Biologie Celulara si Histologie

Curs 1 - Celula

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Cuprins

• Structura si functie

• Tipuri de celule

• Celula normala si celula tumorala

• Tehnici de studiu in laborator

• Culturi de celule, linii celulare

• Tehnici de microscopie

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Structura unei celule

• Membrana celulara

• Citoplasma
– Organite celulare
– citoschelet

• Nucleul
http://training.seer.cancer.gov/module_anatomy/unit2_1_cell_functions_1.html

Celula – elementul de baza structural si functional al unui

organism

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Membrana celulara

• Bistrat lipidic (fosfolipide si colesterol)

• Contine proteine membranare
– Proteine intrinseci (transmembranare)

– Proteine extrinseci
• Glicocalix - glucide

http://www.molecularstation.com/molecular-biology-images/504-cell-biology-pictures/17-cell-membrane-figure-plasma-membrane.html

Structura fluida, dinamica!

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Membrana celulara

Functii:
• Protectie mecanica
• Transport
– canale ionice
– proteine transportoare
– endo/exocitoza
• Semnalizare
– receptori membranari
• Raspuns imun
– antigene de membrana

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Transportul membranar

• Difuzie prin membrana – substante liposolubile

• Canale ionice
• Pompe ionice
• Proteine transportor
• Endocitoza, exocitoza, transcitoza

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Receptori membranari

• Receptori ionotropi – canale ionice

• Receptori metabotropi – cuplati cu proteine G

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Antigene membranare

• Complexul major de histocompatibilitate (MHC)

• Rol in recunoasterea celulelor proprii organismului
• Implicate in respingerea grefelor de organe

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Citoplasma

• Solutie ionica (potasiu, clor, calciu – principalii ioni)

• Contine proteine citoplasmatice, metaboliti

• Citoscheletul – sistem de microtubuli si microfilamente; mentin

forma celulelor, intervin in transportul intracelular

• Organite celulare:
– Cu rol in sinteza proteinelor:
• Ribozomi
• Reticul endoplasmic
• Aparat Golgi
– Cu rol in energetica celulara:
• Mitocondrii
– Cu rol metabolic (digestia intracelulara):
• Lizozomi (contin enzime lizozomale)

• Vezicule de tranzit sau depozitare (endozomi)

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Organite celulare cu rol in sinteza proteinelor

• Ribozomii
– aglomerari de ARN
(ARN ribozomal)
– Izolati/atasati RE
• Reticulul endoplasmic
(RE)

– Neted/rugos
– Sistem de canale si
cisterne, comunica cu
AG
– Preia si distribuie
proteinele sintetizate
la nivelul ribozomilor
• Aparatul Golgi
– Sistem de cisterne si
vezicule
– Rol in depozitarea
proteinelor

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Organite celulare cu rol energetic

• Mitocondriile
– Membrana dubla
– Membrana interna – pliata (criste mitocondriale)

– Rol energetic – lantul respirator celular
– Contin ADN – transmiterea unor caractere pe linie exclusiv
maternala

http://remf.dartmouth.edu/images/mammalianLungTEM/source/8.html

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Structura si functie
Nucleul

• Cromatina (material genetic) – cromozomi + histone

• Nucleol – contine ARN ribozomal

http://www.cartage.org.lb/en/themes/Sciences/Zoology/AnimalPhysiology/Anatomy/AnimalCellStr http://biologica.concord.org/webtest1/Shout3d_cell_6_1_00/v2_top_right_nucleus.htm
ucture/Nucleus/Nucleus.htm

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tipuri de celule
• Celule epiteliale
– Epitelii keratinizate/nekeratinizate
– Epitelii ciliate/cu microvili

• Celule conjunctive
– (cartilaje, oase, adipozitate)

• Celule musculare
– Fibre musculare netede
– Fibre musculare striate
– Fibre musculare de tip cardiac

• Celule nervoase
– Neuroni

• Celule sangvine
– Eritrocite
– Leucocite
– (trombocite)

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula
Tipuri de celule
Epitelii

• nespecializate
• piele
• mucoase http://mednote.co.kr/images/epithelia.jpg

• vase de sange
(interior)

• specializate
• intestin – microvili
(absorbtie)
• plamani – cili
• glande cu secretie
interna si externa
http://utpa.net/Epithelium/projections/

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tipuri de celule
Celule musculare

• Celule musculare netede

– Mononucleate
– Peretii tubului digestiv, vaselor
de sange etc

• Celule musculare striate

– Lungi, polinucleate
– Grupate in fascicule
– Contin filamente de actina si
miozina; interactiunea dintre
acestea sta la baza contractiei
musculare
– Alcatuiesc musculatura
scheletica

• Celule musculare cardiace

– Caractere intermediare intre
primele doua
– Intra in alcatuirea cordului

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tipuri de celule
Celule nervoase (neuroni)

• transmitere impulsuri nervoase

• neuronii adulti nu se divid

http://www.alzheimers.org/rmedia/IMAGES/HIGH/NEURONS_HIGH.JPG
http://www.blackwellpublishing.com/matthews

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tipuri de celule
Celule sangvine

• Eritrocite (globule rosii)

– anucleate
– Contin hemoglobina; rol in
transportul oxigenului la http://www.pennhealth.com/health_info/images/19192.jpg

nivel tisular

• Leucocite (globule albe)

– Leucocite
polimorfonucleare; rol in
apararea impotriva http://media-2.web.britannica.com/eb-media/28/98328-004-

infectiilor bacteriene (acut)
5514AFAC.jpg

– Limfocite (B, T); rol in

raspunsul imun
imediat/intarziat

• Trombocite
– Sunt, de fapt, fragmente
celulare
– Rol in tromboza, coagulare
http://www.abc.net.au/science/photos/whatis/answer4.htm

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Celula normala si celula tumorala
Celula normala Celula tumorala

Morfologie Nucleu normal Anomalii nucleare

Rata de diviziune Difera in functie de tipul Rata de diviziune mult
de celule accelerata

Inhibitie de contact Prezenta absenta

http://www.ellagicdirect.com/cancer-picure.jpg
http://64.202.120.86/upload/image/articles/2008/smart-bombing-cancer/cell-grow.jpg

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Culturi de celule si linii celulare

• Culturi de celule
– Celulele sunt recoltate de la diferite organisme (ex: soareci de
laborator)

– Tesutul recoltat este prelucrat in vederea separarii celulelor
– Celulele sunt mentinute in medii de cultura adecvate
– Timp de viata limitat

• Linii celulare – celule fetale/tumorale

– Standardizate – baza europeana/americana de culturi de celule
– Timp de viata indelungat – in functie de linia celulara, mai
multe zeci de pasaje
– Pot reprezenta un sistem de expresie pentru o proteina de
studiat; cele mai des utilizate:
• HEK (human embrionic kidney)

• CHO (chinese hamster ovary cells)

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Culturi de celule si linii celulare

HEK 293 CHO

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Culturi de celule si linii celulare

ECACC = European Collection of Cell Cultures

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Tehnici microscopice

• Microscopie optica
– Microscopie optica de transmisie
– Microscopie optica de baleiaj folosind lasere
• Microscopul confocal
• Microscopie in camp apropiat

• Microscopie electronica
– Microscopie electronica de transmisie
– Microscopie electronica de baleiaj

• Microscopie de forta atomica

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Tehnici microscopice

• Microscopul optic de transmisie

Oc

Ob

B
F1’ F2 A’ F2’
A” A F1
B’
B”
Puterea P = tgα2/AB

e Grosismentul G = P/4 = e/4f1f2

G = tgα2/tgα1
G ≈ A”B”/AB
α2 – unghiul sub care se vede obiectul prin microscop
G = GobGoc
α1 – unghiul sub care se vede obiectul cu ochiul liber

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Tehnici microscopice

• Microscopul optic de transmisie

Oc

Ob

B
F1’ F2 A’ F2’
A” A F1
B’
B” λ- lungimea de unda a luminii folosite
e n – indicele de refractie al mediului dintre
obiectiv si preparat
u – unghiul de deschidere a ocularului (1/2)

Puterea separatorie η=1/d

Distanta separatorie d = 1,22λ/(2nsinu)

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula
Tehnici de studiu in laborator
Tehnici microscopice

• Microscopul optic de transmisie – microscoape speciale

– Ultramicroscopul
• Iluminare laterala a preparatelor; imagine de difuzie

– Microscopie in contrast de faza

• Vizualizare obiecte transparente; imaginea se formeaza pe baza diferentei
de faza induse de proprietatie optice diferite ale mediilor strabatute

– Microscopul cu fluorescenta
• Iluminare UV; preparatul – marcat specific (absorbtie in UV, emisie in
vizibil)

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Tehnici microscopice – microscopie optica de transmisie

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Tehnici microscopice – imagerie de fluorescenta

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Tehnici microscopice – imagini in contrast de faza

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Tehnici microscopice

• Microscopie optica de baleiaj folosind lasere

– Microscopul confocal
• Proba este iradiata cu o radiatie laser de o anumita lungime de unda
• Imaginile se obtin prin focalizare in planuri diferite ale preparatului
(se pot realiza reconstructii 3D)

– Microscopul in camp apropiat

• Se lucreaza la distante mai mici decat lungimea de unda a radiatiei
utilizate
• Nu apar imagini de difractie
• Permite rezolutii la nivel molecular

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Microscopie confocala

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Microscopie electronica de transmisie

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Microscopie electronica de transmisie

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Microscopie electronica de baleiaj

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Microscopie de forta atomica

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Tehnici de studiu in laborator
Microscopie de forta atomica

• Microscopie de forta atomica

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula

Bibliografie web

• http://training.seer.cancer.gov/module_anatomy/unit2_1_cell_functions.html
• http://www.biology.iupui.edu/biocourses/N100H/cells.html
• http://kentsimmons.uwinnipeg.ca/cm1504/15ovrh2000.htm
• http://highered.mcgraw-
hill.com/sites/dl/free/0072437316/120060/ravenanimation.html
• http://www.nsf.gov/news/overviews/biology/interactive.jsp
• http://www.etsu.edu/cpah/hsci/forsman/Histologyofmuscleforweb.htm
• http://www.blackwellpublishing.com/matthews/

DBB – Masterat Inginerie Medicala si Clinica Biologie Celulara si Histologie – 1. Celula