PRACTICA DE BIOQUIMCA # 4

“DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS”

I. INTRODUCCIÓN

Los carbohidratos son compuestos orgánicos, formados

principalmente de carbono, hidrogeno y oxígeno. Se encuentran en muchos
productos naturales fundamental de los carbohidratos son los
monosacáridos estos son polihidroxialdehidos o polihidroxicetona.

los monosacáridos se y son una de las fuentes principales de energía para los
organismos quimio tróficos.

La unidad

Combinan con la perdida de molécula

de agua uniéndose mediante enlaces glicosidicos, formándose oligosacaridos
y
polisacáridos.

Para reconocer si un compuesto pertenece a la familia de los carbohidratos,

es necesario
diferenciar si se trata de un monosacáridos tipo aldosa o cetosa, si es
fácilmente
oxidable o no, es decir si es un AZÚCAR REDUCTOR o no lo es, si es de cinco
átomos de carbono (pentosa) o de seis átomos de carbono (hexosa), si es
disacárido o polisacárido.

Ensayo de Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general

de carbohidratos en el que los
polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado
hasta
monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil
furfural los cuales reaccionan con α-naftol formando un color púrpura
violeta.

Ensayo de Benedict: El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de

 carbohidratos reductores, al
igual que el reactivo de Felhing, el de Benedict contiene ion cúprico en
medio
alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el
hidroxilo hemiacetálico libre.

Ensayo de Barfoed: Esta prueba permite diferenciar entre monosacáridos y

disacáridos reductores,
también contiene ion cúprico que se reduce hasta óxido cuproso más
rápidamente
con los monosacáridos que con los disacáridos.

Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y
yoduro, permite reconocer
polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración
azúlvioleta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de
coloración
roja.

Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo es específico para cetosas y se basa en

la conversión de la cetosa
en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol
formando así complejos coloreados.

Ensayo de Bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el

cual forma complejos
de coloración sólo con las pentosas.

Los carbohidratos constituyen la mayor parte de los componentes vegetales.

Son carbohidratos los diferentes azúcares, almidones, celulosa, hemicelulosas,
pectinas y numerosas gomas. Los azúcares como la glucosa, fructosa y sacarosa
se acumulan especialmente en el jugo celular; los almidones son los
carbohidratos de reserva y se encuentran en forma de plastidios; la
hemicelulosa y pectinas son los polisacáridos que conforman el material
estructural y las gomas son productos de desecho. Dada la importancia de
estos compuestos se han desarrollado varios métodos para su determinación:
Fehling, Benedict, Somogy, Lane-Enyon, Hagerdorn-Hensen, etc., pero todos
ellos se basan en el mismo principio: Todos los azúcares con un grupo aldehído
libre o un grupo cetónico se clasifican como azúcares reductores y se
transforman fácilmente en enedioles (reductonas) al calentarlos en soluciones
alcalinas; dichos enedioles son altamente reactivos y se oxidan fácilmente en
presencia de oxígeno

II. MATERIALES REACTIVOS

Galleta (muestra) 5g
Agua destilada
Vasos de precipitación
Ferrocianuro de potasio al 5 %
Fiolas
Ácido clorhídrico (HCl)
Luna de reloj
Acetato de plomo al 30%
Balanza analítica
Sulfato de sodio( Na2SO4 )
Papel filtro
Hidróxido de sodio al 40%
Embudo
Fehlig A 5 ml sulfato cúprico
Pipetas y peras
Fehling B 5ml tartrato sodio.
Agitador
Potasio alcalizado con hidróxido
Probeta
de sodio.
Baño maría
Bureta
Pinzas
Soporte universal
Matraz Erlenmeyer
III. PROCEDIMIENTO
1. En una luna de reloj pesamos 5g de galleta y lo llevamos al horno a 130°

por 30 min.

2. En una fiola se coloca la muestra (galleta) + ácido clorhídrico (HCl) 5ml +

80 ml de agua destilada; luego se coloca en baño maría por 2 horas a

temperatura de 60°C.

3. Esperadas las dos horas enfriamos y neutralizamos con 5ml de hidróxido

de sodio al 40% preparado con 40g de NaOH + 1L de agua destilada.

4. Filtramos y lo llevamos a la bureta

5. Llevamos
IV. RESULTADOS
Los resultados de la práctica se determinaron mediante cálculos

1. Gasto del filtro 0,05g de glucosa

100 ml de filtrado X

X= gramos de glucosa

55 ml 0,05g de glucosa

100 ml de filtrado X

X= 0,09 g de glucosa

2. 5 g de muestra g de glucosa
100de muestra Y

Y = % de glucosa

5 g de muestra 0.09

100 g de muestra Y

Y = 1.8 g de glucosa

 % de carbohidratos = g de glucosa x 0.09

% de carbohidratos = 1.8 x 0.09

% de carbohidratos = 0.162
 3. El resultado de pH de la muestra (galleta) es de 2 solución acida.
4. El resultado de pH de la muestra + NaOH (hidróxido de sodio) es de 13
solución básica.
5. El gasto de la titulación es 55 ml.
6. El resultado de la titulación ósea el color del licor de fehling A y B + 40 ml
de agua destilada + 5 ml de ferrocianuro de potasio influyo mucho por el pH
ya que la solución fue básica y nosotros necesitábamos pH 7 solución neutra

V. DISCUSIÓN
VI. CONCLUSIONES
VII. REFERENCIAS LINKOGRAFICAS

https://youtu.be/czw8QQQsZGU

https://youtu.be/czw8QQQsZGU

VIII. ANEXOS