FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA

Escuela Académico Profesional de Ingeniería Química

Universidad Nacional de Trujillo

Laboratorio de Instrumental
N°11
Docente:
DR. Costilla Sánchez, Noé Idelfonso

INTEGRANTES:
Alvarado Valdez Jordy David
Contreras Cruz, Luciano

Ciclo:
“IV- B “

CURSO:
ANALISIS INSTRUMENTAL

18 DE OCTUBRE DEL 2018

 DETERMINACIÓN DE CAFEÍNA EN UNA BEBIDA GASEOSA
(POR HPLC)

1. OBJETIVOS
1.1 Determinar la concentración de cafeína en la bebida gaseosa Fanta

2. FUNDAMENTO TEORICO
En todos estos casos, el control de calidad del parámetro cafeína es necesario
en los productos que la contienen. Por esta razón, se han desarrollado nuevos
métodos instrumentales para su determinación en diversas matrices,
especialmente en alimentos.
Para elegir una técnica de separación de la cafeína, además de tener en cuenta
los criterios económicos y de accesibilidad, hay que atender a dos tipos de
consideraciones: unas tienen que ver con las propiedades físicas y estructurales
de las moléculas que se pretende separar, o de las características de la matriz
en que se encuentran; otras se derivan de los objetivos del análisis
(sensibilidad, resolución, tiempo de análisis, necesidad de una detección
específica). El método de selección incluye los pasos necesarios para la
obtención, preparación y posible fraccionamiento de la muestra, la aplicación
de la técnica analítica adecuada y el tratamiento de los datos obtenidos.
Las técnicas analíticas más empleadas en la actualidad pueden englobarse en
dos grandes grupos: técnicas de separación y técnicas espectroscópicas. Las
técnicas espectroscópicas proporcionan, para cada compuesto analizado, una
información compleja, relacionada con sus características estructurales
específicas, por otro lado, las técnicas de separación se utilizan para resolver
los componentes de una mezcla y la señal obtenida puede utilizarse con fines
analíticos cuantitativos o cualitativos. En la actualidad, las separaciones
analíticas se efectúan fundamentalmente por cromatografía y electroforesis.
La cromatografía no solo permite la separación de los componentes de una
mezcla, sino también su identificación y cuantificación. El análisis cualitativo
está basado en la medida de parámetros cromatográficos (tiempos y
volúmenes de retención) mientras que el análisis cuantitativo está basado en
la medida de alturas o áreas de picos cromatográficos que se relacionan con la
concentración. La columna cromatográfica y la forma con la que se diseña,
constituye el corazón de la separación. El detector, situado al final de la
columna es el que garantiza la respuesta de los componentes que se separan.
La determinación de la cafeína se suele llevar a cabo mediante técnicas de
separación como HPLC (Cromatografía líquida de alta eficiencia), CE
(Electroforesis capilar), TLC (Cromatografía de capa fina) o GC (Cromatografía
de gases). Estos métodos realizan la detección mediante técnicas
electroquímicas (potenciométricas, conductimétricas, amperométricas, etc.),
 ópticas (espectrofotométricas, fluorimétricas, etc.) y otras (termoquímicas). La
elección de una u otra técnica depende del problema a resolver, del volumen
de muestra y de su concentración.
La cafeína es un alcaloide del grupo de las xantinas, que actúa como droga
estimulante y psicoactiva. Se encuentra en muchas especies de plantas. La
fuente habitual de cafeína es el café, pero también se encuentra en el té
(teína), guaraná (guaranina), mate (mateína), cacao y refrescos de cola, entre
otros. El contenido de cafeína varía enormemente de unas plantas a otras.
Dentro de una misma especie también existe gran variabilidad. Así, el
contenido en cafeína del café varía dependiendo de la variedad, del tipo de
grano y del método de preparación. Las plantas producen cafeína como
pesticida natural, a modo de protección mecánica a través de la cual logran
paralizar y matar ciertos insectos que se alimentan de la planta. La
determinación de cafeína ha adquirido mucha importancia, debido a su uso
en la industria farmacéutica y en la industria de alimentos; ya sea como
ingrediente en la elaboración de refrescos y bebidas energéticas o por su
presencia en productos como el té, el mate, el cacao y el café.

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS:

3.1 MATERIALES:

Figura 1. Filtro jeringa de Nylon Figura 2. Vial

Figura 3. Vaso de Precipitación de 25mL

 Figura 4. Jeringa Hipodérmica Figura 5. Tubo de Centrífuga

3.2 REACTIVOS:

Figura 6. Agua ultra pura o Tipo I Figura 7. Fanta

3.3 EQUIPOS:

Fig. 8. Cromatógrafo de líquidos Figura 9. Agitador Magnético

4. PROCEDIMIENTO:
Se preparó un estándar de 1000 mg/L a partir de un medicamento
(gravergol).
Luego se preparó las soluciones estándar definidas por 25, 50, 100, 200 ppm
y se agregó 10 mL de agua ultra pura o Tipo I.
Siguiendo con el procedimiento se preparó la muestra para la medición,
pero antes colocamos 100 mL de gaseosa Fanta en un vaso de precipitación
y se agita con un agitar magnético por 10 minutos, luego de esto se cogió
25 mL del vaso de gaseosa para ponerlo en el tubo de ensayo de 50 mL para
finalmente aforarlo con agua Tipo I.
Finalmente se preparó la muestra para la medición por HPLC con una
jeringa hipodérmica de 3-5 mL, luego se tomará de la muestra par a filtrarla
con el filtro jeringa y se depositó en un vial.

5. CALCULOS:

TABLA N°1: DATOS EMPLEADOS TABLA N°2: DATOS OBTENIDOS DE LOS

ESTANDARES

SOLUCION ppm
1 25 ppm Área (mAU*s)
2 50 10 71.96522
3 100 20 149.70918
4 200 40 296.45947
60 450.18695

Grafico para determinar la concentración de cafeína

500
450
400
350
300
Área

250
200
150
100
50
0
0 10 20 30 40 50 60 70
ppm
6. RESULTADOS:
6.1 DETERMINACIÓ DE LA CONCENTRACIÓN DE LA CAFEINA:
A = 7.5342C - 2.7826

Amuestra = 442.31680
𝟒𝟒𝟐.𝟑𝟏𝟔𝟖𝟎+𝟐.𝟕𝟖𝟐𝟔
C= = 59.07719 ppm
𝟕.𝟓𝟑𝟒𝟐
C = 59.07719 ppm

7. CONCLUSIONES:
7.1. La concentración que se encontró de la cafeína en la gaseosa Fanta fue
de 59.07719 ppm.
7.2. Es necesario tener en cuenta algunos conceptos previos como que es la
cromatografía, curva de calibración, etc.

8. Bibliografía:
https://upcommons.upc.edu/bitstream/handle/2099.1/11148/
Mem%C3%B2ria.pdf
https://www.google.com.pe/search?biw=1600&bih=761&tbm=i
sch&sa=1&ei=dlb3W_KsHoWzggf7x6vQDQ&q=jeringa+hipod%C
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