Sunteți pe pagina 1din 54

Instrumentele biotehnologiei

moderne

Prof. univ.dr. Elena Marcela Badea


București, noiembrie 2012
Cuprins

 Transferul genelor, o nouă metodă de


ameliorare
 Metodele folosite pentru transferul genelor la
plante
 O nouă generație de metode folosite pentru
modificarea genetică a plantelor
 Prima generație de plante modificate genetic
 Produse modificate genetic aflate în drum
spre piaţă
Tranziția de la plantele sălbatice la plantele cultivate
a început devreme în istoria omenirii
Boabele de fasole din oraşele maiaşilor erau de 100 x
mai mari decât boabele speciilor sălbatice din regiune
A fost nevoie de cca 7 500 ani de ameliorare pentru a
ajunge de la teosint la porumb şi totuşi numai 2- 4 %
dintre cele 60 000 gene ale porumbului sunt controlate
prin ameliorare (Steven Wright, Universitatea
California, Science 308 (1310-1313, 2005)
Tomata cultivată şi ruda ei sălbatică
Lycopersicon pimpinellifolium (dreapta; diametrul
aproximativ al tomatei mai mici = 1 cm)
Unde au fost domesticite plantele?

Independent, în cinci regiuni:


 Asia SV (Orientul Mijlociu)– grâu, mazăre,
măslin
 China: orez, mei

 Mesoamerica: porumb, fasole, squash

 Anzi:cartof

 America: floarea soarelui


Cele mai importante evenimente din
istoria ameliorarii plantelor

 1865 Principiile geneticii Mendeliene


 1923 Primul hibrid de porumb
 1960 “Revolutia Verde” (soiuri, îngrăsăminte,
pesticide)
 1983 Primele plante transgenice
2,000 BC Cultivation
19th Century Selective Cross Breeding
Early 20th Century Wide-Cross Hybridization
Mid 20th Century Mutagenesis and Selection
1930s Cell Culture and Somaclonal Variation
1940s Embryo Rescue
1950s Polyembryogenesis
1970s Anther Culture
(1973) 1983 Recombinant DNA
1980s Marker Assisted Selection
1990s Genomics
2000 Bioinformatics
2002 SYN Rice genome
Metode convenționale de
ameliorare

 Toate metodele de ameliorare care nu cad


sub incidența legislației actuale
 Cadrul legislativ European definește OMG și
menționează tehnicile care sunt excluse de
la aplicarea respectivelor acte normative:
hibridarea, fertilizarea in vitro, inducerea
poliploidiei, mutagenza și fuziunea
protoplaștilor proveniți de la plante sexual
compatibile.
Biotehnologia modernă
este o versiune “high
tech” a ameliorării
convenţionale
Metoda biolistică: accelerarea
microparticulelor prin intemediul unui gaz
Agrobacterium tumefaciens – bacterie
fitopatogenă
Bacteria transferă gene în nucleul celulei
vegetale
“Instrucţiunile”: gena determină sinteza
unei proteine care conferă caracterul dorit

Promotor Gena - Marker Terminus Promotor Gena Terminus

Permite identificarea
plantelor care conţin
noua genă

Declanşează sau opreşte


expresia genei pe care o
reglează
Metode noi de ameliorare

 Tehnologia nucleazelor Zn finger


 Mutageneza mediată de oligonucleotide
 Cisgeneza sau intrageneza
 Metilarea ADN mediată de ARN via
ARNi/ARN interferant mic
 Altoirea pe portaltoi MG
 Ameliorarea inversă
 Agro-infiltrarea
 Biologia sintetică
Noi tehnici aplicate în ameliorarea
plantelor
 The New Techniques Working Group of the Commission (2008)
considers the new biotechnological techniques applied in plant breeding
and/or the modification of other organisms.
 National authorities have identified the following techniques for
consideration by the group:
 Oligonucleotide Directed Mutagenesis (ODM)
 Zinc Finger Nuclease Technology (ZFN) comprising ZFN-1, ZFN-2 and
ZFN-3;
 Cisgenesis comprising Intragenesis;
 Grafting;
 Agro-infiltration;
 RNA-dependent DNA methylation (RdDM);
 Reverse breeding;
 Synthetic genomics.
 EFSA has issued an opinion on the risks of these techniques starting
with cisgenesis and intragenesis. The Commission and EU countries are
clarifying the legal status of these techniques.
Pierderile de recoltă potenţiale şi reale determinate de
dăunători, buruieni şi patogeni la 8 dintre cele mai
importante plante de cultură (Oerke & Dehne, 2004)
Prima generaţie de PMG

Produse cu însuşiri agronomice care fac


cultura plantelor mai uşoară pentru fermieri:
 toleranţa la erbicide, care facilitează extinderea
sistemului cu lucrări minime ale solului ce
diminuează eroziunea, facilitează refacerea
humusului şi reduce energia consumată pentru
arături (şi, implicit, eliberarea CO2 în atmosferă)
 rezistenţa la insecte, care determină o reducere
semnificativă a utilizării insecticidelor
 rezistenţa la virusuri, care are importante beneficii
socio-economice, mai ales pentru ţările în curs de
dezvoltare
Rezistenţa la erbicide
Bacillus thuringiensis
Papaia rezistentă la virusul
petelor inelare
 Bogată în vitaminele A
şi C, este o sursă
importantă de vitamine
în zonele tropicale
 Varietatea transgenică
se numeşte “UH
Rainbow”
 Se află în cultură în
Hawaii
A doua generaţie de PMG
Nutraceuticele – produse care sunt atât nutritive
cât şi farmaceutice ce conţin nu numai substanţe
nutritive, ci şi alţi compuşi: antioxidanţi, uleiuri cu
conţinut mic de colesterol sau cu conţinut înalt de
acizi graşi polinesaturaţi, flavonoizi, fructan,
vitamine, licopen, fitochimice. Substante cu diferite
acţiuni: preventivă, curativă, de reducere a
simptomelor, de stimulare a performanţelor.
Unele nutraceutice încetinesc procesul de
îmbătrânire prin suprimarea proceselor oxidative.
Aceste produse, utile şi ca alimente şi ca
medicamente, vor fi mai uşor acceptate de
consumatori.
Tomate: conţinut mare în licopen – factior nutritiv înrudit
cu vitamina A; procesul de coacere modificat pentru
ameliorarea aromelor; rezistenţă la o boală bacteriană
Orezul auriu
Orezul este principala sursă de hrană pentru 2.2
miliarde de oameni din ţările lumii a 3-a.
Consumul orezului comercial decorticat determină
însă apariţia unor boli din cauza deficitului de
vitamina A. An de an, 500.000 de copii orbesc
datorită deficitului de vitamina A din hrană. Şi 2
milioane mor din cauză că, malnutriti şi suferind de
avitaminoză, nu rezistă malariei, dizenteriei şi altor
boli.
"Orezul auriu", bogat în β-caroten - sau provitamina
A- , ar contribui substanţial la ameliorarea situaţiei
Deficiența vitaminei A afectează 800
milioane oameni
Orezul auriu

 Pentru a
sintetiza beta-
caroten,
precursorul
vitaminei A, au
fost transferate
2 gene de la
narcisă şi una
de la o bacterie
 Se află în teste
de câmp
Morcovul BetaSweet® conține 50% mai mult
beta caroten (antioxidant) decât morcovul
normal
Culoarea florilor
Cultura biofarmaceutică: vaccinuri comestibile;
planticorpi; proteine terapeutice
Producerea proteinelor farmaceutice

 PMG: tutun, orez, porumb, rapita,


cartof
 Proteine: proteina C (proteaza
serică; hirudina; acidul N-acetil-
neuraminic; fosfataza acidă umană
secretată; serum albumina; factorul
de creștere epidermal uman
 Se estimează că proteinele
terapeutice pot fi produse în plante
transgenice cu costuri care
reprezintă doar 2 – 10 % din
costurile producerii în sisteme de
fermentaţie microbiană şi doar 0,1 %
din costurile producerii în culturi de
celule de mamifere
Vaccinuri comestibile

 Modificarea plantelor de
cultură astfel încât sa producă
vaccinuri comestibile: herpes,
hepatita B si C,SIDA, malaria,
toxina B
 Banana
 Palatabilitate
 Adaptarea la mediul tropical şi
subtropical
Primele produse se afla in teste
clinice
 Există aproximativ 100 de mici
companii care îşi concentrează
eforturile pentru dezvoltarea mai
multor produse. Liderii: Prodigene,
Epicyte, Large Scale Biology, Sem
Biosys Genetics, din SUA, şi
Maristem Therapeutics, din
Europa. Fiecare dintre aceste
companii are în lucru zeci de
produse.

 Primele produse aflate în teste


clinice (faza a doua) sunt lipaza
gastrică şi Caro Rx, un anticorp
util pentru prevenirea cariilor
dentare.
Ce se așteaptă în viitor
 În SUA, Canada şi Australia va continua creşterea suprafeţelor ocupate de
PMG prin extinderea culturilor varietăţilor cu caractere cumulate şi ale celor cu
însuşiri noi, atât agronomice cât şi de ordin calitativ; vor fi cultivate plante
tolerante la secetă
 Intervalul 1996-2005 a fost “decada americană”. A doua decadă va fi probabil
caracterizată de o creştere accentuată a suprafeţelor ocupate de PMG în Asia,
determinată de India, China şi alte ţări, ca Pakistanul şi Vietnamul

 Brazilia are un potenţial uriaş de a deveni lider în cultivarea PMG în America


de Sud

 Se preconizează o creştere modestă a numărului ţărilor africane care vor


adopta plantele biotech. Lideri sunt Egiptul, în Africa de Nord, Kenia, în Africa
de Est, şi Burkina Faso, in Africa de Vest

 Se preconozează o creştere modestă în UE, cu un potenţial mai mare în Europa


de Est

 Utilizarea pentru producerea de biocombustibili (etanol şi biodiesel), domeniu


în care lideri sunt SUA şi Brazilia, cărora li se vor adăuga multe alte ţări, îşi va
pune amprenta pe dezvoltarea viitoare a culturilor de PMG