Practica: Calibración de micropipetas y uso de la balanza analítica

Materia: Biología Molecular.

Docente: Dr. Octavio Guerrero Andrade.

Alumnos:
 Rancel Valdenegro Tornez
 Samira Lizeth Mejía Olvera
 Asiel Salomón Mejía de la Rosa
 Diana Magali Mejía Nieto
 Alondra Callejas Polo

Carrera: Innovación Agrícola Sustentable.

Semestre: Quinto.
 Calibración de micropipetas y uso de la balanza analítica

INTRODUCCIÓN

Una manera de conocer la precisión de las micropipetas que se utilizan

rutinariamente en la práctica de la biología molecular es con ayuda de la balanza

analítica. Aunque las micropipetas no pueden ser calibradas en el laboratorio, si

es posible conocer su precisión, considerando, que el volumen tomado debe

corresponder a su peso en gramos (ejemplo: 1,000 µL pesan 1,000 mg).

El error máximo que debe tener la micropipeta para un volumen especificado no

debe ser mayor al 3%.

OBJETIVO

Aprender el uso correcto de las micropipetas y verificar su precisión para ser

utilizadas en la realización de las prácticas.

MATERIALES Y MÉTODOS

Se utilizarán tres micropipetas Gilson™ diseñadas para capturar volúmenes

variables. P20, de 1 a 20 µL, P200 de 20 a 200 µL y P1000 de 200 a 1,000 µL .

Además, se utilizará una balanza analítica (Citizen CY-220 o cualquier otra

disponible), una probeta de 10 mL y agua.

El procedimiento es el siguiente:

1. Ajustar cada micropipeta a su volumen máximo (la de 1,000 µL a 1,000

µL), tomar el volumen correspondiente y colocarlo en la probeta de 10 mL

que se debe encontrar sobre la platina de la balanza analítica, ya tarado.

 2. Registrar el peso de dicho volumen. Repetir las mediciones cinco veces

para cada una de las micropipetas, P20, P200 y P1000 respectivamente.

Registrar los datos en la tabla 1.1 y determinar la desviación estándar de

acuerdo a la fórmula siguiente:

S =
е ( x ­ x i )
2

=
2 2
( x ­ x1 ) + ( x ­ x 2 ) + ...+ ( x ­ x N )
2

n­ 1 n­ 1
Xi representa cada uno de los valores de las repeticiones, x  representa la
media
 de la muestra y n es el número de observaciones ó tamaño de la muestra.
Para determinar el porcentaje de error se multiplica la desviación estándar

obtenida en cada caso por 100 y se divide entre el volumen total de la pipeta.

Tabla 1.1 Precisión de las micropipetas P20, P200 y P1000.

Volumen máximo
Peso promedio Desviación Error
de la micropipeta
(mg) estándar (%)
(µL)
10 0.1924 1.5290X10-3 15.29
100 101.52 9.6X10-3 9.6
1000 4.9861 4.2073X10-3 4.2
1 0.99482 1.4X10-3 0.014

CUESTIONARIO

Debido a que cada micropipeta está diseñada para obtener un volumen

determinado en un rango definido, diseñe y demuestre experimentalmente:

1. ¿Por qué no es recomendable usar la micropipeta de 1,000 µL para medir 150

µL?.

Porque la medición no sería de buena precisión y en alguna investigación habría

un % considerable de error.