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FACULTAD DE AGRONOMÍA
Acetosyringone (4-acetyl-
2,6-dimethoxyphenol) is
produced by N. tabacum
upon wounding, and
induces transfer of T-DNA
from Agrobacterium.
Ciclo de la enfermedad “Agalla de la corona” causada por
Agrobacterium tumefasciens
Disease tumor crown gall formed on different crops stem infected with
Agrobacterium tumefaciens.
The two major opines, octopine and nopaline, are found only
in crown gall tumors.
T-DNA has almost identical repeats of 25 bp at each end in the Ti plasmid. The right repeat is necessary for transfer
and integration to a plant genome. T-DNA that is integrated in a plant genome has a precise junction that retains 1–2
bp of the right repeat, but the left junction varies and may be up to 100 bp short of the left repeat.
T-DNA is generated like a rolling circle
T-DNA is generated by
displacement when DNA
synthesis starts at a nick
made at the right repeat.
The reaction is
terminated by a nick at
the left repeat.
T – DNA (DNA transferido)
gene 5
LB gene 7 iaaH iaaM ipt ons tml ocs RB
A .tumefac
Scientists can replace iensgenes
these pT iA 6by
T -D N A genes and use
other
Agrobacterium to introduce 1317them
8 bp into transgenic plants.
iaaM=Tryptofano 2-
iaaH=Indol-3-acetamida
Monoxigenasa
hidrolasa
ipt = Isopenteniltransferasa
Isopenteniladenosina 5'-fosfato,
precursor de las citoquininas:
transzeatina y transribosilzeatina
Genes Vir
virA; transporta Acetocyringona (flavonoide) en la bacteria y activa la
expresión de virG.
virG; promueve la trascripción de otros genes vir (factor de transcripción).
virD2; endonucleasa/integrasa, corta el T-DNA y se une en el extremo 5‘ de
la cadena sencilla.
virE2; se une a la cadena sencilla del T-DNA y puede formar canales a través
de la membrana celular.
virE1; chaperona para virE2.
virD2 y virE2; poseen un dominio de NLS y lleva el T-DNA al núcleo de la
célula hospedera.
virB; lleva el T-DNA a través de la membrana bacterial.
Mecanismos moleculares de Agrobacterium t.
Plant proteins and subcellular structures important for Agrobacterium-mediated
transformation
Métodos Directos
Electric field distribution (E) inside an electroporator, showing the charge difference and the dipolar moments (μ)
for a cell exposed to (a) a low frequency (lf) and (b) a high frequency (hf) electric field.
Comparison of the most popular methods for genetic transformation of plants.
Los 1,7 millones de hectáreas de 1996 se han multiplicado por 94, hasta alcanzar
los 160 millones en 2011, dato que convierte a los cultivos transgénicos en la
tecnología que más rápida aceptación ha encontrado en la historia de la
agricultura moderna.
Área global con cultivos transgénicos, por cultivo (sobre 160 millones de hectáreas).También se sembraron pequeñas áreas
de remolacha azucarera y alfalfa tolerantes a herbicidas, papaya y zapallo italiano resistentes a virus, álamo resistente a
insectos y papa sin amilosa para uso industrial. Fuente ISAAA 2011.
Distribución por característica (ISAAA, 2011).
Ejemplos de cultivos transgénicos resistentes a insectos disponibles comercialmente caso del maíz y el algodón:
A) larva de gusano dañando una mazorca de maíz;
B) comparación de maíz Bt (arriba) y maíz convencional (abajo) luego del ataque de insectos;
C) comparación de la contaminación con micotoxinas entre maíz Bt (izquierda) y maíz no Bt (derecha);
D) larva de gusano dañando una planta de algodón;
E) vista aérea de un campo de algodón dañado por insectos (derecha) y algodón transgénico resistente al ataque de esos insectos
(izquierda)
Ejemplos de cultivos transgénicos tolerantes a herbicidas disponibles comercialmente en la actualidad son: A) soja;
B) maíz;
C) algodón;
D) canola;
E) remolacha azucarera.