FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD (NUTRICIÓN Y DIETETICA)

PRÁCTICA N° 2: PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

Curso: MICROBIOLOGÍA

Profesor: Carmen Sofia Medina Escudero

Integrantes:

 Castro Arianna
 Garcia Brito Diana
 Meza Taboada Sofia

Horario de Prácticas:

Día: Martes
Hora: 11:10 a.m – 1:00 p.m

Fecha de REALIZACIÓN de la PRÁCTICA:

Lunes 2 de Abril de 2018.

Fecha de ENTREGA de la PRÁCTICA:

Martes 10 de Abril de 2018.

LIMA- PERÚ

2018
 I. INTRODUCCIÓN:

PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

En la actualidad, la mayoría de los medios de cultivo se encuentran comercializados;

normalmente bajo la forma de liofilizados a los que es preciso rehidratar. En estos casos
la preparación del medio de cultivo se reduce sencillamente a pesar la cantidad deseada
del mismo y disolverla en agua destilada siguiendo las instrucciones del fabricante. Así
mismo un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metabólica de estos es tan grande que la variedad de
medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal adecuado para
todos ellos, ni siquiera refiriéndonos a las bacterias con exclusividad. Uno de los sistemas
más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en
sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en
el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Así mismo para que las bacterias puedan crecer
adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe contar con las condiciones
necesarias como temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuadas, así
como un grado correcto de acidez o alcalinidad, un medio de cultivo debe contener los
nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante. Por otro lado, E l agar es un elemento solidificante muy
empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la
temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas
excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por
aquellas que crecen en él.

En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de

enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los
hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el
valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentación de los
microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se añaden
para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes. También se
añaden colorantes que actúan como indicadores para detectar, como la formación de ácido
o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras.

Como objetivo de esta práctica consistido en la preparación de medios de cultivo como

soporte y fuente de nutrientes para el desarrollo de los microorganismos in vitro y a la
vez aprender y conocer los requerimientos nutricionales para las bacterias.

II. MATERIALES Y MÉTODOS:

III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN:
FUNDMENTO DE MEDIO DE CULTIVO

1. AGAR MACCONKEY
Según su Utilización:

Medio Selectivo y Diferencial

Para el aislamiento e identificación de bacterias entéricas es utilizado para la recuperación

de enterobacterias y bacilos Gram negativos entéricos relacionados. Contiene sales
biliares y cristal violeta que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y de algunas
Gram negativas exigentes. La lactosa es la única fuente de carbono. El indicador es el
rojo neutro. Las bacterias fermentadoras de lactosa formas colonias de diferentes tonos
de rojo. Los fermentadores fuertes de lactosa pueden provocar la precipitación de las sales
biliares por la gran cantidad de ácidos formados, lo que se observa fácilmente en el medio
por la aparición de zonas opacas alrededor de las colonias. Las bacterias que no fermentan
la lactosa forman colonias incoloras o transparentes.

Composición:

Mezcla de peptona 18.0 g/litro

Lactosa 10.0 g/litro

Cloruro de sodio 5.0 g/litro

Sales Biliares 0.5 g/litro

Rojo Neutral 0.05 g/litro

Agar 16.0g/litro

pH final 7,3 ± 0,2

 2. AGAR MANITOL-SALADO O CHAPMAN
Según su Utilización:

Medio Selectivo

Para Staphylococcus. debido a la alta concentración de cloruro sódico (75 g/L). La

mayoría de los microorganismos no crecen a esta concentración de sal, mientras que los
estafilococos, entre los que se encuentran los del género Staphylococcus, sí lo hacen.
Incorpora manitol como fuente de carbono y rojo fenol como indicador, lo que permite
aprovechar la correlación que existe entre la patogenia y la capacidad fermentadora del
manitol de los estafilococos para establecer un diagnóstico presuntivo y sirve, por lo tanto,
como indicativo de la presencia de Staphylococcus aureus. Los estafilococos patógenos
fermentan el manitol y producen colonias amarillas. Los estafilococos no patógenos no
lo fermentan y producen colonias de color rosa.

Composición:

Proteosa peptona 10,0 g

Extracto de carne 1,0 g

D-Manitol 10,0 g

Cloruro de sodio 75,0 g

Agar 15,0 g

Rojo fenol 25,0 mg

Agua destilada c.s.p. 1000 mL

pH final 7,4 ± 0,2

PROCEDIMIENTO:

 Suspender 111 g de medio deshidratado en un litro de agua destilada.

 Mezclar vigorosamente.
 Calentar agitando frecuentemente y dejar hervir durante 1 minuto para disolver
completamente los ingredientes.
 Esterilizar a 121°C durante 15 minutos.
 Dejar enfriar hasta una temperatura entre 40-45ºC y verte en placas estériles.
 Dejar solidificar a temperatura ambiente antes de su utilización.
IV. CONCLUSIONES

V. BIBLIOGRAFÍAS:

1. Krikorian, A. D. (1991). Medios de cultivo: generalidades, composición y

preparación. Cultivo de tejidos en la agricultura: fundamentos y aplicaciones.
Cali: CIAT, 41-77.