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1a avaliação: 06 de abril
2a avaliação: 08/06
2a chamada 15/06
Final: 22/06
As bactérias e fungos são organismos celulares, enquanto os vírus são acelulares. Segundo
Tortora há três domínios que conceituam os seres vivos. Os três domínios abrigam:
segundo Wose, 1978.
I- Archea
II- Bacteria
III- Eucarya
São 25 reinos divididos entres estes três domínios, mas que são separados com base na
existência da célula enquanto unidade morfofuncional do ser vivo. Desta forma, os vírus não
estariam incluídos como seres vivos. Entretanto há outra ótica que se trata d substâncias
químicas vitais (proteínas e a)idos nucleico). E os vírus são constituídos destas substâncias
vitais . Assim, dependendo da óptica e do autor os vírus e príons podem ser ou
considerados seres vivos.
A microscopia óptica, com auxílio da objetiva de 100X com óleo de imersão normalmente é
a tecnica mais eficazmente para identificar a morfologia. A microscopia óptica oferece varias
informações como a coloração de grã e o arranjo das bactérias.
O tamanho das bactetias variam normalmente entre 2-6 micrometro de comprimento x 1-2
micrômetro de espessura. As formas básicas: cocos (esferas), bacilos (bastões) e espirais.
Existem as bactérias pleomorficas que representam um grupo muito pequeno. Por exemplo
os micoplasma da ordem molicutis
Diferentes morfologias de acordo com o método utilizado para estudo (por exemplo, campo
escuro, imunofluorescencia, esfregaço de meio de culturacorados pelo Giemsa, fixação em
agar.
Cocos
Os cocos são as formas bacterianas que mais se arranjam. os de número 1, 2, 3 e 6 são os
mais importantes pois os tétrade e sarcomas não têm importância na prática clínica.
1. Cocos
2. Diplococo se organizam aos pares:
a. Neisseria meningitidis são causadoras de meningite e podem ser
visualizadas em líquor cefalorraquidiano. É extremamente agressiva (pode
levar o indivíduo ao óbito em 48h). A punção do LCR é realizada pelo
médico. É feita uma coloração de gram.
b. Enterococcus faecalis: são um dos tipos mais comuns em infecções
hospitalares e veem se mostrando altamente resistentes a dois tipos
importantes de antibióticos. As bactérias resistentes a dois ou mais tipos de
antibióticos são chamadas de “multirresistentes”. São bactérias do intestino e
lembram os estreptococos. Formam pontes citoplasmática
3. Estreptococo formam uma linha de cocos = colar de pérolas
a. Streptococcus pyogenes os quais podem ser identificado sem faringe são
microbiota da faringe normal
4. Tétrade
5. Sarcinas
6. Estafilococo tem formato de cacho de uva
a. Staphylococcus aureus e epidermidis são da microbiota normal da pele.
Bacilos
A maioria dos bacilos não se arranjam e apresentam-se em células isoladas.
1. Bacilos únicos : maioria
a. Escherichia colículo. É microbiota normal do intestino, mas provoca infecção
urinária em mulheres (uretrite, por retorno da limpeza anal) e pode ascender
para bexiga (cistite) e para os rins (pielonefrite).
2. Diplobacilos
3. Estreptobacilos são também chamados de cordão bacilar.
a. Mycobacterium tuberculosis: normalmente identificado em cultura de escarro
de paciente infectado. Normalmente não se identifica fácil o bacilo em
escarro, normalmente se usa aspirado brônquico.
4. Cocobacilos: forma ou arranjo mais difícil de ser visualizado (Tortora considera
cocobacilos como arranjos de bacilos).
a. Heaemophilus influenza normalmente apresenta-se associado a neutrofilos
(neutrofilos) devido a infecção bacteriana. Pode ser associada à quadros de
meningite.
Bactérias espirais
Estas bacias nações arranjam. São três tipos :
1. Vibrião
a. Víbrio cholerae: causadores de cólera.
2. Espirilo
a. O gênero spirlum ainda não está associado às doenças e por isso não tem
tanta importância clínica. Veremos quando for importante comentar.
3. Espiroqueta
a. Treponema pallidum: causador da sífilis
b. Leptospira interrogans: causador da leptospirose.
METABOLISMO BACTERIANO
Introdução
Catabolismo
Somos serem de quimioheterotroficos onde metabolizamos energia amaráveis de
compostos orgânicos onde há ganho e perda de elétrons energéticos. Desta forma para se
colonizarem em determinados hospedeiros, esse último deve dar condições da mesma
crescer.
23/02/2018
Metabolismo bacteriano
Introdução
É a soma de todas e todas as reações químicas dentro de um organismo vivo. Só aha
crescimento bacteriano quando as bactérias metabolizam.
A via glicolítica gera duas moléculas de ácido pirulito/piruvato.
Algumas bactérias são da microbiota normal e podem se tornar patógenos quando há perda
do equilíbrio biológico. Por exemplo as E. coli. Outras nunca seriam microbiotas, como a
Salmonela.
Algumas substâncias do ciclo do ácido cítrico são utilizadores para fazer identificam
bactéria. Esta identificação é feita de em meio de cultura. Como a maioria tem com bege em
meio de cultura padrão, há tanto meios espécies que são estimulados na ausência do ácido
fumárico e que se permitir o crescimento da bactéria ela não deve portanto ser fermentativa.
A respiração aeróbica cresce mais rapidamente e por tanto precisam produzir muitas
moléculas de ATP. São produzidas 38 moléculas de ATP e o oxigênio é o aceitar final. Na
respiração anaeróbica há produção de 38>......> 2 moléculas de ATP.. NA fermentação há
PRODUÇÃO DE 2 moléculas de ATP.
As bactérias são muito diversas e podem utilizar substratos diversos, não só os citados. Por
isso podem metabolizar energia por outras vias como a via da PENTOSE FOSFATO (ex. A
E. coli, mesenteróides e Enterococcus fecalis. Outra via conhecida é a via
ENTNER-DOUDOROFF (ex.: Pseudomonas, não é usada por bactérias Gram positivas).
Algumas bactérias tem como fonte e energia alia enquanto outra usam o CO2.
Bactérias quimioheterotroficas
Crescimento - são capazes de realizará crescimento in vivo e eis vitro.
In vivo depende da relação parasita-hospedeiro
In vitro depene de meio de cultura e desta forma favorece a identificarão das bactérias.
Quando produzo um meio de cultura com determinados compostos orgânico isso pode
auxiliar na identificarão do tipo bacteriano.
O suprimento in vivo pode ser considerado quase infinito, enquanto que in vitro é necessária
a manutenção das condições adequadas.
Classificação das bactérias quanto ao requerimento de oxigênio.
Algumas bactérias que não crescem em meio de cultura artificial precisam de apuros fatores
de crescimento como vitaminas, aminoácidos e fragmentos de ácidos nucleicos. O
acrescimento desses nutrientes específicas são importantes para a correta identificarão e
crescimento dessa bactérias.
REPRODUÇÃO BACTERIANA
Crescimento Bacteriano
02/03/2018
Obs.: entretanto a grande desvantagem do antibiótico bacteriostático é que esse, por não
matar todos os incomuns, pode provocar resistência bacteriana nas bactérias vivas e
provocar até a cronificação da doença. Esse mecanismo pode explicar as infeções
recorrentes (otite recorrente ou infecção urinária recorrente).
Os antibióticos bactericidas podem se tornar bacteriostático para algumas cepas. Nesse
caso devemos estar atentos para que, se houver recorrência bacteriana, deve se trocar por
outro antibiótico.
Estes fatores devem ser considerados junto com os aspectos de “controle” bacteriano.
A hipobiose que ocorre Baixo da temperatura de 5grUs ocorre porque ocorre congelamento
da água na abertura dos portos bacterianos e o fluxo de nutrientes diminui. Dest forma
abaixa sua atividade metabólica impedindo seu crescimento, mas não mata a bactéria.
Faixa de tolerância do pH
A maioria das bactérias crescem em pH entre 6,0 e 7,5. Não toleram. Em pH mentistes que
4,0. O víbrio chelerae crescem em pH altamente alcalino em torno de 9,5.
As células devem vivem em meio isotônico. Se bactéria cai em ambiente com excesso de
sal ela murcha e perde todo seu conteúdo citoplasmatico. Por isso alguns produtos
alimentícios são conservado em sal (exemplo é o bacalhau). O inverso também não é
tolerado pelas bactérias. Se colocada em meio hipotônico isso provocará um entrada i tens
de água que pode levAr a lise bacteriana.
As bactérias são não halófilas (não toleram sal). H uma bactéria que não necessita mas
tolera o sal (halótolerNtes) são os staphilococcus aureus. O vibrio fischeri são adaptadas ao
sal e podem ser encontradas por exemplo nas águas do mar morto.
Na autoclave é necessário limpar, embalar os objetos que vão ser autoclavados e também
devem ser etiquetados com fita indicadora onde devemos anotar também a data do
procedimento de autoclavagem. O objeto embalado deve ser preferencialmente aberto em
capela de fluxo laminar. A fita indicadora é impregnada por endósporo de bacilos (uma
espécie não patogênicas) que serve como indicador de morte para os microrganismos. .
Com relação abertura os cuidados são diferentes, tem que embalar comparável, mas tem
que distribuir adequadamente na estufa e não pode encostar nas paredes da estufa e deve
ficar afastado para promover a ventilação entre os objetos para que o calor passe
adequadamente entre eles. É necessário o controle periódico da temperatura através do
termostato.
Na radiação, as técnicas agem por dano direto ao ácido nucleico dos microrganismos.
Existem as radiação ionizantes (alto poder de penetração) e não-ionizante (combatido poder
de DNA), mas é capaz de integrar nos diversos de tímida e influência negativamente o
mecanismo de replicação do DNA. É muito utilizado para produtos faramacologico,
suprimentos médicos, seringas, agulhas, e no processamento de alimentos ( normalmente
se usa o cobalto 60 e céssio 137). Também pode ser utilizado para esterilização de
ambientes fechados com Luz UV em capelas biológicas, por exemplo.
A Filtração é utilizada para materiais que não podem ser esterilizados pela autoclave
(vitaminas, toxinas, proteínas termissensiveis, antibióticos,) usasse um filtro de milipore
comalgulio da pressão exercida por uma seringa ou embora os por aspiração.
Há varios tipos de desinfectantes que foram usados ao longo da história. O Fenol (ácido
carbolítico) foi muito usado em esgotos e foi sugerido para ser usado em práticas cirúrgicas.
Hoje em dia se usa compostos fenólico
Produtos químicos:
1. Compostos fenólico sabem provocando ruptura da membrana microbiana. Também
desnatura proteínas. É efetivo contra matéria orgânica Mas tem alta volatibilidade e
por isso entrou em desuso pelo seus pontencial no dano ao meio ambiente.
2. Biguanidas: causa ruptura das membran plasmática é muito usado para antissepsia
de peles e mucosas. Pode ser usado com efeito bactericida ou fungicida. São
substância atóxicas.
3. Iodo e cloro: são ambos muito irritantes para mucosa. O hipoclorito deve ser usado
na proporção de1:3 em água..
4. Álcool tem ação bem ampla e tem ação inclusive sobre os vírus da influenza e o
álcool consegue desnaturar proteínas e promover a ruptura de membrana. Deve ser
usado na concentaracao do 70%. É capaz de dissolver os lipídios presentes na
membrana citoplasmatica além de ser capaz de desnaturar proteínas.
Características de um antisséptico ideal
● Amplo espectro
● Toxicidade seletiva
● Solubilidadedade, estabilidade, odor relativo
● Não corrosivo, não deve corar,
● Poder de penetração e poder residual
● Não combinar com substâncias orgânicas
● Disponibilidade e pressão arrazoáveis,
● Não poluir o ambiente.
Aula 23/03/18
Mecanismos de Patogenicidade das Bactérias
(cap 15 de Tortora)
“Maioria dos icrorgaismos são não patogênicos” - quando saem de seu sítio anatomico
acabam crescendo, portanto são oportunistas. A maioria das doenças são causadas por
patópgenos oportunistas .
o homem convive com microreganismos. Essa relção se mantem por tres tipos de relção
1. colonização transitória: está na pele, na cavidade oral, (microrganismos Planctódes
não colam na pele e os sésseis são permanente);
2. colonização microbiana permanente = microbiota. Inclusivem impedem a
colonização de espécies patogênicas. A Schechia coli é uma destes agentes que
atapeta o epitélio intestinal (compete por substrato) e outras bactérias ficam
impedidas de crescer)
3. doenças ( processo patológico) → doença. são aqueles oportunistas
portas de entrada
Membrana Mucosa>: apesar de ser uma barreira, são mais finas que a pele e podem servir
de via de infecção.
● revestem os tratos: respiratório, gastrointestinal, geniturinário, conjuntivo.
Via Parenteral
● penetram na pele ou membranas mucosas: perfurações, injeções, mordidas, cortes,
ferimentos, cirurgias. Fisicamente a pele é muito espessa e por isso serve de
barreira de proteção. A pele de idoso, fina e ressecada, é mais frágil nessa defesa.
obs.: a partir de 108 a 109 UFC ja se trata de uma população capaz de causar doença
instalada.
Bacillus anthracis: palavra grega = carvão. bactéria gram positiva (poucos bacillus são
gram positivos, a maior é gram negativa) que penetra na pele e causa necrose. A célula
morre mas, permanece seu esporo vivo que é capaz de infectar a pele. Começa localmente,
geralmente nas peles das mãe, e depois se torna sistêmica.
Trato gastrointestinal: Febre tifóide, Shigelose, cólera (eliminada pelas fezes e vai
contaminar água e alimentos)
Trato genital
sífilis e gonorréia
Para que uma bactéria seja virulenta ela precisa ter determinadas substâncias que
compõem certas estruturas. Normalmente a célula bacteriana só possui dois componentes:
membrana e citoplasma. Algumas possuem ainda:
- parede celular:
- Flagelo
- Fímbrias
- Pili (pêlo um pouco maior que as fímbrias e tem patogenicidade menor. na verdade é
uma estrutura para fazer troca de material genérico)
- Cápsula = glicocálice = capa de polipeptídeos e polissacarídeos)
Pseudomonas aeruginosas são capazes de formar biofilme e por muitos anos foi
considerado uma das bactérias mais negativamente impactante no controle de infecção
hospitalar. Em poucas horas (24h) seu glicocálice crescem e recobrem toda colônica
A E. coli causa a enterite hemorrágica, as bactérias aderem se ao parede epitelial ,
destruindo a estrutura epitelial de facilitando a invasão.
Cápsula - a presença de uma bactéria com cápsula favorecem a aderência por sua
composição. Além disso dificultam a fagocitose e adesividade falta de fagocitose aumenta
a virulência. um exemplo é Streptococcus pneumoniae . Além disso, a cápsula promove
resistência antibiótica, ao ressecamento, à ação de produtos químicos e permite a absorção
seletiva de íons. O próprio glicocálice, quando já formado o biofilme, é fonte de nutrientes
para a bactéria pois estará em grande quantidade.
toxinas
● Endotoxinas em gram negativas principalmente. são principalmente componentes do
lipopolissacarídeos da cápsula. Há um mecanismo proposto pelo quais essas
endotoxinas produzem a febre. estimulando a produção de IL-1 e TNF- alfa. estes
mediadores atingem o centro de controle de temperatura ( no hipotálamo) induzindo
a liberação de prostaglandinas.
● Exotoxina (toxina botulínica - impede a transmissão do impulso nervoso e é
descendente, começando pelo SNC): principalmente em gram positivas
Aula 27/04
Nas bactérias gram-, a parede de peptidoglicano mais fina e possui a mais uma membrana
externa. Essa camada externa é formada de LPS (camada lipolissacarideos ou também
chamada de EPS = CAMADA EXTRACELULAR POLISSACARÍDICA). Essa membrana é
formada por lipídios e polipeptídeo e os sacarídeos são moléculas incrustadas na
membrana como moléculas de adesão. Nessa parede é onde está o fator virulência da
bactéria gram -.
Entre as membranas está o ESPAÇO PERIPLASMÁTICO onde estão enzimas (ex.
Beta-lactamase), como as membranas são permeáveis o antibiótico encontra as enzimas do
espaço periplasmático podendo ser degradado por ação bacterian (constitui um dos
mecanismos de resistência bacteriana por destruição dos antibióticos destruindo o anel
betalactâmico).
Possuem endotoxina
Coloração de gram
1. Cristal violeta 1min
2. Banho em água corrente
3. Lugol (álcool iodado 1 mina
4. Água corrente
5. Álcool etílico ou cetona (30 s) — na gram + o álcool não consegue tirar o complexo
cristal violeta + lugol por causa de sua espessura, entretanto na bactéria gram - , por
ter sua parede celular delgada, o álcool consegue dissolver a membrana externa e
tirar junto com ela o complexo violeta +lugol.
6. Água corrente
7. Safranina por 30s (com coloração fúcsia vai corar a parede de peptidoglicano que
ficou exposta após a dissolução da membrana externa).
A bactéria gram positiva se cora com a violeta aparentando o violeta azulado e as bactérias
gram negativas se foram em fúcsia.
Toda ação o antibiótico ocorre durante a proliferação das bactérias e antes de concluir a
formação da parede celular a droga age. Os antibióticos possuem poder de seletividade,
pois são capazes decreto hecer a parede celular que não existe na célula humana.
● Inibição da síntese da parede celular —penicilina
● Lesão da membrana citoplasmática
● Inibição da síntese proteica — os ribossoma das bactérias soa do tipo 70S
(subunidade maior de 50S e amor de 30S), enquanto que os humanos são 80S
(subunidade maior 60 e a menor de 40S). De maneira geral o antibiótico atuará nas
estruturas ribossomais de número de sedimentos bacterianos e não humanos.
● Metabolismo do ácido fólico (?)
O uso do antibiótico mata a maioria das bactérias comuns, mas a variável resistente não.
Essas sobrevivem ao tempo de ação do medicação e depois passam a predominar.
Realização de antibiograma
Aula - 04/05/2018
Metodologias
Existem diferentes metodologias
Avaliação qualitativa avalia se é sensível ou resistente
● Disco difusão em ágar (Kirby e Bauer, 1966). Método fácil e permite verificar se os
isolados são sensíveis ou resistentes é um método
Esse material deve ser vertido pelo menos em 24h antes do sério da bactéria para poder
absorvê-la melhor. Com 24 h a bactéria cresce e já possível verificar se houve resistência
ou sensibilidade ao antibiótico
Esperar diminuir a umidade antes da aplicação dos discos e observar que os mesmos não
podem ser deslocados ou removidos, nem fazer pressão sobre o meio de cultura. Além
disso a difusão da droga sobre o meio é imediata e arrastada vai gerar distorções no halo
de inibição.
O tamanho das placas podem variar com o objetivo do procedimento, se em análises de
grandes escalar com técnicos treinado pode sem maior e compor varios discos em seu
teste. As placas devem ser aguardadas em estufa invertidas para evitar a condensação do
meio.
Fungos
São microrganismos eucariotas pertencem ao reino fungi e são células com características
intermediárias entre eucariotas e procariota, mas predominantemente com características
eucariotas.. Podem ser uni (leveduras ou fungos leveduriformes) ou pluricelulares ( fungos
filamentosos).
São microrganismos mais complexos que as bactérias, não possuem clorofila e a organela
que produz energia nesses micro-organismos são as mitocôndrias.
Possuem parede celular e por isso são frequentemente aquilatamos aos vegetais.
Produzem como metabólitos secundários pigmentos que acabam gerando cor, mas
diferente da clorofila que representa uma estrutura primária e não um resultado metabólico.
Sua parede celular é composta de quitina, manadas, e glicanas. Quanto ao seu aspecto
metabólico são quimioheterotróficos igual uma célula animal e se nutrem atarantes da
nutrição de micronutriente (também semelhante às células).
O ciclo de vida dos fungos inclui reprodução sexuado e assexuada. Está constituída por
duas fases distintas: uma fase vegetativa eletrão reprodutiva. A fase vegetativa mostra
células somáticas (não forma tecido, mas têm células especializadas). Em sua fase
reprodutiva as células reprodutivas (estruturas fúngicas).
Morfologia
Quanto à morfologia sabemos que são de dois tipos:
● Unicelulares ou leveduriformes
● Pluricelulares ou filamentosos. Possuem estruturas mais complexas e formam o
bolor.
Leveduras
Fase vegetativa: são unicelulares, não flagelados, esféricas, ou ovais de 1 a 10
micrômetros. Exemplo Saccharomyces cerevisiae
A parede celular está constituída por polissacarídeos gliaanas e mananas além de compor
dão um aspe torcemos ou viscoso ao crescimento leveduriformes.
Fase reprodutiva
Quando vai entrar em reprodução, a levedura começa a formar um “pequeno broto”
chamado gêmula e forma o blastoconídeo. O broto acaba se separando da célula mãe. E
esse tempo de reprodução é dita por brotamento. Alguns destes brotamento não se
desprendem e podem permanecer unidos formando pseudo-hifas muito comum por
exemplo na Candida albicans.
Filamentosos
A célula do fungo filamentoso é chamada de hifa. São células cilíndricas e ligadas pela
extremidade para formar filamentos. A hifa cresce pelas suas extremidades e possuem as
estruturas básicas de uma célula eucariotas e parede celular.
Sua parede célula é formada por quitina. É um polissacarídio que dar um aspecto seco ou
algodonoso ao crescimento do fungo filamentoso. A quitina est também presente no
exoesqueleto de alguns crustáceos e insetos e algumas pessoas desenvolvem alergia a
este composto. Os mastócito ficam hipersensibilidades e liberam histamina.
As hifas podem ser septadas ou cenocíticas. Podem ser identificadas pelas suas
diversidades morfológicas.