El Sistema HLA, Inmunogenética y

Transplante.

Dr. MSc. Juan M. Rodríguez-Tafur Dávila

Prof. Asociado de Farmacología e Inmunología
Regional Editor of WAO (Organización Mundial de Alergia)
Facultad de Medicina
Universidad Privada Telesup
 Historia

La mitología India dice, que

el Señor Ganesha tenía
una cabeza
transplantada, siendo
una deidad favorita….
 Historia
Alexis Carrel (1908)

• Primer estudo sistemático de la transplantación.

• Intercambio ambos riñones en una serie de 9 gatos.
• Sobrevivieron mas de 25 días.
• Establecio que el órgano transplantado podia llevar a
cabo su función normal en el receptor.
 Historia
Medawar (1940s)

• Observa que la naturaleza del rechazo del injerto, al trabajar

con pacientes con quemaduras de la Segunda Guerra Mundial.
Los injertos de piel de una región del cuerpo a otro en el
mismo paciente eran aceptadas fácilmente, en tanto que los
injertos obtenidos de parientes cercanos fueron rechazados.
La intensidad del rechazo de un injerto por segunda vez fue
más rápido.
• Descubre que la sensibilizacion previa con celulas del donador
permitia aumentar el rechazo a un subsiguiente transplante.
Cronología en la Historia de la Transplantación

• 1906 – Primer transplante corneal por el oftalmologo Austriaco Dr. Edward

Zim.

• 1908 –Primer alotransplante de piel por el cirujano suizo Jacques Louis

Reverdin.

• 1908 –Exitoso primer transplante de cadaver de la articulacion de la rodilla

por el Dr Eric Lexer.

• 1911 – Inicio del uso de tejido de vena homologa en la reconstruccion

arterial.

• 1918 –Primera transfusion de sangre.

Cronología en la Historia de la Transplantación

• 1949 –Se establece el primer Banco de Tejidos en Hospital Naval en USA.

• 1954 - Primer éxitoso trasplante de riñón vivo relacionado de gemelos idénticos

realizada por el Dr. Joseph Murray y David Hume, en Boston, MA. El receptor tuvo
una función renal normal durante ocho años.

• 1955 – Inicio del transplante de aloinjerto fresco de válvula del corazón puesto en la
aorta descendente.

• 1955 – Alotransplante de vena congelada para bypass de la arteria femoral.

• 1962 – Primer implante de valvulas cardiaca frescas colocadas en el corazon.

 Cronología en la Historia de la
Transplantación

• 1962 – Primer transplante de riñon cadaverico transplantado por el Dr.

Joseph Murray y el Dr. David Hume en Boston, MA. El receptor tuvo
funcion normal del riñon por 21 meses.

• 1963 – Primer transplante hepatico realizado por el Dr. Thomas Starzl..

• 1963 – Primer transplante de pulmon realizado por el Dr. James Hardy en

la Universidad de Mississippi Centro Medico, Jackson, MS.

• 1967 – Primer transplante cardiaco realizado por el Dr. Christian Barnard

en el Groate Shure Hospital, Sudafrica. El receptor tuvo funcion normal
del corazon por 19 meses.

• 1967 – Primer transplante exitoso de pancreas realizado por el Dr.

Richard C. Lillehei en la Universidad de Minnesota.
Cronologia en la Historia de la Transplantacion

• 1968 – Se crea criterios de muerte cerebral.

• 1968 -The Uniform Anatomical Gift Act. Legislacion que permite la

donacion a otras personas.

• 1971 – Se usa valvulas cardiacas congeladas en transplante alografico.

• 1971 -Introduccion de la crio-preservacion para tranplanstes alograficos de

piel humana.

• 1972 -The Uniform Anatomical Gift Act establece la Uniform Organ Donor
Card como un documento legal en los 50 estados permitiendo que
cualquiera mayor de 18 años o mas pueda ser legalmente donante de su o
sus organos al morir.
 Cronología en la Historia de la Transplantación

• 1972 - End Stage Renal Disease Act preparo el terreno para que el
Medicare cubriera los costos de todos los transplantes de riñon.

• 1974 – Primer uso de aloinjerto de vena criopreservada.

• 1978 – Se inician las pruebas de la Ciclosporina.

• 1979 – Transplante de pancreas vivo relacionado, Minneapolis, MN.

• 1981 – Criterios de muerte cerebral se expande por la Comision

Presidencial para el estudio de los problemas eticos en la medicina y la
investigacion biomedica.
Cronología en la Historia de la Transplantación

• 1981 – Primer Transplante de corazon y pulmon realizado por el Dr. Norman

Shumway en Stanford University Medical Center, Stanford, CA.

• 1982 -Barney Clark recibe el primer corazon artificial permanente en la

Universidad de Utah.

• 1983 –FDA aprueba el uso de la Ciclosporina, el mas exitos medicamento anti

rechazo desarrollado.

• 1984 - El primer transplante de corazon e higado realizado por el Dr. Starzl en el

Children's Hospital de Pittsburgh.

• 1984 -Baby Fae recibe el primer transplante de corazon de mono babuino en la

Loma Linda University Medical Center. Ella fue el primer infante en recibir un
organo animal. Baby Fae vivio por 21 dias.
 Cronología en la Historia de la Transplantación

• 1988 -FDA aprueba la solucion de Viaspan o UW para preservacion

extendida de Higado

• 1989 -Dr. Thomas Starzl en la University of Pittsburgh reporta exito clinico

prometedor con el FK-506.

• 1989 – Primer transplante de higado relacionado de un donador vivo.

Cronología en la Historia de la Transplantación

• 1990 – Transplante de pulmon se ensaya como cura de la

fibrosis quistica.

• 1990 -Dr. Joseph Murray (realizao el primer transpalnte renal)

gana el Premio Nobel de Medicina.

• 1990 -Dr. Thomas (pionero de los transplantes de medula

osea como cura de la leucemia) gana el premio Nobel de
Medicina.

• 1990 – Primer transplante cardiaco relacionado exitoso.

• 1991 – Se ensaya primer transplante parcial de pulmon.

 Cronología en la Historia de la
Transplantación

• 1991 –Primer transplante exitoso de intestino delgado.

• 1996 –Cirujanos del Barnes Hospital en St. Louis, University de California,

San Francisco, y Stanford University Hospital realizan el primer transplante
parcial de higado.
TERMINOLOGIA:

Locus: Posición de un gen sobre un cromosoma.

Alelo: Forma alternativa de un gen expresado
en un locus simple.
Homocigote: Tiene alelos idénticos en un locus.
Heterozigote: Tiene diferentes alelos en un locus.
Genotipo: Constitución de un individuo.
Fenotipo: Características observable producida por los
genes.
Polimorfico: Dos o mas genotipos comunes diferentes que se
mantienen en una población.
Cr. homólogos: Dos miembros de un par de cromosomas que
tienen un loci correspondiente, uno derivado
de cada padre.
Recombinacion: Reacomodacion de genes de manera que el
gameto tenga genes de ambos padres.
COMPLEJO MAYOR DE

HISTOCOMPATIBIDAD

(MHC)
 DIFERENTES TIPOS DE COMPLEJOS
MAYORES DE
HISTOCOMPATIBILIDAD POR ESPECIES

EN EL HOMBRE EL MHC HLA

EN EL RATON H2
EN EL PERRO DLA
EN EL MONO RHESUS RhLA
EN EL CERDO PLA
 Definición
• El Complejo Mayor de Histocompatibilidad es una
región de genes altamente polimórficos, localizados
en el brazo corto del cromosoma 6, cuyos productos
se expresan sobre la superficie de una gran variedad
de células.
• Su función consiste en fijar fragmentos de péptidos
derivados de patógenos y presentarlos sobre la
superficie celular para ser reconocidos por las
células T.
 Funciones del MHC

RECONOCIMIENTO INMUNE:
Reconocimiento de los antígenos protéicos unidos a la superficie de
otras células por la célula T.

Determina la especificidad de las células T citotóxicas para las

moléculas de clase I y de las celulas T colaboradoras o helper para
las moleculas de clase II.

RECHAZO AL TRANSPLANTE:
Diferenciar antígenos propios de extraños
 Características del Sistema HLA

• Poligénico: contiene numerosas moléculas MHC

clase I y MHC clase II
• Polimorfismo: gran número de alelos para cada uno
de los genes.
• Codominancia: cada alelo que se encuentra en el
cromosoma se expresa en la superficie de la
membrana celular
• Enlazamiento: los genes se transmites juntos, en
bloques de padres a hijos
 Patrones de Expresión HLA

• Las HLA clase I se expresan en casi todas las células

nucleadas.
• Las HLA clase II son de expresión restringida y se
encuentran en los Linfocitos B, células dendríticas,
células tímicas epiteliales. Los macrófagos y células
endoteliales pueden ser inducidos para que las
expresen.
 Human Leucocyte Antigen (HLA)
Major Histocompatibility Complex (MHC)

Descubiertos / rechazo de los transplantes (Jean

Dausset 1952/1953).
La funcion del HLA / MHC fue descubierta en los 70.
(Zinkernagel & Doherty 1974).

Moleculas MHC/HLA presentan peptidos antigenicos a

las celulas T a traves del TCR (receptor de la celula T).
Los peptidos antigenicos (ej patogenos) son reconocidos
por una combinacion con una variante individual propia
del HLA.
• El sistema consiste en
Genética
3 juegos de genes localizados
en el brazo corto del cromosoma 6 y se extiende a lo
largo de 3500kb:
– HLA Clase Ia: HLA-A, HLA-C, HLA-B, HLA-D, HLA Clase
Ib:HLA-E, HLA-F, HLA-G.
– HLA clase II: HLA-DP, HLA-DQ, HLA-DR
– Moleculas de Clase III: C2, alfa y beta hidroxilasa, HSP-70,
TNF-alfa, Linfotoxina beta.
• Existe un gen localizado en el cromosoma 15 que
sintetiza la b2 microglobulina que conforma la
molécula HLA I
• Los individuos expresan seis moléculas HLA-I, y 10 a
20 productos HLA-II
Mapa del Locus del MHC humano
 Mapa esquemático del
Complejo Mayor de Histocompatibilidad
 Mapa simplificado de la Region HLA

DP DM LMP/TAP DQ DR B C A
b   b b  b1 b3 b4 b5 

MHC Clase I
MHC Clase II
Clase III
 Human Genome Project

3,838,986 bp
224 genes
en el cromosoma 6

The MHC
sequencing
consortium
Nature 401, 1999
 ORGANIZACIÓN DEL CMH:

CMH-I
HLA-B, HLA- C, HLA-A , (MAS IMPORTANTES)
HLA-E, HLA-F, HLA-G, HLA-H, HLA-J, HLA-X.

CMH-II
DP, DQ, DR, (MAS IMPORTANTES)
DM,GENES TAP-2.

CMH-III
C4b, C4a, C2, FACTOR B, ALFA Y BETA
HIDROXILASA
 Estructura de CMH-I
• Formado por 2 cadenas polipeptidicas
separadas (alfa y beta)
• Alfa o pesada contiene 44 kd aprox.
• Beta contiene 12 kd aprox , y tiene union
no covalente con la cadena pesada (b2m).
• Posee 4 regiones:
1.- Unida al peptido: de 180 aa (1 y 2)
2 contiene puentes disulfuro.
2.- Similar a inmunoglobulina de 90 aa
b2m.
3.- Transmembrana de 25 aa
hidrofobica
4.- Citoplasmatica de 30aa
 Moléculas de Clase I - MHC

• Constituído por una cadena

2 1
alfa y una cadena de beta2-
microglobulina
3 b2m
• Dominios:
– De unión peptídica
– Similar a inmunoglobulina
– Transmembrana
– intracitoplasmático
MOLECULA DE CMH DE CLASE 1

DOMINIO UNIDO
PEPTIDO

DOMINIO TIPO
INMUNOGLOBULINA

DOMINIO
TRANSMEMBRANA

DOMINIO
CITOPLASMATICO
Los HLA clasicos de Clase Ia son moleculas
altamente polimorficas

HLA-A10 HLA-A3 HLA-A23 HLA-A11 HLA-A25 HLA-A26

HLA-B12 HLA-B5 HLA-B12 HLA-B16 HLA-B40 HLA-B8
HLA-Cw5 HLA-Cw7 HLA-Cw1 HLA-Cw8 HLA-Cw2 HLA-Cw5

HLA-A2 HLA-A28 HLA-A19 HLA-A19 HLA-A25 HLA-A24

HLA-B27 HLA-B17 HLA-B14 HLA-B15 HLA-B12 HLA-B8
HLA-Cw6 HLA-Cw5 HLA-Cw8 HLA-Cw2 HLA-Cw1 HLA-Cw4
Los HLA no clasicos de Clase Ib son moleculas
casi monomorficas

HLA-G HLA-G HLA-G HLA-G HLA-G

HLA-G
HLA-E HLA-E HLA-E HLA-E HLA-E
HLA-E
HLA-F HLA-F HLA-F HLA-F HLA-F
HLA-F

HLA-G HLA-G HLA-G HLA-G HLA-G HLA-G

HLA-E HLA-E HLA-E HLA-E HLA-E HLA-E
HLA-F HLA-F HLA-F HLA-F HLA-F HLA-F
 Funciones del HLA-G
Posible contribución del HLA-G en el proceso de
implantación:

1) Unir el Blastocisto con el Endometrio

• HLA-G han sido comprometido en la adhesion celular.
(Ødum et al 1991)

2) El Trofoblasto invade el tejido uterino y las arterias

espirales de la madre.
• HLA-G es expresado por celulas del trofoblasto endovascular y
puede modular la angiogenesis (Le Bouteiller et al)

3) Trofoblasto interacciona con celulas efectoras

inmunes maternas
• HLA-G interactua con receptores en las celulas inmunes.
Ensamblaje HLA Clase I
 PROCESAMIENTO EN
MOLECULA DE CLASE I
LAS CADENAS  DEL CMH-I
PARCIALMENTE DOBLADAS
SE UNEN A LA CALNEXINA
HASTA QUE B2M SE UNE.
EL COMPLEJO CMH-I-B2M
SE LIBERA DE CALNEXINA
Y SE UNE AL COMPLEJO DE
PROT. CALRETICULINA/
TAPASINA Y TAP
MOLECULAS TRANSPORTADORAS TAP
(Péptidos transportadores putativos)
 LAS PROTEINAS
CITOSOLICAS
DEGRADAN
A FRAGMENTOS
PEPTIDICOS
POR EL PROTEOSOMA
(PROTEASA
MULTICATALITICA)
LA PROTEINA TAP ENTREGA
EL PEPTIDO QUE SE UNE A
CMH-I Y ESTA COMPLETA
SU DOBLAMIENTO
CMH-1 TOTALMENTE
DOBLADO ES LIBERADO DE
TAP Y EXPORTADO
LAS MOLECULAS. DE CLASE I NO DEJAN
EL RETICULO ENDOPLASMICO (RE) HASTA
QUE SE HAN UNIDO A PEPTIDOS, LUEGO
SON TRANSPORTADOS A TRAVES DEL
APARATO DE GOLGI A LA SUPERFICIE .
 Estructura de CMH-II
• Formado por 2 cadenas polipeptidicas separadas (alfa y
beta)
• Alfa contiene 32-34 kd aprox.
• Beta contiene 29-32 kd. posee 4 regiones:

1.- Unida al peptido: de 180 aa (12,b1b2)

1 no contiene puentes disulfuro.
b1 contiene puentes disulfuro.

2.- Similar a Inmunoglobulina 2, b2 con enlaces

disulfuro internos.

3.- Transmembrana 2 segm. de 25 aa c/u hidrofóbica.

4.- Citoplasmatica (tamaño varible)

 Molecules de Clase II - MHC

• Consta de dos cadenas de

polipéptidos alfa y beta b1 1
iguales.
• Su división es análoga a la
b2 2
HLA clase I
• El dominio beta2 contiene la
región de unión al CD4
MOLECULA DE CMH DE CLASE 2

DOMINIO UNIDO
PEPTIDO

DOMINIO TIPO
INMUNOGLOBULINA

DOMINIO
TRANSMEMBRANA

DOMINIO
CITOPLASMATICO
 PROCESAMIENTO EN
MOLECULA DE CLASE II
PROCESAMIENTO CON MOLECULAS DE CLASE II
ENDOSOMAS ACIDIFICADO
EL ANTIGENO ES
INTERNALIZADO A
TRAVES DE UNA
VESICULA
INTRACELULAR
LA ACIDIFICACION
DE LAS VESICULAS
ACTIVA PROTEASAS
QUE DEGRADAN EL
ANTIGENO EN
FRAGMENTOS
PEPTIDICOS
 LA VESICULAS QUE
POSEEN LOS
FRAGMENTOS SE
UNEN
A LAS VESICULAS QUE
CONTIENEN EL CMH-II
EL PEPTIDO UNIDO
ES TRANSPORTADO
A LA SUPERFICIE
POR LAS CMH-II
PROCESAMIENTO CON MOLECULAS DE CLASE II
CADENA INVARIANTE Li
 CMH-II
PARCIALMENTE
PLEGADO ES UNIDO
POR LA
CADENA INVARIANTE
RE li
CMH-II EN EL RETICULO
li ENDOPLASMICO (RE)
PEPTIDO RECIEN
SINTETIZADO
 Li BLOQUEA LA UNION
DEL PEPTIDO A CMH-II ,

CLIP FACILITA SU DESPLAZA-

MIENTO AL RETICULO
ENDOPLASMICO (RE)

RE
 Li ES CLIVADO EN DOS
ESTADIOS Y LIBERADO
PARA PERMITIR QUE
CMH-II
SE UNA AL ANTIGENO
QUE ESTA INGRESANDO
EL CMH-II CONDUCE AL

PEPTIDO ANTIGENICO

A LA SUPERFICIE DE

LA CELULA.
Ensamblaje
HLA Clase II
LAS MOLECULAS DE CLASE II ASOCIADAS A CADENAS
INVARIANTES, RETARDAN LA UNION DE PEPTIDOS Y CMH-II A
LOS ENDOSOMAS.

Li SE UNE A CMH-II RECIEN SINTETIZADO EN EL RE,

PREVINIENDO QUE SE UNA A CMH-II Y PROTEINAS
PARCIALMENTE PLEGADAS DEL LUMEN.
DIRECCIONA LOS ANTIGENOS AL GOLGI PARA QUE SEAN
ACIDIFICADOS POR LOS ENDOSOMAS
PROCESAMIENTO CON MOLECULAS DE CLASE II
CADENA INVARIANTE Li-CLIP-HLA-DM
 CADENA INVARIANTE(li)
FORMA UN COMPLEJO
CON CMH-II
BLOQUEANDO LA
UNION DE PEPTIDOS
Y PROTEINAS
NO PLEGADAS

li
 Li ES CLIVADO
CLIP
EN UN
ENDOSOMA ACIDIFICADO
DEJANDO UN PEQUEÑO
FRAGMENTO DE PEPTIDO
(CLIP)
UNIDO A CMH-II
 EL PEPTIDO CLIP
BLOQUEA LA UNION DE
DERIVADOS DE
PEPTIDOS
PARA SER
ENDOCITADOS
POR CMH-II
CMH-II

HLA-DM SE UNE A CMH-II

LIBERANDO CLIP
Y PERMITIENDO QUE
OTROS PEPTIDOS SE UNAN

HLA-DM
HLA -DM FACILITA A LOS PEPTIDOS

UNIRSE A CMH-II AL CATALIZAR LA

LIBERACION DEL PEPTIDO CLIP

PRESENTACION DE ALOANTIGENOS
DIRECTA E INDIRECTA
CD22
 CD1

Presentación de lípidos CD1b

Presentación de péptidos CD1d
Interacciona con céls CD4- CD8-
SUPERFAMILIA
DE LAS
INMUNOGLOBULINAS
 Molécula de Clase I - MHC
Peptide

-chain

b2-micro-
globulin

Cadenas Estructuras
 Moléculas de Clase II - MHC
Peptide

-chain

b-chain

La hendidura es hecha
por ambas
Cadenas  y b
 Geometría de la Hendidura

MHC clase I

MHC clase II

Peptido es sujetado en la hendidura por fuerzas no covalentes

 Geometría de la Hendidura

-chain -chain

Peptide b-chain
Peptide
b2-M

MHC de clase I acepta peptidos MHC de clase II acepta

de 8-10 amino acidos peptidos > de 13 amino acidos
 Peptidos unidos al MHC

Cada humano usualmente expresa:

3 tipos de MHC de clase I (A, B, C) y
3 tipos de MHC de clase II (DR, DP,DQ)

El numero de antigenos receptores de la cels T se estima es de

1,000,000,000,000,000
Cada uno de los cuales puede potencialmente
reconocer un peptido antigenico distinto
 Polimorfismo Alelico esta concentrado en
los peptidos de union al Antigeno

Clase I 2 1 b1 1 Clase II
(HLA-DR)
b2m b2 2
3

Polimorfismo en el MHC afecta a los peptidos de union a antigenos

Las variantes alelicas pueden diferir de 20 amino acidos
Residuos polimórficos de una molécula CMH de clase I
Unión de péptidos a moléculas CMH
TIPOS DE RECHAZOS
MECANISMO INMUNE DEL RECHAZO
 Tipo II : Citotóxico
Antígeno

Complemento

Ig G
Ig G

Lisis,
Fagocitosis
o Estimulación
MECANISMO INMUNE DEL RECHAZO
Tipo III : Reacciones Mediadas por Complejos
Inmunes

Antígeno Neutrófilo
Ac
Complemento

C3a, C4a, C5a

Plaquetas Vaso Sanguíneo

MECANISMO INMUNE DEL RECHAZO
Tipo IV : Hipersensibilidad mediada por Células

Linfocito T
Receptor antigénico
específico

Liberación
de Citoquinas
RECEPTOR Y PARTES A SUSTITUIR
TIPOS DE INJERTOS:

Autoinjerto: Injerto del tejido propio del huésped.

Isoinjerto: Entre individuos genéticamente

iguales ( ejm. gemelos idénticos)

Aloinjerto: Entre miembros de una especie

pero genéticamente diferentes.

Xenoinjerto: Entre miembros de especies

diferentes.
 HLA y Enfermedad

• La expresión de alelos específicos HLA es uno de los factores

asociados a la susceptibilidad y resistencia a diferentes agentes
infecciosos. Como HTLV1, hepatitis B, malaria, tuberculosis,
VIH
• También se ha reconocido su relación con enfermedades de
tipo autoinmune
 HLA y Enfermedad – Teorías

• Las moléculas HLA sirven como receptores para diversos

patógenos
• Las semejanzas accidentales entre los antígenos del patógenos
y las moléculas HLA u otras del hospedero (mimetismo
molecular)
• Es posible que locus vecinos al gen sean los responsables de la
enfermedad.
 Ligamento Desequilibrado

La tendencia de ciertos alelos de 2 genes diferentes de ocurrir en una población mas

frecuentemente en el mismo haplotipo de lo espectado.

Ejem:
Haplotipo A1 y B8 en europeos:
A1 tiene frecuencia de 0.17
B8 tiene una frecuencia de 0.11

Frecuencia presumible de la asociacion A1 B8

0.17 x 0.11 = 0.019
pero la frecuencia observada es de 0.08 entonces hay un ligamento desequilibrado
 RIESGO RELATIVO:

RR= RIESGO DE PTAR. LA ENFERM. MARC POSITIVO

RIESGO DE PTAR. LA ENFERM. MARC NEGATIVO
 Asociación HLA y Enfermedad

• Artritis reumatoide DR4

• Esclerosis múltiple DR2
• Miastenia gravis DR3
• Enfermedad celiaca DR3, DR7
• Diabetes mellitus ID DR3 y DR4
• Espondilitis anquilosante B27 (90%)
• Enfermedad de Reiter B27
• Narcolepsia DR2
 ENFERMEDADES ASOCIADAS A HLA

ENFERMEDAD HLA RIESGO RELATIVO

E. ANQUILOSANTE B27 87.8

ENF. REITER B27 35.9

A.REUMATOIDE DR4 4.0

PSORIASIS A1 2.1
B13 8.7
B37 8.1
CW6 4.3

ENF.GRAVES B8 2.5
B35 5.0

HEMOCROMATOSIS A3 9.0