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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

VICERRECTORADO ACADÉMICO

UNIDAD DE PLANIFICACIÓN ACADÉMICA

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

CITOLOGÍA

TEMA:

“MONTAJE Y REPARACION DE PLACAS”

ESTUDIANTE: BRONCANO CAROLINA

DOCENTE: GISNELLA CEDEÑO

CURSO: TERCERO

PARALELO: “B”

PERIODO ACADEMICO

OCTUBRE 2018 – MARZO 2019

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PRÁCTICA N° 4

TEMA: MONTAJE Y REPARACION DE PLACAS

OBJETIVOS:

OBJETIVO GENERAL:

 Conocer la importancia y el funcionamiento de la técnica de montaje y la reparación


de placas citológicas.

OBJETIVOS ESPECIFICOS:

 Realizar el proceso de montaje y reparación de placas.


 Adquirir nueva información acerca de la técnica de montaje.
 Determinar las ventajas y desventajas de la técnica de montaje y la reparación de
placas citológicas.

MATERIALES

Materiales Reactivos Muestra


 Normas de bioseguridad  Neoclear  Placa
 Gorro  Resina, Entellan citológica,
 Guantes secreción
 Mascarilla vaginal
 Mandril
 Portaobjetos
 Cubreobjetos

FUNDAMENTO TEÓRICO CONTENIDO CIENTÍFICO

TÉCNICA DE MONTAJE

 El montaje es una técnica que se aplica sobre el espécimen luego de que este haya
sido teñido. Existen razones básicas para realizar la técnica de montaje el montaje.

 Protección del espécimen

 Señalización de campos

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 Archivo de la muestra

 Bioseguridad

Los medios más usados son los acuosos. Para de alguna manera corregir la deshidratación
que se provoca con el alcohol y xilol.

Actualmente las casas comerciales brindan excelentes medios de montaje que son
refringentes y de secado rápido como por ejemplo el permount y el entellan.

Se refiere a la adhesión de un cubreobjetos (0.17 mm. de espesor) sobre un portaobjetos con


la preparación teñida, mediante la colocación de un medio de montaje que presenta
propiedades ópticas especiales, con el objetivo básico de protegerla de "lesiones fisicas”
minimizando además la posibilidad de "blanqueamiento" (deterioro del colorante a
consecuencia de las oxidaciones) (1)

Si se examina al microscopio óptico, un preparado teñido sin montar, es más difícil percibir
detalles celulares, debido a que existe una gran diferencia de refracción de la luz entre el
portaobjeto, las células, sus eventuales agrupaciones y el aire. La dispersión de la luz a través
de estos elementos es distinta. La transparencia y la visibilidad no son lo mismo y presentan
una relación inversa. Cuanto más transparentes son las células, menos visibles son. Esta regla
se aplica fundamentalmente a las células sin teñir. A su vez, los elementos teñidos son más

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visibles, pudiéndoselos distinguir por sus colores, las diferentes tonalidades de sus estructuras
y morfología. (2)

Este procedimiento consiste en colocar encima del corte coloreado o un extendido una gota
de una sustancia adherente, diluida, generalmente en xilol (resina natural como el bálsamo de
Canadá o resinas sintéticas, cuyos índices de refracción son similares a los del vidrio) y
encima de ellos, una laminilla cubreobjetos, cuidando que no queden burbujas de aire entre la
resina.

A continuación, se deja que el xilol se evapore, y la resina adquiera solidez suficiente; para
ello las láminas se colocan en una platina caliente (45° 50° C) durante 24 a 48 horas y estarán
listas para ser observadas.

MEDIOS DE MONTAJE

 Resinas naturales

 Resinas sintéticas

 Resinas acuosa

Existen medios de montaje hidrosoluble y no hidrosoluble.

Medios hidrosolubles:

Gelatina de Kaiser

Gelatina

Jarabe de Von Apathy

Jarabe de Lillie y Ashburn

Medios no hidrosolubles:

En estos se subdividen en resinas naturales, artificiales y mixtos.

Resinas naturales: Balsamo de canada

Resina sintética: Flotex, Eukit

Resina Mixtas: Euparal

Características que tienen los medios de montaje:

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Tener un índice de refracción similar al del vidrio (1.518)

Ser miscible con tolueno y xileno

Ser químicamente inerte

Solidificar sin deformar o encoger las células.

No producir gránulos o grietas

No dañar los colorantes y fundamentalmente no debe modificar el color con el tiempo.

Pautas para realizar la técnica de montaje

La deshidratación es primordial para evitar la aparición de gotitas de agua en el medio de


montaje. Si esto ocurre, se puede solucionar sumergiendo otra vez las secciones en xileno,
alcohol absoluto y en alcoholes de gradación decreciente, hasta su hidratación, y repitiendo la
deshidratación en mejores condiciones (soluciones nuevas, alargar tiempos, etc.). Sin
embargo, en algunos casos el tiempo en alcohol determina el grado de tinción, por los que
habría que volver a pasar de nuevo por las soluciones de colorantes.

El cubreobjetos tiene que estar limpio y hay que manipularlo cogiéndolo por los bordes.
Además, no deben quedar burbujas de aire durante el montaje y hay que tener cuidado con la
cantidad de medio de montaje a utilizar: si es poco podría no cubrir toda la sección cuando se
evapore el xileno. Si se añade un exceso de medio de montaje se generará una capa tan gruesa
que no se podrán utilizar objetivos de gran aumento, como el de 100x. Estos objetivos tienen
una distancia focal muy corta, es decir, las lentes de estos objetivos deben estar muy
próximas a la muestra para poder enfocarla. y el aumento del espesor normal del medio de
montaje se lo impedirá. Del mismo modo, debe usarse un medio de montaje lo más parecido
a cómo se obtuvo de la casa comercial puesto que con el tiempo los medios de montaje
suelen perder el disolvente y se vuelven más viscosos. Esto hace que sea más difícil
conseguir una capa delgada y por tanto estamos en el mismo problema mencionado
anteriormente.

IMPORTANCIA DE LA TÉCNICA DE MONTAJE

Para el análisis microscópico, las secciones de tejido teñido, las preparaciones citológicas
ginecológicas, las muestras bacteriológicas o los frotis de sangre hematológica se montan
generalmente con medios de montaje acuosos o no acuosos y se cubren con un vidrio de
cobertura si es necesario almacenarlos durante un período prolongado. Esto permite una
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conservación estable y un almacenamiento virtualmente permanente de la muestra. También
garantiza el cumplimiento de las directrices internacionales, que requieren que las muestras
clínicas preparadas para el diagnóstico se almacenen durante 10 años. La elección del medio
de montaje depende del protocolo y debe contener solvente o agua, que se aplica a la muestra
antes del montaje. (3)

Instructivo para realizar el montaje de las láminas.

1. Tomar la lámina teñida por el extremo e introducimos en la bandeja de neoclear.

2. Tomar por el extremo de la laminilla, ponemos sobre el papel absorbente para quitar el
exceso del neoclear.

3. Revisar con buena luz de qué lado de la lámina está el extendido (punto crítico) y revisar
que esté seca la parte posterior de la muestra, antes de iniciar el montaje.

4. Aplicar tres gotas de entellan sobre el portaobjetos ni tan cerca ni tal alejadas.

5. Colocar sobre éste el cubreobjetos de una manera muy lenta para evitar producir las
burbujas.

6. Si producimos burbujas dentro de la muestra debemos obligatoriamente manipular el cubre


objeto para eliminar el exceso del entellan con el papel absorbente.

7. Colocarla sobre una bandeja para su secado por 1 hora y están listas para ser observadas

PROCEDIMIENTO DE MONTAJE

1. Tomar la lámina teñida por el extremo e introducimos en la bandeja de neoclear.

2. Tomar por el extremo de la laminilla, ponemos sobre el papel absorbente para quitar el
exceso del neoclear.

3. Revisar con buena luz de qué lado de la lámina está el extendido (punto crítico) y revisar
que esté seca la parte posterior de la muestra, antes de iniciar el montaje.

4. Aplicar tres gotas de entellan sobre el portaobjetos ni tan cerca ni tal alejadas.

5. Colocar sobre éste el cubreobjetos de una manera muy lenta para evitar producir las
burbujas.

6. Si producimos burbujas dentro de la muestra debemos obligatoriamente manipular el cubre


objeto para eliminar el exceso del entellan con el papel absorbente.

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7. Colocarla sobre una bandeja para su secado por 1 hora y están listas para ser observadas

PROCEDIMIENTO DE REPARACIÓN DE PLACA

Tomar una placa

Armar la placa que está rota

Colocamos 4 gotas de entellan sobre la placa

Colocamos la placa rota sobre el portaobjeto

PROCEDIMIENTO DE MONTAJE CON FOTOS

Foto1: introducimos la laminilla en el Foto2: sacamos el excedente con una


neoclear toallita absorbente.

Foto3: colocamos la laminilla en una Foto4: procedemos a colocar el cubre objeto,


superficie plana, procedemos a colocar la gota tocamos la primera gota del entellan y soltamos
de resina de derecha a izquierda. suavemente para no producir burbujas.

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Foto5: dejamos que se disperse por si Foto6: la muestra está lista para
sola la resina, sobre una superficie plana. observar en el microscopio

Foto7: Resultados

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PROCEDIMIENTO DE REPARACION DE PLACA

Foto1: reparar la placa Foto2: colocamos tres gotas de


resina sobre un portaobjeto.

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Foto3: empezamos a reparar la placa Foto4: placa reparada

Foto4: limpiamos la placa con


neoclear, lista para observar

RESULTADOS:

 Células intermedias con Citoplasma basófilo, núcleo grande

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CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

CONCLUSIONES

 Realizamos el proceso de montaje y reparación de placas.


 Adquirimos nueva información acerca de la técnica de montaje.
 Determinar las ventajas y desventajas de la técnica de montaje y la reparación de
placas citológicas.
 Observamos e identificamos células basales.

RECOMENDACIÓNES:

 Utilizar las normas de bioseguridad.


 Utilizar todas las medidas de prevención para manipular las muestras.
 Tomar mucha atencion a las indicaciones planteadas por el docente.
 Al terminar la practica colocar todos los desechos en los respectivos tachos de basura.
 Realizar el respectivo lavado de manos.

BIBLIOGRAFIA

1. (s.f.). Obtenido de Montaje definitivo de las preparaciones:


http://www.laboduchene.com/MONTAJE.pdf

2. Nora , B. Merck. (2015). Obtenido de Montaje: http://www.merckmillipore.com

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