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Objetivos
Identificar los principales componentes de los cuatro aparatos de uso
común en el laboratorio de BCT I que son: balanza analítica,
potenciómetro,centrífuga yespectrofotómetro.
Explicar el fundamento y el uso que tienen cada uno de los aparatos.
Manejar y cuidar correctamente cada uno de ellos.
Antecedentes académicos
Concepto de masa, peso, sensibilidad, precisión y exactitud.
Definición de pH.
Diferentes tipos de electrodos.
Amortiguador.
Fuerza centrífuga y velocidad angular.
Espectro electromagnético y Espectrofotometría
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Bioquímica Celular y de los Tejidos I
Introducción
Balanza Analítica
La balanza analítica es un instrumento indispensable para cualquier
procedimiento analítico, ya se trate de un método clásico de análisis
estequimétrico o de un método instrumental moderno de naturaleza
estequiométrica. Si la determinación de la masa no es absolutamente
confiable, el resultado analítico final es inaceptable.
La balanza analítica determina la masa de un objeto y el término peso se
utiliza como sinónimo, aunque sea incorrecto. Las balanzas actuales tienen
una pantalla digital, capacidades para restar la tara y rutinas de prueba y
calibración programadas internamente. Algunas balanzas tienen una
capacidad máxima pequeña (de 0.1-1g), mientras que otras balanzas
analíticas electrónicas que utilizan células de carga poseen capacidades de
hasta 200 g y una facilidad de lectura de + 0.10 mg ó + 0.01mg y poseen salida
de datos que permiten incorporarlas a sistemas automatizados. Algunas
balanzas pueden registrar en forma continua variaciones del peso con el
tiempo.
Se emplea principalmente cuando se requieren preparar: soluciones
valoradas, soluciones estándar ó estándar primario, para realizar alguna
valoración, para obtener el peso constante en algunas determinaciones,
como humedad y cenizas, en donde es necesario registrar valores de 0.1 mg.
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Manejo de Aparatos
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Manejo de Aparatos
Los pasos de operación para realizar una pesada en una balanza semianalítica
son similares a los descritos anteriormente, ésta tiene una capacidad de
pesado mayor y la precisión es de 0.001 g. Generalmente se utiliza cuando se
preparan solucionesporcentuales o que no requieran valoración (figura 3).
Potenciómetro
El potenciómetro es un aparato que sirve para determinar el pH de una
sustancia. El pH se define como el -log [H+] y representa la acidez de una
solución.
El potenciómetro es un instrumento que se basa en el principio de balance
nulo, por el cual el potencial que se va a medir es balanceado por un
potencial igual, pero en sentido opuesto. Está constituido por una batería,
una resistencia, un electrodo, un galvanómetro y un voltímetro.
La fuerza electromotriz del electrodo se lee directamente en el voltímetro, en
una escala de pH que va de 1 a 14. Los electrodos indicadores de iones
hidronio son cuatro: electrodo de hidrógeno, el de quinhidrona, el electrodo
de vidrio combinado y electrodos de metal-óxido metálico (antimonio).
La carga del electrodo de hidrógeno puede medirse comparándola con un
electrodo patrón, es decir, encontrando la diferencia del potencial entre
ambos electrodos. Cualquier cambio en la acidez de la disolución hará variar
la diferencia de potencial entre los electrodos.
El electrodo combinado contiene la media celda de pH con una solución
amortiguadora, sellada en el cuerpo del electrodo, así como su media celda
de referencia. El potencial observado será la suma de los potenciales
separados de las medias celdas (de pH y de referencia). Puesto que los
potenciales dentro del electrodo de pH están fijados por la solución de
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Bioquímica Celular y de los Tejidos I
Medición de pH
Sumerja el electrodo en la muestra de la cual se desea conocer el pH (figura
4F). Agite brevemente y registre el pH que se indica en la pantalla (figura 4G).
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Bioquímica Celular y de los Tejidos I
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Manejo de Aparatos
Centrífuga
Las centrífugas clínicas son muy útiles para el trabajo diario en un laboratorio
clínico o bioquímico; con ellas se pueden separar suspensiones o trabajar con
muestras biológicas, pero al requerir una separación más fina, como por
ejemplo de sustancias con peso molecular similar, o de organelos, pueden
utilizarse las ultracentrífugas, que poseen una mayor capacidad de
separación y requieren cuidados especiales.
La centrífuga es un aparato con el cual puede separarse un sólido de un
líquido, gracias a la aplicación de una fuerza centrífuga. Las partículas de
distinta densidad, tamaño o forma sedimentan a diferente velocidad, cuando
se someten a un campo centrífugo, es decir, un campo gravitacional y la
velocidad de sedimentación es directamente proporcional al campo G, que
está dada a su vez por la siguiente ecuación:
4 ( ) ( )
G = wr = =
3600 900
w = velocidad angular rad/seg.
rpm = revoluciones por minuto.
r = distancia radial a partir del eje de rotación hasta la solución.
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Panel de operación.
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