APORTACIONES AL MICROSCOPIO

El microscopio se invento, hacia 1610, por Galileo, según los italianos, o por Jansen,
en opinión de los holandeses. La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los
componentes de la "Accademia dei Lincei" una sociedad científica a la que pertenecía Galileo
y que publicaron un trabajo sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja.

Sin embargo las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopia

aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi prueba la teoría de Harvey sobre la circulación
sanguínea al observar al microscopio los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra
Micrographia.

A mediados del siglo XVII un comerciante holandés, Leenwenhoek, utilizando

microscopios simples de fabricación propia describió por primera vez protozoos, bacterias,
espermatozoides y glóbulos rojos.

Durante el siglo XVIII el microscopio sufrió diversos adelantos mecánicos que aumentaron su
estabilidad y su facilidad de uso aunque no se desarrollaron mejoras ópticas. Las mejoras mas
importantes de la óptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teoría del microscopio y por
encargo de Carl Zeiss mejora la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de
cedro lo que permite obtener aumentos de 2000A principios de los años 30 se habia alcanzado
el limite teórico para los microscopios ópticos no consiguiendo estos, aumentos superiores a 500X
o 1000X sin embargo existia un deseo científico de observar los detalles de estructuras celulares (
núcleo, mitochondria... etc.).

El microscopio electrónico de transmisión (T.E.M.) fué el primer tipo de microscopio

electrónico desarrollado este utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra
consiguiendo aumentos de 100.000 X. Fue desarrollada por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania
en 1931. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrónico de barrido (SEM).

Partes y funciones del microscopio.

Revólver.1 * Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen
formada en los objetivos.

2 * Objetivo: lente situada cerca del revólver. Amplía la imagen, es un elemento vital que permite
ver a través de los oculares

3 * Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.

4 * Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.

5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

6 * Tubo: es una cámara oscura unida al brazo mediante una cremallera.

7 * Revólver: Es un sistema que agarra los objetivos, y que rota para utilizar un objetivo u otro.

8 * Tornillos macro y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y
hacia abajo. El macrométrico lo hace de forma rápida y el micrométrico de forma lenta. Llevan
incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura.

9 * Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la
preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada
por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de
cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la preparación de delante
hacia atrás o de izquierda a derecha y viceversa.

10 * Base: Es la parte inferior del microscopio que permite el sostén del mismo.

* FUENTE DE ILUMINACIÓN: Se trata de una lámpara halógena de intensidad graduable. Esta

situada en el pie del microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie
externa puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualización.

* CONDENSADOR Y DIAFRAGMA: El condensador es un sistema de lentes situadas bajo la platina

su función es la de concentrar la luz generada por la fuente de iluminación hacia la preparación.
En el interior del condensador existe un diafragma (iris) cuya función es limitar el haz de rayos que
atraviesa el OBJETIVOS: sistema de lentes eliminando los rayos demasiado desviados (regula la
cantidad de luz y ajusta la Apertura Numérica).

* OCULARES: Están colocados en la parte superior del tubo. Se denominan así, porque están muy
cercanos al ojo. Su función es la de captar y ampliar la imagen formada en en los objetivos. En
los modernos microscopios hay dos oculares (microscopios binoculares) que están unidos
mediante un mecanismo que permite ajustar la distancia interpupilar. En general los mas
utilizados son los de 10X ( producen un aumento de 10 veces ).

* Están colocados en la parte inferior del tubo insertados en una pieza metálica, denominada
revolver, que permite cambiarlos fácilmente. Generan una imagen real, invertida y aumentada.
Los mas frecuentes son los de 4, 10, 40, y 100 aumentos. Este último se llama de inmersión ya que
para su utilización se necesita utilizar aceite de cedro sobre la preparación. En la superficie de
cada objetivo se indican sus características principales, aumento, apertura numérica, y llevan
dibujado un anillo coloreado que indica el número de aumentos (rojo 4X, amarillo 10X, azul 40X y
blanco 100X).

Cuidados: El microscopio como cualquier instrumento de laboratorio tiene cuidados de suma

importancia uno de ellos es que se le debe dar mantenimiento se deben limpiar los oculares,
mantenerse a una temperatura normal , en un lugar fijo y moverse de la forma correcta la mano
derecha izquierda bajo el pie del microscopio y la mano derecha debe tomar el brazo del
microscopio .

TIPOS DE OBJETIVOS

• Objetivos acromáticos: Presentan corrección cromática para la luz azul y roja. Corrección de
esfericidad para el verde. Dan mejores resultados con filtro de luz de color verde y son ideales
para microfotografía blanco y negro. Se asume que un objetivo es acromático cuando no posee
ninguna denominación.

• Objetivos semi-apocromáticos: Elaborados a partir de cristales de fluorita. Corrigen para el azul,

el rojo y en cierto grado para el verde. La corrección de esfericidad es para dos colores, el verde
y el azul. Dan buenos resultados con luz blanca y están mejor diseñados para la microfotografía
en colores.

• Objetivos apocromáticos: Poseen el más alto nivel de corrección de aberraciones y por ello,
son más costosos. Presentan corrección cromática para cuatro colores (azul oscuro, azul, rojo y
verde); corrección de esfericidad para dos o tres colores. Son los mejores objetivos para
microfotografía y video a color. Debido a su alto grado de corrección, estos objetivos poseen
mayores aperturas numéricas que los acromáticos y las fluoritas. Esto puede ser un inconveniente
puesto que el campo de observación se presenta un poco curvo.

Los tres tipos de objetivos proyectan imágenes con cierta distorsión que se manifiesta como
curvaturas y al ser corregidos para este defecto se denominan plan-acromáticos, plan-fluoritas o
plan-apocromáticos.

Objetivos secos y objetivos de inmersión:

Estos objetivos difieren entre sí por la naturaleza del medio interpuesto entre el cubre-objeto de la
lámina histológica y la lente frontal del objetivo. En los objetivos secos el medio interpuesto es el
aire cuyo índice de refracción (n=1) es muy diferente del índice del vidrio porta y cubre-objeto
(n=1,5). Por el contrario, en los objetivos denominados de inmersión el medio que separa al
cubre-objeto de la lente frontal del objetivo es un líquido cuyo índice de refracción es lo más
próximo al del vidrio. Este líquido puede ser agua destilada (n=1,33) o mejor aún aceite de cedro,
que posee un índice de refracción (n=1,515) casi idéntico al del vidrio.

La ventaja de los objetivos de inmersión consiste en la disminución o eliminación de la refracción

de los rayos luminosos entre el aire y el objetivo, en consecuencia la luminosidad de la imagen
está aumentada, mientras que en los objetivos secos, está disminuida. El empleo de la inmersión
aumenta el ángulo de apertura del objetivo y permite mayor resolución gracias a la captura de
una mayor cantidad de rayos luminosos refractados y solo puede utilizarse con objetivos de
mayor aumento.

Óptica finita y óptica infinita:

La microscopia de luz o fotónica ha experimentado cambios radicales en sus sistemas ópticos en

los últimos años. El tubo que soporta tanto el revólver por un extremo, como el ocular por el otro,
se confeccionaba con una determinada longitud y los fabricantes elaboraban objetivos que
funcionaban para esa longitud (longitud finita) que fue estandarizada a 160mm y en algunos
casos (Leitz) a 170mm. En muchos modelos de microscopios modernos el tubo no es rectilíneo y
los rayos de luz transmitidos desde el objetivo hacia el ocular son desviados por prismas,
especialmente en los microscopios trinoculares para fotografía. Emplear objetivos diseñados para
una determinada longitud de tubo en otro microscopio que no corresponda produce
incremento en las aberraciones de esfericidad, ocasionado por una longitud de tubo diferente.

HISTORIA DE LA TEORIA CELULAR

Los conceptos de materia viva y célula están estrechamente ligados a la biologia. La materia
viva se distingue de la no viva por su capacidad para metabolizar y autoperpetuarse, además
de contar con las estructuras que hacen posible la ocurrencia de estas dos funciones; si la
materia metaboliza y se autoperpetúa por sí misma, se dice que está viva. Varios científicos
postularon numerosos principios para darle una estructura adecuada:

Robert Hooke, observó una muestra de corcho bajo el microscopio, Hooke no vio células tal y
como las conocemos actualmente, él observó que el corcho estaba formado por una serie de
celdillas de color transparente, ordenadas de manera semejante a las celdas de una colmena;
para referirse a cada una de estas celdas, él utiliza la palabra célula.

Anton Van Leeuwenhoek, usando unos microscopios simples, realizó observaciones sentando las
bases de la morfología microscópica. Fue el primero en realizar importantes descubrimientos con
microscopios fabricados por sí mismo. Desde 1674 hasta su muerte realizó numerosos
descubrimientos. Introdujo mejoras en la fabricación de microscopios y fue el precursor de la
biología experimental, la biología celular y la microbiología.

TETETETE