Tatiana nieto

Cód.:
09172032
bacteriología
BUENAS PRACTICAS
DE
LABORATORIO!
!
 Un conjunto de reglas, de procedimientos
operacionales y prácticas establecidas y
promulgadas por determinados organismos
como la (Organization for Economic Cooperation
an d
Development (OCDE), Food and
Drug
Administration (FDA),etc.), que se consideran de
obligado cumplimiento para asegurar la calidad
e integridad de los datos producidos en
determinados tipos de investigaciones o
estudios
 Verificar correcto lavado de material :

1. Verificación pH (azul de bromotimol 0.04%)

2. Verificación de presencia de residuos
inhibitorios remanentes del detergente.

 Garantizar el control de calidad del agua

de preparación:

1. Control de calidad microbiológico: recuentos <10 3

UFC/mL.
2. Control de parámetro de conductividad: <25µS/cm.
 Rehidratación y disolución:

1. Medios de cultivo comerciales: de acuerdo a

las indicaciones del fabricante.

2. Medios por composición: seguir las indicaciones de

la formulación.

 Medición y ajuste de pH: Antes y/o

después de esterilización NaOH 40g/L,
HCl
36.5g/L.
 Esterilización: Destrucción o
eliminación completa de toda forma de vida
microbiana.

1. Por calor humedo : autoclave 121 + 3ºC, 15 lb,

15 minutos.

2. Por filtración: bajo vacío o condiciones de

presurización, use membranas de 0.2 µm previamente
desecadas .

 Adición de Suplementos lábiles:

El medio debe estar a 47-50ºC, y el aditivo
deberá estar a temperatura ambiente.
 Dispensar el medio de cultivo:
Volumen dispensado/caja: 20-25mL
(3mm) Volumen dispensado/Tubo: 9mL u
otros.

 Control de esterilidad: Incubación

 Rotulado y almacenamiento:
Agar en cajas de petri: refrigrerar maximo por dos
semanas
Medios líquidos: monitorear pérdida de volumen/ máximo
3 meses.
NOMBRE MEDIO CULTIVO
FECHA DE
PREPARACIÓN NUMERO
DE LOTE
 TODOS LOS PARÁMETROS
EVALUADOS
DEBEN REGISTRARSE EN LOS
FORMATOS DESTINADOS PARA
TAL
FIN
.

LOQUE NO SE
ESCRIBE NO
EXISTE!
CONTROL DE CALIDAD
Técnicas y actividades
que se usan para
satisfacer los requisitos
de calidad

CONTROL DE
CALIDAD DE
MEDIOS DE
CULTIVO
Abarca los procedimientos
desarrollados antes, durante
 y
despues de la preparación de
medios de cultivo microbiológicos
con miras a satisfacer y garantizar el
cumplimiento de los requerimientos
de calidad
 CONTROL DE ESTERILIZACIÓN.

 CONTROL DE DETECTORES CON

MICROORGANISMOS DE PRUEBA:
 CARACTERÍSTICAS DE LOS MICROORGANIMOS
SELECCIONADOS PARA CONTROL DE MEDIOS:

MO QUE DEBEN SELECCIONARSE PARA PRUEBAS DE

CALIDAD DE DETECTORES
Cepa de crecimiento robusto (positivo) con características
típicas
Cepa débilmente positiva (de naturaleza mas
sensible) Cepas que exhiban características
negativas
Cepas con crecimiento parcial o completamente inhibido
 CEPA DE
MEDIO
MEDI EVALUACIÓN FUNCIO DE CONTROL
O N REFEREN
No CI
Deseada A
deseada
E. Coli
Agar Chromocult E. faecalis N.A
C. freudii
Produc semicu
tivid anti
ad tativo

Baird- S. aureus Productivi Cuantitat

Parker ATCC dad i vo
(coagulasa 6538/2592
+) 3 TSA
Productivi
BHI S. aureus ATCC 25923 dad
N.A Cualitativo
LOS MEDIOS DE CULTIVO DEBEN
SER
EVALUADOS EN DOS NIVELES:

 CALIDAD DE LOS NUTRIENTES

 SU CAPACIDAD SELECTIVA
 CUANTITATIVO: calculo de un índice a
partir de estimaciones objetivas del crecimiento
bacteriano
(recuentos). Siempre debe contarse con un medio de
referencia

 CUALITATIVO: evaluación de los atributos del medio

en prueba, por valoración subjetiva del crecimiento
bacteriano (bueno, malo, regular).

 SEMICUANTITATIVO BASADO EN
ECOMETRICO: determinación de un índice a
partir de estimaciones subjetivas del crecimiento
bacteriano (valoración del crecimiento).
 PRODUCTIVIDAD: usado para demostrar
la capacidad del medio para promover el
crecimiento de un MO. Si se trata de
métodos cuantitativos, calcular:

PR : Ns/No Ns=conteo total de colonias obtenido

en el medio de cultivo test (de una o

más placas)
No: conteo total de colonias obtenido
en el medio de cultivo de referencia. Debe
ser

ACEPTABLE PR>0.7 <100UFC/mL

 SELECTIVIDAD: cuando es
necesario
demostrar que un medio suprime
el crecimiento de uno y favorece el
de otro.
SF=DO-
DF

DO= dilución mas alta a la que crecen al

menos 10 UFC en el medio de referencia

DF= dilucion mas alta a la que crecen en

0= Corresponde a
ausencia de
crecimiento
1= Corresponde a
crecimiento débil
2= Corresponde a buen
crecimiento.

MO DESEADO:2/INDESEADO:<2