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PROYECTO DE TESIS
EJECUTOR:
ASESOR:
CO-ASESOR:
JAÉN, 2018
INDICE
I. INTRODUCCIÓN ........................................................................................................ 4
VI. METODOLOGÍA................................................................................................... 16
(García, Lippi, & Valverde, 2001), mencionan que, “Existen otros subgrupos A
considerados débiles (A3, Ax, Aend, Am, Ael), en los que la reactividad antigénica es
inferior a la de los glóbulos A2”. (pág. 172)
Existen métodos para tipificar estos sub grupos A1 y A2, realizando una prueba de
aglutinación en el laboratorio, a todos los pacientes y donantes para tipificar los sub
grupos para garantizar una transfusión sanguínea adecuada y disminuir el riesgo de una
reacción.
El Hospital General de Jaén cuenta con un banco de sangre tipo I, donde se realiza
extracción de sangre, inmunohematología, separación de hemocomponentes y
transfusiones sanguíneas.
Cuál es la frecuencia de donantes con fenotipos débiles (A1 Y A2) del grupo A del sistema
ABO en banco de sangre del hospital general de Jaén, .en los meses de junio a agosto del
2018.
Los fenotipos débiles del antígeno “A” (A1 Y A2) del sistema ABO. En el banco de sangre
es de gran importancia para reducir y prevenir reacciones transfusionales, toda trasfusión
sanguínea implica riesgos por lo que recibe antígenos eritrocitarios no propios, el coombs
indirecto detecta anticuerpos que están circulando en la sangre, pero no detecta la carga
antigénica que recibe cada paciente, cuando no hay una determinación adecuada de
compatibilidad el cuerpo crea aloanticuerpos causando así una respuesta inmune dando
como resultado una reacción transfusional.
En el Banco de Sangre del hospital general de Jaén se clasifican a los grupos sanguineos del
sistema ABO en grupos A, B, AB y O; pero no realizan la fenotipificación del grupo A por
lo cual estarían causando posiblemente sensibilización a los pacientes, con lo cual
provocaría una futura reacción transfusional.
4.1. VARIABLES
Frecuencia de fenotipos A1 Y A2 del grupo “A”.
Tipos de donantes.
V. REVISIÓN DE LITERATURA
Estudios en fenotipos débiles del antígeno “A” (A1 Y A 2) del sistema ABO en
banco de sangre enfatizan las consecuencias que pueden causar, por ejemplo,
(Garcia, Samanta, & Velarde, 2001). Estudio la frecuencia de los grupos sanguíneos
A1, A2, Aint, B y O, en la ciudad de La Habana Cuba en el cual se definen como A
intermedio (Aint) los hematíes que comparten caracteres con A1 y A2. Existen
diferencias cualitativas y cuantitativas en los epitopes A. Los hematíes A1 son
aglutinados por la lectina de Dolichus biflorus (anti-A1), los A2 por la lectina de
Ulex europaeus (anti-H), en tanto los hematíes Aint, son variablemente aglutinados
por ambas de manera inesperada. Este investigador realizó una búsqueda de
individuos Aint en individuos sanos normales de acuerdo con la reacción con las
lectinas mencionadas. El método que utilizo fue el siguiente; Se enfrentaron glóbulos
rojos suspendidos en plasma autólogo, al 40 %, con anti-A, B, luego con anti-A y
anti-B, finalmente, con lectinas anti-A1 y anti-H (Laboratorio de Inmuno-
hematología. Las lectinas anti-A1 y anti-H fueron diluidas para asegurar su
especificidad, debido a que algunas lectinas puras presentan reacciones inespecíficas.
Estos resultados concuerdan con observaciones previas sobre la marcada
heterogeneidad de los hematíes Aint. Se estudiaron 1 301 muestras, de las cuales
resultaron 703 O (54,04 %); 468 A (35,97 %); 106 B (8,15 %); 18 A1B (1,38 %) y 6
A2B (0,46 %). Las muestras A se subdividieron en: 346 A1 (73,93 %); 82 A2 (17,52
%) y 40 Aint (8,55 %). El reconocimiento de subgrupos débiles del grupo A reviste
importancia en la práctica forense y en el estudio de la dinámica de poblaciones. El
estudio de la variante Aint es relevante en Inmunogenética Poblacional, por su
contribución al conocimiento del mestizaje con poblaciones negras. (pág. 171).
Según (González, Bencomo, Alfonso, Martínez, & Rivero, 1997). Estudio los
fenotipos débiles del antígeno A (sistema ABO de grupos sanguíneos) en la Habana,
Cuba. Para la determinación de éstos se utilizó la técnica de hemaglutinación con
antisueros policlonales y en los casos de aglutinación débil, tardía o de discrepancias
con el grupo reverso, se realizó ésta con antisueros anti-A1 y anti-H. Se estudiaron 6
346 donantes de sangre, obteniendo como resultados. Donantes del grupo A (2 230),
1 (0,045 %) fue Ael y 1 (0,045 %) fue Aint. El grupo sanguíneo A presenta los
subgrupos A1 y A2. El subgrupo A2 presenta una expresión antigénica débil y las
personas con los fenotipos A2 y A2B pueden tener anticuerpos anti-A1.1. Además
se han descrito subgrupos raros del antígeno A con características serológicas
específicas como el A3, A4, A5, Ax, Ao, Am, Aend, Abantu, Alae y el Ael. (pág.
99)
Algunos estudios así como (Cabezas, 2016). Realizó un estudio sobre la valoración
de subgrupos de “A y B” mediante la aplicación de la prueba de tipificación
sanguínea en gel y su correlación con lectinas A1 y H en pacientes del servicio de
medicina transfusional del hospital provincial general docente de Riobamba,
Ecuador. Para esta investigación se planteó valorar subgrupos de “A” y “B” mediante
aplicación de la técnica de Tipificación Sanguínea en Gel y su correlación con
lectinas A1 y H en muestras de pacientes atendidos por el Servicio
Transfuncional del Hospital General Docente de Riobamba Provincia de
Chimborazo en el año 2015. Se aplicó el método científico que permite
enunciar leyes, principios manejables y demostrables útiles al hombre, para
evitar incompatibilidades transnacionales. Para identificar grupos sanguíneos ABO
y subgrupos de A. Se evaluó 47 muestras de sangre, 75% corresponde al grupo A,
19% al B y 6%s AB; se identificó 38 subgrupos sanguíneos, 82% A1, 10% A2 y 8%
A1B. Al aplicar la técnica de tipificación en gel se identificó antígenos de
grupos sanguíneos A, B y AB. Siendo esta técnica de alta sensibilidad y
especificidad; la clasificación de subgrupos se logró mediante lectinas A1, A2. (pág.
12)
Es una herramienta muy importante en todas las áreas de la medicina, tiene por
objeto la conservación y el restablecimiento de la salud apoyada en la terapéutica
transfusional. La terapéutica transfusional puede ser de gran valor para mantener
o salvar una vida. La Medicina Transfusional también depende de laboratorios
cada vez más sofisticados para minimizar los riesgos de transmisión de
enfermedades y de maximizar la compatibilidad de las células y los tejidos, como
también establecer las causas de la aparición o falta de reacciones inmunológicas
adversas.
5.2.4. INMUNOHEMATOLOGÍA
(Gordillo & Guzñay, 2011). Los antígenos del grupo ABO son de naturaleza
hidrocarbonada. Los determinantes antigénicos de los antígenos A, B y 0 son
azúcares terminales de cadenas de oligosacáridos ancladas en glucoproteínas o
glucolípidos de la membrana eritrocitaria. Los antígenos A y B difieren solo en
el azúcar terminal del oligosacárido. El antígeno A se caracteriza por un residuo
N-acetilgalactosamina en posición terminal, mientras que el antígeno B se
caracteriza por un residuo terminal de galactosa. El fenotipo 0 ocurre cuando no
hay azúcares terminales propios del A y del B. La sustancia precursora, a la cual
se añaden los residuos azucarados propios del A y B, se llama sustancia H. La
sustancia H también tiene poder antigénico caracterizado por una fucosa, unida
de forma covalente al azúcar subterminal. Las personas del grupo A añaden una
N-acetilgalactosamina a la sustancia H para generar el epítope A, y las del grupo
B añaden una galactosa a la sustancia H para generar el epitope B. Las del grupo
0 no añaden ningún azúcar a la sustancia H, y por lo tanto expresan el antígeno
H, pero no el A o el B. (pág. 26)
Las pruebas serológicas en inmunohematología dependen de la reacción
antígenos y anticuerpos en los glóbulos rojos en el suero. Los anticuerpos
sanguíneos son usualmente Ig G, IgM y en casos poco comunes IgA. Además
las reacciones hemolíticas transfusionales causadas por anticuerpos IgM con
fijación de complemento pueden causar hemolisis intravascular severa y
reacciones transfusionales hemolíticas causadas por anticuerpos IgG pueden
causar hemólisis extravascular y reacción menos severa.
5.2.8. GRUPO A
Según (Lopez & Pino, 2016). Todos los subgrupos de A. Con los sueros anti-A,
no difieren significativamente en el grado de aglutinación y la distinción
serológica entre ellos se basa en su reactividad con el suero humano absorbido
anti-A 1 o con la Lectina anti-A1 (Dolichos biflorus). Ambos reactivos aglutinan
las células A1 pero no las A2. Aproximadamente un 80% de las personas del
grupo A reaccionan con la lectina anti-A1 y pueden ser clasificadas como A2 o
A2B. No es necesario en la rutina determinar si una persona 33 es A1 o A2, a
menos que en su suero exista un anticuerpo con especificad anti-A1 que este
causando una discrepancia en la interpretación del grupo inverso , o que se
presente incompatibilidad en la prueba cruzada .Hasta un 8% de las persona A2
y 35 % de las A2B pueden desarrollar anti-A1.Generalmente este anticuerpo es
natural, pues con frecuencia se encuentra en personas sin antecedentes
transfusionales o de embarazos y se considera que no tiene importancia clínica a
menos que reacciones a 37ºC. Los subgrupos débiles de A como el Aint, A3 .Ax
y Ael pueden ser resultado de genes modificadores situados en locus distintos al
ABH que alteran la expresión normal de estos genes. (pág. 29).
(Lopez & Pino, 2016). Investigo sobre: La diferencia Cualitativa señalan el hecho
de que las personas A2 y A2B forman anti-A1, además, que el suero humano
anti-A contiene ambas especificidades: anti A y anti–A1. Cuantitativas se basan
en las variaciones del número de sitios antigénicos presentes en la membrana del
glóbulo rojo. Entre los genes de las transferasas A1 y A2 se identificaron 2
diferencias estructurales: sustitución del aminoácido (aa) prolina en A1 por
leucina en A2. Los europeos, alrededor del 80% de los individuos del grupo A
pertenecen al subgrupo A1, casi todo el resto siendo A2. La distinción Se hace
más conveniente probando los glóbulos rojos con la lectina de Dolichos biflorus.
La distinción entre A1 y A2 puede ser difícil de en recién nacidos: los glóbulos
rojos de algunos bebés que puede ser demostrado ser A1 cuando son mayores
pueden, en el momento del nacimiento, no reaccionar con reactivos anti-A1.
Ensayos con la lectina anti-H de Laburnum alpinum puede ser útil para distinguir
entre A1 y A2 eritrocitos en los primeros meses de vida, A2 eritrocitos
reaccionando mucho más fuertemente que los glóbulos rojos A1: la anti-H lectina
de Ulex europaeus no discrimina tan bien. La lectina de D. biflorus es mejor que
el anti-A1 humano al distinguir A1 de A2. (pág. 33).
Antígeno: todo aquel material, propio o extraño, soluble o particulado, que es capaz
de despertar una respuesta inmunitaria en un individuo inmunológicamente
competente. Son sintetizados por las células plasmáticas derivadas de los linfocitos
B activados.
Anticuerpo (Ab o Ac): conjunto heterogéneo de proteínas que se producen por la
estimulación antigénica del sistema inmunológico y que tienen la propiedad de
reaccionar, específicamente, con el antígeno inductor de su producción. Llamados
inmunoglobulinas, son sintetizadas por las células plasmáticas y están constituidos
por cadenas de polipeptídicas pesadas y ligeras.
IgG: Este anticuerpo es el más abundante, constituye aproximadamente el 80% de
las inmunoglobulinas existentes en plasma sanguíneo. Es el más pequeño de los
anticuerpos y el único que atraviesa la barrera placentaria.
IgM: De mayor tamaño, predominantemente intravascular y constituye el 10% del
total de inmunoglobulinas. La producción de está en la exposición primaria al
antígeno es máxima.
Anticuerpos Eritrocitarios: Son usualmente Ig G y/o IgM y en casos raros IgA.
Aglutinación. Reacciones dependientes de complemento. Neutralización y efectos
alotrópicos. Los antígenos se unen natural o artificialmente a materia en partículas
(ejemplo: glóbulos rojos) formando acúmulos.
Aloinmunización: Es la producción de anticuerpos por un organismo en respuesta a
la introducción de antígenos provenientes de otro diferente, pero de la misma especie.
Epítope: Es la unión específicamente de la región de un antígeno que puede unirse
a un anticuerpo.
Inmunización: La inmunidad es la capacidad del organismo para hacer frente a la
entrada de patógenos o sustancias extrañas, es decir, es un estado de protección.
Aloanticuerpos: Es aquél anticuerpo que se produce como resultado de la
exposición de un organismo a antígenos extraños, no reacciona con los antígenos
presentes en los hematíes del productor de los anticuerpos.
Fenotipo: Son los antígenos presentes en los glóbulos rojos de una persona.
Auto anticuerpo: Son anticuerpos que aparecen en la sangre y que luchan contra las
células del propio cuerpo estas reacciones pueden darse en donaciones autologas.
Sensibilización: Proceso por el que la respuesta inmunitaria activada por un antígeno
se da posteriormente con mayor intensidad cuando se presenta otra vez este antígeno.
VI. METODOLOGÍA
P=q=0.1
E= 0.01
Confianza 90% 91% 92% 93% 94% 95% 96% 97% 98% 99%
Z 1.64 1.70 1.75 1.81 1.88 1.96 2.05 2.17 2.33 2.58
N= (1.96)2(0.5) (0.5) / 0.052
N= 104.93
Se desea realizar un estudio con un resultado confiable con un 99 por ciento y un
error del 1 por ciento se debería tomar una muestra de personas.
La muestra inicial considerada será de 104.93 donantes que acudan al “Banco de
sangre del hospital general de Jaén”, durante el periodo de estudio, desde el mes de
octubre a diciembre del 2018.
MUESTRA REAL
𝑍 2 𝑥 𝑃𝑥 𝑄 𝑥 𝑁
𝐸 2 𝑥 (𝑁 − 1) + 𝑍 2 𝑥 𝑃 𝑥 𝑄
N = tamaño de la población
E = Error 1% (0.01)
P = 10%
Z = Grado de confianza que se establece 99%
donantes de 18 a 55 años que tengan grupo “A”, que acudan al área de “Banco
de sangre del hospital general de Jaén”.
Cuadros
Afiches
6.7. TÉCNICAS
TÉCNICA DE AGLUTINACIÓN
6.8. PROCEDIMIENTOS
MUESTRA
MATERIALES Y EQUIPOS
TABLA DE RESULTADOS
O O O + + O O
+ O + O + O A
O + + + O O B
+ + + O O O AB
VII. CRONOGRAMA
MESES
ACTIVIDADES 2018 2018 2018 2018 2018 2018 2018 2018 2018
Fase de Planeamiento:
1 Determinación del X
Problema
2 Revisión de X X
Bibliografía
3. Elaboración del X X
Proyecto
4. Presentación del X
Proyecto
5. Aprobación del X
Proyecto
Fase de Ejecución
6. Recolección de X X X
datos
7. Análisis e X X
Interpretación de
datos
Fase de
Comunicación
8. Elaboración del X
Informe final
9. Presentación del X
Informe final
10. Sustentación. X
logistica
VIII. PRESUPUESTO
MATERIAL DIDACTICO
Folder 8 1 8.00
Corrector 2 2 4.00
Lapiceros 6 2 6.00
USB 1 50 50.00
Cuadernos 2 7 322.00
SUB TOTAL :
S/2132.00
SERVICIOS
Anillados 10 8 80.00
SERVICIOS
Logística
IX. COLABORADORES
Equipo asistencial del área de “Banco de sangre” del Hospital General de Jaén.
X. REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS
González, R., Bencomo, A., Alfonso, Y., Martínez, M., & Rivero, R. (1997). Rev Cubana Hematol
Inmunol Hemoter . Obtenido de http://bvs.sld.cu/revistas/hih/vol14_2_98/hih05298.htm
XI. ANEXOS