FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

CARRERA DE MEDICINA

CATEDRA DE BIOQUÍMICA II

INFORME DE LA PRÁCTICA

INTEGRANTES:
JOHANNA ALEXANDRA ARCE NEGRETE

ANA MARÍA CHILUISA

EDISON FERNANDO MACAS MIRANDA

CRISTINA NATHALIA PINEIDA ANDRADE

PABLO ANDRÉS PUPIALES HERNÁNDEZ

[
GRUPO: 11 CICLO I 2018-2019 ]
Fecha del laboratorio: 25/07/2018

REACCIONES COLOREADAS DEL COLESTEROL

El colesterol es un alcohol esteroide insaturado muy soluble en grasas pero poco

hidrosoluble.

El colesterol presente en el organismo tiene un doble origen:

 El que procede de la dieta -exógeno- se encuentra en su mayor parte en forma

libre –no esterificado-. El colesterol esterificado es hidrolizado por el colesterol
esterasa pancreática dando colesterol libre y ácidos grasos.
 El colesterol endógeno –aunque puede ser potencialmente sintetizado por
todas las células- se forma fundamentalmente a nivel hepático e intestinal y es
eliminado por el hígado –con la bilis- o utilizado para la síntesis de ácidos
biliares.

El colesterol circula en sangre unido a las lipoproteínas:

 Las LDL transportan el 70% del colesterol

 Las HDL del 15 al 20%
 El resto, circula unido a las VLDL y a los quiliomicrones.

El aumento de la concentración plasmática de colesterol, se asocia a un incremento

del riesgo de sufrir enfermedades cardiovasculares, por lo que su regulación tiene un
alto interés epidemiológico.
Se realizaron 4 procedimientos durante la práctica:
 Reaccion de schiff
 Prueba de salkowski
 Reacción con el anhídrido acético
 Determinación del número acídico
Materiales para la práctica:

• 1 tubo de ensayo • Pipeta • Extracto de

colesterol en
Cloroformo

• Ácido sulfúrico • Ácido acético • Aceite de girasol

concentrado glacial

• Fenolftaleína al • Hidróxido de K 0. • Mezcla de alcohol

1% 1N eter
REACCION DE SCHIFF

 Objetivo: Observar la aparición de un color violeta-púrpura (reacción positiva

de aldehídos). Las cetonas dan un color rosado pálido.
Materiales:
 1 tubo de ensayo
 Pipeta
 Extracto de colesterol en Cloroformo
 Ácido sulfúrico concentrado
Procedimiento:
 Colocar 1ml de Extracto de colesterol en Cloroformo.

 Agregamos 1 ml de Ácido sulfúrico concentrado y observamos.

Observaciones: Se observa un anillo de color rojo oscuro.

Conclusiones: El anillo da una apariencia de separación entre la sangre y la grasa,
es decir separa la parte liquida de la parte de la parte grasa o en otras palabras la
sangre de los lípidos.
PRUEBA DE SALKOWSKI

 Objetivo: La prueba de Salkowski es una prueba para el colesterol que nos

sirvió para la detección cualitativa del colesterol
Materiales:

 1 tubo de ensayo
 Pipeta
 Extracto de colesterol en Cloroformo
 Ácido sulfúrico concentrado
 Ácido acético glacial
Procedimiento:

 Colocar 1ml de Extracto de colesterol en Cloroformo.

 Agregamos 1 ml de Ácido sulfúrico concentrado

 Por último, colocamos 1 ml de ácido acético glacial y observamos.

Observaciones: Se formó en el fondo un color naranjazo y arriba de este un color

rojo tinto. Debido a que el ácido sulfúrico concentrado se agrega a una solución de
cloroformo de colesterol, una capa de cloroformo se muestra de un color rojo a color
azul y la capa de ácido muestra una fluorescencia verde.

Conclusiones: El ácido acético glacial deshidrata las moléculas de colesterol de tal

manera que colorea todo y no se forma el anillo que se forma en la reacción de Schiff
REACCIÓN CON EL ANHÍDRIDO ACÉTICO

 Objetivo: Realizar ensayo colorimétrico para la detección de colesterol.

Materiales:

 1 tubo de ensayo
 Pipeta
 Extracto de colesterol en Cloroformo
 Ácido sulfúrico concentrado

Procedimiento:

 Colocar 2 ml de extracto de colesterol en cloroformo en un tubo de ensayo.

 Añadir 2 gotas de ácido sulfúrico

 Agregar 10 gotas de Anhídrido acético

 Mezclar cuidadosamente y observar.

Observaciones: Al principio se torna de un color rosa violáceo y progresa a través

de un verde claro y luego de un color verde muy oscuro.

Conclusiones: El color es debido al grupo hidroxilo del colesterol que reacciona con
los reactivos y el aumento de conjugación de la insaturación en el anillo fusionado
adyacente. El anhídrido acético actúa como deshidratando las moléculas de colesterol
dando una simulación de que no hay colesterol en la sangre.
DETERMINACIÓN DEL NÚMERO ACÍDICO

 Objetivo: Observar una simulación de la cantidad en miligramos de grasa o

ácidos grasos que hay presente en la sangre.

Materiales:

 1 tubo de ensayo
 Pipeta
 Aceite de girasol
 Fenolftaleína al 1%
 Mezcla neutralizante Alcohol 50% eter 1:2
 Hidróxido de K 0.1N

Procedimiento:

 Colocar 1ml de Aceite de girasol en el tubo de ensayo.

 Agregamos 10 ml de Alcohol: eter
 Colocamos 3 gotas Fenolftaleína al 1%.

 Por último, agregamos gota a gota el KOH 0.1N hasta que toda la mezcla
cambie de color, de un transparente a un rosa intenso.
 Anotamos el número de gotas empleado y observamos.

Observaciones: Se observa un cambio en la coloración, de transparente a violeta.

Conclusiones: Lo que nos indica esta práctica es la cantidad en miligramos de
grasa o de ácidos grasos que hay en la sangre y así saber la calidad de la grasa. Se
sabe que entre más acida es la grasa esta tiende a ser de menor calidad, a
fraccionarse y acumularse con mayor rapidez.

𝑎. 5.6(k)
𝑥=
𝑐
𝑥 = 𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑎𝑐í𝑑𝑖𝑐𝑜
𝑎 = 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝐾𝑂𝐻 𝑔𝑎𝑠𝑡𝑎𝑑𝑜
5.6 = 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑡𝑎𝑛𝑡𝑒
𝐾 = 𝐶𝑜𝑒𝑓𝑖𝑐𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑟𝑟𝑒𝑐𝑐𝑖ó𝑛 0,1𝑁
𝐶 = 𝑀𝑢𝑒𝑠𝑟𝑎 𝑒𝑛 𝑔𝑟

𝑈𝑠𝑎𝑚𝑜𝑠 10 𝑔𝑜𝑡𝑎𝑠 𝑑𝑒 𝐾𝑂𝐻 𝑝𝑜𝑟 𝑙𝑜 𝑡𝑎𝑛𝑡𝑜 𝑛𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑜 𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑎𝑐í𝑑𝑖𝑐𝑜 𝑒𝑠 𝑥

= 2,8 ml que se encuentra en el rango normal.