Oancea Andreea-Florina

Anul II, AMG

POPULAȚII ȘI FENOTIPURI CELULARE ÎN

LEUCEMIA LIMFOCITARĂ
CRONICĂ B

Motivația și obiectivele studiului cercetarii

Leucemia limfocitară cronică cu celule B (LLC-B) constituie una dintre cele

mai frecvente hemopatii maligne ce se întâlnește în special la persoanele în
vârstă. Totuși, apariția sa nu este restricționată la această categorie de vârstă, la
fel cum nu este nici o boală omogenă. Este deosebit de interesant faptul că deși
se cunoaște ca entitate patologică și se studiază de zeci de ani, continuă să fie o
boală incurabilă la pacienții la care se impune intervenția terapeutică. Este într
adevăr poate fără echivalent în domeniul numit oncologie faptul că în timp ce unii
pacienți au evoluție fulminantă a bolii și final imediat, alți pacienți pot supraviețui
ani de zile fără măcar a necesita tratament.
Originea celulei maligne B din această patologie nu a fost identificată.
Studiile care vizeaza stabilirea originii clonei maligne, tintesc, de regula,
raportarea patologiei la condițiile corespondente fiziologice.
Astfel, in timp ce pentru majoritatea hemopatiilor maligne în general și a
limfoproliferărilor cronice cu celule B,în particular,s-a reușit caracterizarea celulei
de origine a clonei, in cazul LLC-B, datorită fenotipului particular al celulei maligne
(un amestec asincron de molecule caracteristice atat celulei B naive, cat
și celulei B de memorie), echivalentul celular normal nu a putut fi identificat. Și
din punct de vedere genetic această boală este unică, deoarece nu există o
singură aberație cariotipică asociată, mai mult, boalapoate debuta cu un cariotpi
normal și poate acumula aberații datorită in stabilității genomice, unele dintre
acestea avand valoare prognostică.
Sistemul imun la pacientii cu această boală se caracterizează prin defecte
funționale Este de asteptat,întrucât limfocitul B este un participant important în
răspunsurile imune adaptative. Din acest motiv, majoritatea pacienților cu LLC B
prezintă hipogamaglobulinemie, iar cei ce nu o au la diagnostic o vor dezvolta pe
parcursul terapiei. Rezultatul combinat va fi un risc crescut pentru infecții,
principala cauză de deces în această boală. Statusul imun devine astfel o
caracteristică cu valoare clinică în alegerea terapiei potrivite și în controlarea
efectelor sale, întrucât majoritatea medicamentelor utilizate au și un efect
imunomodulator (pozitiv sau negativ). Totuși există defecte imune intrinseci bolii și
mai ales stadiilor avansate, dar și induse terapeutic, cu repercursiuni ce se întind
de-a lungul unor perioade mari de timp.
Tocmai această observație a constituit una dintre cele mai intrigante
ipoteze: sistemul imun prin multitudinea de celule și molecule răspunde diferit în
contact cu această boală. Cât de extins este acest răspuns și ce anume îl
suprimă în unele situații nu se cunoaște exact.
Oancea Andreea-Florina
Anul II, AMG

POPULAȚII ȘI FENOTIPURI CELULARE ÎN

LEUCEMIA LIMFOCITARĂ
CRONICĂ B

Concluziile cercetarii:

1.Studiul aberațiilor fenotipice, prin citometrie în flux, folosind panelurile EuroFlow,

permite identificarea populațiilor clonale și realizarea diagnosticului diferențial la pacienții
cu limfoproliferări cronice cu celule B.

2. Frecvența aberațiilor genetice identificate la nivelul clonei limfoide B în lotul nostru de

pacienți este similară frecvențelor globale descrise în literatură. Asociind aceste aberații
comportamentului bolii,am detectat genotipuri normale sau cu modificări unice/simplela
pacienții cu boală indolentă, în timp ce majoritatea pacienților cu boală avansată s-au
caracterizat prin aberații genetice complexe.

3. Limfocitele B normale reziduale se găsesc în numere relative și absolute reduse la

pacienții cu LLC-B ce prezintă boală activă (stadii avansate ce necesită tratament imediat)
comparativ cu indivizi sănătoși din aceeași categorie de vârstă. Această reducere afectează
în special compartimentul celulelor naive.

4. Polarizarea în cadrul compartimentului limfoid B normal la pacienții cu LLC-B este

orientată către memorie (probabil pre-existentă), cu inhibarea posibilă a măduvei
hematogenedatorită infiltrării cu celule patologice.

5. Tratamentul afectează pe termen lung compartimentul limfoid B normal, studiul nostru

relevând că defectele intrinseci bolii sunt augmentate la pacienții cu LLC-B tratați,
indiferent de numărul sau tipul de tratament primit.

6. În studiul nostru s-a elaborat o strategie accesibilă și reproductibilă, ce permite

identificarea prin citometrie în flux multiparametrică a stadiilor maturative și funcționale
limfoide B (imature, naive, , plasmocite) și T (naive, memorie și efector, reglatorii, helper
foliculare, cu profil Th1 sau Th2) la pacienții cu LLC-B. Această strategie poate fi aplicată și
în alte patologii ale sistemului imun (de tipul monitorizării pacienților cu diferite tipuri de
imunodeficiențe).

7. Limfocitele T totale circulante se găsescîn numere absolute semnificativ și progresiv

crescute la pacienții cu LLC-B, creștere datorată augmentării ambelor subseturi majore-T
helper CD4+ și T citotoxic CD8+.
Oancea Andreea-Florina
Anul II, AMG

POPULAȚII ȘI FENOTIPURI CELULARE ÎN

LEUCEMIA LIMFOCITARĂ
CRONICĂ B

8. În compartimentul limfoid T se identifică o expansiune selectivă, asociată agresivității

bolii, a unor stadii ce includ limfocitele de memorie, efector, T reglatorii și T helper
foliculare, dar nu și limfocitele T helper naive.

9. Profilul receptorilor pentru chemokine CXCR3 și CCR4 de pe membrana limfocitelor T

este modificat în corelație cu stadiul bolii, și sugerează polarizarea către un tip de răspuns
Th1.

10. Aceste modificări ale limfocitelor T augmentează progresiv de la staiul Rai0 al bolii
către stadiul Rai3, în timp ce stadiul Rai4 prezintă un profil diferit. Populații și fenotipuri
celulare în LLC-B20

11. În studiul nostru, expansiunea limfocitelor T nu se asociază cu utilizarea preferențială a

unei singure familii TCRVβ, în majoritatea cazurilor identificându-se recombinări
oligoclonale sau policlonale.

12. Studiul nostru demonstrează complexitatea sistemului imun și cons

tituie un exemplu în investigarea complexă, la nivelul diferitelor paliere celulare și

moleculare, normale și patologice, aleunei hemopatii frecvente, relativ bine studiată, dar
incurabilă-leucemia limfocitară cronic
Oancea Andreea-Florina
Anul II, AMG

POPULAȚII ȘI FENOTIPURI CELULARE ÎN

LEUCEMIA LIMFOCITARĂ
CRONICĂ B

Bibliografie

1. Georgiana E. Grigore, IuliuC.Ivanov, Mihaela Zlei, Angela Dascalescu, Roxana

Popescu, Tudor Petreuș, Eugen Carasevici,Specific Associations Between Clinical
Signs, Immune Cells, Disease Genetic Background and Burden in a Group of
Patients with B-Cell Chronic Lymphocytic Leukemia, Romanian Review of Laboratory
Medicine,2014;22(1):79-92 (ISI)
2. van den Beemd R, Boor PP, van Lochem EG, et al. Flow cytometric analysis of
the Vβ repertoire in healthy controls. Cytometry. 2000; 40: 336-45.
3. de Campos-Lima P-O, Levitsky V, Imreh MP, Gavioli R and Masucci MG. Epitope-
dependent selection of highly restricted or diverse T cell receptor repertoires in
response to persistent infection by Epstein-Barr virus. The Journal of Experimental
Medicine. 1997; 186: 83