UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Maza De la Quintana Ricardo Otoniel –Setiembre 2018

Métodos de cuantificación de biomasa celular

Estos métodos hacen referencia a aquellos procedimientos que nos ayudan a determinar la cantidad de
población de un microrganismo en un determinado sistema. La determinación dela biomasa es una
variable fundamental para conocer la eficiencia de un sistema. Los métodos pueden ser de tipo directo o
indirecto como veremos a continuación:
Métodos directos
 M. gravimétricos: Se basan en la separación de biomasa por centrifugación o filtración, donde se
incluyen sólidos en suspensiones totales y volátiles. Siendo su principal desventaja separación no
especifica, ya que el centrifugado o filtrado incluyen microorganismos vivos inertes, polímeros,
materia orgánica, entre otros.
 M espectrofotométricos: Se basan en la relación entre la presencia del número de microrganismos y
la turbidez generada por los mismos en un fluido a través de un haz de luz que pasa por ellos. Este
método no es exacto, pues el resultado es un valor estimado según una curva de calibrado realizad
antes del procedimiento, con lo que según la absorbancia obtenido del espectrofotómetro se
determinado la cantidad de microorganismos.
 M. microscópicos: Se realiza a través de cámaras de recuento celular como: la cámara de Neubauer,
Thoma, Bürker, etc. La cámara de Neubauer por ejemplo consiste en una cuadricula distribuida en 5
áreas de conteo, donde a través del microscopio se proceden a cuantificar.
 M. por epifluorescencia: Se debe a la acción de un agente fluorocromo o anticuerpo fluorescente que
se encarga de teñir los sustratos metabólicos o ácidos nucleicos, para luego realizar el conteo por
microscopía óptica utilizando iluminación de epifluorescencia.
Métodos indirectos.-
 Métodos para componentes celulares:
Estos determinan la cantidad de ácidos nucleicos, proteínas, azúcares, lípidos y ATP de manera
específica por espectrofotometría, extracción celular con disolventes orgánicos, por hidrolisis alcalina
en el caso de carbohidratos, cromatografía liquida o gaseosa, etc.
 Métodos bioquímicos -Para actividad enzimática
Miden la actividad enzimática y de realiza de manera rápida. Seda mediante la conversión de sustratos
específicos a productos coloreados que son cuantificados fotométricamente, siendo las más comunes
la actividad de proteasas, lipasas, esterasas que son medidas por adición de diacetato de fluoresceína
cuya reacción produce fluoresceína y puede ser visualizada por microscopía y f luorescencia; y
deshidrogenasa cuya determinación de actividad puede hacerse midiendo la capacidad de los
microorganismos para reducir un indicador, ya que como se sabe, este tipo de enzimas son de potencial
oxido-reductor.
 Métodos cinéticos-Para el consumo de sustrato o formación de productos
Estos miden el consumo de ciertos fluidos empleados como sustratos para los microrganismo, se mide
la variación de concentración en el tiempo a través de su relación con la presión.

Bibliografía
 Arnais C., Lebrato J. & Isac L. (2000). Determinación de la biomasa en procesos biológicos I.
Métodos directos e indirectos. Tecnología del Agua 20(205):45-52.
 Martínez s. & Yurico E. (2012). Determinación de biomasa. Trujillo, Perú: Universidad Nacional de
Trujillo.
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