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Los altos costos y la baja eficiencia de producción son una seria limitación para la producción de
xilitol de origen biológico. Para la producción a escala industrial de xilitol, una Escherichia coli libre
de plásmidos para la producción de xilitol a partir del hidrolizado hemicelulósico de la mazorca de
maíz.
En lugar de ser plásmido e inductor dependiente, esta cepa se basó en la integración de múltiples
copias de los genes de la xilosa reductasa (XR) en el cromosoma, donde su expresión estaba
controlada por el promotor constitutivo P43.
Además de minimizar el flujo de L-arabinosa a arabitol, dos estrategias que incluyen una actividad
total de XR baja y alta selectividad de XR ha sido adoptada.
El arabitol se redujo significativamente usando una cepa libre de plásmidos que tuvo una actividad
total XR más baja y ocho mutaciones puntuales de XR con una actividad enzimática 27 veces
menor hacia la L-arabinosa fue lograda.
La cepa libre de plásmidos junto con XR mutado puede eliminar completamente la formación de
arabitol en la producción de xilitol. En la fermentación discontinua, esta cepa sin plásmido produjo
143.8 g de L − 1 xilitol a 1.84 g/L *h a partir de hidrolizado hemicelulósico de mazorca.
A partir de estos resultados, concluimos que esta ruta por E. coli libre de plásmidos tiene potencial
para convertirse en un proceso comercialmente viable para la producción de xilitol.
carga sobre la cepa huésped y el gen de resistencia a los antibióticos utilizado en el plásmido. Una
desventaja general del uso de la selección de antibióticos es la necesidad de eliminar
completamente el antibiótico residual del producto final antes de su aplicación.
Los enfoques asociados con los plásmidos tienen varios inconvenientes, incluida la inestabilidad
segregacional e inestabilidad estructural.
Afortunadamente, una XR que tiene una preferencia innata de 2.4 veces por la D-xilosa sobre L-
arabinosa se ha aislado de Neurospora crassa y un mutante XR (VMCQI) que tenía 50 veces menos
Además, una E. coli diseñada por ingeniería genética (mutante CRP) junto con la mutación XR
(VMCQI) pudo eliminar la producción de L-arabitol de una mezcla de D-xilosa, L-arabinosa y glucosa.
Sin embargo, se utilizó XS(VMCQI) basado en plásmidos en E. coli, casi todos la L-arabinosa en el
hidrolizado hemicelulósico de la mazorca de maíz se ha reducido a L-arabitol .
Para diseñar E. coli para una producción más económica de xilitol libre de arabitol a partir de
hidrolizado hemicelulósico de la mazorca de maíz , el objetivo de este estudio es realizar una
integración cromosómica de copias múltiples de los genes XR de N. crassa controlados por un
promotor constitutivo para lograr una producción estable de xilitol.
Un plásmido que contenía una secuencia IS5 (una familia de secuencias de inserción y los genes N.
crassa XR dirigidos por un promotor P43 se construyeron para la integración cromosómica en
múltiples ubicaciones.
Por otra parte, una XR mutante con una actividad enzimática mucho menor hacia la L-arabinosa se
logró y una E. coli libre de plásmidos en conjunto con este mutante se construyó. La sinergia se
manifestó como selectividad incrementada tal que la formación de L-arabitol se eliminó
completamente en la producción de xilitol a partir de hidrolizado hemicelulósico de mazorca.
https://www.nature.com/articles/srep26567.pdf
https://es.wikipedia.org/wiki/Alimento_hidrolizado
promotor: Se considera que los promotores son regiones reguladoras cis-acting que dirigen la
transcripción de otras regiones adyacentes o cercanas al ácido ribonucleico
El hidrolizado hemicelulósico de bagazo de caña de azúcar fue obtenido por hidrólisis ácida en
reactor de acero inoxidable de 250 L, a 120 ºC y 20 min, usando ácido sulfúrico 0,07 N, con
relación sólido:líquido 10:1. La eliminación de partículas sólidas se realizó por centrifugación.