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1.Una de las siguientes afirmaciones es 1.Una de las siguientes afirmaciones es 1.

Una de las siguientes afirmaciones es


correcta: correcta: correcta:
a. El gen reportero en el diseño del transgen, a. El gen reportero en el diseño del transgen, a. El gen reportero en el diseño del transgen,
determina la fuerza de expresión del gen inserto. determina la fuerza de expresión del gen inserto. determina la fuerza de expresión del gen inserto.
b. La fuerza de expresión del transgen depende b. La fuerza de expresión del transgen depende b. La fuerza de expresión del transgen depende
del péptido líder. del péptido líder. del péptido líder.
c. El gen GUS es un promotor selectivo utilizado c. El gen GUS es un promotor selectivo utilizado c. El gen GUS es un promotor selectivo utilizado
para el diseño de plantas transgénicas. para el diseño de plantas transgénicas. para el diseño de plantas transgénicas.
d. El gen 35S es un promotor de expresión d. El gen 35S es un promotor de expresión d. El gen 35S es un promotor de expresión
constitutiva utilizado para el diseño de plantas constitutiva utilizado para el diseño de plantas constitutiva utilizado para el diseño de plantas
transgénicas. transgénicas. transgénicas.
2.Una de las siguientes proposiciones es 2.Una de las siguientes proposiciones es 2.Una de las siguientes proposiciones es
falsa. falsa. falsa.
a. La región de DNA – T del plasmido Ti se a. La región de DNA – T del plasmido Ti se a. La región de DNA – T del plasmido Ti se
integra al DNA de la planta por un mecanismo integra al DNA de la planta por un mecanismo integra al DNA de la planta por un mecanismo
enzimático del ciclo biológico de Agrobacterium enzimático del ciclo biológico de Agrobacterium enzimático del ciclo biológico de Agrobacterium
tumefasciens. tumefasciens. tumefasciens.
b. Todo el DNA del plasmido Ti se integra al DNA b. Todo el DNA del plasmido Ti se integra al DNA b. Todo el DNA del plasmido Ti se integra al DNA
de la planta por un mecanismo enzimático del de la planta por un mecanismo enzimático del de la planta por un mecanismo enzimático del
ciclo biológico de Agrobacterium tumefasciens. ciclo biológico de Agrobacterium tumefasciens. ciclo biológico de Agrobacterium tumefasciens.
c. La transgénesis animal utiliza como técnica de c. La transgénesis animal utiliza como técnica de c. La transgénesis animal utiliza como técnica de
introducción del DNAr la microinyeccion. introducción del DNAr la microinyeccion. introducción del DNAr la microinyeccion.
d. Los vectores transbordadores son los que d. Los vectores transbordadores son los que d. Los vectores transbordadores son los que
tienen 1 OR bacteriano y 1 OR de levadura. tienen 1 OR bacteriano y 1 OR de levadura. tienen 1 OR bacteriano y 1 OR de levadura.
3.Dos de las siguientes proposiciones son 3.Dos de las siguientes proposiciones son 3.Dos de las siguientes proposiciones son
correctas. correctas. correctas.
a. Mediante técnica del retrovirus el gen inserto a. Mediante técnica del retrovirus el gen inserto a. Mediante técnica del retrovirus el gen inserto
se integra al genoma de la celula animal se integra al genoma de la celula animal se integra al genoma de la celula animal
hospedera. hospedera. hospedera.
b. El gen de luciferasa, actua como péptido líder b. El gen de luciferasa, actua como péptido líder b. El gen de luciferasa, actua como péptido líder
en el diseño de plantas transgenicas. en el diseño de plantas transgenicas. en el diseño de plantas transgenicas.
c.El gen de la proteína verde fluorescente (GPVF) c.El gen de la proteína verde fluorescente (GPVF) c.El gen de la proteína verde fluorescente (GPVF)
es un gen reportero de selección indirecta. es un gen reportero de selección indirecta. es un gen reportero de selección indirecta.
d.El promotor P1 de lambda puede ser regulado d.El promotor P1 de lambda puede ser regulado d.El promotor P1 de lambda puede ser regulado
por un represor activo a 37 C en E.Coli. por un represor activo a 37 C en E.Coli. por un represor activo a 37 C en E.Coli.
4. En el diseño de un transgen vegetal indique 4. En el diseño de un transgen vegetal indique 4. En el diseño de un transgen vegetal indique
brevemente la función de los siguientes brevemente la función de los siguientes brevemente la función de los siguientes
genes: genes: genes:
BORDE DERECHO Y BORDE IZQUIERDO DE BORDE DERECHO Y BORDE IZQUIERDO DE BORDE DERECHO Y BORDE IZQUIERDO DE
DNA-T: son regiones transformantes DNA-T: son regiones transformantes DNA-T: son regiones transformantes
PROMOTOR: forma parte del vector o puede ser PROMOTOR: forma parte del vector o puede ser PROMOTOR: forma parte del vector o puede ser
incorporado en el diseño del transgen incorporado en el diseño del transgen incorporado en el diseño del transgen
GEN REPORTERO: genes de expresión directa GEN REPORTERO: genes de expresión directa GEN REPORTERO: genes de expresión directa
para la selección de las células-r para la selección de las células-r para la selección de las células-r
5. Una de las siguientes proposiciones es 5. Una de las siguientes proposiciones es 5. Una de las siguientes proposiciones es
correcta: correcta: correcta:
a.La técnica de nick translation permite la a.La técnica de nick translation permite la a.La técnica de nick translation permite la
construcción de sondas de RNA. construcción de sondas de RNA. construcción de sondas de RNA.
b.La técnica SP6 RNA polimerasa se utiliza para b.La técnica SP6 RNA polimerasa se utiliza para b.La técnica SP6 RNA polimerasa se utiliza para
preparación de sondas de DNA preparación de sondas de DNA preparación de sondas de DNA
c.El marcaje de los dNTPs puede ser con c.El marcaje de los dNTPs puede ser con c.El marcaje de los dNTPs puede ser con
isótopos radiactivos como P 32, S35 o H3. isótopos radiactivos como P 32, S35 o H3. isótopos radiactivos como P 32, S35 o H3.
d.La técnica de Random primer sirve para d.La técnica de Random primer sirve para d.La técnica de Random primer sirve para
preparar sondas de RNA. preparar sondas de RNA. preparar sondas de RNA.
6.Elija la proposición correcta: 6.Elija la proposición correcta: 6.Elija la proposición correcta:
a.Los dideoxinucleotidos trifosfato son análogos a.Los dideoxinucleotidos trifosfato son análogos a.Los dideoxinucleotidos trifosfato son análogos
de base que carecen de P en 5´. de base que carecen de P en 5´. de base que carecen de P en 5´.
b.Los dideoxinucleotidos trifosfato son análogos b.Los dideoxinucleotidos trifosfato son análogos b.Los dideoxinucleotidos trifosfato son análogos
de bases que carecen de OH en 3´. de bases que carecen de OH en 3´. de bases que carecen de OH en 3´.
c.La hidrazina en medios ácidos rompe en c.La hidrazina en medios ácidos rompe en c.La hidrazina en medios ácidos rompe en
C. C. C.
d.El dimetil sulfato (DMS) desestabiliza y rompe d.El dimetil sulfato (DMS) desestabiliza y rompe d.El dimetil sulfato (DMS) desestabiliza y rompe
en A y G. en A y G. en A y G.
7. Una de las siguientes proposiciones es 7. Una de las siguientes proposiciones es 7. Una de las siguientes proposiciones es
correcta: correcta: correcta:
a.La especificidad de hibridación está dada por la a.La especificidad de hibridación está dada por la a.La especificidad de hibridación está dada por la
secuencia y de marcaje de la sonda. secuencia y de marcaje de la sonda. secuencia y de marcaje de la sonda.
b.Los radioisótopos P 32 y S35 y su se utilizan b.Los radioisótopos P 32 y S35 y su se utilizan b.Los radioisótopos P 32 y S35 y su se utilizan
para preparar sondas frías de DNA. para preparar sondas frías de DNA. para preparar sondas frías de DNA.
c.La sensibilidad de hibridación depende del tipo c.La sensibilidad de hibridación depende del tipo c.La sensibilidad de hibridación depende del tipo
de marcaje de la sonda de marcaje de la sonda de marcaje de la sonda
d.La especificidad de hibridación está dado por la d.La especificidad de hibridación está dado por la d.La especificidad de hibridación está dado por la
secuencia de la sonda. secuencia de la sonda. secuencia de la sonda.
8.Completar según corresponde 8.Completar según corresponde 8.Completar según corresponde
-Técnica utilizada para síntesis química del DNA -Técnica utilizada para síntesis química del DNA -Técnica utilizada para síntesis química del DNA
método quimico o Maxam – Gilbert método quimico o Maxam – Gilbert método quimico o Maxam – Gilbert
-Determina una eventual contaminación en la -Determina una eventual contaminación en la -Determina una eventual contaminación en la
PCR control negativo PCR control negativo PCR control negativo
-Equipo utilizado en la PCR: termociclador -Equipo utilizado en la PCR: termociclador -Equipo utilizado en la PCR: termociclador
9. Defina brevemente: 9. Defina brevemente: 9. Defina brevemente:
-PCR: técnicas que permiten la amplificación in -PCR: técnicas que permiten la amplificación in -PCR: técnicas que permiten la amplificación in
vitro del DNA vitro del DNA vitro del DNA
-Genoteca de cDNA: es un tipo de genoteca que -Genoteca de cDNA: es un tipo de genoteca que -Genoteca de cDNA: es un tipo de genoteca que
contiene copias de DNA complementario de la contiene copias de DNA complementario de la contiene copias de DNA complementario de la
población de ARNm presente en un determinado población de ARNm presente en un determinado población de ARNm presente en un determinado
tejido tejido tejido
-Taq polimerasa: activa como una DNA -Taq polimerasa: activa como una DNA -Taq polimerasa: activa como una DNA
polimerasa termoestables polimerasa termoestables polimerasa termoestables
10. Calcular la Tm de hibridación para PCR 10. Calcular la Tm de hibridación para PCR 10. Calcular la Tm de hibridación para PCR
para los siguientes cebadores: para los siguientes cebadores: para los siguientes cebadores:
CEBADOR A: CEBADOR A: CEBADOR A:
CAGCCAGTCACAGAACTGACCG CAGCCAGTCACAGAACTGACCG CAGCCAGTCACAGAACTGACCG
N(G, C)X4°C N(A,T)X2°C N(G, C)X4°C N(A,T)X2°C N(G, C)X4°C N(A,T)X2°C
Tm: 14 (G,C)X4°C = 56 Tm: 14 (G,C)X4°C = 56 Tm: 14 (G,C)X4°C = 56
Tm: 9 (A,T)X2°C = 18 Tm: 9 (A,T)X2°C = 18 Tm: 9 (A,T)X2°C = 18
SUMADOS=74 SUMADOS=74 SUMADOS=74

CEBADOR B: CEBADOR B: CEBADOR B:


ACTGGTCGCTCAGCTACTG ACTGGTCGCTCAGCTACTG ACTGGTCGCTCAGCTACTG
Tm: 11 (G,C)X4°C =44 Tm: 11 (G,C)X4°C =44 Tm: 11 (G,C)X4°C =44
Tm: 8 (A,T)X2°C =16 Tm: 8 (A,T)X2°C =16 Tm: 8 (A,T)X2°C =16
SUMADOS=60 SUMADOS=60 SUMADOS=60
TM= (Tm CebA +TmCeb B)/2 – 5°C TM= (Tm CebA +TmCeb B)/2 – 5°C TM= (Tm CebA +TmCeb B)/2 – 5°C
TM= 74+60 /2 -5°C =67 °C TM= 74+60 /2 -5°C =67 °C TM= 74+60 /2 -5°C =67 °C

11. Una de las siguientes afirmaciones es 11. Una de las siguientes afirmaciones es 11. Una de las siguientes afirmaciones es
falsa: falsa: falsa:
a. La cantidad de producto obtenido por PCR a. La cantidad de producto obtenido por PCR a. La cantidad de producto obtenido por PCR
depende del húmero de ciclos y la cantidad de depende del húmero de ciclos y la cantidad de depende del húmero de ciclos y la cantidad de
DNA blanco DNA blanco DNA blanco
b. La PCR utiliza DNA polimerasa l, 4dNTPs, b. La PCR utiliza DNA polimerasa l, 4dNTPs, b. La PCR utiliza DNA polimerasa l, 4dNTPs,
2cebadores, DNA blanco y buffer-Mg. 2cebadores, DNA blanco y buffer-Mg. 2cebadores, DNA blanco y buffer-Mg.
c. El producto de la PCR se evalúa mediante c. El producto de la PCR se evalúa mediante c. El producto de la PCR se evalúa mediante
electroforesis electroforesis electroforesis
d. El tamaño del fragmento de DNA a amplificar d. El tamaño del fragmento de DNA a amplificar d. El tamaño del fragmento de DNA a amplificar
está flanqueada por bs 2 cebadores. está flanqueada por bs 2 cebadores. está flanqueada por bs 2 cebadores.
12. Elija la proposición correcta: 12. Elija la proposición correcta: 12. Elija la proposición correcta:
a. La especificidad de la PCR depende del DNA a. La especificidad de la PCR depende del DNA a. La especificidad de la PCR depende del DNA
blanco utilizado en la reacción. blanco utilizado en la reacción. blanco utilizado en la reacción.
b. La especificidad de la PCR depende de! b. La especificidad de la PCR depende de! b. La especificidad de la PCR depende de!
número de ciclos utilizados en la reacción. número de ciclos utilizados en la reacción. número de ciclos utilizados en la reacción.
c. La especificidad de la PCR está dada por los c. La especificidad de la PCR está dada por los c. La especificidad de la PCR está dada por los
cebadores utilizados en la reacción. cebadores utilizados en la reacción. cebadores utilizados en la reacción.
d. La especificidad de la PCR está dada por la taq d. La especificidad de la PCR está dada por la taq d. La especificidad de la PCR está dada por la taq
polimerasa y el DNA blanco. polimerasa y el DNA blanco. polimerasa y el DNA blanco.
13. Si tuviese que aplicar una técnica 13. Si tuviese que aplicar una técnica 13. Si tuviese que aplicar una técnica
molecular en el Diagnostico de una molecular en el Diagnostico de una molecular en el Diagnostico de una
enfermedad por un virus por ejemplo HIV, que enfermedad por un virus por ejemplo HIV, que enfermedad por un virus por ejemplo HIV, que
técnica utilizarla y porqué? técnica utilizarla y porqué? técnica utilizarla y porqué?
La PCR es efectiva en la detección de ácidos La PCR es efectiva en la detección de ácidos La PCR es efectiva en la detección de ácidos
nucleicos virales nucleicos virales nucleicos virales
14. explique brevemente en que pasos involucra 14. explique brevemente en que pasos involucra 14. explique brevemente en que pasos involucra
la PCR la PCR la PCR
Denaturación(94°C-1´): la reacción se calienta a Denaturación(94°C-1´): la reacción se calienta a Denaturación(94°C-1´): la reacción se calienta a
altas temperaturas para producir la doble hélice del altas temperaturas para producir la doble hélice del altas temperaturas para producir la doble hélice del
DNA a cadena simple, estas cadenas se toman DNA a cadena simple, estas cadenas se toman DNA a cadena simple, estas cadenas se toman
simples a los cebadores. simples a los cebadores. simples a los cebadores.
Hibridación de cebadores (TM): se enfria la mescla Hibridación de cebadores (TM): se enfria la mescla Hibridación de cebadores (TM): se enfria la mescla
de reacción, los cebadores hibridan con las de reacción, los cebadores hibridan con las de reacción, los cebadores hibridan con las
regiones complementarias de las cadenas de DNA regiones complementarias de las cadenas de DNA regiones complementarias de las cadenas de DNA
patrón y se forman nuevamente cadenas dobles patrón y se forman nuevamente cadenas dobles patrón y se forman nuevamente cadenas dobles
entre los cebadores y las secuencias entre los cebadores y las secuencias entre los cebadores y las secuencias
complementarias. complementarias. complementarias.
Extención por la Taq (72°C-1´): polimerasa Extención por la Taq (72°C-1´): polimerasa Extención por la Taq (72°C-1´): polimerasa
sintetiza una cadena complementaria a la enzima sintetiza una cadena complementaria a la enzima sintetiza una cadena complementaria a la enzima
lee la secuencia en la cadena opuesta y extiende lee la secuencia en la cadena opuesta y extiende lee la secuencia en la cadena opuesta y extiende
los cebadores agregando nucleótidos en el orden los cebadores agregando nucleótidos en el orden los cebadores agregando nucleótidos en el orden
en el que se pueden emparejarse el proceso entero en el que se pueden emparejarse el proceso entero en el que se pueden emparejarse el proceso entero
se repiten una y otra vez. se repiten una y otra vez. se repiten una y otra vez.
15. completar según corresponda: 15. completar según corresponda: 15. completar según corresponda:
-activa como una DNA polimerasa termo estables: -activa como una DNA polimerasa termo estables: -activa como una DNA polimerasa termo estables:
Taq polimerasa Taq polimerasa Taq polimerasa
-tecnicas que permiten sintetizar químicamente el -tecnicas que permiten sintetizar químicamente el -tecnicas que permiten sintetizar químicamente el
DNA; Metodo de MAxman y Gilbert DNA; Metodo de MAxman y Gilbert DNA; Metodo de MAxman y Gilbert
-objetivos necesarios para la PCR: DNA blanco, -objetivos necesarios para la PCR: DNA blanco, -objetivos necesarios para la PCR: DNA blanco,
Taq polimerasa, 2 cebadores, 4 dNTPs, buffer Mg+ Taq polimerasa, 2 cebadores, 4 dNTPs, buffer Mg+ Taq polimerasa, 2 cebadores, 4 dNTPs, buffer Mg+

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