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DOCENTE:
Limber Servando Poma Pilco
INTEGRANTE
El Alto - Bolivia
Introducción
La creación del microscopio fue un importante avance en el mundo de la medicina. Al descubrirse
las bacterias se pudo averiguar la causa de muchas enfermedades y así fabricar una cura. El tejido
humano también pudo ser examinado y se pudo descubrir como funciona nuestro cuerpo. Hoy en
día, se analiza tejido enfermo en los hospitales. También se usan los microscopios en la conocida
microcirugías, cirugías muy difíciles las cuales no pueden llevarse a cabo sin el microscopio.
Los microscopios son aparatos que, en virtud de las leyes de formación de imágenes ópticas
aumentadas a través de lentes convergentes, permiten la observación de pequeños detalles de una
muestra dada que a simple vista no se percibirían.
En el presente informe se hablará del microscopio compuesto sus partes, su correcto uso, cuidado y
conservación.
OBJETIVO GENERAL:
El objetivo general de este laboratorio es que como estudiantes podamos identificar el funcionamiento
de cada una de las partes del microscopio aplicadas a la biología celular.
OBJETIVO ESPECIFICO:
Que lo estudiantes reconozcamos las partes del microscopio y el poder de resolución de este frente al
ojo humano. Que el estudiante comprenda la importancia del microscopio para toda investigación
científica.
Marco teórico
Un microscopio es un dispositivo encargado de hacer visibles objetos muy pequeños. El
microscopio compuesto consta de dos lentes (o sistemas de lentes) llamados objetivo y ocular. El
objetivo es un sistema de focal pequeña que forma una imagen real e invertida del objeto (situado
cerca de su foco) próxima al foco del ocular. Éste se encarga de formar una imagen virtual de la
anterior ampliada y situada en un punto en el que el ojo tenga fácil acomodación (a 25cm o más).
Dada la reducida dimensión del objeto, se hace imperioso el recolectar la mayor cantidad de luz del
mismo, utilizando sistemas de concentración de la energía luminosa sobre el objeto y diseñando
sistemas que aprovechen al máximo la luz procedente del objeto.
Un microscopio compuesto es un microscopio óptico que tiene más de un lente. Los microscopios
compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en láminas
tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y
organismos no visibles a simple vista. El microscopio óptico común está conformado por tres
sistemas:
El sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las
lentes, que permiten el movimiento para el enfoque.
El sistema óptico comprende un conjunto de lentes, dispuestas de tal manera que producen
el aumento de las imágenes que se observan a través de ellas.
El sistema de iluminación comprende las partes del microscopio que reflejan, transmiten y
regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a través del microscopio.
La parte mecánica del microscopio comprende el pie, el tubo, el revólver, el asa, la platina, el carro,
el tornillo macrométrico y el tornillo micrométrico. Estos elementos sostienen la parte óptica y de
iluminación; además, permiten los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.
El pie: Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma
de Y o bien es rectangular.
La columna o brazo: llamada también asa, es una pieza en forma de C, unida a la base por
su parte inferior mediante una charnela, permitiendo la inclinación del tubo para mejorar la
captación de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porción superior y
por el extremo inferior se adapta al pie.
El tubo: tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las molestias
que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares y en
extremo inferior el revólver de objetivos. El tubo se encuentra unido a la parte superior de
la columna mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva
mediante los tornillos.
La platina: es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que se va
a observar. Presenta un orificio, en el eje óptico del tubo, que permite el paso de los rayos
luminosos a la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en
otros casos puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o
producir movimientos circulares.
Las pinzas: son dos piezas metálicas que sirven para sujetar la preparación. Se encuentran
en la platina.
Carro móvil: es un dispositivo que consta de dos tornillos y está colocado sobre la platina,
que permite deslizar la preparación con movimiento ortogonal de adelante hacia atrás y de
derecha a izquierda.
El revólver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los objetivos.
Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de
trabajo, lo que se nota por el ruido de un piñón que lo fija.
Sistema óptico
o Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos
y la preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el
aumento que producen, la abertura numérica y otros datos. Así, por ejemplo, si un
objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es plan
acromático, su aumento 40 y su apertura numérica 0,65, calculada para una
longitud de tubo de 160 mm. El número de objetivos varía con el tipo de
microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos más
frecuentemente utilizados son: 6X, 10X, 20X, 45X y 60X.
Sistema de iluminación
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la
preparación u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada. Comprende los
siguientes elementos:
Condensador: está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos
luminosos sobre el plano de la preparación, formando un cono de luz con el mismo ángulo
que el del campo del objetivo. El condensador se sitúa debajo de la platina y su lente
superior es generalmente planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la
preparación cuando se usan objetivos de gran abertura (los de mayor ampliación); existen
condensadores de inmersión, que piden que se llene con aceite el espacio entre esa lente
superior y la preparación. La abertura numérica máxima del condensador debe ser al
menos igual que la del objetivo empleado, o no se logrará aprovechar todo su poder
separador. El condensador puede deslizarse verticalmente sobre un sistema de cremallera
mediante un tornillo, bajándose para su uso con objetivos de poca potencia.
o Ocular (1)
o Revólver (2)
o Objetivos (3)
Brazo (11)
o Tornillos macrométrico y
micrométrico (4 y 5)
o Diafragma (6)
Fuente de luz (7)
o Condensador (8)
o Platina (9)
Base (10)
El microscopio debe estar protegido del polvo, humedad y otros agentes que pudieran dañarlo.
Mientras no esté en uso debe guardarse en un estuche o gabinete, o bien cubrirlo con una bolsa
plástica o campana de vidrio. Las partes mecánicas deben limpiarse con un paño suave; en algunos
casos, éste se puede humedecer con xilol para disolver ciertas manchas de grasa, aceite de cedro,
parafina, etc. Que hayan caído sobre las citadas partes.
La limpieza de las partes ópticas requiere precauciones especiales. Para ello debe emplearse papel
"limpiante" que expiden las casas distribuidoras de material de laboratorio. Nunca deben tocarse las
lentes del ocular, objetivo y condensador con los dedos; las huellas digitales perjudican la
visibilidad, y cuando se secan resulta trabajoso eliminarlas.
Para una buena limpieza de las lentes puede humedecerse el papel "limpiante" con éter y luego
pasarlo por la superficie cuantas veces sea necesario. El aceite de cedro que queda sobre la lente
frontal del objetivo de inmersión debe quitarse inmediatamente después de finalizada la
observación. Para ello se puede pasar el papel "limpia lentes" impregnado con una gota de xilol.
Para guardarlo se acostumbra colocar el objetivo de menor aumento sobre la platina y bajado hasta
el tope; el condensador debe estar en su posición más baja, para evitar que tropiece con alguno de
los objetivos. Guárdese en lugares secos, para evitar que la humedad favorezca la formación de
hongos. Ciertos ácidos y otras sustancias químicas que producen emanaciones fuertes, deben
mantenerse alejados del microscopio.
PRECAUCIONES
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de
observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la
misma y dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda
para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se
debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente
con un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el
objetivo con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable).
En cualquier caso, se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el
aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de
alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se
aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico,
platina, revólver y condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la
preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo
agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del
ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido,
secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol.
9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al
acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos.
PROCEDIMIENTOS Y OBSERVACIONES:
Se procedió a conocer el microscopio sus partes, su morfología, sus uso e importancia, se uso el
microscopio para observar tres muestras diferentes: el primero fue un trozo de periódico con una
letra impresa, segundo fue una punga y tercero un piojo. Gracias al microscopio pudimos ver que
hay un mundo microscópico escondido y estas imágenes son una muestra de ellos.
4x
10x
40x
IMAGEN ÓPTICA
Una imagen óptica es una figura formada por el conjunto de puntos donde convergen los
rayos que provienen de fuentes puntuales del objeto tras su interacción con el sistema óptico.
TIPOS
La imagen real
Es aquella que se forma cuando, tras pasar por el sistema óptico, los rayos de luz son
convergentes. Esta imagen no la podemos percibir directamente con nuestro sentido de la vista,
pero puede registrarse colocando una pantalla en el lugar donde convergen los rayos.
La imagen virtual
Es aquella que se forma cuando, tras pasar por el sistema óptico, los rayos divergen. Para
nuestro sentido de la vista los rayos parecen venir desde un punto por el que no han pasado
realmente. La imagen se percibe en el lugar donde convergen las prolongaciones de esos rayos
divergentes. Es el caso de la imagen formada por un espejo plano. Las imágenes virtuales no se
pueden proyectar sobre una pantalla.
Una imagen virtual es la representación mediante un sistema óptico, como podría ser: un
espejo, una lente, etc., se forma en el momento donde se localiza el sol de manera frontal del
alargamiento de los rayos hacia la parte sucesiva de este espejo manchado, donde posteriormente
varía el recorrido al incidir en un conjunto óptico o al atravesarlo.
Las imágenes virtuales tienen que ser vistas directamente, situando el ojo en el trayecto de
los rayos, alterado por el sistema meteorológico óptico. Las imágenes dadas por el objeto reflejado
en clase de meteoros un espejo liso, son siempre virtuales. En cambio, si el sistema óptico es un
espejo curvado o una lente, las representaciones serán existentes o virtuales, en virtud de la
situación real de objeto combatido y el foco del sistema operacional.
En óptica geométrica, una imagen virtual está formada por la proyección de los rayos reflejados o
refractados (según sea el caso de un espejo o lente, respectivamente) en el dispositivo las que
convergerán en un punto formando la imagen virtual. (A diferencia de una imagen real que se
forma con los rayos reflejados o refractados y no con sus proyecciones).
Un espejo plano es una superficie plana que puede reflectarse la luz que le llega con una
capacidad reflectora de la intensidad de la luz incidente del 95%. Una imagen de un espejo se ve
como si el objeto estuviera detrás del objeto, y no delante, ni en la superficie (es un error muy
frecuente pensar que la imagen la vemos en la superficie del espejo).
El sistema óptico del ojo recoge los rayos que salen divergentes del objeto y los hace
converger en la retina. El ojo identifica la posición que ocupa un objeto en el lugar donde convergen
las prolongaciones del haz de los rayos divergentes que llegan. Estas prolongaciones no coinciden
con la posición real del objeto. En este punto es donde se forma la imagen virtual del objeto.
La convergencia de los ejes de visión nos da como resultado la captación más definida de la
imagen observada, y a la vez que se mantiene la información relativa a la distancia, siendo casi
paralelos a los ejes de visión en los objetos lejos y ampliamente divergentes en los objetos más
cercanos. Se ha de tener en cuenta el condicionamiento que lleva el ajustamiento de los ángulos de
visión de los ojos: se trata de la automática variación de la distancia focal, que permite mantener la
imagen con el enfoque preciso para que la captación de la misma sea la más nítida posible.
Es decir, una imagen virtual, se ve como si estuviera dentro del espejo, no se puede formar
encima de la pantalla, pero puede ser vista cuando se enfoca con los ojos.
APLICACIONES
Si definimos ahora límite de resolución como la distancia mínima que debe existir entre dos
puntos para que sean distinguidos por separado, comprenderemos fácilmente la relación inversa
que se establece entre poder resolutivo y límite de resolución: cuanto menor sea la distancia que
debe separar a dos puntos para que se distingan por separado, mayor será el poder resolutivo
necesario para observarlos.
El poder resolutivo del microscopio no guarda relación alguna con el aumento del mismo.
Depende principalmente de la apertura numérica de la lente y de la longitud de onda de la luz
utilizada. Sin abocarnos demasiado a definir "apertura numérica" podemos decir que es un valor
determinado, entre otras cosas, por el diámetro de la lente.
ÍNDICE DE REFRACCIÓN
Frentes de onda de una fuente puntual en el contexto de la ley de Snell. La región debajo de
la línea gris tiene un índice de refracción mayor y velocidad de onda proporcionalmente menor que
la región por encima de la línea.
Refracción de la luz en la interfaz entre dos medios con diferentes índices de refracción (n 2
> n1). Como la velocidad de fase es menor en el segundo medio (v 2 < v1), el ángulo de refracción θ 2
es menor que el ángulo de incidencia θ 1; esto es, el rayo en el medio de índice mayor es cercano al
vector normal.
n=c/v
Donde:
El índice de refracción del aire es de 1,00029 pero para efectos prácticos se considera como
1, ya que la velocidad de la luz en este medio es muy cercana a la del vacío.
En una guía de ondas (ej.: fibra óptica) el índice de refracción efectivo determina el índice
de refracción que experimenta un modo de propagación en razón a su velocidad de grupo. La
constante de propagación de un modo que se propaga por una guía de ondas es el índice efectivo
por el número de onda del vacío:
Nótese que el índice efectivo no depende sólo de la longitud de onda sino también en el
modo en que la luz se propaga. Por esta razón es que también es llamado índice modal.
El índice de refracción efectivo puede ser una cantidad compleja, en cuyo caso la parte
imaginaria describiría la ganancia o las pérdidas de la luz confinada en la guía de ondas.
No debe confundirse con la idea que el índice efectivo es una medida o promedio de la
cantidad de luz confinada en el núcleo de la guía de onda. Esta falsa impresión resulta de observar
que los modos fundamentales en una fibra óptica tienen un índice modal más cercano al índice de
refracción del núcleo.
APLICACIONES
Un microscopio digital tiene una cámara CCD adjunta y esta conectada a un LCD, o a una pantalla
de computadora. Un microscopio digital usualmente no tiene ocular para ver los objetos
directamente. El tipo triocular de los microscopios digitales tienen la posibilidad de montar una
cámara, que será un microscopio USB.
Un microscopio electrónico es uno de los más avanzados e importantes tipos de microscopios con
la capacidad más alta de magnificación. En los microscopios de electrones los electrones son
utilizados para iluminar las partículas más pequeñas. El microscopio de electrón es una
herramienta mucho más poderosa en comparación a los comúnmente utilizados microscopios
livianos.
Un microscopio estéreo, también llamado "microscopio de disección", utilice dos objetivos y dos
oculares que permiten ver un espécimen bajo ángulos por los ojos humanos formando una visión
óptica de tercera dimensión.
Consiste en una fuente luminosa, un condensador que enfoca los rayos de luz sobre la
muestra una platina sobre la cual se coloca la muestra, un objetivo y un ocular a través del cual se
puede observar directamente el espécimen.
Permite observar células y tejidos sin colorear y por eso resulta especialmente útil para el
examen de células vivas y cortes gruesos de material plástico no coloreados.
Existen pequeñas diferencias del índice de refracción en diferentes partes de la célula y en
distintas partes de una muestra de tejido. La luz que pasa por regiones de mayor índice de
refracción experimenta una deflexión y queda fuera de fase con respecto al haz principal de las
ondas de luz.
Permite detectar moléculas que florecen, es decir, que emiten luz de longitud de onda, que
se encuentra dentro del espectro visible, cuando son expuestas a la luz ultravioleta. Se usa este
microscopio para revelar moléculas fluorescentes naturales como la vitamina A, pero como este
tipo de moléculas no es numeroso, su aplicación mas difundida es para revelar una fluorescencia
agregada a sustancia, como en el caso de la detección de antígenos o anticuerpos en procedimientos
de coloración inmune cito química.
Se registren los datos de cada punto y se guardan en una computadora, luego se puede
llevar la información a un monitor de alta resolución para crear una imagen visual. Su ventaja es su
capacidad de tomar imágenes de la muestra en cortes ópticos muy finos.
Se utiliza una fuente de luz ultravioleta y depende de la absorción de esa luz por las
moléculas de la muestra. Sus resultados se registran fotográficamente.
No es posible examinar en forma directa el espécimen en el ocular, ya que la luz ultravioleta daña la
retina.
Este método sirve para detectar ácidos nucleicos, específicamente bases púricas y
pirimidicas del nucleótido.
Microscopio de polarización. -
Es una simple modificación del microscopio óptico, pero el espécimen es atravesado por luz
paralizada y se usa otro polarizador que se hace rotar para detectar la orientación molecular en
muestra de tejidos.
Microscopía Electrónica:
Se utiliza un haz de electrones en lugar de un haz de luz visible para producir una imagen.
Los electrones deben pasar a través de la muestra y chocar luego con la placa fotográfica. La
formación de la imagen en el microscopio electrónico depende del hecho de que algunos electrones
no atraviesan el espécimen y en consecuencia, no llegan a la placa fotográfica, sino que
experimentan una deflexión provocada por sustancias de alta densidad que encuentran
normalmente en la muestra o han sido agregadas a ellas durante el proceso de fijación y tinción.
4.- QUÉ IMPORTANCIA TIENE LAS IMÁGENES OBTENIDAS A TRAVÉS DEL MICROSCOPIO
ELECTRÓNICO
Las imágenes proporcionadas por los microscopios electrónicos son de gran importancia y
utilidad para el desarrollo científico, en parte es esencial para el estudio más profundo de la
biología como ciencia, ya que nos permite observar y analizar imágenes que no son visibles incluso
para el microscopio compuesto. Gracias a las imágenes de estos microscopios se puedo estudiar por
fin un mundo que antes era imposible explorar. Las aplicaciones de las imágenes del microscopio
electrónico de barrido son muy variadas, y van desde la industria petroquímica o la metalurgia
hasta la medicina forense. Sus análisis proporcionan datos como textura, tamaño y forma de la
muestra.
utilizadas en la biología celular. Aunque permite una menor capacidad de aumento que el
microscopio electrónico de transmisión , este permite apreciar con mayor facilidad texturas y
objetos en tres dimensiones que hayan sido pulverizados metálicamente antes de su observación.
Por esta razón solamente pueden ser observados organismos muertos, y no se puede ir más allá de
la textura externa que se quiera ver. Los microscopios electrónicos sólo pueden ofrecer imágenes en
blanco y negro puesto que no utilizan la luz.
análisis de las imágenes obtenidas, todas estas características han hecho que las imágenes
proporcionadas por el microscopio sean tan importantes.
CONCLUSIONES:
El microscopio ha sido uno de los avances científicos mas importantes del hombre porque ha
significado un gran avance para la ciencia y hoy en día lo sigue siendo, por que gracias a el se
investigan y desarrollan muchas ciencias.
En esta práctica se han aprendido las partes del microscopio su correcto uso, manipulación y
mantenimiento.
También se comprendió que sin este aparato seria imposible visualizar los microorganismos a
simple vista, es fundamental en el avance de la citología, citogenética, microbiología, fitopatología
virología, bacteriología, parasitología y demás ciencias que se trabaja con microorganismos.
BIBLIOGRAFÍA