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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

Facultad de Ingeniería Ambiental

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA


FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

PRIMER LABORATORIO DEL CURSO MICROBIOLOGIA SANITARIA I – SA323

JUAN CARLOS SALAS CHIRINOS – 20164150J

DOCENTE: ING. JORGE GILBERTO TELLO CEBREROS

Lima, Perú
2018
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
INDICE

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RESUMEN

El presente trabajo tiene como propósito principal el exponer tres cultivos: agar nutritivo,
agar saboraud y el caldo nutritivo a una serie de condiciones de ambiente en la Facultad
de Ingeniería Ambiental; consiguientemente se hace evidente la presencia de
microorganismos que determinarán el grado de contaminación.

Para llevar a cabo nuestro objetivo principal, en primer lugar, se realiza los cálculos
correspondientes para encontrar en que cantidades se usa el agua destilada o agua
desionizada, con los distintos medios de cultivo. Después de tener las cantidades
suficientes se usan pipetas, tubos de ensayo, así como otros equipos debidamente
esterilizados o no. Esto depende de las indicaciones de la guía. Se usa el autoclave
para dar como resultado las esterilizaciones. Luego se obtienen tubos fundidos con
cultivos. Acto seguido, se coloca dicho contenido de los tubos en los 5 petris, con la
marcación, de tal modo que no nos confundiremos. Sin embargo hay que tener mucho
cuidado con equivocarse y escribir en en la tapa equivocada. La solución que está
encerrada en el Petri debe solidificar. Rápidamente, los petris son sometidos a 5
condiciones distintas, todas expuestas en el diagrama de flujo. Exponemos los petris a
las diversas condiciones y esperamos por 15 minutos. Por último, incubamos, dos días
o 48 horas, a 37°C. En el caso de nuestra experiencia fue de 72 horas
aproximadamente.

Los resultados obtenidos fueron de alguna manera, sorprendentes, en mi experiencia;


puesto que el laboratorio de microbiología fue el que tenía mayor cantidad de colonias.
Por ende era el más contaminado. A continuación precisaremos algunos datos
adicionales conforme se va avanzando en el informe.

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INTRODUCCION
El desarrollo de colonias sobre superficies de agar permite al estudiante identificar las
bacterias y hongos; porque las especies forman a menudo colonias con una forma y
aspecto característico. Po ello, este principio es importante por dos motivos: uno es el
de conocer las características de los ya mencionados microorganismos, por ejemplo:
color, elevación, caracteres ópticos, etc. El segundo motivo es determinar cuál de los
ambientes es de mayor contaminación, a través del conteo de colonias, este punto se
reliza de modo fácil.

Además, con esta práctica se pretende aprender las técnicas de preparación de


diferentes medios de cultivo, su esterilización y su almacenaje, así como la importancia
de los diferentes medios de cultivo y su uso. También se pretende que nosotros nos
familiaricemos con las técnicas empleadas en Microbiología para el cultivo y la
manipulación de microorganismos en condiciones de esterilidad.

En el experimento también nos preguntamos por qué esterilizamos a los objetos. La


respuesta está en el concepto de esterilización, que se define como proceso por el cual
se obtiene un producto libre de microorganismos viables. El proceso de esterilización
debe ser diseñado, validado y llevado a cabo para asegurar que es capaz de eliminar la
carga microbiana del producto o un microorganismo más resistente. Este proceso nos
permite contabilizar los microorganismos del aire en el ambiente, del cabello o en la
huella digital.

Otra de las preguntas que nos hacemos, es por qué esperamos 48 horas. La respuesta
es resuelta instantáneamente; puesto que así como nosotros, todo organismo requiere
de cierto tiempo para ir madurando. En este caso aparecen las colonias de hongos y
bacterias.

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OBJETIVOS
 Instruirse en la utilización de los materiales y equipos para el desarrollo de las
prácticas de laboratorio en microbiología.
 Averiguar sobre los distintos factores que propician el crecimiento de
microorganismos.
 Observar el desarrollo de microorganismos en medios de cultivo, tales como:
agar nutritivo, caldo de cultivo y agar sabouraud.
 Determinar el grado de contaminación y el tipo de contaminante en los
diferentes sectores de la facultad.
 Identificar los tipos de microorganismos; así como sus características, tales
como: color, elevación, caracteres ópticos, etc.

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MARCO TEORICO
MEDIOS DE CULTIVO
Son soluciones estériles que tienen macro y micronutrientes, sustancias que permiten
el crecimiento de organismos. En las condiciones de laboratorio, se debe sembrar
sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos van a
crecer y multiplicarse y dar colonias. (Eduardo y Teddy, 1980).

Puesto que la diversidad metabólica de los microorganismos es enorme, la variedad


de medios de cultivo es también muy grande.

Los constituyentes habituales de los medios de cultivo son:

1. Agar. Se utiliza como agente solidificante. Es un polisacárido que se obtiene de ciertas


algas marinas. Las bacterias no son capaces de degradarlo.

2. Azúcares. Son una fuente de carbono para los microorganismos. Los más empleados
son la glucosa, la lactosa, dextrosa y la sacarosa.

3. Extractos. Son preparados de ciertos órganos o tejidos animales o vegetales


obtenidos con agua y calor. Ej.: extracto de carne, de levadura, de malta, etc.

4. Peptonas. Son proteínas hidrolizadas, se obtienen por digestión química o enzimática


de proteínas animales o vegetales.

HONGOS MICROOSCOPICOS

Son organismos pertenecientes al reino Fungi, con nutrición heterótrofa. Poseen una
pared celular de quitina (carecen de celulosa) y pueden ser parásitos, que causan
enfermedades al hombre y otros animales y a vegetales, o saprófitos, que se desarrollan
sobre materia orgánica en descomposición. Hay hongos unicelulares (levaduras) y
pluricelulares, con organización tipo talo, formados por filamentos ramificados y
tabicados llamados hifas cuyo conjunto constituye el micelio. Los mohos son hongos
filamentosos microscópicos, por ejemplo, el género Mucor. Pueden reproducirse
asexualmente (por gemación, esporulación o fragmentación) o sexualmente.

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BACTERIAS

Se trata de un microorganismo unicelular procarionte que puede provocar


enfermedades, fermentaciones o putrefacción en los seres vivos o materias orgánicas.

De acuerdo a su foma se clasifican en:

 Bacilos.- Son las bacterias que se definen por ser alargadas y porque tienen la
posibilidad de ser curvas o rectas.
 Leptothrix.- De gran tamaño son las que se enmarcan bajo esta denominación y
tienen como principal seña de identidad que pueden presentar filamentos
llamados tabicados.
 Espirilos.- En este caso bajo dicha categoría se incluyen las bacterias que tienen
una apariencia curva helicoidal.
 Cocos.- Las bacterias que reciben dicho nombre son aquellas que poseen forma
redondeada y cuentan con la posibilidad de que pueden presentarse aisladas,
en pares o bien en forma de cadena arracimada.

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RESULTADOS

GRUPO 1

Grupo N°1 Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril


Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril

Cantidad de crecimiento Ninguno Moderado Abundante

Distribución de Trasparente Turbidez Película


crecimiento

olor Imperceptible Imperceptible Pútrido

Grupo N° 1

ambiente Baño de varones 2° piso

N° de hongo 4

Tipo de hongo - penicillium (3)


- aspergillus (4)
- candida spp (1)
- levadura (2)

Algunas características - penicillium: forma circular oscura con


bordes bancos.
- aspergillus: de un color verde oscuro.
- candida spp: de un color blanco circular.
- levadura: de color rojizo y blanco.

Día de exposición 28/08/18

Tiempo de exposición / días de 15 minutos / 6 días


reproducción

Hora / temperatura 1:49 pm – 2:04 pm / 18°C

Condiciones Poca luz solar

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GRUPO 2

Placa
Placa N°1 Placa N°2 Placa N°4
Grupo N°3
Estéril Estéril NO Estéril
Estéril
Sector C Sector D
Ambiente: biblioteca Sector A Sector B
2 primer piso Pelo Huella
I. Estéril I. NO NO abrir NO abrir
estéril
N° de
23 20 13 1 3 4 42
Colonias
X1=2mm
X2=3mm X1=0.5mm
X1=3mm
X3=3mm X2=0.5mm
X2=1mm
X4=1mm X3=0.5mm
X3=0.5mm
X5=2mm X4=1mm
X4=4mm X1=3mm
X6=3mm X5=1mm
X5=Irregu. X2=2.5mm
X7=4mm X6=1mm
X6=4mm X3=Irregular
X8=4mm X7=1mm
X7=2mm X4=2mm
X9=2mm X8=1mm
X8=1mm X5=1mm
X10=3mm X1=3mm X9=1mm
X9=1mm X6=2mm X1=3mm
X11=5mm X2=1mm X10=1mm
X10=1mm X7=1mm X2=4mm
Tamaño X12=1mm X1=3mm X3=1mm X11=1mm
X11=1mm X8=4mm X3=4mm
X13=7mm X4=2mm X12=1mm
X12=1mm X9=1mm
X14=2mm X13=1mm
X13=1mm X10=1mm
X15=2mm X14=1mm
X14=1mm X11=1mm
X16=8mm X15=1mm
X15=1mm X12=1mm
X17=3mm X16=1mm
X16=1mm X13=2.5mm
X18=2mm X17=1mm
X17=1mm
X19=1mm X18=1mm
X18=1mm
X20=4mm X19=1mm
X19=1mm
X21=2mm X20=1mm
X22=3mm X21=1mm
X23=4mm

Lisos: x1, x2, x3, x4, x9,


Lisos: x1, x2,
x10, x11, x12, x13, x14,
Lisos: x1, x3, x11, x20, x3, x8, x9, x10, Liso: x1, x8
x15, x16, x17, x18, x19, x20,
x23, x22, x21, x19 x11, x12, x13,
Liso: x2, x3 x30, x31, x32, x33, x34,
Margen o lobular:x7, x2, x5, x6, x14, x15, x16, Ondulantes: Lisos: x1,
Liso:x1 Ondulantes: x35, x36, x37, x38, x39,
borde x10, x12, x15, x16 x17, x18, x19, x2, x4, x5, x6, x2, x3, x4
x1 x40, x41, x42.
ondulante:x8, x13, x4, x20 x7, x9, x10,
Ondulantes: x5, x6, x7,
x9, x14, x17, x18 Ondulantes: x11, x12, x3
x8, x21, x22, x23, x24, x25,
x4, x6, x7
x26, x27, x28, x29.
Plano: x1, x2, x3, x4, x9,
x10, x11, x12, x13, x14,
Plano: x1, x2,
x15, x16, x17, x18, x19, x20,
Plano: x7, x1, x2, x3, x3, x4, x8 Plano: x1, x2,
Plano: x3 x5, x6, x7, x8, x21, x22,
x4, x5, x6, x9, x10, x14, Cóncavo: x6, x4, x5, x6, x7,
Plano: x1, Cóncavo x23, x24, x25, x30, x31,
Elevación x15, x17, x18, x19, x22 x7, x9, x10, x11, x8, x9, x10, Plano:x1
x2, x3 : x1, x2, x32, x33, x34, x35, x36,
Cóncavo: x8, x23, x20, x12, x13, x14, x11, x12, x13
x4 x37, x38, x39, x40, x41,
x8, x13, x12, x16, x21 x15, x16, x17,
x42.
x18, x19, x20
Cóncavo: x26, x27, x28,
x29.
Crema: x1, Crema: x1, x2, x3, x4,
Crema: x1, x3, x4, x5, x5, x6, x7, x11, x9, x10, x11, x12, x13, x14,
x10, x14, x15, x17, x18, x12, x13, x14 x15, x16, x17, x18, x19, x20,
x19, x20, x21, x22, x23. x15. x16, x17, Todas x5, x6, x7, x8, x21, x22,
Todas son Crema: Todas son
Pigmentación Anaranjado: x6, x7, x18, x19, x20. son x23, x24, x25, x28, x29, x30,
cremas x1 cremas
x8, x9. Anaranjado: crema x31, x32, x33, x34, x35,
Amarillo: x2, x11, x12, x2, x3, x4. x36, x37, x38, x39, x40,
x13, x16. Amarillo: x8, x41, x42.
x9, x10. Amarillo: x26, x27.
Todas Todas
Todas son Todas son Todas son
C. Óptico Todas son opacas son son Todas son opacas
opacas opacas opacas
opacas opacas

Nota: Los resultados se vieron 7 días después de la preparación.

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Ambiente Biblioteca
Características La placa se colocó al fondo, con
pocas personas a su alrededor.
Día de exposición 28 de Agosto 2018
Hora 13:30-13:45 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 7 días
Tipo de Agar Agar nutritivo
Cantidad de personas 1 (el encargado de la muestra)
Temperatura 19°C (Temperatura de ambiente)

Grupo 2

Ambiente Laboratorio de Fisicoquímica

Tiempo de exposición: 15 minutos

Fecha de exposición 28/08/18

Numero de hondos observados 8 hongos

Tipos de hongos Penicillium spp (3), levaduras (5)

 Levaduras: Son de forma circular, de


color blancos y de tamaño pequeño a
mediano.
Características  Penicillium spp: Forma circular, de
contextura algodonosa, con bordes
blancos y centro gris verdoso

Ambiente Laboratorio de Fisicoquímica


Características La placa se colocó al medio. El
lugar estaba ventilado y sin polvo.
Día de exposición 28 de agosto 2018
Hora 13:30-13:45 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 7 días
Tipo de Agar Agar Sabouraud
Cantidad de personas 1 (el encargado de la muestra)
Temperatura 21°C (Temperatura de ambiente)

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GRUPO 3
Procedimiento B

N° 1 N° 2 N° 3

Grupo N°3 Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril


Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril

Cantidad de Moderado Escaso Abundante


crecimiento

Distribución de Sedimento Turbidez Película


crecimiento

Olor Pútrido Imperceptible Imperceptible

Procedimiento C

Ambiente Aula vacía 2 piso

Número de hongos 2

Tipos de hongos Aspergillus (1), Candida (1)

Características Aspergillus: Tiene forma concéntrica, núcleo


verde oscuro.

Cándida: Colonia pequeña de color blanco


sin forma definida.

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Factores de crecimiento del procedimiento C:

Ambiente Aula vacía 2 piso (161)

Día de exposición 28/08/18

Hora 1:50 pm – 2:05 pm

Tiempo de exposición/días de reproducción 15 minutos / 6 dias

Cantidad de personas 0 personas

Características del lugar donde se dejó la Puerta a medio abrir, había 1 ventana abierta.
muestra.

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Placa N1º Placa N°2 Placa Placa
UNIVERSIDAD
Grupo 4 Estéril
NACIONAL DE
Estéril
INGENIERIAN°3 N°4 No
estéril estéril
Facultad de Ingeniería Ambiental
Laboratorio Sector A: Sector B: Sector Sector
de Fisico Pelo Huella C: D:
2
Quimica Inocu- Inocu-
lador lador
estéril no
estéril

Número 35 3 5 1 1 3 -
de
colonias

Tamaño X1=6.5 X19=6 X1=3 X1=4.5 X1=6 X1=6.5 X1=3 -


(mm) X2=9 X20=3 X2=3.5 X2=2.5 X2=3.5
X3 =6 X21=13 X3=3 X3=2 X3=2.5
X4=1 X22=1.4 X4=3
X5=8 X23=1.2 X5=2.7
X6=3 X24=1.9
X7=2 X25=4
X8=4.5 X26=1
X9=2.3 X27=2,2
X10=5 X28=25
X11=2 X29=2
X12=3 X30=4.2
X13=1.8 X31=2
X14=3 X32=7
X15=1 X33=1.1
X16=2.3 X34=3
X17=2.9 X35=1
X18=4.5

Margen Liso X1=liso X1=liso X1=liso X1=liso X1=liso -


x1,x3,x4,x6,x10, X2=liso X2=liso X2=liso
x13,x14,x15,x17,
X3=liso X3=liso X3=liso
x20,x23,x24, x25,
X4=liso
x29, x30, x31,
x33, x34 X5=liso

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Lobular
x2, x8, x19, x21,
x27, x32
Ondular
x5, x7, x9, x11,
x12, x16, x18,
x22, x26, x28,
x35

Elevación Todas son Todas son Todas son X1=plan X1=plan Todas -
lanas planas planas o o son
planas

Pigmenta- Crema X1=Amarillo X1=Amarillo X1=am X1=ama X1=Anar -


ción arillo rillo anjado
x1, x8, x9, x16, X2=Crema X2=Amarillo
x18, x19, x22, X2=Anar
X3=Crema X3=Amarillo
x24, x26, x28, anjado
x32, x33, x35 X4=
X3=Cre
Anaranjado
Amarillo ma
X5=Crema
x2, x6, x10, x11,
x12, x14, x17,
x20, x25, x29,
x31, x34
Anaranjado
x5, x13, x21, x27,
x30
Blanco
x3, x4, x7, x15,
x23

Caracterís Todas son Todas son Todas son Es Es Son -


-ticas opacas opacas opacas opaca opaca opacas
excepto x22 y
x28

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GRUPO 5

Grupo N°5 Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril


Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril

Cantidad de crecimiento escaso abundante moderado

Distribución de crecimiento sedimento película Turbidez fina uniforme

olor aromático pútrido Ligeramente pútrido

Grupo N° 5

ambiente Sala de tesis

N° de hongo 1

Tipo de hongo Aspergillus-niger

Algunas caracteristicas Forma: filamentosa


Superficie: umbilicada
Levaduras: verde opaco
Colonias blancas con micelio aéreo de color
negro

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DISCUSION DE RESULTADOS
 Se observaron cinco tipos de hongos: levadura, Aspergillus niger, Alternaria,
Alternaria sp, Rhizopus Nigricans.
 En el grupo N°1 destacaré la no presencia de bacterias en el inoculador esteril.
 En el grupo N°2 no hay colonias en los sectores A y B de la placa N°2. Quizás
por una mala manipulación.
 En el grupo N°3 no se observa colonias en sector A de la placa N°2 y en la placa
no estéril.
 En el grupo N°4 no se observa colonias en sector B de la placa N°2 y en la placa
no estéril.

CONCLUSIONES

 Se puede observar mayor N° de colonias en el laboratorio de Microbiología (36)


que en todos los demás ambientes, esto significa que hay más contaminación
en el laboratorio, y esto se debe a la cantidad de personas dentro del laboratorio
y el Centro de Estudiantes, como también por factores como la temperatura,
polvo, la humedad, etc.
 Se logró verificar que en la placa N° 2, de los grupos 3 y 4 no se observó
bacterias, dado que la placa fue esterilizada y no fueron expuestas al ambiente.
 Se observa mayor cantidad de hongos en la sala de tesis, posiblemente por la
humedad que hay en ese lugar.

RECOMENDACIONES

- Tener cuidado con la manipulación de los equipos y materiales; ya que un error


podría traer consigo falacias. Ejemplo: placas estériles con microorganismos y
placas no estériles sin microorganismos.
- Realizar una limpieza exhaustiva de los lugares más contaminados: laboratorios,
baños, etc.
- Monitorear frecuentemente los ambientes de la universidad a través de este
procedimiento para encontrar soluciones contra los agentes contaminantes

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CUESTIONARIO
1. ¿Qué factores influyen en la flora microbiana del aire?
El aire no posee una microflora propia, ya que no constituye un hábitat microbiano; es
un medio desfavorable para los microorganismos. Sin embargo el aire es portador de
materias especiales como polvo, humo, hollín y de gotitas que pueden ir cargadas de
microbio. Los factores que influyen en los microorganismos del aire son:

 Materia orgánica: La materia orgánica que se encuentra sobre el suelo influye


en la riqueza microbiana del mismo, por lo que así será la riqueza del aire, en
dependencia de la fertilidad del suelo.
 Humedad y precipitaciones atmosféricas: La atmósfera húmeda contiene menos
microbios que la seca, debido a que las gotas de humedad los hacen bajar al
suelo. Igualmente, después de las precipitaciones atmosféricas, lluvias y
nevadas, el aire en gran medida se purifica de microbios. A su estancia
contribuye un tiempo seco prolongado.
 Corrientes de aire: Un ambiente activo contiene más bacterias que otro seco más
sosegado, por otra parte, las bacterias permanecen en el aire durante lapsos
variables, según la velocidad de las corrientes. La importancia epizoótica de la
transmisión por el aire contaminado aumenta durante la ubicación conjunta de
un gran número de animales en un área pequeña y con poco espacio, sobre todo
cuando hay ventilación deficiente, la estabulación de los animales con las
cabezas situadas unas frente a las otras y con comederos centrales facilita esta
vía de transmisión.
 Tamaño de las partículas: La permanencia de los microorganismos en el aire
depende del tamaño de las partículas donde se fijan, depositándose con más
rapidez las adheridas a las partículas mayores.
 Luz solar, temperatura y desecación: El destino de los microorganismos del aire
depende entre otros factores atmosféricos, de la luz solar, pues la acción directa
de los rayos solares tiene efectos perjudiciales en los microorganismos;
igualmente la temperatura y la desecación directamente relacionadas con la luz
solar (con los rayos infrarrojos), actúan como agentes antimicrobianos
importantes.
2. ¿Qué grupos de agentes causa la mayor incidencia de enfermedades
respiratorias?

Hongos (algunos de ellos), virus y bacterias.

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3. Explicar cuatro enfermedades que son transmitidas por el aire

Enfermedades bacterianas transmitidas por vía aérea:

• Tuberculosis (Mycobacterium tuberculosis)

• Faringitis causada por (Streptococcus pyogenes)

• Neumonía causada por (Streptococcus pneumoniae)

• Difteria (Corynebacterium diphteriae)

• Legionelosis causada por (Legionella pneumophila)

• Tosferina causada por Bordetella pertusis.

4. Mencionar las principales características de: Rhizopus nigricans, Alternaria,


Sacharomyces cerevisae

Rhizopus nigricans: Es un tipo de moho inofensivo, hallable en crecimiento en pan,


conocido por "moho del pan". Es un miembro del género Rhizopus, que se compone
de hongos con esporangios columnares hemiséricos aéreos, anclados al sustrato por
rizoides. Puede causar infecciones si no se tiene cuidado. Puede causar reacciones
concretas alérgicas. Rhizopus nigricans posee esporas que flotan alrededor en el aire.
Presentan el aspecto de una suave pelusa grisácea o verdosa que se desarrolla en la
superficie de la materia orgánica en descomposición sobre la que viven.

Alternarias: Es un hongo ascomiceto .Las diferentes especies de este género son uno
de los mayores patógenos de plantas. Son conocidas comúnmente como alérgenos en
los humanos, y, dentro de casa, pueden causar rinitis alérgica o reacciones de
hipersensibilidad que, en ocasiones, pueden producir ataques de asma.

Sacharomyces cerevisae: Es un hongo unicelular, un tipo de levadura utilizado


industrialmente en la fabricación de pan, cerveza y vino. En su ciclo de vida alternan
dos formas, una haploide y otra diploide. Ambas formas se reproducen de forma
asexual por gemación. En condiciones muy determinadas la forma diploide es capaz
de reproducirse sexualmente. En estos casos se produce la meiosis en la célula
formándose un asca que contiene cuatro ascosporas haploides.

5. ¿Cuáles son los ingredientes del caldo nutritivo y agar nutritivo? ¿Qué clase de
nutrientes proporciona cada uno de los ingredientes?

Agar Nutritivo

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Agar Nutritivo Cantidad Nutrientes

Extracto de carne 3g Glúcidos, lípidos

Peptona 5g Glúcidos

Agar 15g Glúcidos

Agua 1000ml Agua

Agar Saboraud

Agar Nutritivo Cantidad Nutrientes

Dextrosa 10g Glúcidos

Peptona 10g Glúcidos

Agar 15g Glúcidos

Agua 1000ml Agua

Caldo nutritivo

Caldo Nutritivo Cantidad Nutrientes

Extracto de carne 3g Glúcidos, lípidos

Peptona 5g Glúcidos

Agua 1000ml Agua

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FUENTES DE INFORMACION

Bacterias. (2007). En Manual de la Microbiología de los Alimentos (págs. 19-30).

French, E., & Heber, T. (1980). Métodos de Investigación Fitopatológica. Managua.

Olivas, E. (2012). Manual de Prácticas: Laboratorio de Microbiología.

Pérez Porto, J., & Merino, M. (2009). Obtenido de http://definicion.de/bacteria/

Solano Goñi, C. (2005). Microbiología General: ( Guion de Prácticas).

ANEXOS

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APENDICE

APÉNDICE
EQUIPO
 Balanza Calibrada
 Papel Kraft
 Espátula
 Probeta
 Vaso
 Vagueta
 Mechero Bunsen
 Tripode
 Rejilla
 2 guantes de asbesto
 Algodón

CALDO NUTRITIVO

Mezclar 8 grms de peptona y


extracto de carne ( 5 y 3 grms
respectivamente)

Diluir con 1 lt de agua destilada. Si es


posible se calienta hasta diluir.

Distribuir y esterilizar al Autoclave a


118-121 °C, durante 15 minutos.

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AGAR NUTRITIVO

Mezclar 23 grms de peptona,


extracto de carne y agar ( 5, 3 y
15grms respectivamente)

Diluir con 1 lt de agua ionizada. Si es


posible se calienta hasta diluir.

Distribuir y esterilizar al Autoclave a


118-121 °C, durante 15 minutos.

AGAR SABOURAUD

Mezclar 65 grms de peptona,


dextrosa y agar ( 10, 40 y 15grms
respectivamente)

Diluir con 1 lt de agua ionizada. Si es


posible se calienta hasta diluir.

Distribuir y esterilizar al Autoclave a


118-121 °C, durante 15 minutos.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental

PROCEDIMIENTO A

Tomar 4 tubos de ensayo de agar


fundido.

Vaciar el tubo de ensayo en cada uno


de los tres petris esterilizados y 1 no
esterilizado.

1 4

Exponer el No se debe
agar en abrir.
cualquier
ambiente de
la facultad.

B D

A
3
C

No se debe
En donde: abrir.
ACabello
BHuella Digital
CInoculador estéril
D Inoculador no estéril

Invertir los petris e incubarlos a 37°C, durante 48 horas

23
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental

PROCEDIMIENTO C

Ubicar el contenido del tubo de ensayo


5(agar saboraud) en el Petri.

Exponemos 15 minutos en un
determinado ambiente de la facultad

Invertir los petris e incubarlos a 37°C,


durante 48 horas.

PROCEDIMIENTO CÁLCULO
En este caso, sólo realizamos una simple regla de tres simple, para calcular que
cantidad (en grs) de agar nutritivo o agar saboraud vamos a usar en el experimento.

 Agar Nutritivo: 240 ml


 Agar Saboraud: 75 ml

23gr----1000ml 65gr----1000ml

X ----240 ml x -----75ml

DATOS CALCULADOS
Usaremos 5.52 gramos de agar nutritivo y 4.875 gramos de agar saboraud.

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