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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE BABAHOYO

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS


ESCUELA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA

TEMA DE TRABAJO DE INVESTIGACIÓN


Título: Monitoreo y aislamiento del nematodo agallador de
raíces Meloidogyne javanica en suelos agrícolas de la zona de
Babahoyo.
ASIGNATURA:
NEMATOLOGÍA
ESTUDIANTES
CATHERINE GABRIELA GARCIA BUSTAMANTE
CRISTIAN JOEL ZAMORA CHAMORRO
EITER NEY RODRIGUEZ CAGUA
JAIME RENATO COLOMBATTI MORAN
RUTH GABRIELA VARGAS ULLON
YULISSA MARIBEL GUINGLA CRIOLLO

CATEDRATICA:
DRA. CARMEN GENOVEVA TRIVIÑO GILCES

SEMESTRE
SEPTIMO MATUTINO

PERIODO LECTIVO
SEPTIEMBRE 2018 – FEBRERO 2019
INDICE

I. TITULO ................................................................................................................................ 3
II. INTRODUCCION ................................................................................................................ 4
2.1. ANTECEDENTE ............................................................................................. 4
2.2. IMPORTANCIA DE LOS NEMATADOS ......................................................... 5
2.3. AÑOS QUE CAUSA ....................................................................................... 5
2.4. JUSTIFICACION ............................................................................................ 5
III. OBJETIVOS .................................................................................................................... 6
3.1. Objetivo General ............................................................................................. 6
3.2. Objetivo Específico ......................................................................................... 6
IV. MARCO TEORICO ........................................................................................................ 7
3.1. Control de Meloidogyne javanica ...................................................................... 10
V. MATERIALES Y METODOS ....................................................................................... 11
5.1. Ubicación de la practica ................................................................................ 11
5.2. Materiales ..................................................................................................... 11
5.3. Colecta de muestra de suelo en 10 campos diferentes ................................. 11
5.4. Trasplante plántulas de tabaco en los suelos colectados.............................. 12
5.5. Mantenimiento de plántulas durante los 50 días ........................................... 12
5.6. Extracion de las raices .................................................................................. 12
5.7. Evaluacion y conteo de números de agallas presente en las raíces causadas
por el nematodo en estudio ..................................................................................... 12
VI. CONCLUSIONES......................................................................................................... 13
VII. RECOMENDACIONES ............................................................................................... 13
VIII. BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................................ 14
IX. ANEXOS ........................................................................................................................ 16

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I. TITULO

Monitoreo y aislamiento del nematodo agallador de raíces Meloidogyne


javanica en suelos agrícolas de la zona de Babahoyo.

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II. INTRODUCCION
El presente trabajo de investigación, ha sido propuesto como un trabajo
grupal para los estudiantes de la Asignatura Nematología correspondiente al
SEPTIMO NIVEL, titulado: “Monitoreo y aislamiento del nematodo agallador de
raíces Meloidogyne javanica en suelos agrícolas de la zona de Babahoyo”

El trabajo consiste en la realización de una observación para determinar la


presencia de la especie M. javanica en diferentes campos agrícolas de la
provincia de Los Ríos, utilizando el hospedero diferencial NC 95.

Se espera obtener resultados luego de realizar el trasplante en macetas con


suelos de diferentes sectores de la provincia de Los Ríos, los mismos que serán
provistos por los estudiantes quienes deberán obtener dos muestras cada uno,
siendo de diferentes sectores, sin repetirse ninguno, la ubicación de cada lugar
donde se obtengan las muestras deberán ser de campos cultivados, no
cultivados y forestales.

Cada planta cultivada deberá ser arrancada a los sesenta días después del
trasplante, se llevara a efecto la evaluación y conteo del número de agallas
presentes en las raíces causadas por el nematodo M. javanica.

2.1. ANTECEDENTE

Estudios anteriores demuestran que el nematodo Meloidogyne javanica


se le conoce como el nematodo javanes de los nódulos radiculares, es la especie
que infecta a ciertos duraznos y principal mente al cultivo de tabaco. Por otra
parte, en analisis realizados se manifiesta que Meloidogyne javanica fue también
encontrado en raíces de la planta de olivo (Olaea europea) en Portugal se dice
que la examinaron histología de raíces infestadas de olivo de cualquier especie
demostró la formación de células grandes inducidas. Se caracteriza por tener
estructuras que se diferencian de las demás especies, tiene líneas laterales que
son incisuras distintas en el corte a través de la estría del diseño perineal así
poco o ninguna estría intacta extendiéndose del dorso al sector ventral. Por
último se menciona que es el primer reporte de M. javanica en el cultivo de
Ocumo en Venezuela y no se dispone de estudios relacionados.

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2.2. IMPORTANCIA DE LOS NEMATADOS

El estudio de los nematos es de gran importancia debido que en suelos


infectados y plantas susceptibles a Meloidogyne javanica, pueden llegar afectar
la producción y rendimiento del cultivo. Las pérdidas de cosecha anuales
estimadas debidas a nematodos parásitos de plantas en la producción agrícola
mundial se aproxima al 11 al 14%. La prevención es la mejor manera de controlar
los patógenos del suelo, especialmente los nematodos. Finalmente, Las
pérdidas de producción causadas por especies de Meloidogyne en los
cultivos varían entre el 15 y el 60%. (DEERE, 20178).

2.3. AÑOS QUE CAUSA

Los daños ocurren generalmente en etapa juvenil 2, aquí la larva puede


penetrar a la raíz, moviéndose entre las células no diferenciadas de la raíz, e
introduce su cabeza en el cilindro central en desarrollo, estas larvas inducen la
formación de células gigantes de las cuales continúan alimentándose, por medio
de su estilete perforan las células en el cilindro vascular, aumentándose así la
proporción de la división celular en el pericelo; esta da origen a células gigantes
formadas por el agrandamiento de las células. Al mismo tiempo hay una intensa
multiplicación de células vegetativas alrededor de la cabeza de la larva. Estos
cambios son acompañados por el engrosamiento de raíces o tubérculos para
formar agallas o conspicuas.

2.4. JUSTIFICACION

La situación descrita despierta el interés de realizar “Monitoreo y


aislamiento del nematodo agallador de raíces Meloidogyne javanica en suelos
agrícolas de la zona de Babahoyo” el mismo que nos mostrara datos bajo un
rigor investigación, los cuales se desconoce por no haber anteriores prácticas en
este trabajo. Determinar la cantidad de nematos nos permitirá analizar las
condiciones en la que se encuentra el cultivo.

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III. OBJETIVOS

3.1. Objetivo General


 Determinar la presencia de la especie M. javanica en diferentes campos
agrícolas de la provincia de Los Ríos.

3.2. Objetivo Específico


 Evaluar la presencia de M. javanica en campos cultivados, no cultivados y
forestales de la provincia de Los Ríos utilizando el hospedero diferencial NC
95.

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IV. MARCO TEORICO
EcuRed (2018) indica que los daños causados por (Meloidogyne spp) que
son producidos en la raíz donde forma agallas, debido a una hipertrofia e
hiperplasia de los tejidos provocados por la presencia de las hembras, y una
posterior necrosis, lo cual impide una normal absorción del agua y nutrientes por
parte de la planta. Las heridas son vía de entrada de otros microorganismos
(virus, bacterias, hongos). Todo esto conduce a una gran disminución del vigor
de la planta y rendimiento del cultivo.

Meloidogyne javanica presenta 4 estadíos larvales o juveniles; el estadío L1


lo cumple dentro del huevo, el estadío L2 es el infectivo, que es el que está libre
en el suelo; a partir de ese estadío la hembra comienza a engrosarse y se fija a
la raíz de la planta. El ciclo de vida se completa entre 25 y 60 días en función de
la temperatura del suelo. El estado de resistencia lo constituye el huevo y las
larvas del segundo estadío. (Sistema Nacional de Vigilancia y Monitoreo de
Plagas, 2016).

El tabaco (Nicotiana tabacum) pertenece a la familia de las solanáceas. Es


planta dicotiledónea. Las hojas son lanceoladas, alternas, sentadas o
pecioladas. Corola rojiza, gamopétala, en forma de tubo largo. Las flores se
agrupan en panojas o racimos terminales. Fruto en cápsula, con semillas de color
blanco de pequeñísimo volumen. Es planta vivaz, que rebrota al cortarse. Se
cultiva como anual, aunque en los climas de origen puede durar varios años. El
tallo puede alcanzar los 2 metros de altura. (Agroinformacion, 2014).

Las temperaturas de 25 a 30ºC son ideales para el crecimiento y desarrollo de


este nematodo. Temperaturas inferiores a 15ºC o superiores a 33ºC interrumpen
el desarrollo de las hembras que no llegan a completar la madurez.

La eficacia del nematodo parásito Paecilomyces lilacinus, solo y en


combinación con phenamiphos y ethoprop, para controlar el nematodo de nudo
de la raíz Meloidogyne javanica en el tabaco y la capacidad de este hongo para

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colonizar en el suelo en condiciones de campo se evaluaron durante 2 años en
microplots. Combinaciones y tratamientos individuales del hongo cultivado en
semillas de trigo autoclavadas, M. javanica Los huevos (76,000 por parcela) y
nematicidas se aplicaron a micro parcelas específicas al momento del trasplante
de tabaco el primer año. (Nematology, 1998).

La expresión de un gen reportero de g-us vinculado a un promotor de


hemoglobina Parasponia andersoniise ha estudiado en plantas de tabaco
transgénicas después de la infección por Meloidogyne javanica. Las raíces
transgénicas se recolectaron en diferentes momentos después de la inoculación
de nematodos y se tiñeron histoquímicamente para la expresión del gen
gus. Durante las primeras etapas de la infección (0-2 semanas) hubo poca
expresión en células gigantes, en contraste con otras células de la raíz. En
etapas posteriores de la infección (3-6 semanas) hubo una fuerte expresión de
gus en células gigantes, prácticamente sin expresión en otras células de la raíz.
(JONES & EHSANPOUR, 1996).

Las zonas productoras de tabaco negro tipo García en Santander y


Boyacá, han venido presentando problemas fitosanitarios graves, entre los
cuales cabe destacar especies de nemátodos del nudo radical, las cuales fueron
identificadas como Meloidogyne javanica y Meloidogyne incógnita razas 1 y 2.
Para enfrentar la problemática, en primera instancia, se tomó de base la variedad
Ica Guane por su calidad industrial y la variedad de tabaco Virginia NC-95 como
fuente de resistencia a Meloidogyne incógnita razas 1 y 3. (Coronado Silva,
Arguello Castellanos, & Moreno Rodríguez, 1996).

Se realizó un experimento bajo invernadero que tuvo como objetivo


determinar los efectos de la interacción de hongos micorriza arbusculares (HMA)
y el nematodo Meloidogyne javanica en plántulas. Para esta evaluación se utilizó
un diseño completamente al azar con cinco tratamientos y siete unidades
experimentales por tratamiento; los cuales consistieron en la combinación de dos
inóculos de HMA una comercial y Glomus mosseae; con inóculo de cinco mil
huevos de M. javanica, y sus respectivos controles. (Escobar, 2017).

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Dávila Negrón (2012) mensiona que el género Meloidogyne es el más
importante por su distribución, el rango de hospedantes y los daños que origina
en las plantas cultivadas. En las hortalizas frecuentemente muestra altas
poblaciones y predomina sobre otros nematodos fitoparásitos. Son organismos
biótrofos que se alimentan del citoplasma de las células vivas de su planta
hospedante, y secundariamente se convierten en agentes patógenos.

Los nematodos pueden ingresar a la raíz y vivir dentro de ella, o


alimentarse por fuera de ésta. Además, debido a que viven debajo del suelo y
que por su tamaño no pueden ser observados a simple vista, el diagnóstico de
problema de nematodos usualmente se vuelve complicado.

 Lesiones en forma de puntos negros


 Crecimiento reducido
 Aparición de nudos o agallas
 Raíces hinchadas (Seminis, 2017).

El desarrollo de los nematodos en el suelo está influenciado por suelo


impropiamente tratado por la humedad, la aireación y temperatura del mismo,
plantas en contacto con la tierra y material de propagación vegetativa infectado.
Las condiciones favorables son: suelos ligeros con buena humedad y
temperatura óptima de 25 a 30ºC son ideales para el crecimiento y desarrollo de
Meloidogyne. Temperaturas inferiores a 15ºC o superiores a 33ºC interrumpen
el desarrollo de las hembras que no llegan a completar su madurez. Los
nematodos foliares y del tallo son típicamente introducidos en el invernadero en
los esquejes y plantas enraizadas; son más perjudiciales cuando los cultivos de
invernadero son infectados al principio del ciclo de producción debido al uso
generalizado de los medios de cultivo sin suelo , se propagan por las
herramientas y la maquinaria agrícola manchadas por partículas de suelo
contaminadas. (Lezaun, 2016).

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3.1. Control de Meloidogyne javanica

Cinco Miguel (2001) expresa que el contro Físico es un método usado


para la erradicación de M. incognita y M javanica en cultivos de la vid, se inicia
con un tratamiento de agua caliente a rizomas de la vid, el tiempo en que se debe
de mantener es por 20 minutos para poder eliminar completamente al nematodo.

Químico. Primordialmente este método es muy usado el objetivo es reducir el


incremento de la población, para que no se tenga daño por este nematodo y no
afecte la devaluación de la calidad del producto, los productos usados son:
Fumigantes: 1-3 D Dicloropropeno Bromuro de metilo.

Biológicos. Para este método se han utilizado hongos que actúan como
biocntroladores para nematodos agalladores se ha considerado el G. Mosseae
y P. lilacinus, la presencia de estos agentes parásitos que matan a los
nematodos, es que inhiben la infección por M. javanica.

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V. MATERIALES Y METODOS

5.1. UBICACIÓN DE LA PRACTICA

El trabajo de investigación se lo realizo en los predios de la Facultad de Ciencias


Agropecuarias de la Universidad Técnica de Babahoyo, ubicada en el km 7 ½,
vía Babahoyo - Montalvo, del cantón Babahoyo, provincia de Los Ríos,
coordenadas geográficas 01° 49° de latitud Sur y 79° 32° de longitud Oeste. Esta
zona posee un clima tropical, con una temperatura media anual de 25.8 °C, con
una precipitación anual de 2203.88 mm; con una humedad relativa de 82%,
evaporación de 1241.4 mm y una altura de 8 m.s.n.m. 1/.

5.2. MATERIALES
 Maceteros
 Suelos De Diferentes Zona De La Provincia De Los Rios
 Semillas De Tabaco
 Realización De Un Semillero De Tabaco.

Se procedió a realizar un sustrato para hacer el semillero el cual estaba


compuesto a base de compost, humus de lombriz, tierra de sembrado y tierra
común.

En el cual los resultados de germinación no fueron favorable obteniendo un 0%


de germinación.

5.3. COLECTA DE MUESTRA DE SUELO EN 10 CAMPOS DIFERENTES


1. Muestra de suelo VENTANAS-LOS RIOS
2. Muestra de suelo PIJULLO-LOS RIOS
3. Muestra de suelo – LOS RIOS
4. Muestra de suelo VINCES – LOS RIOS
5. Muestra de suelo CEDEGE,PALMAR – LOS RIOS
6. Muestra de suelo MONTALVO- LOS RIOS
7. Muestra de suelo PREDIOS LA FACIAG-LOS RIOS
8. Muestra de suelo el SALTO –LOS RIOS
9. Muestra de suelo ZAPOTAL – LOS RIOS
10 Muestra de suelo LOS ANGELES – LOS RIOS

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5.4. TRASPLANTE PLÁNTULAS DE TABACO EN LOS SUELOS
COLECTADOS.
Como los resultados de germinación no fueron favorables dieron como resultado
0%, se realizó la compra de almacigo para hacer el trasplante en cada macetero
y luego sembrarlas en los diferentes sustrato donde la planta iba a desarrollar su
ciclo vegetativo.

5.5. MANTENIMIENTO DE PLÁNTULAS DURANTE LOS 50 DÍAS

Una de las labores que se realizó durante este tiempo fue el riego ya que la
planta de tabaco necesita de mucha agua para su desarrollo y crecimiento.

Se realizó control de maleza manual para evitar la competencia de agua, luz,


nutrientes, espacio, agua.

5.6. EXTRACION DE LAS RAICES

Luego se realizó la extracción de raíces, sacando las plantas del macetero, luego
se procedió a lavar las raíces con abundante agua para que queden limpia de
residuos de tierra y con mucho cuidado sin dañarlas ,para que se puedan
observar los síntomas de la agallas que había causado Meloidogyne javanica .

5.7. EVALUACION Y CONTEO DE NÚMEROS DE AGALLAS


PRESENTE EN LAS RAÍCES CAUSADAS POR EL NEMATODO EN
ESTUDIO

El día 16 de enero se llevó a cabo la práctica de evaluar y contar agallas bajo la


supervisión de la Dra. CARMEN TRIVIÑO pero las raíces no presentaron
ningunas agallas en los distintos tipos de suelo de diferentes zona de las
provincia de LOS RIOS.

Luego se cortaron las raíces de las plantas, se las guardo en una funda plástica
con la respectiva identificación que se le hacen a una muestra de raíces para
luego llevarlas al labotario donde se realizara el conteo de población por el
Método Licuado Tamizado.

En clases se llenó una tabla que la Dra. nos facilitó se anotó la cantidad de
agallas ocasiona por (Meloidogyne javanica).

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VI. CONCLUSIONES

El trabajo consiste en la realización de una observación para determinar la


presencia de la especie M. javanica en diferentes campos agrícolas de la
provincia de Los Ríos, utilizando el hospedero diferencial NC 95. Los daños de
dicho nematodo ocurren generalmente en etapa juvenil 2, aquí la larva puede
penetrar a la raíz, moviéndose entre las células no diferenciadas de la raíz, e
introduce su cabeza en el cilindro central en desarrollo, estas larvas inducen la
formación de células gigantes.

De acuerdo a los analisis observados, las raíces no presentaron ningunas


agallas sometidos a los distintos tipos de suelo de diferentes zona de las
provincia de Los Rios. Sin embargo, al haber presencia de este tipo de nematos,
generarían cambios los cuales están acompañados por el engrosamiento de
raíces o tubérculos para formar agallas o conspicuas.

VII. RECOMENDACIONES

 Una de las recomendaciones que debemos de recalcar es que la semilla al


sembrarla necesita riego tres veces por día para tener un gran porcentaje de
germinación ya que esto fue una problemática para los compañeros que se
encargaron de hacer el porcentaje de germinación, según la información
brindada por los expertos en el cultivo de tabaco en la zona de Ventanas.

 Evaluar la actividad de diferentes tipos de nematodos en clases de suelo


alcalinos y salinos.

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VIII. BIBLIOGRAFÍA

Agroinformacion. (13 de marzo de 2014). El cultivo de Tabaco. Obtenido de


http://canales.hoy.es/canalagro/datos/herbaceos/industriales/tabaco.htm

Cinco Miguel, L. (Diciembre de 2001). ESPECIES IMPORTANTES DEL


GENERO Meloidogyne. Recuperado el 22 de Enero de 2019, de
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http://repositorio.uaaan.mx:8080/xmlui/bitstream/handle/123456789/3719
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Coronado Silva, Arguello Castellanos, & Moreno Rodríguez. (1996).


Mejoramiento genético de tabaco García por resistencia a Meloidogyne
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request_locale=fr&recordID=CO1999000042&query=&sourceQuery=&so
rtField=&sortOrder=&agrovocString=&advQuery=&centerString=&enable
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Dávila Negrón, M. (7 de Diciembre de 2012). Nemátodos: su importancia en el


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Investigación Composta:
http://www.uprutuado.edu/sites/default/files/documents/academicos/proy
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DEERE, J. (28 de Junio de 20178). Nematodos y su Importancia en la


Agricultura. Recuperado el 22 de Enero de 2019, de Nematodos:
https://www.deere.com.mx/es/nuestra-
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novedades/2017/jun/importancia-nematodos.html

EcuRed. (18 de noviembre de 2018). Meloidogyne javanica. Recuperado el 18


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Escobar, J. S. (2017). Efectos de la interacción de hongos micorrizo arbusculares


(HMA) y Meloidogyne javanica. doi:10.21931

14
JONES, & EHSANPOUR. (28 de Diciembre de 1996). Expresión de la
glucuronidasa en raíces de tabaco transgénicas con un promotor de la
parasponía en la infección por Meloidogyne javanica. Obtenido de
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Lezaun, J. (Abril de 2016). Nematodos fitoparásitos: una plaga mundial.


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https://www.croplifela.org/es/plagas/listado-de-plagas/nematodos-
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Nematology, J. o. (20 de Octubre de 1998). Evaluación de Paecilomyces lilacinus


como agente de control biológico de Meloidogyne javanica sobre el
tabaco. Obtenido de PMC:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2618854/

Seminis. (17 de Octubre de 2017). Qué Son Los Nematodos. Recuperado el 22


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http://www.seminis.mx/blog-que-son-los-nematodos/

Sistema Nacional de Vigilancia y Monitoreo de Plagas. (Julio de 2016).


Meloidogyne javanica. Obtenido de sinavimo:
https://www.sinavimo.gov.ar/plaga/meloidogyne-javanica

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IX. ANEXOS

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