Explorați Cărți electronice
Categorii
Explorați Cărți audio
Categorii
Explorați Reviste
Categorii
Explorați Documente
Categorii
1
b. Sterilizarea la pupinel, etuva termoreglabila- sterilizatorul cu aer
cald este un cuptor cu peretii dubli, intre care se gaseste sursa de
caldura.
-peretii interiori sunt perforati pt a permite circulatia aerului cald.
-agentul de sterilizare este aerul cald si uscat la 180°C la o ora, din
momentul atingerii temperaturii de sterilizare in interiorul incarcaturii.
3. decontaminarea chimica-exemple:
-depinde de natura substantei dezinfectante folosite fiind direct
proportionala cu concentratia acesteia si timpul de actiune , in timp ce
prezenta materiilor organice (sange, urina, materii fecale, culturi
bacterigene) si a formelor sporulate reduc efectul dezinfectant.
-sunt: -dezinfectante puternice;
-dezinfectante medii;
-dezinfectante slabe.
1. Dezinfectante puternice:
Glutaraldehida
Formaldehida
Amestec sulfocromic-acid sulfuric+bicromat de
potasiu+apa
Peroxid de hidrogen
Acid peracetic
Hipoclorit de sodiu.
2. Dezinfectante medii:
Iodofori (compusi iodati)
Compusi clorurati
Alcool-etilic, izopropilic (vol 70%)
Compusi fenolici
Detergenti
2
3. Dezinfectante slabe:
Compusi cuaternari de amoniu
Dezinfectante ce contin fenoli, iodofori si agenti de spumare.
5.urocultura:
-recoltarea urinei pt urocultura este indicata in suspiciunea de infectie
urinara;
-recoltarea se face in flacoane sterile de unica folosinta,
-pacientul va incepe sa urineze-prima portiune a jetului sa elimine
flora de la nivelul uretrei terminale, si a doua parte a jetului o va urina
direct in flacon-2-3 ml.
-la bolnavii care nu.si pot controla mictiunea (copii, adulti
inconstienti) si la cei la care se efectueaza sondaj vezical evacuator
(adenom de prostata), recoltarea se face pe sonda.
3
-urina va fi pastrata la temperatura camerei maxim 2 h pana la
insamantare, sau la frigider maxim cateva ore.
6.coprocultura:
-este indicata in bolile diareice, in febra tifoida si paratifoida.
-recoltarea se face in coprorecoltoare sterile, cu mediu de conservare
si transport.
-la bolnavii cu diaree, materiile fecale se recolteaza din scaunul emis
intr.un recipient steril, fara urme de detergenti sau dezinfectanti.
-cu lingurita se va recolta o cantitate mica din proba, in special cu
sange sau mucus, apoi va fi introdusa in coprorecoltor, in mediu de
conservare si transport Carry-Blair.
-pt suspectii de portaj de enterobacterii patogene, recoltarea materiilor
fecale se va face dupa administrarea unui purgativ salin (sulfat de Na
si de Mg).
7.hemocultura:
-are indicatie pt suspiciunea de bacteriemie, septicemie sau
endocardita bacteriana.
-de asemenea hemocultura mai este indicata in starile febrile
prelungite fara o cauza decelabila.
-punctia venoasa trebuie facuta in conditii de asepsie, folosind pt
dezinfectia pielii la locul punctiei venoase-alcool 80-95% si compusi
iodati: tinctura de iod sau betadina.
-volumul de sange indicat pt hemocultura este de 20 ml la adult si 1-5
ml la copil.
-sangele se recolteaza cu seringa si se descarca in mediile de cultura
lichide speciale; de obicei se foloseste un set de 2 medii de cultura:
aerobe si anaerobe.
-in cazul in care pacientii au primit tratament cu antibiotice, exista
medii de cultura aerobe si anaerobe cu inhibitori de antibiotice.
-incubarea hemoculturii se face la 37°C, timp de o saptamana.
4
-daca dupa o saptamana hemocultura nu s.a pozitivat, rezultatul
definitiv va fi negativ (hemocultura sterila).
8.LCR:
-examenul LCR este indicat in suspiciunea de meningita: febra,
cefalee, fotofobie, redoarea cefei.
-recoltarea LCR se face prin punctie lombara, in conditii de asepsie
stricta, dupa dezinfectia pielii cu betadina sau alti compusi iodati.
-prelevarea se face in seringa, fara a aspira, apoi se descarca in
flacoane sterile cu dop.
-este de preferat sa existe flacoane diferite: pt cultura, examenul
biochimic si cel microscopic.
-la cel macroscopic LCR normal este incolor, limpede, transparent; in
meningitele bacteriene apare tulbure, galbui sau verzui.
-culturile se fac pe medii solide sau lichide.
-din LCR se numara elementele (celulele) in camarea de numarat
Fuchs-Rosenthal; valoarea normala a numarului de elemente celulare
este mai mica de 5 elem la 1 ml, acestea fiind limfocite.
-daca numarul depaseste limitele fiziologice, este necesara efectuarea
unui nou frotiu colorat Giemsa pt aprecierea raportului dintre
mononucleare si plinucleare.
-LCR este apoi centrifugat la 1500r/min la 15 minute.
-supernatantul este separat si va fi folosit la examenul biochimic:
dozarea glucozei, proteinelor, clorurilor, etc.
-dezavantaje:
Microorganismele sunt vii, existand posibilitatea contaminarii.
Daca examinarea nu se face in 10-15 minute, preparatul se usuca
si examinarea devine imposibila.
Nu poate fi pastrat.
11.coloratiile simple:
6
-coloratia albastru de metilen-este o coloratie simpla, rapida,
neagresiva asupra bacteriilor prin lipsa unor timpi de decolorare si
recolorare.
-permite vizualizarea capsulei bacteriene sub forma unui halou clar in
jurul acestora.
-tehnica coloratiei cu albastru de metilen:
Frotiul bine uscat se acopera cu solutie de albastru de metilen
1%, timp de 2-3 min;
Se scurge colorantul si se spala cu apa
Se usuca in stativ, la temperatura camerei.
12.coloratia Gram:
-este cea mai utilizata coloratie in bacteriologie;
-permite vizualizarea marii majoritati a bacteriilor, cu incadrarea in
categoriile morfologice: coci, bacili, si in diferentierea lor in cele doua
mari calse: bacterii Gram-pozitive si bacterii Gram-negative.
7
-la examenul microscopic, unele bacterii apar colorate in violet
(Gram-pozitive), altele in roz (Gram-negative).
-diferenta de colorare se datoreaza structurii diferite a peretelui celular
la cele doua categorii de bacterii: unele au peretele format din mai
multe straturi de peptidoglican, impenetrabil pt alcool-acetona; altele
au peretele format din putine straturi de peptidoglican si bogate in
lipide, ce se solubilizeaza in alcool-acetona.
13.coloratia Ziehl-Neelsen:
-evidentiaza bacterii acid-alcoolo-rezistente, din genurile
Mycobacterium si Nocardia.
-reactivi neceasri:
Fuxina fenicata Ziehl 1%;
Solutie alcool-acid (alcool 96% si acid clorhidric sau azotic).
16.antibiograma:
-antibiograma= testarea sensibilitatii in vitro la substantele
antibacteriene.
Antibiograma difuzimetrica standardizata (metoda Kirby-Bauer):
-mediul de cultura utilizat este de regula Muller-Hinton, mediu
nutritiv si fara substante inhibitoare, pH 7.2-7.4.
-mediul se toarna in placi Petri.
10
-o exceptie o reprezinta antibiograma pentru streptococi-unde mediul
de cultura este geloza-sange.
-discurile cu antibiotice contin cantitati standardizate din fiecare
antibiotic.
-vor fi folosite 2-3 antibiotice din fiecare clasa si cateva antibiotice de
rezerva.
-vor fi alese in functie de tulpina bacteriana testata si eventual de
sediul infectiei:
Setul de antibiotice pentru testarea stafilococilor;
Setul de antibiotice pentru testarea streptococilor;
Setul de antibiotice pentru bacilii Gram-negativi;
Setul de antibiotice pentru bacteriile izolate din infectiile urinare.
Antibiograma prin dilutia antibioticului in mediu lichid-metoda
cantitativa ce permite determinarea concentratiei minime inhibitorii si
concentratiei minime bactericide a unui antibiotic fata de tulpina
testata.
-este o metoda laborioasa, rezervata cercetarii si situatiilor in care este
necesara administrarea de doze mari de antibiotice (endocardite
septicemii).
Antibiograma prin dilutia antibioticului in mediu solid- se prepara
solutiile stoc de antibiotic din care se vor face dilutii binare, apoi
dilutia finala 1:10 in geloza topita Muller Hinton;
-pentru testarea streptococilor, la geloza topita se adauga 5% sange
defibrinat de cal sau de berbec.
-insamantarea mediului se va face cu ansa calibrata de 0,001 ml care
se incarca cu suspensie.
11
-sunt prezenti ca saprofiti in multiple ecosisteme ale omului si ale
animalelor-in piele, tract intestinal, caile respiratorii superioare, vagin,
etc.
-stafilococii pot deveni patogeni daca sunt prezente conditii
favorizante: solutii de continuitate ale pielii si ale mucoaselor,
scaderea imunitatii, etc.
-prelevarea produsului patologic se face cu tamponul steril, stergand
zona afectata a tegumentului in caz de leziuni cutanate; tot cu
tamponul steril se recolteaza puroiul.
-din produsele patologice se pot efectua frotiuri colorate albastru de
metilen sau Gram care se examineaza la microscopul optic, cu
obiectivul de 100 x cu imersie.
-insamantarea produselor necontaminate si a celor moderat
contaminate se face in bulion si pe geloza-sange.
-stafilococii sunt bacterii nepretentioase care cresc pe geloza simpla,
nutritiva, de preferat geloza pentru observarea hemolizei.
-se foloseste geloza cu sange defibrinat de berbec 7% si NU sange de
om-ce contine inhibitori nespecifici si eventual anticorpi
antistafilococici.
-daca produsul patologic este lichid de varsatura, materii fecale sau
alimente, in cazuri de toxiinfectie alimentara, atunci este indicata
folosirea mediilor selective hiperclorurate Chapmann lichid si solid.
-dupa o incubatie de 18-24 h la 37 °C se obtine o cultura abundenta si
caracteristica.
-hemoliza pe mediul geloza-sange-coloniile de S.aureus (stafilococ
auriu) pot fi inconjurate de o zona clara de hemoliza completa.
-catalaza-enzima care elibereaza O2 din peroxid de hidrogen este
prezenta la genurile Micrococcus si Staphylococcus si absenta la
Streptococaceae.
12
-streptococii sunt bacterii pretentioase nutritiv, mediul de electie fiind
geloza-sange.
-exista mai multe genuri de streptococi cu importanta pt om: genul
Streptococcus, genul Enterococcus, genul Lactococcus.
-in functie de hemoliza, se deosebesc:
Streptococii ß-hemolitici-produc hemoliza completa;
Streptococii alfa-hemolitici-produc hemoliza partiala
Streptococii alfa’-hemolitici-produc o zona de hemoliza
incompleta delimitata de o zona ingusta de hemoliza incompleta
Streptococii nehemolitici (gamma).
13
-pneumococii sunt sensibili la actiunea bilei si sarurilor biliare ce ii
distrug; la pneumococi apare fenomenul de autoliza in culturile vechi
in mediul lichid.
-pneumococii sunt bacterii conditionat-patogene, ce determina
pneumonia pneumococica, otita medie, mastoidita.
14
-meningococii sunt sensibili la penicilina, ampicilina, cefalosporine,
Cloramfenicol, tetracicline, macrolide, etc.
-vaccinul antimeningococic este pentru serogrupurile A si C.
17