LABORATORIO 2: LEY DE

LAMBERT - BEER

Integrantes: Kiara Osses Reinoso

Francisco Santelices Meneses
Profesor: Eduardo Muñoz
Ayudante: Victor Rojas
Curso: Laboratorio Qui-235
Fecha realización: 9/10/2016
Fecha entrega: 15/10/2016
OBJETIVOS

- Determinar la concentración de una muestra problema.

- Adquirir técnicas de espectrofotometría.
- Construir una gráfica de absorbancia versus concentración con 8 patrones, utilizando ley de
Lambert - Beer.
- Determinar de manera experimental absorbancia del rojo fenol a diferentes concentraciones

OBSERVACIONES

- Se visualiza el incremento de la intensidad de la tonalidad de las soluciones conforme aumenta la

concentración.
- En la comprobación de la ley de Lambert - Beer, de acuerdo con los datos obtenidos, se puede
observar que a mayor concentración de una solución esta presentara mayor absorbancia
- El punto en la longitud de onda en que se logra apreciar la máxima absorción para determinada
sustancia fue de 559,0 nm.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

- Se toma un matraz de aforo de 10 mL y se agrega 8 mL de una solución tampón borato a

pH 9,8 el cual se enrasa con 2 mL de agua destilada. La solución resultante es incolora, la
cual se tomará como solución blanca.
- Se van agregando los mL correspondientes a los demás matraces y los cuales poseen un
volumen de 10 mL cada uno y al agregar una mayor cantidad de rojo fenol, la solución
resultante poseía un violeta más intenso.
-
Reactivo 1 2 3 4 5 6 7 8
Tampón borato, pH 9,8 8 8 8 8 8 8 8 8
Rojo fenol 1*10-4 M - 0,1 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,0
H2O 2 1,9 1,8 1,6 1,4 1,2 1,0 1,0
Tabla 1.

- Al tener las 8 soluciones listas, se vierten en las cubetas de plásticos las cuales son
depositadas en el espectrofotómetro para su análisis.
- Al principio se realiza un barrido con la solución blanca (tubo 1) y la solución del tubo 5, para
realizar una certera muestra de la longitud de onda estándar y saber a que longitud de onda
se tiene que trabajar en el equipo.
- Luego de ello se depositan 7 cubetas de plástico, con las 7 primera soluciones (incluida la
blanca) y se realiza el análisis espectrofotométrico.
- Luego de ello se toma la solución del tubo 8 y se deposita en el lugar del tubo 2, y se configura
el equipo solo para que mida la absorbancia en ese sitio.
- Finalmente se realiza el análisis para la muestra problema y al igual que el paso anterior se
deposita en el lugar número 2.
RESULTADOS

Se utiliza para calcular la concentración con la alícuota de la tabla 1.

Cmp = (Absmp * Cref) / (Absref) (1)

CMP = (0,461 * 6x10-6 ) / 0,408)

CMP = 6,77 x 10-6 M

Número de tubo Concentración (M) Absorbancia

1 0 0
2 1x10-6 0,042
3 2x10-6 0,115
4 4x10-6 0,252
5 6x10-6 0,408
6 8x10-6 0,553
7 1x10-5 0,615
8 1x10-5 0,659
Muestra Problema 6,77 x 10-6 0,461
Tabla 2
Abs V/s Conc
-5
1,1x10

-5
1,0x10

-6
9,0x10

-6
8,0x10

-6
7,0x10

-6
6,0x10
[]

-6
5,0x10

-6
4,0x10

-6
3,0x10

-6
2,0x10

-6
1,0x10 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7
Abs

Grafico 1

DISCUSIONES.

Basados en la ecuación (1) la cual presenta la concentración que se encontraba la muestra

problema, estuvo cercana a la muestra del tubo 5 precisamente que es la que se toma para realizar
la medición de la longitud de onda analítica, que tiene la función de realizar un barrido desde los 380
a 600 cm-1 y que se toma como referencia la 559 cm-1.
Es necesario realizar el barrido del espectro con dos muestras en el espectrofotómetro, la primera
es un blanco, el cual posee la misma matriz de los demás tubos pero no posee la muestra que se
desea analizar, por lo tanto este blanco no debería absorber a la longitud de onda analítica (559 cm-
1
) y el segundo es la muestra 5, debido a que se encuentra en la mitad de las soluciones que se
realizaron y teniendo en cuenta que siempre estará entre el límite de cuantificación y el límite de
detección, para estar dentro de la linealidad de la curva.
Se realiza la curva de calibrado con un set de 7 muestras a distintas concentraciones de Rojo Fenol
y luego se compara con la concentración de la muestra problema calculada en base a su
absorbancia registrada, por ende basándose en la gráfica (1) la cual se representa de manera que
cumple la linealidad se interpola la concentración y absorbancia de la MP y claramente se visualiza
que está entre los puntos de la curva 4 y 5, como se puede observar en este, a medida que aumenta
la concentración, aumenta la absorbancia puesto que son directamente proporcionales; por otra
parte también son proporcionales a la longitud del paso de luz y dependen de una constante
denominada Coeficiente de Extinción Molar (ε), el cual es característica para cada sustancia a una
longitud de onda determinada.
Si bien la ley de Lambert-Beer indica que a una representación gráfica de la absorbancia frente a la
concentración le correspondería una línea recta, esto sólo tiene lugar para disoluciones diluidas, por
ello, no es conveniente utilizar la expresión matemática directamente, sino construir en cada caso la
recta de calibrado que confirme que la ecuación de Lambert-Beer se cumple en el intervalo de
concentraciones en el que se trabaja. Esta recta se construye midiendo la absorbancia de una serie
de disoluciones de concentración perfectamente conocida.

CONCLUSIÓN.

A partir de este laboratorio se logró llevar a la práctica la ley de Lambert Beer, ya que se conoció y
utilizó una técnica de aplicación para lograr determinar la concentración de una muestra de
concentración desconocida a partir de su absorbancia, la longitud de onda y el punto máximo de la
longitud de onda analítica. Por esta razón es importante conocer estas técnicas, leyes y
formulaciones, puesto que si se tienen estas bases para conocer algunas sustancias desconocidas,
se puede determinar concentración, absorbancia, coeficiente de extinción molecular e incluso la
transmitancia de una solución.
Se adquirieron técnicas espectroscópicas para el análisis cuantitativo de sustancias a distintas
concentraciones, la espectrofotometría se utiliza generalmente para medir concentraciones de
sustancias, se puede concluir que la absorbancia de una sustancia puede ser analizada y
comparada para su identificación, además se comprueba la ley de Lambert - Beer, pues las
sustancias presentan un crecimiento directamente proporcional entre la concentración y la
absorbancia, a mayor concentración del soluto en una solución mayor será la cantidad de intensidad
de luz que absorbe la muestra.
La absorción de la luz depende de la estructura química del compuesto absorbente y en especial de
ciertos grupos funcionales, de modo que es posible identificar un compuesto por medio de las
características de un espectro de absorción. Finalmente se comprueba que la concentración de la
muestra problema estaba cercana a la del contenido de la muestra 4.

REFERENCIAS.

- Gilbert w. Castellan pag 144 (1974-1987). Fisicoquímica (2nd edición en español.) versión en
español de María Costa Basin y Carlos Amador Bedolla [En línea] disponible en:
https://books.google.cl

- Química General 7ma edición (2002) Raymond Chang Ed. Mc Graw-Hill Interamericana