PRACTICA N °1

DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LA

SALIVA (AMILASA)

INTRODUCCIÓN
En el presente informe se tratara sobre La α-amilasa que es una enzima proteica que se encuentra en
la saliva humana y cataliza la degradación del almidón, que es un polisacárido de reserva vegetal. El
almidón está formado por dos tipos de moléculas: la amilosa y la amilopectina, ambos polisacáridos
de glucosa. La amilosa se conforma por cadenas lineales de glucosas unidas por enlaces α- C1-C4,
mientras que la amilopectina tiene, además de estos últimos enlaces, uniones C1 con C6, formando
cadenas ramificadas.

La α-amilasa rompe uniones C1-C4, tanto en la amilasa como en la amilopectina, dejando dextrinas
lineales y ramificadas (oligosacáridos) como productos. Para medir la actividad enzimática de la α-
amilasa, se utilizará un test colorimétrico que detecta el almidón. Para ello se contará con una
solución de iodo/ioduro de potasio (I 2 /IK), ya que el almidón en presencia de esta solución
adquiere una coloración azulada característica. Esto tiene una explicación física: el iodo se coloca
en el interior de la hélice que forma la amilosa (en las regiones hidrofóbicas), formando un
complejo de color azul. Cuando la α-amilasa actúa, degrada la amilosa, se desintegra la hélice y por
tanto en presencia de I 2 /IK ya no dará una coloración azul. Por lo tanto, en este TP mediremos la
desaparición de sustrato (evidenciada por el test colorimétrico) para determinar la actividad de la
enzima. Además, analizaremos cómo afectan las distintas condiciones en que actúa la enzima (pH,
temperatura, concentración de NaCl), así como los efectos que pueden causar diferentes
pretratamientos (proteinasa, calor).
OBJETIVOS

 Identificar la acción de la amilasa de la saliva sobre el almidón

MATERIALES
 Pipetas
 Vaso de precipitación
 Almidón ( chuño)
 Galleta
 Agua
 Yodo
 Saliva

PROCEDIMIENTO
1.-En primer lugar, agregar cierta cantidad de galleta triturada a dos tubos de ensayo y Luego a dos
tubos de ensayo más agregar una pequeña cantidad de chuño o maicena

Maicena Galleta
(almidón) triturada

2.-Seguido de eso, agregar a a los 4 tubo 2 ml de agua, y homogenizar el contenido

3.-Agregar 2 ml de saliva a un tubo de ensayo con maicena y con galleta triturada y homogenizar el
contenido

4.- A los dos tubos de ensayo que se le agrego la saliva se les llevo a incubar por un cierto tiempo
5.-Luego se les agrego una gota de yodo a cada uno de ellos.
RESULTADOS
1. Luego de agregar la gota de lugol a cada tubo se obtuvo las siguientes reacciones
Tubo 1: Galleta + agua + una gota de yodo
Se pudo observar en el tubo es el cambio de color ya que al agregar una gota de yodo , la solución
se tornó inmediatamente de un color oscuro ( negro)

Tubo 2: Maicena + agua+ una gota de yodo.

Se pudo observar en el tubo de ensayo , es el cambio inmediato de color ya que se le agrego una
gota de yodo, la solución se tornó inmediatamente de color oscuro (negro)

T2
2.-Despues de agregar la gota de yodo a los dos siguientes tubos donde se le agrego saliva se
obtuvo las siguientes reacciones:
Tubo 3 : Galleta +saliva (amilasa salival) + una gota de yodo
Se pudo observar en el tubo es el cambio de color en la solución ya que al agregar una gota de yodo
, la solución se tornó inmediatamente de un color amarillento la reacción fue lenta

T3

Tubo 4 : Maicena + saliva (amilasa salival) + una gota de yodo.

La reacción que se pudo observar en el tubo de ensayo, es el cambio inmediato de color en la
solución ya que se le agrego una gota de yodo, la solución se tornó inmediatamente de color
amarillenta y la reacción fue lenta.

T4
3.-Tras las observaciones se pudo destacar la gran diferencia de las reacciones en el color de los 2
primeros tubos y los 2 últimos tubos que contiene saliva ,

Color mostaza para los tubos Color negro para los tubos
que contiene maicena o galleta que contiene maicena o
+ saliva + lugol galleta + agua + lugol

CONCLUSIONES
 Podemos concluir que la función de la amilasa consiste en degradar el almidón para formar
azúcares simples, la amilasa salival o ptialina se encuentra en las saliva, cuando entra en
contacto con el almidón que es un polisacárido lo desdobla en unidades de monosacáridos
llamados glucosa ;en ese caso la amilasa actúa sobre el polisacárido que es el almidón
hidrolizando el enlace O-glicosídico, por lo que el almidón se termina por transformarse en
unidades de glucosa. Sin la amilasa las largas cadenas de azucares que conforman los
almidones no serian absorbidas por los animales y se desecharían del cuerpo de estos sin
brindar la energía que la glucosa del almidón
 Se pudo concluir que los dos primeros tubos que contenida (galleta, maicena), agua y yodo
se tornaron inmediatamente de color negro , esto es debido a la reacción del yodo, El
almidón al ponerse en contacto con el yodo presenta una coloración negruzca , esto se debe
a que cuando el yodo reacciona con las dos estructuras que forman el almidón ,con la
amilasa proporciona un color azul y cuando reacciona la amilo pectina con lugol
proporciona un color rojo y la combinación de estos dos colores nos proporciona el color
violeta oscuro o negro característico del almidón, demostrando así que los dos contenidos
de los tubos tenia específicamente almidón.
 En los tubos 3 y 4 que contiene galleta o maicena (almidón) + saliva+ yodo se produjo un
cambio de color, no se tornó de color negro como paso en el tubo 1 y2, en este caso se
decoloro tomando un color amarillento, esto se debe a que la amilasa que está presente en la
saliva , degrada la actividad existente en la muestra

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
 Amerongen AVN. Salivary glands and saliva. Number 2. Saliva- the defender of the oral
cavity. Oral Dis. 2002;8:12-22.
 Cardellá L, Hernández R, Upman C, Vicedo A, Pérez A, Sierra S. Bioquímica Médica. La
Habana: Ecimed; 1999, p. 137, 211, t.I.
 PRACTICA N° 2
DETERMINACION DE LAS CARACTERISTICAS QUIMICAS (PH) DE LAS
DIFERENTES PARTES GASTROINTESTINALES DE UNA AVE

INTRODUCCIÓN
En el presente informe se mostrará las características químicas en especial el PH de las diferentes
partes gastrointestinales de un ave, determinando así las condiciones óptimas donde cada parte
puede realizar su actividad correcta, El sistema digestivo de el ave empieza en el pico o boca e
incluye diferentes órganos importantes y terminaciones como la cloaca.
Algunas Partes que forman el sistema digestivo de las aves
1- Pico o Boca
Las aves utilizan su pico para alimentarse. Toda la comida que entra al cuerpo del ave pasa primero
por el pico. Las aves no tienen dientes, así que no pueden masticar la comida.
No obstante, en el interior del pico pueden ser encontradas glándulas que secretan saliva que sirve
para humedecer los alimentos, permitiendo que estos puedan ser tragados fácilmente.
La saliva que se encuentra en el interior del pico contiene enzimas digestivas como amilasa que
sirven para iniciar el proceso de digestión de los alimentos. Las aves también usan su lengua para
empujar el alimento a la parte trasera del pico y así poder tragarlo (Jacob & Pescatore, 2013).
2- Esófago
El esófago es un tubo flexible que conecta el pico con el resto del tracto digestivo del ave. Se
encarga de llevar el alimento de la boca al buche y del buche al proventrículo.
3- Buche
El buche es una saliente del esófago localizada en la región del cuello del ave. Los alimentos y el
agua tragados son almacenados en esta bolsa hasta que pueden pasar al resto del tracto digestivo.
Cuando el buche está vacío o casi vacío, le envía señales de hambre al cerebro para que el ave
ingiera más alimento.
Aunque las enzimas digestivas secretadas en el pico inician el proceso de digestión, en el buche este
proceso es bastante lento, ya que este órgano sirve como un lugar de almacenamiento temporal para
los alimentos.
Este mecanismo de almacenamiento se desarrolló en aves que son típicamente cazadas por otros
animales, pero necesitan desplazarse en campo abierto para encontrar alimento.

De esta forma, las aves pueden consumir una cantidad considerable de alimento rápidamente y
luego moverse a un lugar más seguro a digerir dicho alimento.
En algunas ocasiones, el buche puede ser afectado por problemas de obstrucción o impactación.
Esto sucede cuando el ave lleva un largo periodo de tiempo sin consumir alimento y de repente
ingiere una amplia cantidad.
Cuando esto ocurre, el alimento puede iniciar un proceso de descomposición en el interior del buche
y enfermar al ave. El buche también puede obstruirse cuando el ave consume grandes trozos de
material vegetal que bloquean el paso de alimento al resto del sistema digestivo.
Un buche inflamado también puede bloquear la tráquea o salida del aire, causando que las aves
mueran por sofocación.
4- Proventrículo
El esófago continúa después del buche y lo conecta con el proventrículo. Este órgano es conocido
como el estómago glandular de las aves donde la digestión primaria comienza.
El ácido hidroclórico y las enzimas digestivas como la pepsina se mezclan con el alimento ingerido
y empiezan a descomponerlo de manera más eficiente. En este momento, la comida todavía no ha
sido molida.
5- Ventrículo o Molleja
El ventrículo o molleja es un órgano del sistema digestivo tanto de las aves como de los reptiles, los
gusanos de tierra y los peces.
Usualmente se le conoce como el estómago mecánico, pues está compuesto por un par de músculos
fuertes con una membrana protectora que actúan como si fuesen los dientes del ave.
El alimento consumido por el ave y los jugos digestivos provenientes de las glándulas salivales y el
proventrículo pasan a la molleja donde todo será molido y mezclado.
Algunas veces, las aves pueden consumir pequeñas rocas dentro del alimento. Éstas suelen ser
ablandadas en el proventrículo y molidas en la molleja.
Generalmente, las rocas molidas permanecen en la molleja hasta que su tamaño es lo
suficientemente pequeño como para pasar por el resto del tracto digestivo.
Cuando un ave ingiere un objeto filoso, como una tachuela o un gancho de grapadora, el objeto
puede quedar atrapado en la molleja. Estos objetos pueden perforar la molleja cuando sus músculos
empiezan a moverse rápidamente.
Las aves que presentan daños en las paredes de la molleja, comienzan a sufrir de desnutrición y
eventualmente mueren (Loon, 2005).
OBJETIVOS:
 Determinar las características químicas (Ph) de las diferentes partes gastrointestinales de
una ave

MATERIALES
 Estuche de disección
 Cintas pH metro
 Paloma

PROCEDIMIENTO
En primer instancia se procede a matar a la paloma , luego abrir a la paloma por la parte ventral
utilizando los instrumentos adecuados , con la finalidad de extraer todo el sistema digestivo del ave

Liquido del duodeno

Una vez reconocidas las partes del sistema digestivo del ave se procede a realizar la prueba del ph ,
utilizando la cinta de PHmetro, en las siguientes partes :
 Buche
 Proventrículo
 Molleja
 Liquido del duodeno
RESULTADOS
Luego de realizar la prueba del pH metro a las 4 partes del sistema digestiva del ave ya
mencionadas los resultados que se pudo obtener son:
 Ph en el buche: 4-6 pH
 Ph en el proventrículo: 6 pH
 Ph en la molleja: 0 pH
 Ph en el liquido del duodeno (páncreas): 7 pH

CONCLUSIÓN
Se concluye de la práctica que la determinación de los distintos pH existentes en cada parte del
sistema digestivo, uno de ellos fue la determinación del pH en el buche y como resultados
obtuvimos que el pH es de 4-6, lo que indicaría que no estaría en su rango entre lo normal, y por
ende indicaría que el ave tenga algún problema.
El siguiente dato obtenido es del estómago glandular el proventrículo, en donde se determinó que el
ph esta entre 5-6, lo que indicaría que no está en su rango normal ya que este parte del sistema
digestivo del ave siempre tiene que ser acida (3,5-4 ph).
El pH de la molleja se obtuvo 0 de pH , lo que indica que esta zona es bien acida , pero
generalmente estará en los niveles de pH 2-3,5, ya que es el lugar donde se produce la mezcla de
alimentos con HCl y la pepsina , se produce una digestión mecánica, ya que la molleja en un
musculo fuerte que actúa como dientes .
En el PH del líquido del duodeno del páncreas el pH es 7 ( neutro), porque el páncreas presenta el
bicarbonato y eso neutraliza al duodeno.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
 ANAVITARTE CONDEMARIN, Federico. (1 970). Manual de Anatomía Comparada de
los Animales Domésticos. Universidad Nacional Agraria La Molina. Lima Perú.
 CASTEJON CALDERON, Francisco J. y otros. (1 979). Fundamentos de Fisiología
Animal. Ediciones Universidad Navarra, S.A. Pamplona. 562 pag.
 CHURCH, D. C. (1 974). Fisiología Digestiva y Nutrición de los Rumiantes Volumen 1.
Fisiología Digestiva. Editorial Acribia. Zaragoza.
 DUKES, H. H. (1 955). Fisiología de los Animales Domésticos. Ediciones Acribia, S.A.
Nueva York.
 DUKES, H.H. (1 969). Fisiología de los Animales Domésticos. Tercera Edición. Ediciones
Aguilar, S.A. Madrid. 962 pag.