UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

E.A.P.: INGENIERIA EN INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS

TEMA:
Calculo Del Crecimiento Microbiano

CURSO:
Bioingeniería

DOCENTE:
Heydi Ocampo Quito

ESTUDIANTES:
Abanto Atalaya Judit
Núñez Mejía Edith
Requejo Ilatoma Rubely
CICLO:
IX

Cajamarca 14/07/16
I. INTRODUCCIÓN.
Las bacterias, al igual que los demás seres vivos requieren de una serie de condiciones o
factores ambientales para el desarrollo celular y conformación de poblaciones y
comunidades. Los factores pueden diferenciarse en abióticos, referidos a aquellos
relacionados con aspectos propios del medio donde se desarrollan, como la temperatura,
el pH, los gases respiratorios (O2 y CO2), las radiaciones (lumínicas, sonoras,
electromagnéticas), la presión (atmosférica, hidrostática, osmótica) y la presencia de
nutrientes y en bióticos, referidos a aquellos relacionados con las interrelaciones que se
dan entre las diversas poblaciones y comunidades. Cuando la bacteria encuentra
condiciones propicias para su desarrollo o se adapta a las nuevas condiciones del medio,
ocurre inicialmente un crecimiento en masa celular y posteriormente, en el número de
células a medida que avanza el tiempo. Estos cambios pueden representarse mediante una
curva, la cual ha sido denominada curva de crecimiento, tal como se presenta a
continuación:

Fase Lag: Las células bacterianas se aclimatan al nuevo ambiente y las características de
estas. En esta fase se da inicialmente un crecimiento en masa celular y luego comienzan
a formarse nuevas células si se encuentran las condiciones apropiadas para ello.
Fase de crecimiento exponencial: La población bacteriana se incrementa
exponencialmente (el mismo número de células por la misma unida de tiempo). Las
células se han adaptado al ambiente.
 Fase estacionaria: La tasa de crecimiento disminuye por la acumulación de desechos
metabólicos y el agotamiento de los nutrientes. La tasa de crecimiento iguala la tasa de
mortalidad.
Fase de muerte: La población bacteriana disminuye por el agotamiento total de
nutrientes, los efectos tóxicos de los desechos metabólicos y las modificaciones
sustanciales en el ambiente.

II. OBJETIVOS.
➢ Analizar las diferentes graficas de crecimiento microbiano de Bacillus subtillis
en glucosa.

III. RESULTADOS Y DISCUSIONES.

Grafico N°01: CURVA DE CRECIMIENTO CELULAR.

CONCENTRACION DE Bacillus subtillis X(/L) Vs

Tiempo.
10
CONCENTRACION DE Bacillus

9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0 2 4 6 8 10
TIEMPO

Como podemos observar en el grafico N° 01 se expresa tres fases del crecimiento de

Bacillus subtillis en relación con el tiempo

La primera es la fase logarítmica es prácticamente cero periodo de inactividad, donde los

microrganismos se están adaptando al medio de sustrato, en esta fase no ocurre
crecimiento inmediatamente, si no después de cierto tiempo lo cual puede ser más larga
o más corta dependiendo de muchos factores como pH, T°, concentraciones de sal, etc.
Este es un tiempo de adaptación de los Bacillus subtillis a un nuevo medio que en este
caso es la glucosa, para lo cual es preciso que se sinteticen enzimas que permitan
metabolizar los compuestos presentes en este nuevo medio de glucosa

Luego que estas bacterias Bacillus subtillis se adaptan al medio empieza la segunda fase
que es la de crecimiento o fase de aceleración (u = u máx), y continua durante la fase de
crecimiento (u<umax) propiamente dicha y durante la fase de deseleracion (u u max)
Esta fase es la consecuencia de la división consecutiva de una célula. La mayoría de los
microorganismos Bacillus subtillis crecen exponencialmente, pero las velocidades de
crecimiento exponencial pueden variar esencialmente. Tal velocidad es influenciada por
las condiciones ambientales (temperatura, composición del medio de cultivo (glucosa)),
así como por las características genéticas.

En cultivos batch el crecimiento exponencial es de duración limitada y, a Cuando un

nutriente esencial del medio de cultivo o el sustrato limitante (glucosa) se ha consumido
en su totalidad por los microorganismo Bacillus subtillis o porque los productos de
desecho que han liberado los Bacillus subtillis durante la fase exponencial hacen que el
medio sea inhóspito para el crecimiento microbiano acá en esta fase el crecimiento
disminuye y las células comienzan su fase de deceleración.

Luego de este periodo de transición, se alcanza la fase estacionaria (u=0) en la que n se

produce crecimiento.

GRAFICO N°02: LOGARITMO NEPERIANO DE LA CONCENTRACION DE

CELULAS VIABLES Y DE CONCENTRACION DE SUSTRATO VERSUS EL
TIEMPO
 LOG.(X,S Vs t)
1.500
1.000
0.500
0.000
Log (X,S)

0 2 4 6 8 10
-0.500
-1.000
-1.500
-2.000
-2.500
-3.000
Tiempo
log(X) log(S)

Como podemos observar en la gráfica N° 02 la representación del logaritmo neperiano

de la concentración de las células viables (Bacillus sillitis) van incrementando el número
de células en un determinado tiempo, es decir es proporcional a este. Luego este
crecimiento pasa a una fase estacionaria durante otro determinado tiempo.

Mientras que la representación del logaritmo neperiano de la concentración del sustrato

al inicio muestra una fase estacionaria en un determinado tiempo; y luego se da una fase
desacelerada.

GRÁFICO N°03: EFECTOS DE LA CONCENTRACION DE BIOMASA Y DE

SUTRATO VERSUS EL TIEMPO.

X,S Vs t
25
Concentracion de X,S

20
15
10
5
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Tiempo

X(/L) S(g/L)

En el gráfico N° 03 podemos observar que representa la variación de la biomasa (o

número de células Bacillus) del cultivo (glucosa) a lo largo del tiempo. En este cultivo,
se va consumiendo un substrato cuya concentración decrece de forma proporcional al
crecimiento de la biomasa. El sustrato (glucosa) va disminuyendo, por lo que se puede
decir que la velocidad específica de consumo de oxigeno también disminuye
variablemente hasta que se hace nulo en la fase estacionaria. Esto sucede porque el
sustrato limitante (glucosa) es la fuente de carbono, ya que al agotarse ésta, los
microorganismos quedan sin combustible y por lo tanto el consumo de oxígeno cesa.
Según la literatura encontrada, no ocurre lo mismo cuando el sustrato limitante es el
nitrógeno por lo éste al agotarse se detiene el crecimiento, pero no impide que los
microorganismos sigan respirando ya que cuentan con combustible en exceso.

Monod ha propuesto una relación muy simple entre el valor de u y la concentración de

sustrato limitante, S, entendiéndose por éste al componente del medio de cultivo que esté
en menor proporción respecto de las necesidades del microorganismo. Por tanto S puede
ser la fuente de N, de C, algún aminoácido, etc. La ecuación es:

𝑢 = (𝑢 𝑚𝑎𝑥 ∗ 𝑆)/(𝐾𝑠 + 𝑆)

Donde:

S = concentración de sustrato limitante de crecimiento.

umax = velocidad especifica máxima de crecimiento.

Ks = constante de sustrato.

Luego: para encontrar los valores de umax y Ks, es necesario una linealización de la
ecuación de Monod con el fin de obtener una línea recta; lo cual se logra invirtiendo la
ecuación:

1 𝐾𝑠 𝑆
= +
𝑢 𝑢𝑚𝑎𝑥 ∗ 𝑆 𝑢𝑚𝑎𝑥 ∗ 𝑆
1 𝐾𝑠 ∗ 1 1
= +
𝑢 𝑢𝑚𝑎𝑥 ∗ 𝑆 𝑢𝑚𝑎𝑥

𝑌 = 𝑎𝑋 + 𝑏

GRÁFICO N°04: RELACIÓN DE LAS INVERSAS DE LA VELOCIDAD

ESPECÍFICA Y DEL SUSTRATO.
 1/u Vs 1/S
60.0000
Y = 0.0954x + 1.4706
50.0000 R² = 0.9936
40.0000
1/u

30.0000

20.0000

10.0000

0.0000
0.0000 100.0000 200.0000 300.0000 400.0000 500.0000 600.0000
1/S

Por último, si relacionar la velocidad de crecimiento (μ) con la concentración de substrato

(S). En condiciones de substrato abundante, la concentración de este no afecta al valor de
μ; pero cuando el substrato se hace limitante, sí existe ese efecto. La expresión matemática
que relaciona ambos parámetros se conoce con el nombre de ecuación de Monod y es la
siguiente: En esta ecuación la tasa de crecimiento (μ) depende de la máxima que puede
alcanzar el microorganismo (μmax), de la concentración de substrato (S) y de un valor
constante, Ks, que representa la concentración de substrato a la que se alcanza una tasa
de crecimiento igual a la mitad de la máxima. Para que se cumpla esta ecuación el
rendimiento debe ser independiente de la concentración de substrato. En la práctica, los
valores de Ks suelen ser muy bajos, lo que indica que los microorganismos crecen con
tasas (μ) muy próximas a las máximas (μmax) a concentraciones de substrato bajas y sólo
cuando estas son extremadamente bajas, la velocidad de crecimiento se reduce. Esto es
debido a que los sistemas de transporte de nutrientes suelen tener valores de Km
considerablemente reducidos (La Km indica la concentración de substrato a la que la
velocidad de transporte es la mitad de la máxima).

Como podemos observar en la gráfica N°04 mediante la aplicación de la curva de

tendencia se obtiene la ecuación Y = 0.0954x + 1.4706 la cual va a ser comparada con la
ecuación lineal de la bibliografía para poder obtener la velocidad máxima de crecimiento
celular y la constante de sustrato Ks.

Y = 0.0954x + 1.4706

Esta ecuación se compara con la ecuación linealizada: así se tiene:

A = 0.0954x = Ks/umax
B = 1.4706 = 1/umax

Entonces: umax = 1/1.4706

umax = 0.6800 t-1

Para Ks= 0.0954 x 0.6800 = 0.0649 g/L

Si la constante de sustrato (Ks) es igual a la concentración del sustrato(S), entonces la

velocidad especifica de crecimiento es:

u = umax/2

Entonces u= 0.6800/2 = 0.3400 t-1

De los resultados obtenidos se puede decir que ha una concentración de 0.0649 g/L de
glucosa se obtiene un crecimiento máximo de microorganismo de 0.6800 t-1 nos da la
velocidad de crecimiento especifico.

GRÁFICO N°05: CINÉTICA DEL CONSUMO DE SUSTRATO.

rs/X Vs u
2.5000

2.0000

1.5000
rs/X

1.0000

0.5000

0.0000
0.0000 0.1000 0.2000 0.3000 0.4000 0.5000 0.6000 0.7000 0.8000 0.9000

En el grafico N° 05 se muestra la relación la velocidad volumétrica del sustrato en relación

con la concentración de materia biomasa versus la velocidad específica en el crecimiento
microbiano. La tasa específica de consumo de substrato la podemos considerar la
 “velocidad” con la que el organismo consume el substrato. Evidentemente, cuanto mayor
sea la tasa de consumo mayor será la tasa de crecimiento; cuando la concentración de la
materia celular aumenta su volumen es porque han alcanzado su máximo crecimiento en
un tiempo determinado, y las bacterias que no logran esto empiezan a morir por la
disminución de sustrato limitante ya que este sustrato las bacterias lo van a utilizar como
fuente de alimento o también como fuente de energía para que puedan sobrevivir.

RENDIMIENTOS OBSERVADOS.
El rendimiento se define como la relación entre el producto obtenido (biomasa) y el
sustrato consumido por tanto Cuanto mayor sea el rendimiento del substrato consumido,
también mayor será la tasa de crecimiento. Sin embargo, hay una cierta compensación
entre la tasa de consumo del substrato y el rendimiento de forma que los microorganismos
que tienen altas tasas de consumo de substrato tienen rendimiento más bajo (o cuando se
dan las condiciones para una alta tasa, el rendimiento disminuye).

IV. CONCLUSIONES.

➢ En un medio de cultivo de batch cuando se hace de manera discontinua se

producen dos máximos. El primer máximo permite alcanzar un elevado
crecimiento y consumo de sustrato, pero la producción de producto es baja o nula.
En el segundo máximo el crecimiento es menor y la velocidad de consumo del
sustrato es elevada, así como la producción de producto.

➢ El crecimiento bacteriano puede tomarse como el crecimiento de población de

muchos millones de células, cuyas características son esencialmente estadísticas
y el comportamiento de una célula individual es tomado como una frecuencia.
➢ A mayor sustrato consumido mayor va a ser el crecimiento de biomasa, se va
consumiendo un substrato cuya concentración decrece de forma proporcional al
crecimiento de la biomasa.
 TABLA N°01: CÁLCULO DE LOS PARÁMETROS CINÉTICOS CORRESPONDIENTES

VELOCIDAD CONS UMO

VELOCIDAD INVERS A DE
VOLUMETRI VELOCIDAD LOG. DE INVERS A DE DE
CONCENTR VOLUMETRI LOG. DE RENDIMIEN VELOCIDAD
CONCENTR CA DEL ES PECIFICA COMNCENT CONS ENTR S US TRATO
ACION DE CA DE CONCENTR TO DEL ES PECIFICA
ACION DE CRECIMIEN DE RACION DE ACION DE ENTRE
TIEMPO (h) Bacillus CONS UMO ACION DE CRECIMIEN DE
S US TRATO TO CRECIMIEN Bacillus S US TRATO CONCETRA
subtillis DE S US TRATO TO CELULAR CRECIMIEN
MICROBIAN TO subtillis LIMITANTE CION DE
S US TRATO TO
O Bacillus
X(/L) S(g/L) rx=dX/dt rs=-dS/dt u=rx/X log(X) log(S) Yx/s=-dX/dS 1/u 1/S rs/x
0 0.02 20 - - - -1.6990 1.3010 - - - -
0.5 0.02 20 0.0000 0.0000 0.0000 -1.6990 1.3010 - 0.0500 0.0000
1 0.023 20 0.0060 0.0000 0.2609 -1.6383 1.3010 - 3.8333 0.0500 0.0000
1.5 0.028 19.98 0.0100 0.0400 0.3571 -1.5528 1.3006 0.2500 2.8000 0.0501 1.4286
2 0.034 19.96 0.0120 0.0400 0.3529 -1.4685 1.3002 0.3000 2.8333 0.0501 1.1765
2.5 0.047 19.94 0.0260 0.0400 0.5532 -1.3279 1.2997 0.6500 1.8077 0.0502 0.8511
3 0.078 19.87 0.0620 0.1400 0.7949 -1.1079 1.2982 0.4429 1.2581 0.0503 1.7949
3.5 0.13 19.74 0.1040 0.2600 0.8000 -0.8861 1.2953 0.4000 1.2500 0.0507 2.0000
4 0.221 19.6 0.1820 0.2800 0.8235 -0.6556 1.2923 0.6500 1.2143 0.0510 1.2670
4.5 0.372 19.2 0.3020 0.8000 0.8118 -0.4295 1.2833 0.3775 1.2318 0.0521 2.1505
5 0.633 18.64 0.5220 1.1200 0.8246 -0.1986 1.2704 0.4661 1.2126 0.0536 1.7694
5.5 1.07 17.67 0.8740 1.9400 0.8168 0.0294 1.2472 0.4505 1.2243 0.0566 1.8131
6 1.791 16.3 1.4420 2.7400 0.8051 0.2531 1.2122 0.5263 1.2420 0.0613 1.5299
6.5 3.01 13.33 2.4380 5.9400 0.8100 0.4786 1.1248 0.4104 1.2346 0.0750 1.9734
7 4.889 8.89 3.7580 8.8800 0.7687 0.6892 0.9489 0.4232 1.3010 0.1125 1.8163
7.5 8.01 0.09 6.2420 17.6000 0.7793 0.9036 -1.0458 0.3547 1.2832 11.1111 2.1973
8 8.7 0.014 1.3800 0.1520 0.1586 0.9395 -1.8539 9.0789 6.3043 71.4286 0.0175
8.5 8.88 0.004 0.3600 0.0200 0.0405 0.9484 -2.3979 18.0000 24.6667 250.0000 0.0023
9 8.97 0.002 0.1800 0.0040 0.0201 0.9528 -2.6990 45.0000 49.8333 500.0000 0.0004