrógira a una rotación negativa o levógira.
Esta enzima ha sido encontrada en bacterias, hongos y plantas. Zymomonas mobilis,
bacteria utilizada en la elaboración del pulque, sintetiza dos invertasas: una intracelular
(INVA) y una extracelular (INVB), cuando crece en sacarosa como fuente de carbono.
Gráficas; Resultados

Curva estándar de azúcares reductores

Nota:
Esta curva estándar, fue utilizada para hallar (interpolar) las absorbancias de cada muestra
y así determinar su concentración.
Efecto de la concentración de La Enzima
Efecto de pH

Efecto de la temperatura
La temperatura ideal que se encontró para este experimento es de 37°C

Efecto de la concentración de sustrato

La velocidad máxima alcanzada es de 0.00021

Análisis de resultados:
Como se puede observar que el comportamiento de las gráficas de concentración de
enzima fue la esperada conforme a la teoría dado que a mayor concentración de enzima, la
actividad de esta es mayor con el sustrato; La gráfica de efecto de pH se puede observar
que el aumento de pH desfavorece la actividad de la enzima, sabiendo que esta es de
origen proteico se desnaturaliza a pH ácido y a pH alcalino, la mayor actividad se presenta a
un pH ligeramente ácido, debido a lo datos obtenidos de las absorbancias a pH alcalino se
puede mostrar una variabilidad conforme a la teoría indicando que a pH 5 la enzima
obtendría una óptima condición de función, pero debido a unos problemas dados como
errores sistemáticos como el valor de pH dado, errores de medición al momento de agregar
las soluciones y en cantidades adecuadas.
En la gráfica de la temperatura optima de la enzima podemos apreciar que se observa un
aumento conforme aumenta la temperatura, pero llega un punto en el que empieza a bajar
debido a que dependiendo de la enzima que se tenga a cierta temperatura esta va a
comenzar a desnaturalizarse y pierde propiedades.

Conclusiones
Podemos concluir que las enzimas poseen una conformación natural muy estable y
definida. Claramente específica para cada procesos metabólico , por lo cual cambios en la
conformación (estructura de la enzima) y entorno suelen ir asociados a cambios en la
actividad catalítica, algunos de estos factores fueron observados y reconocidos en esta
práctica, los cuales son pH, Temperatura, Concentración de sustrato y concentración
enzimática, La catálisis es una vía metabólica necesaria para la vida, la cual proporciona
las condiciones necesarias para que las reacciones en los seres vivos sean súbitas, sin las
cuales no existiría la vida como la conocemos.
Bibliografía

Estructura y mecanismos de las enzimas; Biología elemental, A Fersht, Ed: Reverté S.A,
Bogotá; Páginas: 94-101.

Bioquímica; Texto y Atlas, Jan Koolman, Klaus-Heinrich Röhm - 2005. Pág: 94

Bioquímica; Donald Voet, Judith G. Voet - 2006 - Pág: 473.