1.1.

CONCLUSIONES

A partir de la colección de cepas aisladas de la laguna Busch Kalina Potosí –

Bolivia, se seleccionó con éxito la Cepa 8, se logró biotransformar α-pineno
utilizando microorganismos halófilos, los productos de biotransformación se
consideran productos naturales ya que fueron obtenidos a partir de sustratos
naturales a través de un proceso biotecnológico. A partir de este proyecto se
concluye que:

 Se determinó que los microorganismos halófilos seleccionados son

capaces de biotransformar α-pineno en un periodo de 24 horas a
microescala, bajo condiciones de pH 7, temperatura 37°C y 180 rpm
de velocidad de agitación. Por medio de la evaluación
cromatográfica de la capacidad transformadora de las bacterias
halófilas se analizó la separación de la mezcla de compuestos
obtenidos en la biotransformación de α-pineno con la cepa 3 nativa
de la laguna Coruto y la cepa 8 nativa de la laguna Busch Kalina, se
seleccionó la Cepa 8 por ser considerada potencialmente
biotrnaformadora, cuyo producto de fermentación mostró un recorrido
(Rf) diferente al del sustrato.

 Se logró optimizar una metodología para la purificación de los

compuestos orgánicos aplicando la técnica de cromatografÍa en capa
fina preparativa como criterio de pureza e identificación de sustancias,
al realizar variaciones en la formulación y proporción de las fases
móviles se determinó que los compuestos biotransformados tienen
mayor afinidad a la fase móvil polar debido a que obtuvieron una
mejor separación y resolución de bandas cromatograficas.

 En el perfil cromatográfico se Identificó dos compuestos producidos

durante el proceso de biotrasformación, mediante cromatografía de
gases que indica la composición de muestras analizadas en un
equipo Simatsu modelo CG-14B, utilizando una columna capilar
Sumelcom (0.25mm x30mx0.25µm) con temperatura máxima de
350°C,a la cual se inyecto 0.2µL de muestra disueltas en acetato de
etilo. La temperatura del inyector fue de 250 °C. Se utilizó hidrogeno
como gas de arrastre a un flujo de 1,00 mL/min y una presión de 7.52
psi. Programa de operación: temperatura inicial: 40 °C durante 1.0
min, rampa de calentamiento 2 °C/min, temperatura final de 220 °C
durante 3.0 min, temperatura del detector 250 °C en modo scan.
Tiempo total de la corrida 25.0 min. El reconocimiento de los
compuestos individuales se realizó mediante la comparación de los
patrones de fraccionamiento de las lecturas con microorganismos y α-
pineno respecto a una muestra en blanco (medio de cultivo). La
 composición relativa de los compuestos se estimó mediante el
análisis de relación de áreas.

En conclusión, la cromatografia de gases permitió la identificación de

los principales metabolitos presentes en los productos
biotransformados, cabe destacar que los resultados constituyen
aspectos novedosos que contribuirán a ampliar el conocimiento
acerca de la composición química del α-pineno.

 Se diseñó un biorreactor de 300 litros de capacidad, que cumpla las

condiciones geométricas y de aireación, se calculó la potencia
necesaria para el funcionamiento del agitador y los parámetros de
diseño del serpentín para el intercambio de calor. La potencia
estimada de agitación es de aproximadamente 1.5 hp.