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EFECTO DE LOS FACTORES AMBIENTALES EN EL CRECIMIENTO

MICROBIANO.
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Alvarez C. Juan Pablo, 2García F. Erick, 3Rodríguez V. Ali, 4Vides A. Walfran.
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Universidad Del Magdalena, Facultad de Ingeniería, Programa de Ingeniería Pesquera,
Laboratorio de Microbiología de Alimentos. Carrera 32 No 22-08 Santa Marta, Colombia.
Códigos estudiantes: 20151130361, 20142130372, 20142130773, 20142130974.

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jpalvarez0620@gmail.com, 2erickgarciafdez20@gmail.com ,
3
rodriguezvillan.ali@gmail.com, 4walfrandj06@gmail.com.

RESUMEN
El ambiente donde se encuentra un microorganismo tiene una gran influencia sobre su
crecimiento, al igual que las demás formas de vida. Para ello, no sólo son indispensables o
necesarios los requerimientos nutricionales, sino otros factores ambientales tanto físicos como
químicos. Un agente físico es una condición física o propiedad física que causa un cambio, por
ejemplo, la humedad, la temperatura, la presión osmótica, el pH, las radiaciones y los filtros
bacteriológicos.
El crecimiento de los microorganismos se modifica o se limita al cambiar los factores
ambientales físicos en el medio. El conocimiento de los factores ambientales nos permite
explicar la distribución de los organismos en la naturaleza, sobre todo en el caso de organismos
patógenos, que causan deterioro en los alimentos o que dan lugar a pérdidas económicas en otras
formas. El manejo de estos factores se puede utilizar para el control del crecimiento microbiano.
Algunos microorganismos están adaptados a los hábitats extremos, donde otros definitivamente
no pueden sobrevivir. Pero hay factores ambientales que se controlan en condiciones de
laboratorio con mayor frecuencia, además de los factores nutricionales son los fisicoquímicos
como: la temperatura y el pH.
Como objetivo general de la práctica podemos destacar el hecho de conocer el efecto del pH y
la temperatura como parámetros de control del crecimiento microbiano; asimismo, analizar y
someter dos tipos de microorganismos a diferentes condiciones o factores ambientales.

Palabras clave: Microorganismos, crecimiento, humedad, temperatura, presión osmótica, pH.

ABSTRACT
The environment where a microorganism is found has a great influence on its growth, just like
other forms of life. For this, not only nutritional requirements are necessary or necessary, but
there are also environmental factors. A physical agent is a physical or physical property that
causes a change, for example, humidity, temperature, osmotic pressure, pH, radiation and
bacteriological filters.

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The growth of microorganisms is modified or limited to the change of physical environmental
factors in the environment. The knowledge of environmental factors allows us to explain the
distribution of organisms in nature, especially in the case of pathogenic organisms that cause
deterioration in food or that give rise to it. The management of these factors can be used to
control microbial growth.
Some microorganisms are adapted to extreme habitats, where others definitely can´t survive.
But there are environmental factors that control laboratory conditions more frequently, in
addition to nutritional factors such as chemical levels: temperature and pH.
As a general objective of the practice we can highlight the fact of knowing the effect of pH and
temperature as control parameters of microbial growth; Also, analyze and submit the types of
microorganisms to different environmental conditions or factors.

Keywords: Microorganisms, growth, humidity, temperature, osmotic pressure, pH.

INTRODUCCION.
El crecimiento bacteriano no solamente depende de que cumplan los requerimientos
nutricionales, también van ligados a unos factores ambientales (físicos), dichos factores
determinan la distribución de los microorganismos en la naturaleza, también permiten controlar
sus actividades. Uno de los principales factores para un buen crecimiento es la temperatura, cada
microorganismos tiene sus temperaturas cardinales. Que son:
Temperatura mínima: por debajo la cual no hay crecimiento, ya sea por gelificación de la
membrana o por detenerse prácticamente el transporte de nutrientes / gradiente de protones.
Temperatura máxima: por encima de la cual no existe crecimiento, ya sea por desnaturalización
proteica o por colapso y rotura de la membrana (lisis celular).
Temperatura óptima: a la que se da el crecimiento óptimo, ya sea porque las reacciones
enzimáticas alcanzan su máxima velocidad.

Otro efecto importante para el crecimiento y supervivencia bacteriano es el pH, la tolerancia de


las bacterias a los cambios de pH es limitada, cambios bruscos producen muerte. Las variaciones
del pH del medio causan muertes ya sea en la estabilidad de la membrana plasmática y otras
envueltas, en el intercambio de hidrogeniones, en la concentración interna de los mismos (las
bacterias mueren si su pH interno es < 5,5), cambia la ionización de las moléculas.
Entre otros efectos de suma importancia para el crecimiento bacteriano es el oxígeno, no todas
las bacterias necesitan oxígeno para vivir, muchas pueden hacerlo en ausencia parcial o total de
este elemento. Hay microorganismos que viven en ambientes anoxicos, sedimentos, tracto
digestivo de los animales o grandes profundidades, entre otros. (Inés Martínez Sánchez.
Departamento de microbiología, universidad de granada).
El crecimiento de los microorganismos se modifica o se limita al cambiar los factores
ambientales físicos en el medio. El conocimiento de los factores ambientales nos permite
explicar la distribución de los organismos en la naturaleza, sobre todo en el caso de organismos
que son patógenos, que causan deterioro en los alimentos o que dan lugar a pérdidas económicas
en otras formas. El manejo de estos factores se puede utilizar para el control del crecimiento
microbiano. (Manual de Prácticas. Laboratorio de Microbiología. ACADEMIA DE

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MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA. DPTO. CIENCIAS QUIMICO BIOLOGICAS.
ICB, UACJ. 2012. p 25)
Hay 4 factores que tienen una función destacada en el control del crecimiento microbiano: la
temperatura, el pH, la disponibilidad de agua y el oxígeno. (Madigan et al., Biologia de
microorganismos, 10° edición.ISBN 84-205-3679-2)
MATERIALES Y METODOS.

o Cajas de Petri o Cepa E-coli.


o Cepa Bacillus cereus o Tubos de ensayo.
o Cepa Pseudomona aeruginosa. o Rotuladores.
o H2SO4 o Medidores de pH.
o KOH 10% o Incubadora.
o Agar nutritivo y Agar Platecount. o Jarra para anaerobiosis o Gaspak.
o Asas de siembra
o Mechero de bunsen

Jarra para anaerobiosis


Medidores de pH. KOH 10%
o Gaspak.

Placas con agar para los cultivos. Incubadora. Cajas de Petri.

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METODOLOGIA.

Determinación de la temperatura optima de crecimiento de algunas bacterias.


 Se procedió encendiendo el mechero y se dispuso a tomar los cultivos microbianos, los
tubos de ensayo y todos los materiales que necesitaríamos para el laboratorio. Cabe
destacar que cada uno de los procedimientos debían ser realizados cerca al calor del
mechero debido a que esto previene la contaminación de las muestras con
microorganismos provenientes del aire. Ya con el asa estéril, se tomó una placa con agar
nutritivo, lo abrimos cerca del mechero y tomamos un poco de bacteria E-coli y
procedimos a hacer el cultivo. Ya hecho lo cerramos y volvemos a esterilizar el asa de
siembra. Ya esterilizada tomamos el otro agar lo abrimos cerca del mechero tomamos
un poco de E-coli y le procedimos hacer el cultivo. Finalizando lo cerramos y se volvió
a esterilizar el asa y asi sucesivamente se volvió a hacer con el siguiente agar. Ya hecho
esterilizamos el asa nuevamente cogimos un agar nutritivo lo abrimos cerca del mechero
tomamos un poco de Pseudomonas y le hicimos el cultivo ya hecho cerramos y
esterilizamos el asa cogimos otro agar nutritivo lo abrimos cerca del mechero tomamos
Pseudomonas e hicimos el cultivo ya hecho cerramos y esterilizamos el asa cogimos el
otro agar y le hicimos el mismo procedimiento que los agares anteriores ya hecho todo
el procedimiento con un marcador marcamos todas las placas con sus respetivos cultivos
y temperaturas que vamos obtener los resultados cogimos dos placas marcamos una con
E-coli y otra con Pseudomonas y a 35 grados y la dejamos en la incubadora durante 24
horas las dos siguientes placas las marcamos con E-coli y Pseudomonas y a 25 grados y
la dejamos a temperatura ambiente durante 24 horas y las dos últimas placas las
marcamos con E-coli y Pseudomona y a 4 grados y la dejamos en la nevera durante 24
horas ya hecho todas las marcaciones y dejado todas las placas en sus respectivos lugares
del laboratorio ya es esperar los resultados .
Efectos del oxígeno.
Procedimos a dejar el asa para la esterilización y tomamos las 4 placas cerca del mechero
y el resto de materiales para su respectivo laboratorio para que prevenga la
contaminación. Esterilizamos el asa de siembra cogimos un agar lo abrimos cerca del
mechero tomamos un poco de b. cereus e hicimos su cultivo ya hecho cerramos y
esterilizamos el asa ya esterilizada cogimos el otro agar cerca del mechero lo abrimos y
tomamos un poco de P. Aeruginosa e hicimos su cultivo ya hecho cerramos y
esterilizamos el asa ya esterilizada cogimos otro agar lo abrimos cerca del mechero
tomamos un poco de p. aeruginosa e hicimos el cultivo ya hecho cerramos y
esterilizamos el asa ya hecho todo el procedimiento incubamos todas las placas a 35
grados y esperamos 24 horas los resultados para ver si ocurrieron los crecimientos
respectivos

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Influencia del PH.
Procedimos a coger 4 tubos de ensayo con caldo de BHI teníamos un tubo de control
sin sembrar el siguiente tubo de ensayo #2 le echamos un poquito de ácido sulfúrico
cerramos y batimos abrimos y con una tirilla medidora de la escala de colores vimos lo
resultados con el PH 1-14 Y obtuvimos 2 -3 en la escala de colores en el siguiente tubo
de ensayo #3 le agregamos un poco de alcalino y cerramos y batimos abrimos y con
una tirilla medidora de la escala de colores vimos los resultados con el PH 1-14 y
obtuvimos un resultado de 9-10 en la escala de colores y el tubo de ensayo #4 le
agregamos unas gotas
Cerramos y batimos abrimos y con una tirilla medidora introducimos dentro del tubo
para ver el resultado en el PH 1-14 y obtuvimos un resultado de 7 en la escala de colores
que nos da neutro ya hecho todo el procedimiento en el laboratorio incubamos a 35
grados y lo dejamos 24 horas y vemos los resultados obtenidos

RESULTADOS Y DISCUSIONES.

Cultivos de E-coli y P.aeruginosa. Caldos BHI+ E-coli.

Empaquetado de las respectivas muestras. Muestras pre-cultivadas.

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La práctica respectiva arrojo resultados muy significativos. En ello podemos encontrar como la
bacteria e-coli tuvo su crecimiento normal en condiciones anaerobias y temperatura de 35°
aproximadamente, por lo que es afirmativo al momento de comparar con lo dispuesto en la teoría
acerca de esta bacteria. No obstante cabe destacar que el crecimiento de esta (E-coli) y P.
aeruginosa a temperatura ambiente no fue la mejor, pues las condiciones descritas para este tipo
de microorganismos a estas condiciones son casi nulas para su crecimiento, por lo que sus
resultados fueron mínimos.
Cabe destacar un resultado y fue el de estas mismas bacterias, pero en condiciones de
temperatura alta, es decir, temperatura fría (nevera) y fue que el crecimiento de ella fue nulo,
condición que se apega a la teoría de que estas bacterias reúnen características limitadas lo cual
hacen de su crecimiento algo objetivo, es decir, en condiciones óptimas para su desarrollo.

CONCLUSIONES.

Se pudo concluir, que cada una de las practicas desarrolladas tuvo la finalidad de poner en
practica la teoría descrita en clases y la comparación de los resultados con lo visto. No obstante,
cabe afirmar que algunos resultados no siempre serán certeros, pues entraría en juego el error
humano, que por lo general es frecuente, pero aun así se trata de disminuir para que los
resultados sean los mas correctos.

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CUESTIONARIO.
1. En todos los resultados compare con una caja con agar nutritivo testigo sin sembrar e
indique con una cruz el crecimiento mínimo, con dos el regular y con tres cruces el
máximo.
R/ la E. coli; a temperatura de 4°C: +
A temperatura 25°C: ++
A temperatura 35°C: +++
Para P. aeruginosa a temperatura 4°C: +
A temperatura 25°C: +
A temperatura 35°C: ++

2. Determine la temperatura óptima para cada bacteria, es decir, de la que se observa el


mejor crecimiento. También determine si alguna bacteria produjo pigmento a cierta
temperatura.
R/ para la E. coli y P. aeruginosa la temperatura óptima para sus crecimiento fue a 35°C,
aclarando que en dicha temperatura no es que haya alcanzado el máximo crecimiento si
no que con respecto a las demás temperatura fue la mejor.

3. Compare el crecimiento en los diferentes pH.


R/ Para la E. coli logramos observar que su mayor crecimiento fue a pH neutro (7.0 a
7.5) demostrando asi a estudios pasados, cuando se sometio a pH por debajo de 3,3 su
crecimiento fue nulo. Para el caso de P. aeruginosa el crecimiento óptimo se notó a pH
más o menos 6,5 a otros valores de pH no se mostró un crecimiento óptimo.

BIBLIOGRAFIAS.
 Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos Genera-
les (2da edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela.

 Difco y BBL. 2003. Manual de Medios de Cultivo Microbiológicos.

 Merck. 2002. Microbiology Manual. 12th Edition.

 Ortega, Y; Quevedo F. 1991. Garantía de la Calidad de los Laboratorios de Microbiología


Alimentaria. Organización Panamericana de la Salud. Harla S.A. México D.F.

 Manual de Prácticas. Laboratorio de Microbiología. ACADEMIA DE MICROBIOLOGIA Y


PARASITOLOGIA. DPTO. CIENCIAS QUIMICO BIOLOGICAS. ICB, UACJ. 2012. p 25

 Madigan M, Martinko. J, Parker. J.,Biologia de microorganismos, 10° edición.ISBN 84-205-


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