BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LIC. EN BIOTECNOLOGÍA

LABORATORIO DE ECOLOGÍA

EQUIPO: 3

INTEGRANTES:

YAIR EDSEL CHAMA MARTINEZ

EVA M. GINEZ MENESES
AGUSTÍN MARTINEZ REYES
SOFIA MELENDEZ OLVERA

DOCENTE: VERÓNICA CEPEDA CORNEJO

PRACTICA 3: AISLAMIENTO DE BACTERIAS ENDÓFITAS

INTRODUCCIÓN

Las bacterias están indisolublemente asociadas a plantas como patógenos,

epifitas, simbióticas y antagónicas, pudiendo formar asociaciones intimas con las
plantas formando grupos diversos filogenéticamente representados por especies
pertenecientes a los principales taxones.

Las bacterias asociadas a las plantas, regularmente intercambian señales

con su hospedero y poseen diversos mecanismos para adaptación y colonización.
Teniendo de gran importancia los diferentes procesos que realizan la gran
diversidad de bacterias, la complejidad de la interacción y el número de niveles
tróficos de los que forma parte.

Las bacterias endófitas son reconocidas como aquellos organismos que

residen en tejidos de las plantas, principalmente espacios intercelulares, en tejidos
intracelulares y dentro de tejidos vasculares sin causar síntomas de enfermedad en
la planta. Las discusiones sobre el origen de las bacterias endófitas y la forma de
penetración, además de los mecanismos de colonización, consideran la hipótesis
de que se originaron desde semillas.

El número de bacterias endofíticas varia principalmente depende de la planta que

colonizan y la región de donde fueron obtenidas. Se ha reportado que las bacterias
endofíticas pueden tener dos efectos principales En primer lugar, es posible que,
incrementen la capacidad de las plantas de absorber los nutrientes del suelo. En segundo
lugar, se documenta el potencial de estos microorganismos como agentes controladores de
patógenos. Este fenómeno de biocontrol se presenta debido a que los endófitos pueden
establecer una relación mutualista con la planta desde su interior, mediante la cual le
confieren protección contra factores bióticos y abióticos adversos.
 Figura 1. Diagrama de las diferentes interacciones endofíticas planta-bacteria.

Las bacterias endófitas habitan dentro de los tejidos de las plantas al menos durante
una parte de su ciclo de vida sin causar daño alguno al hospedero, establecen asociación
simbiótica y producen grandes beneficios para las plantas. Las bacterias endófitas cumplen
una gran diversidad de funciones (figura 1) como promotoras de crecimiento vegetal, control
biológico sobre una diversidad de Fito patógenos, mejoran la eficiencia de los procesos de
Fito remediación de compuesto tóxicos en la rizosfera. Estos microorganismos son fuentes
inagotables de más de 20.000 compuestos biológicamente activos, los cuales influyen de
manera directa en el rendimiento y supervivencia de las plantas hospederas. Las bacterias
endófitas son reportadas por producir un número de metabolitos como antibióticos,
metabolitos secundarios incluyendo algunos compuestos antitumorales, agentes
antiinflamatorios.

JUSTIFICACIÓN

Las bacterias endófitas pueden albergar distintos tejidos de la planta, incluyendo la

semilla, pudiendo generar con esta, interacciones que beneficie a la planta. Las bacterias
endofíticas se han podido aislar de plantas monocotiledóneas y dicotiledóneas.

Durante el viaje de campo realizado a Cuetzalan, Puebla, México. Se tomaron

muestras de suelo para poder identificar la presencia de bacterias endófitas en las semillas
que se encontraron en dichas muestras.
OBJETIVO
Identificar la presencia de bacterias endófitas en semillas recolectadas de la zona
de “Reserva Azul”, Cuetzalan, Puebla, México.

OBJETIVOS PARTICULARES
 Obtener muestras de suelo de la zona de Reserva Azul, Cuetzalan Puebla,
México
 Extraer semillas a partir de las muestras de suelo recolectadas
 Analizar semillas extraídas para determinar la presencia de microorganismos
endófitos.

METODOLOGÍA
Para el procedimiento de la práctica, se dividió en cuatro etapas
1. Recolección de muestras de suelo
a. Se recolectaron cuatro muestras de suelo del viaje de campo en Reserva
Azul, Cuetzalan, Puebla México.
b. Cada muestra fue colocada en una bolsa ziploc, la cual se mantuvo con
entrada de oxigeno hasta su análisis en el laboratorio.

2. Preparación de medios
a. Se prepararon medios de cultivo, en base a la siguiente tabla (tabla 1)
Medio para aislar bacterias endófitas
Peptona de caseína 7.5g
Citrato de sodio 3.0g
Sulfato de magnesio 2.0g
Cloruro de potasio 2.0g
Cloruro de sodio 0.1g
Agar bacteriológico 15g
Tabla 1. Cantidades para preparar 1 litro de medio para aislar bacterias
endófitas.
3. Semilla-Medios
a. Se separaron las semillas de las muestras de suelo. (figura 2)

Figura 2. Semillas obtenidas

b. Ya separadas se colocaron en los medios de cultivo.
 Figura 4. Procedimiento experimental
4. Observación
a. Se esperó a tener una respuesta de crecimiento (con la formación de
colonias) para poder comprobar la presencia de bacterias endófitas en las
semillas recolectadas, obteniendo un resultado positivo

RESULTADOS

A partir de las semillas, en los medios de cultivo se mostraron crecimiento de

colonias de bacterias. (Figura 4 y 5)

Figura 4. Placa uno con crecimiento de Figura 5. Placa dos con crecimiento de
microorganismos microrganismos
 Figura 6. Principales colonias observadas en microscopio estereoscópico.

Figura 7. Microorganismos 1 Figura 8. Microorganismos 2

A partir de la forma que tenían, se pudieron identificar las bacterias como bacilos
blancos y pseudomonas.

Colonia 1.: Microorganismo similar a bacilos blancos, presentan forma circular casi
perfecta, de color blanquecina, principalmente se presentaron en la placa 1. (Figura 7).

Colonia 2. Microorganismo similar a pseudomonas, la colonia presenta forma

circular casi perfecta, opaca, teniendo diferentes tipos de colonias con las mismas
características, diferenciándose con que unas son más oscuras que otras. (figura 5)

Incluyendo además la presencia de hongos en la placa 1 (figura 9)

 Figura 9. Placa uno con crecimiento de
microorganismos (Hongo)

DISCUSIÓN

A partir de los procedimientos realizados, se logró identificar la presencia de

microorganismos endófitos en las semillas recolectadas de Cuetzalan, gracias a la Dra.
Verónica y la Dra. Laura, se logró identificar que se tenían bacterias como pseudomonas y
bacilos blancos.

Investigaciones han demostrado la presencia de pseudomonas, de diferentes

especies, como bacteria endófita. Zhang (2002) en análisis que realizó, encontró
pseudomonas abundantes en la superficie de las raíces, ya que son versátiles para su
metabolismo, explicando que dentro sus mecanismos de acción se encuentra el aumento
de la toma de agua y nutrientes de la planta, la solubilización de fosfatos y la producción de
reguladores del crecimiento vegetal. Las pseudomonas también son un ejemplo de la
resistencia que puede llegar a adquirir una planta.

En base a la información vista en artículos, y los conocimientos adquiridos en clase

podemos decir, que las bacterias y las plantas forman un lazo estrecho de relación para
ayudarse a llevar a cabo sus funciones vitales; dentro de las semillas, las bacterias endófitas
pueden proporcionarle ciertos mecanismos para que se pueda llevar el proceso de
germinación de la planta.

CONCLUSIONES
Como conclusión tenemos que se logró identificar la presencia de bacterias
endófitas en las semillas recolectadas de la Reserva Azul, en Cuetzalan, Puebla, México,
estas demuestran, por estudios consultados en artículos de revisión, que cumplen
funciones vitales para el buen desarrollo de la planta y así de esta manera ayudar en el
proceso de germinación.

BIBLIOGRAFÍA
Ramírez, D. (2010) “Bacterias endofíticas aisladas de fresa (Fragaria x ananassa Dutch) y
su impacto sobre plantas de interés agrícola”. Departamento de Microbiología, IPN,
México, D.F. Recuperado de:
http://tesis.ipn.mx/bitstream/handle/123456789/10613/215.pdf?sequence=1.

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caracterización de bacterias endófitas asociadas con síntomas de punta morada de
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http://www.uaaan.mx/agraria/attachments/article/46/Agraria_2011(8)-2-4.pdf

PEREZ C, ALEXANDER; ROJAS S, JOHANNA; FUENTES C, JUSTO DIVERSIDAD DE

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(Bothriochloa pertusa) EN TRES LOCALIDADES DEL DEPARTAMENTO DE
SUCRE, COLOMBIA. Acta Biológica Colombiana, vol. 15, núm. 2, 2010, pp. 219-
228 Universidad Nacional de Colombia Sede Bogotá Bogotá, Colombia