NUTRICIÓN Y CULTIVO DE

MICROORGANIMOS
 USO DE NUTRIENTES

• GENERACIÓN DE MATERIAL CELULAR

• MANUTENCIÓN DE ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA Y DE TRANSPORTE
• PRODUCCIÓN DE ENERGÍA
 COMPOSICIÓN QUÍMICA DE
MICROORGANISMOS

• AGUA: 80 – 90% (FORMAS

VEGETATIVAS)
• MATERIA SECA: MACROMOLÉCULAS
(PROTEÍNAS, ÁCIDOS NUCLEICOS,
LÍPIDOS, POLISACÁRIDOS)
PRECURSORES DE
MACROMOLÉCULAS
 ELEMENTOS PRINCIPALES

• MACROELEMENTOS: C, O, H, N, P, S,
Ca, K, Fe, Mg
• OLIGOELEMENTOS: Zn, Mn, Co, Cu, Ni,
Mo, Se
 FUENTES DE ELEMENTOS
• C: CO2, COMPUESTOS ORGÁNICOS
• H: AGUA, COMPUESTOS ORGÁNICOS
• O: AGUA, OXÍGENO GASEOSO
• N: NH3, NO3
• P: COMPUESTOS ORGÁNICOS (AA)
• S: SH2, COMPUESTOS ORGÁNICOS
• K, Mg, Ca, Na, Fe: IONES
 UTILIZACIÓN DE CARBONO

• AUTOTROFOS: USAN CO2 COMO ÚNICA

O PRINCIPAL FUENTE DE C
• HETEROTOFOS: USAN SUSTANCIAS
ORGÁNICAS PREFORMADAS
REDUCIDAS
FACTORES DE CRECIMIENTO
• COMPUESTOS ORGÁNICOS
NECESARIOS COMO PRECURSORES
QUE NO PUEDEN SER SINTETIZADOS
• AMINOÁCIDOS, PURINAS Y
PIRIMI-DINAS, VITAMINAS
(COFACTORES)
• SUMINISTRADOS EN MEZCLAS
COMPLEJAS
 CULTIVO DE ORGANISMOS

• PROVEER UN MEDIO ADECUADO PARA

EL CRECIMIENTO
• OBTENER UN CULTIVO PURO
 MEDIOS DE CULTIVO
• MEDIOS SINTÉTICOS O DEFINIDOS: SE
CONOCE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA Y
CANTIDADES DE COMPONENTES
• MEDIOS COMPLEJOS: CONTIENEN
ALGUNOS COMPONENTES DE
COMPOSICIÓN QUÍMICA NO
TOTAL-MENTE DEFINIDA
MEDIOS DE CULTIVO
 MEDIOS COMPLEJOS
• SIMPLES: BAJOS REQUERIMIENTOS
• ENRIQUECIDOS: ADICIÓN DE SANGRE,
SUERO, etc.
• SELECTIVOS: FAVORECEN EL
CRECIMIENTO DE ALGUNOS TIPOS DE
ORGANISMOS
• DIFERENCIALES: DESTACAN
CARACTE-RÍSTICAS PROPIAS DE UN
ORGANISMO
 CULTIVOS PUROS

• OBTENCIÓN DE COLONIAS AISLADAS

• PLACAS DE PETRI
• MEDIOS SÓLIDOS: AGAR AL 1,5%
• UN ORGANISMO DA ORIGEN A UNA
COLONIA
 SIEMBRA DE
MICROORGANISMOS

• EN PLACA POR ESTRÍA

• EN PLACA EN SUPERFICIE O POR
EXTENSIÓN
• EN PROFUNDIDAD O POR VERTIDO
PLACA DE PETRI
SIEMBRA POR ESTRÍA
 EFECTO DE FACTORES
AMBIENTALES
• TEMPERATURA
• ACIDEZ Y ALCALINIDAD (pH)
• NECESIDADES DE OXÍGENO
• PRESIÓN OSMÓTICA
 TEMPERATURA

• INFLUENCIA VELOCIDAD DE
REACCIONES ENZIMÁTICAS
• TEMPERATURAS “CARDINALES”
• MÍNIMA, ÓPTIMA, MÁXIMA
 CLASIFICACIÓN

• PSICRÓFILOS (0º - 15º - 20º)

• PSICRÓFILOS FACULTATIVOS:
CRECEN A 0º, MÁXIMA ENTRE 20-30º Y
RESISTEN HASTA 40ºC
• RESPONSABLES DE PUTREFACCIÓN
DE ALIMENTOS REFRIGERADOS
 CLASIFICACIÓN

• MESÓFILOS: RANGO ENTRE 15 Y 45ºC

(MAYORÍA DE PATÓGENOS DE
ANIMALES Y HOMBRE)
• TERMÓFILOS: ÓPTIMA POR ENCIMA
DE 45ºC Y MÁXIMA SUPERIOR A 65ºC
ESTUFA DE CULTIVO
 ACIDEZ Y ALCALINIDAD

• MAYORÍA ENTRE pH 4 y 9 (ÓPTIMO 7)

• HONGOS: 4,5 – 6
• BACTERIAS ACIDÓFILAS (Thiobacillus)
y ALCALÓFILAS (Bacillus)
• REGULACIÓN CON BUFFERS EN
MEDIOS DE CULTIVO
 RELACIÓN CON EL O2

• AEROBIO ESTRICTO: DEPENDE POR

COMPLETO DEL O2 ATMOSFÉRICO
• MICROAERÓFILO: REQUIERE MENOR
CONCENTRACIÓN DE O2 (<21%)
• ANAEROBIO ESTRICTO: NO TOLERAN
PRESENCIA DE O2
 RELACIÓN CON EL O2

• ANAEROBIOS FACULTATIVOS
• ANAEROBIOS AEROTOLERANTES
• CRECIMIENTO EN EL LABORATORIO
(CULTIVOS AIREADOS, JARRA DE
ANAEROBIOS, etc.)
JARRA DE ANAEROBIOS
SOLUTOS Y PRESIÓN OSMÓTICA

• AMBIENTES DILUIDOS
• ALTA CONCENTRACIÓN DE SOLUTOS:
PLASMÓLISIS (MÉTODO DE
CONSERVACIÓN DE ALIMENTOS)
• ORGANISMOS HALÓFILOS
 CRECIMIENTO MICROBIANO
• CRECIMIENTO EQUILIBRADO: AUMENTO
DEL NÚMERO DE INDIVIDUOS DE UNA
POBLACIÓN CONCURRENTE CON EL
AUMENTO DE SUS CONSTITUYENTES
QUÍMICOS
• DUPLICACIÓN DEL NÚMERO DE
CÉLULAS Y DE LA BIOMASA
 CRECIMIENTO MICROBIANO
• DIVISIÓN: FISIÓN BINARIA O
BIPARTI-CIÓN (BACTERIAS) Y
GEMACIÓN (LEVADURAS)
• TIEMPO DE GENERACIÓN:
DUPLICACIÓN DE LA POBLACIÓN
MICROBIANA
 CURVA DE CRECIMIENTO
ESTACIONARIA

Log CÉL.
MUERTE
VIABLES EXPONENCIAL

LATENCIA

TIEMPO
 FASE DE LATENCIA
• LATENCIA: ADAPTACIÓN AL MEDIO,
ORGANISMOS METABÓLICAMENTE
ACTIVOS
• DEPENDE DE EDAD DEL INÓCULO Y
DIFERENCIA ENTRE EL MEDIO DE
CULTIVO DE PROCEDENCIA Y EL NUEVO
 FASE EXPONENCIAL

• CRECIMIENTO EQUILIBRADO A
VELOCIDAD CONSTANTE
• DEPENDE DE CONDICIONES
AMBIENTALES Y CARACTERÍSTICAS
INTRÍNSECAS
 FASE ESTACIONARIA
• AGOTAMIENTO DE NUTRIENTES
ESCENCIALES
• ACUMULACIÓN DE PRODUCTOS DE
DESECHO METABÓLICO
• NO SE APRECIA INCREMENTO NETO DE
LA POBLACIÓN
 FASE DE MUERTE
• FALTA DE ENERGÍA PARA
MANTENIMIENTO CELULAR
• DISMINUCIÓN DEL NÚMERO DE
CÉLULAS DEL CULTIVO
• VELOCIDAD EXPONENCIAL
• GENERALMENTE LISIS CELULAR
 CULTIVO CONTÍNUO

• POBLACIÓN MICROBIANA CRECIENDO

EN UN RECIPIENTE DE VOLUMEN
CONSTANTE AL QUE SE AÑADE MEDIO
FRESCO Y SE QUITA MEDIO USADO
• QUIMIOSTATO Y TURBIDOSTATO
MEDICIÓN DEL CRECIMIENTO

• RECUENTO DE CÉLULAS TOTALES:

CÁMARAS DE RECUENTO, RECUENTO
ELECTRÓNICO
• RECUENTO DE CÉLULAS VIABLES: EN
MEDIO SÓLIDO (PROFUNDIDAD O
SUPERFICIE)
MEDICIÓN DE MASA CELULAR
• DETERMINACIÓN DEL PESO SECO O
HÚMEDO DE LA CÉLULAS EN
VOLUMEN FIJO DEL CULTIVO
• CENTRIFUGACIÓN O FILTRACIÓN POR
MEMBRANA
 MEDICIÓN INDIRECTA
• TURBIDEZ: MEDICIÓN DE ABSORBANCIA
O DENSIDAD ÓPTICA (DO)
• DO: PROPORCIONAL A LA
CONCENTRACIÓN DE PARTÍCULAS
• OTRAS: PRODUCCIÓN DE ÁCIDO O GAS
EN ORGANISMOS FERMENTADORES