IDENTIFICAÇÃO DE

ENTEROBACTÉRIAS

Microbiologia Básica
Professora Zilka Nanes Lima
Farmácia – UEPB
 Aula preferencialmente retirada:

• Do material que está sendo preparado pela

Professora e pelas monitoras (Nadjaele e
Aleska) de várias referências bibliográficas.

Professora Zilka Nanes Lima

 CARACTERÍSTICAS DAS
ENTEROBACTÉRIAS

• São bastonetes Gram-negativos

• Todos são oxidase negativos

(exceto Pleisomonas shigelloides)

• Todos fermentam a glicose

• Todos reduzem o nitrato a nitrito

• Todos são catalase negativos

• Não esporulados, crescem rapidamente em meios em ágar Sangue e ágar MacConkey.
 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 1. Identificação inicial das enterobactérias

Observar morfologia em diferentes meios de cultura,
principalmente ágar MacConkey ou ágar EMB.

• 2. Bacterioscopia das colônias isoladas nos

meios de cultura
Bastonetes Gram-negativos curtos, médios ou
longos. Algumas vezes apresentam-se em forma de
cocobacilos.
 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 3. Teste da oxidase
(sistema citocromo-oxidase):
Enzima do grupo das ferroporfirinas. Este
teste baseia-se na produção intracelular da
enzima oxidase pela bactéria.
 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4. Realizar provas bioquímicas

• 4.1. Sistema numérico

• 4.2. Testes bioquímicos tradicionais

ágar citrato, TSI, MILI (ou então LIA e SIM),
ágar uréia, ágar fenilalanina (para bactérias
lactose negativas).
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• SISTEMA NUMÉRICO DE IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

A B C
Lactose Urease Indol (+4)
-----------------------------------------------------------------------------------------------
CO2 LTD * Lisina descarboxilase (+2)
-----------------------------------------------------------------------------------------------
H 2S Motilidade Citrato (+1)
----------------------------------------------------------------------------------------------

* LTD= Desaminação do L-triptofano

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4. Realizar provas bioquímicas

• 4.3. Testes bioquímicos tradicionais
Ágar Citrato de Simmons,
TSI
LIA
SIM
MIO
MILI
Ágar Fenilalanina
Ágar Uréia
Caldo malonato
Meio MR-VP (VM, VP)
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• 4.2.a) Citrato de Simmons

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.b) TSI (Triplíce Sugar Iron)

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BGNNF
(Não é enterobactéria)

• 4.2.b) TSI (Triplíce Sugar Iron)

BGNNF
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• 4.2.c) LIA (Lisina Iron ágar)

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.c) LIA (Lisina Iron ágar)

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.d) SIM (Sulfeto de hidrogênio, indol, motilidade)

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.e) MIO (Motilidade Indol Ornitina)

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.e) MIO (Motilidade Indol Ornitina)

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.f) MILI (Motilidade Indol Lisina

descarboxilase)
 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.g) ágar Fenilalanina

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.h) ágar Uréia (pesquisa da enzima urease)

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.i) Caldo Malonato

Quando positivo muda para cor azul
 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.j) Vermelho de metila

 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 4.2.l) Voges-Proskauer
 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 5. Se o sistema numérico de identificação de

enterobactérias não responder com segurança a
identificação, realizar os principais testes
bioquímicos tradicionais :
- Citrato
- TSI
- MILI (ou LIA e SIM)
- Uréia
Em microrgarnismos lactose negativos (adicionar FENILALANINA)

• Utilizando auxílio de tabelas de identificação

concluir a identificação pelo testes convencionais.
 IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

• 6. Verificar a resistência intrínseca da bactéria

(isto pode ajudar na identificação)

• 7. Se necessário fazer testes complementares,

tais como DNAse, Hidrólise de esculina, lipase,
lisina desaminase etc...

• 8. Proceder a realização do antibiograma

sempre que necessário nas culturas
 PADRONIZAÇÃO DO CLSI PARA
ENTEROBACTÉRIAS

• Grupo A – Ampicilina, Cefazolina, Cefalotina, Gentamicina

• Grupo B – Amicacina, Amox.+ác.clav., Amp.+sulb., Pip.+taz.,

Tic.+ác.clav., Cefuroxima, Cefepime, Cefoxitina, Cefotaxima,
Ceftriaxona, Ciprofloxacina, Levofloxacina, Imipenem, Meropenem,
Sulfametoxazol.+trim.

• Grupo C – Aztreonam, Cloranfenicol, Tetraciclina, Tobramicina

• Grupo U- Norfloxacina, Ofloxacina, Nitrofurantoína, Trimetropin.

ANTIBIOGRAMA DE ENTEROBACTÉRIAS

Antibiograma de K. pneumoniae
Antibiograma de Klebsiella produtora de ESBL
pneumoniae isolada de
esgoto.