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Ana Sahirí Arámbula De La Torre 291773

Nutrición microbiana

Para que un microorganismo pueda crecer, reproducirse y mantenerse debe


contener los nutrientes básicos y energía, para obtener esta energía han
desarrollado diferentes mecanismos, dependiendo del mecanismo que utilicen
se les nombra de diferente manera. A los que obtienen la energía por la
oxidación de compuestos orgánicos e inorgánicos se les llama quimiototrofos,
los fototrofos usan la energía que viene de la luz, los organototrofos oxidan
moléculas orgánicas preformadas, como los azucares. Todas estas buscan
obtener electrones o hidrógeno. Los litotrofos obtienen los electrones de
moléculas inorgánicas reducidas, como sulfuro de hidrogeno y amonio. Los
autótrofos utilizan el CO2 como única fuente de carbono y los heterótrofos usan
varias moléculas orgánicas reducidas, incluyendo hidrocarbonos, lípidos, ácidos
orgánicos, azucares simples y polisacáridos. Esto se resume en la tabla 2.1.
Las células microbianas necesitan varios elementos de la tabla periódica,para su
nutrición los macronutrientes que utiliza son carbono, hidrógeno, oxigeno y
nitrógeno deben de estar en concentraciones de g/L en el medio de cultivo.
Estos junto con fosforo y azufre son los componentes principales de los
polímeros celulares principales, siendo estos los lípidos, ácidos nucleicos,
polisacáridos y proteínas. Los elementos que se necesitan en concentración de
mg/L son el calcio,
hierro, potasio y
magnesio. Los
elementos traza
solo se necesitan
en microgramos,
siendo los
primarios el
cobalto, cobre,
manganeso,
molibdeno, níquel,
selenio y zinc.

Macronutrientes
En las fermentaciones heterótrofas se necesita que las fuentes de carbono estén
en concentraciones de entre 10-20g/L o mayores, ya que estos proveen
“esqueletos” de carbón para la biosíntesis y también sirven como fuente de
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energía. Los azúcares, principalmente la glucosa son fuentes de carbono y


energía.
El hidrogeno y el oxigeno se obtienen del agua y de compuestos orgánicos. En
la respiración celular aeróbica muchos microorganismos dependen del oxígeno
molecular como final aceptor de electrones y también para la síntesis de
compuestos específicos.
El nitrógeno contenido en los microorganismos se encuentra en gran parte en
las proteínas estructurales y funcionales en un porcentaje de 15% (p/p),
normalmente se utilizan a concentraciones de 1-2g/L, un ejemplo de fuente de
nitrógeno más utilizada son las sales de amonio, pero también se utiliza la urea.

Micronutrientes
El fosforo normalmente proviene de los iones fosfato, a veces como buffer de
pH. Este elemento es esencial para la síntesis de ácidos nucleicos,
intermediarios del metabolismo de carbohidratos y compuestos que trabajan en
la traducción de energía. Las concentraciones del medio normalmente no se
necesitan mayores de 100mg/L.
Otro micronutriente necesario para los microorganismos para la producción de
azufre que contienen los aminoácidos, que son la cistina y la metionina y
algunas vitaminas. Para incorporarlo en el medio se utilizan sulfatos inorgánicos
o sal de sulfuro en concentraciones de 20-30mg/L.
Los elementos como calcio, hierro, potasio y magnesio, se agregan en
cantidades menores de 10-20mg/L. El hierro se utiliza para la oxidación-
reduccion de enzimas, el potasio lo requieren las enzimas que están en la
síntesis de proteínas y también como contraión para la columna vertebral de
fosfato de ADN. El magnesio estabiliza los ribosomas, y son necesarios para
mantener la pared celular e integridad de la membrana. El sodio y el potasio se
utilizan como bombas de energía quimiosmótica.

Elementos traza
Los elementos traza incluyen cobalto, cobre, manganeso, molibdeno, niquel,
selenio y zinc. Estos elementos se utilizan en concentraciones de 0.1-1mg/L o
menores. Los microorganismos que pueden vivir a estas bajas concentraciones
se llaman fotótrofos. Los llamados auxotrofos son los que no pueden crecer sin
sustancias orgánicas adicionales, como aminoácidos o vitaminas.

Absorción de nutrientes
Los nutrientes del medio son transportados adentro de la celula a través de la
membrana celular.
La difusión pasiva es la que no requiere portadores, pero este mecanismo es
ineficiente, ya que la mayoría de los solutos deben de ser transportados por
mecanismos activos específicos, porque las membranas son permeables
selectivamente. En la difusión facilitada no utiliza una entrada directa de energía,
si no que utiliza únicamente el gradiente de concentración a través de la
membrana y este es reversible. La absorción de nutrientes nunca termina, ya
que al momento que entran estos se metabolizan.
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Los mecanismos de transporte activo deja que se acumulen los materiales, sin
que afecte el gradiente de concentración. Estos mecanismos utilizan energía
metabolica, ATP o gradientes de proton para llevar a cabo el transporte, además
que los portadores de proteína también están involucrados.
Los nutrientes que entran a la celula, como el azúcar, aminoácidos o una
molecula acida molecular son transportados con un proton, esto se llama
simporte y se lleva a cabo por los gradientes de proton que también son usados
para establecer un gradiente del ion sodio a través de la membrana. Donde los
iones de sodio salen para que los protones entren a la celula, esto es llamado
antiporte. Algunos microorganismos pueden modificarse durante la absorción,
como cuando se lleva a cabo las translocación de grupos.
En los periodos donde las concentraciones de los nutrientes son muy bajas,
algunos organismos producen metabolitos que pueden eliminar los iones
metálicos que quedan.

Utilización de materiales de alto peso molecular


Para poder utilizar sustratos poliméricos los protozoarios y algunos organismos
eucariotas que no tienen pared celular pueden introducirlos por fagocitosis, por
lo que la vacuola secreta enzimas hidroliticas que se encargan de romper los
polímeros en monómeros. Los organismos que tienen una pared celular deben
secretar enzimas hidroliticas extracelulares para asi poder introducir los
monómeros.

Cinetica del crecimiento microbiano


Se puede definir el crecimiento microbiano como un aumento ordenado de los
componentes, lo que lleva a que la célula crezca y después se divida. Esto no es
del todo exacto, ya que implica que siempre hay división celular, siendo que bajo
ciertas condiciones el crecimiento se da sin división celular. Cuando esto pasa,
el número de células se mantiene constante pero la concentración de la biomasa
esta aumentando.
Cada vez que la celula se divide se llama generación y el tiempo que toma para
esto se le llama tiempo de generación. El tiempo de duplicación celular se
expresa como 𝑡𝑑 . El crecimiento asincronico es el tiempo cuando toda las
células están a diferentes etapas de su crecimiento.
Cuando se dice que se tiene una fermentación Batch es porque es un medio
cerrado, donde todos los nutrientes están presentes solo al principio, dentro de
un volumen fijo. Con control de pH y de los gases. En los sistemas Batch
abiertos, estos se alimentan de forma continua y el volumen del medio se
mantiene constante y en los sistemas Batch alimentados son donde se
alimentan de forma continua, intermitente o se agregan como un único
suplemento y el volumen del lote aumenta con el tiempo.

El crecimiento Bacth conlleva varias etapas, siendo estas la fase retardo, fase de
aceleración, fase de crecimiento exponencial, fase de desaceleración, fase
estacionaria y la muerte, en la figura 2.1 se muestran estas fases en una grafica.
En la fase de retardo, no pasa relativamente nada, no se observa crecimiento ni
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duplicación, lo único que pasa es que las células están adaptándose al medio.
Cuando las células se inoculan estas no contienen las enzimas, vitaminas, ni
cofactores para llevar a
cabo la división celular.
La fase de retardo puede
ser mayor si la fuente de
carbono que se utiliza en
el medio es diferente a la
que se utilizo en el
crecimiento de los
microorganismos, de
igual manera afecta la
presión osmótica del
medio, si se pasa de uno
de menor presión(menor concentración de soluto) a uno con mayor presión
(mayor concentración de soluto). También afectan la edad, concentración,
viabilidad y morfolofia del inoculo. Anteriormente se han utilizado
microorganismos que se encuentran en la fase exponencial para disminuir el
tiempo de retardo. Ya que se adaptan las celulas se comienza la fase de
aceleración. Las células se dividen aumentando su frecuencia hasta alcanzar la
tasa de crecimiento máxima (𝜇 max), aqui es donde se dice que el crecimiento
exponencial inicia y el numero de celulas y biomasa aumentan de forma
constante. Se puede considerar que el aumento de la biomasa de la célula es
una reaccion catalitica, entonces la tasa de crecimiento es dependiente de la
concentracion de biomasa.

Para calcular 𝑥𝑡 se utiliza la ecuacion 𝑥𝑡 = 𝑥0 𝑒 𝜇𝑡 , y al aplicar logaritmo natural se


obtiene una ecuacion con forma de ecuacion de la recta de la forma 𝑙𝑛𝑥𝑡 =
𝑙𝑛𝑥0 + 𝜇𝑡 donde 𝑥𝑡 es la concentracion de la biomasa despues del tiempo t, 𝑥0
es la concentracion de la biomasa al inicio del crecimiento exponencial. Para
calcular el tiempo de duplicacion o
tiempo de generacion (𝑡𝑑 ), se toma
en cuenta que el numero de celulas
al iniciar es igual a 1. La formula
para calcular el tiempo de
0.693
duplicacion es 𝑡𝑑 = 𝜇 . En la figura
2.2 se explica como 𝜇 es la
pendiente.
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El modelo de Monod
(figura 2.3) explica como
es que los nutrientes
limitantes afectan en la
tasa de crecimiento, esto
puede llevar a una
interrupción de
crecimiento. La ecuacion
de Monod de representa
de la siguiente manera 𝜇 =
𝜇𝑚𝑎𝑥 𝑆
donde 𝜇𝑚𝑎𝑥 es el crecimiento especifico maximo por hora de las celulas.
𝐾 +𝑆
𝑠
Cuando la concentracion del sutrato no es limitante se puede tomar en cuenta
𝑔
los siguientes factores 𝑆 = 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑙𝑖𝑚𝑖𝑡𝑎𝑛𝑡𝑒 ( 𝐿 ) ; 𝐾𝑠 =
𝑐𝑜𝑛𝑠𝑡𝑎𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝑠𝑎𝑡𝑢𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛, concentración (g/L) del nutriente limitante que deja que
el crecimiento se de a la mitad de la tasa especifica mayor.
La fase de desacerelacion comienza cuando el nivel del sutrato disminuye y se
empieza a hacer limitante y ya no puede sostener la 𝜇𝑚𝑎𝑥 .
Cuando inicia la fase estacionaria es cuando el crecimiento ya no se lleva a
cabo, pero aunque no haya crecimiento, ni mas aumento en la biomasa, no
significa que la celula ya no esta activa metabolicamente, si no que esta esta
intentando de sobrevivir utilizando los compuestos que tiene guardados
intracelularmente, tambien pueden utilizar los nutrientes de las celulas que ya se
lisaron y tambien pueden llegar a producer metabolitos secundarios.
Dependiendo de la forma en la que las celulas sobreviven a las situaciones
adversas del medio ambiente les da la capacidad de alargar el period de no
llegar a la fase de muerte.

Los sistemas Batch nunca llegan a una condicion de estabilidad. Es por esto que
tiene mucho impacto economico por los tipos de operaciones que se llevan a
cabo, porque llega un mometno donde no se esta produciendo ningun product
microbiano en el reactor.

Optimizacion del fermentador Batch


Para que en un sistema Batch funcione y de los resultados que se esperan,
todos los parametros que se llevan a cabo dentro de esta deben ser
optimizados. Uno de los parametros mas importantes es el coeficiente de
rendimiento (Y), este es determinado con la cantidad del nutriente limitante. Con
respecto a la biomasa el coeficiente de rendimiento se calcula 𝑥 = 𝑌𝑥⁄𝑆 (𝑆 − 𝑆𝑡 )
donde 𝑥 =concentracion de la biomasa (g/L) 𝑌𝑥⁄𝑆 =coeficiente de rendimiento (g
de biomasa/ g sustrato utilizado), S= concentracion inicial del sustrato (g/L) y
𝑆𝑡 =concentracion residual de sustrato (g/L).
Cuando se calcula el coeficiente de rendimiento respecto a la biomasa se
relaciona con la cantidad de biomasa producida por cada gramo de sustrato
utilizado. Entre mas alto sea el coeficiente de rendimiento hay mayor porcentaje
de conversion del sustrato inicial a biomasa. El coeficiente de rendimiento
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cambia dependiendo de lo que estemos buscando, como ahora es el caso de


productos metabolicos microbianos (p) donde aquí el coeficiente de rendimieto
esta relacionado con la cantidad de metabolitos producidos en relacion con la
cantidad de sustrato utilizada 𝑌𝑝⁄ . Es muy importante calcular el coeficiente de
𝑆
rendimiento ya que nos puede decir cuanto nos costara economicamente
hablando, llevar a cabo esa fermentación en el reactor.

Para poder escoger el reactor y todos sus parametros es necesario jugar con las
condiciones de operación, como varira los constituyentes del medio, la
concentracion de los componentes, pH, temperatura, etc., tambien es muy
importante determinar la tasa de crecimiento específica máxima (𝜇 max). Para
que se de la productividad óptima el microorganismo debe de cultivarse a la
1 𝐾 1 1
𝜇 max. Para calcular 𝜇 max, se utiliza 𝜇 = 𝜇 𝑆 ∗ 𝑆 + 𝜇 x, que tiene la forma de
𝑚𝑎𝑥 𝑚𝑎𝑥
ecuacion de la recta.

Cinetica de crecimiento continuo


Las fermentaciones en cultivo continuo son muy utiles en los estudios
ecologicos, como para examinar mutaciones. El usarlos de forma indutrial tiene
muchas limitaciones. (figura 2.4)
Este tipo de fermentacion empieza igual que el Batch cerrado, pero el
crecimiento exponencial se puede extender indefinidamente. Se mantiene
constante todos los parametros, volumen, caudal de entrada, caudal de salida,
concentracion, pH, tempertaura etc.

La tasa de crecimiento no solo depende del flujo volumetrico si no que tambien


de la tasa de dilucion (D), que es el recíproco del tiempo de residencia medio.
𝐹
𝐷 = 𝑉 , donde D= tasa de dilucion (por hora), F= flujo (L/h) y V= volumen de
reactor (L).
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En condiciones estables se puede determinar el balance de biomasa como


𝑑𝑥
= 𝑡𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑐𝑟𝑒𝑐𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑒𝑛 𝑒𝑙 𝑟𝑒𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 −
𝑑𝑡
𝑡𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑟𝑑𝑖𝑑𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑟𝑒𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 (𝑙𝑖𝑥𝑖𝑣𝑖𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛), donde se obtiene que 𝜇 = 𝐷.

Si la tasa de dilucion es mayor a la 𝜇 max, todas la celulas se lixivian ya que no


tienen el tiempo suficiente para duplicarse. Es por esto que se debe de trabjar
por debajo de la tasa de dilucion critica 𝐷crit, esta nos da un limite para que no
se lixivien las celulas.

En condiciones de equilibrio se puede predecir la concentracion de sustrato


𝜇 𝑆𝑡
residual en el reactor cambiando la 𝜇 por D en el modelo de Monod 𝐷 = 𝐾𝑚𝑎𝑥 ,
+𝑆 𝑠 𝑡
donde 𝑆𝑡 es la concentración de sustrato residual en estado estacionario en el
reactor a una velocidad de dilución fija. Acomodando la ecuacion para despejar
𝐷𝐾
𝑆𝑡 , queda de la siguiente manera 𝑆𝑡 = 𝜇 𝑆−𝐷.
𝑚𝑎𝑥

Un sistema llamado quimiostato es donde la concentracion del nutriente limitante


se ajusta, por el contrario un tusbidostato es donde los nutrientes del medio no
son limitantes.

Cuando se rebasa la 𝐷crit la concentración del sustrato de entrada será igual a


la concentración de salida. Por lo tanto, este reactor continuo puede describirse
como un quimiostato autorregulado limitado por nutrientes. En la figura 2.5 se ve
donde es donde se llega a la tasa de dilución critica, ahí es donde los valores
empiezan a disminuir.

La biomasa en estado estacionario 𝑥̅ se calcula asi 𝑥̅ = 𝑌𝑥⁄𝑆 (𝑆𝑅 − 𝑆𝑡 ), donde 𝑆𝑅


es la concentración de sustrato que esta entrando.

Entre más alta sea la tasa de dilución, más rápido crecen las células, que a la
vez resulta un crecimiento simultaneo en la concentración residual del sustrato y
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como consecuencia la reducción de la biomasa en el estado de equilibrio.

Monitoreo de crecimiento microbiano en el cultivo


En todo momento en un fermentador se debe de estar en constante conteo el
número de células y/o la biomasa para monitorear el progreso. Hay métodos
directos e indirectos para determinar el número de células, los directos incluyen
peso seco, conteo de células, métodos de conteo de placas y en los métodos
indirectos entra la tubidimetría, espectrometría, estimación de los componentes
celulares (proteína, DNA, RNA o ATP) y el monitoreo de producción de dióxido
de carbono o utilización de oxígeno. Depende de la fermentación o de los
requerimientos específicos el escoger un método directo o indirecto, también se
deben de considerar el grado de precisión de la técnica, su sensibilidad y la
duración del análisis.

Métodos directos de conteo microscópico directo


El número de células en suspensión puede ser medido, menos los organismos
filamentosos, por conteos microscópicos directos, usando cámaras de conteo
como Petroff-Hauser o Neubauer. También existen unas que se llaman rejillas
de recuento, al contar el número de células en una proporción de cuadricula, se
puede determinar el número de células por mililitro. Una desventaja que tienen
los métodos directos es que no se pueden distinguir las células muertas de las
células vivas, además de que las muestras deben contener concentraciones
altas de células, como un mínimo es 5x106 células /mL.
Efectos en las condiciones ambientales en el crecimiento microbiano

El crecimiento y desarrollo de las de los microorganismos se ven afectados por


las condiciones físicas y químicas del medio.

Las células crecen más rápido con el aumento de la temperatura, pero como
todo, esto tiene un límite, llega un momento donde se desnaturalizan. También
hay una temperatura mínima hasta donde se da el crecimiento. De estas forma
se induce que todos los organismos tienen una temperatura óptima de
crecimiento y diferentes grupos de microorganismos han evolucionado para
crecer en diferentes rangos de temperaturas.

Los organismos llamados estenotérmicos pueden crecer en un rango de


temperatura aproximadamente de 30ºC y los euritermicos crecen en rangos más
amplios. Los mesofilos tienen un crecimiento optimo en el rango de 20-45ºC y la
minima en 15-20ºC.
Los psicrófilos tienen
temperaturas
optimas menores de
15ºC, esto es porque
sus membranas
contienen una alta
proporcion de ácidos
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grasos insaturados. En la figura 2.6 se muestran los minimos y maximos quelo


orgaanismos tienen con la temperatura. Y en la tabla 2.3 se muestran algunos
ejemplos de procariotas termofilicas.

Los llamados psicotrofos crecen rapidamente en


temperaturas alrededor de los 20ºC, pero son
capaces de crecer lentamente en tmperaturas
menores de 0ºC. Los termofilos tienen una
tempratura optima alrededor de 50ºC. Existen hiper-
termofilos que pueden crecer a 100ªC o mas.

Todos los microorganismos tienen pH optimo en el


cual crecen. Generalmente los hongos crecen en pH
entre 4 y 6. Los acidófilos tienen pH optimo entre 1 y
5.5, para esto tienen mecanismos que están
excluyendo protones para poder mantener el pH
interno. Se puede decir que la mayoría de los microorganismos son neutrófilos,
que crecen en pH de entre 5 y 9. Los que son alcalófilos tienen que tomar a los
protones para mantener su pH interno en un valor bajo.

Aproximadamente el 70-80% (tabla 2.2) de los microorganismos es agua y


aparte requieren de agua libre para poder llevar a cabo actividades metabólicas
específicas. Cuando se tienen altos niveles de solutos como sal o azucares
hacen que el agua de las células salga y que el crecimiento de ellas se detenga.
Para determinar la disponibilidad de agua para un microorganismo se utiliza Aw,
la relación de la presión de vapor del agua en la solución que rodea al
microorganismo se conoce como Psoln, y se puede determinar la actividad del
𝑃
agua de la siguiente manera 𝐴𝑤 = 𝑃 𝑠𝑜𝑙𝑛 , en agua pura la Aw = 0.
𝑤𝑎𝑡𝑒𝑟

Los organismos osmófilos, xerófilos y halófilos acumulan solutos


compensadores, que equilibran la resistencia osmótica del soluto externo.

Los organismos tienen diferentes formas de clasificación dependiendo de sus


requerimientos de oxígeno.
Los aerobios obligados solo pueden crecer en presencia de oxígeno y este es el
aceptor final de electrones en el transporte de estos en la respiración aerobia.
Los anaerobios facultativos pueden crecer sin oxígeno, pero es más eficiente su
crecimiento si este está disponible.
Los microaerofilos requieren el poco oxigeno derivado de la biosíntesis de
algunos productos, pero no pueden vivir en la atmosfera normal de 21% de
oxígeno, si no que solo entre 2 y 10% de este.
Los aerobios aerotolerantes como su nombre lo dice es que es tolerante del
oxígeno, puede crecer con o sin él.
Los anaerobios obligados no pueden crecer en presencia de oxígeno, si llegan a
estarlo mueren.
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La mayoría de los organismos en presencia de oxigeno pueden producir


productos muy tóxicos, cualquiera de estos productos puede destruir cualquier
molécula orgánica que puedan encontrar, incluyendo lípidos, proteínas y ácidos
nucleicos.
Hay tres tipos de enzimas que catalizan a los radicales libres y los vuelven
inofensivos, estos son superóxido dismutasa, catalasa y peroxidasas, que
actúan de la siguiente manera:

Los aerobios y todos lo que pueden tolerar el oxígeno contienen superóxido


dismutasa. Muchos aerobios, pero no aerotolerantes también tienen catalasa.
Los aerobios obligados tienen muy poca habilidad para detoxificar los radicales
de oxígeno y estos no pueden sobrevivir en presencia de oxígeno, esto es
porque no contienen superóxido dismutasa y catalasa.
Cuando la materia orgánica se acumula los microrganismos usan el oxígeno
más rápido de lo que puede ser reemplazado, esto crea un ambiente aeróbico.
Se usan diferentes tipos de métodos para crear una atmosfera anaeróbica como
el uso de agentes reductores como tioglicolato, remover físicamente el oxígeno
agregando gas nitrógeno y/o dióxido de carbono, hay unos tarros llamados
GasPak, que se sellan los cultivos dentro del tarro junto con el catalizador de
paladio y un sistema generador de gas de hidrogeno y el oxígeno se elimina con
el hidrogeno para formar agua. Y por último los gabinetes anaeróbicos a los que
se les agrega una mezcla de gases de nitrógeno, dióxido de carbono e
hidrogeno (80:10:10) y tiene un sistema para remover el oxígeno.

Efectos de la radiación en el crecimiento


Las regiones violetas y azules en la luz visible son las más energéticas, que
pueden llegar a ser dañinas para el microorganismo, ya que pueden generar
oxigeno singulete que es un agente oxidante muy fuerte, que puede dañar
componentes celulares y provocar hasta la muerte de algunos microorganismos.
A la longitud de onda de 260nm que se encuentra dentro del espectro de la luz
ultravioleta, es la más dañina ya que causa daños específicos al ADN. La
radiación ionizante como los rayos gamma emitidos por el núcleo excitado de
60Co, genera radicales libres de OH* y H* y electrones hidratados. El daño que se

causa es la ruptura de enlaces de hidrogeno en moléculas funcionales,


oxidación de muchos grupos químicos y la ruptura de las cadenas de ADN.
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Efecto de la presión hidrostática en el crecimiento


Usualmente presiones mayores a 1atm inhiben el crecimiento microbiano, ya
que en la naturaleza es muy difícil que 1atm se rebase. Muchos
microorganismos marinos deben de ser barotolerantes ya que entre más hondo
estén hay más presión, entre 200-600atm pueden fallar al crecer pero los que
son barofílicos pueden vivir a presiones menores de 700-1000atm

El control (inhibición) del crecimiento microbiano


El usar microorganismos en muchas situaciones como en el cuidado de la salud,
preparación y procesos alimenticios, y preservación de los materiales, debe de
manejarse con control y prevención, esto se logra con agentes físicos y químicos
que pueden matar a los microorganismos o inhibir su crecimiento. Los agentes
que los matan se llaman “-cidal” y los agentes que inhiben son llamados “-static”.
Los procesos de esterilización eliminan o destruyen completamente a los
microorganismos. Se puede utilizar calor, radiación, químicos o por métodos
físicos.
Los microorganismos no mueren al instante, si no que la población disminuye
exponencialmente, la disminución de la población depende de varios factores
como el tamaño de la población, la composición, la concentración de agente
antimicrobiano o la intensidad del tratamiento, el periodo de exposición,
temperatura y condiciones ambientales como pH, viscosidad y la concentración
de la materia orgánica.

Control de los agentes físicos en el crecimiento microbiano.


El calor se puede utilizar para matar microorganismos específicos por medio de
incineración, calor húmedo, calor seco. En la tabla 2.4 están los términos que se
relacionan con la esterilización con calor en fermentaciones industriales y
alimentos.

El usar temperaturas bajas donde se incluye refrigeración o congelación, no


siempre mata a los microorganismos, si no que no los deja crecer o estos crecen
muy lento a temperaturas menores de 5ºC.
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La actividad baja del agua se usa mucho para preservar alimentos o también se
incluye la remoción de agua con calor o secado frio o también la actividad del
agua se reduce por la adición de solutos como sal y azúcar.
También para destruir microorganismos se pueden utilizar microondas, UV,
rayos X y radicación gamma. La radiación UV tiene la desventaja de que no
puede penetrar vidrio, películas de suciedad, agua y otras sustancias. Lo que
tienen los rayos X y rayos gamma es que estos si pueden penetrar los
materiales.
La irradiación se utiliza comercialmente para esterilizar cajas Petri y en algunos
países, especias, frutas y vegetales para que duren más en almacenamiento
(hasta un 500%), este proceso es caro y no llega a destruir todos los
microorganismos, ya que la radiación no es suficiente porque también puede
destruir algunas vitaminas.
Otra técnica no térmica es el tratamiento eléctrico pulsado de alta intensidad que
trata a las muestras exponiéndolas a un campo eléctrico de 15-20 kV/cm por
unos pocos milisegundos o menos. Esta aún no es una técnica tan utilizada ya
que le faltan estudios.

La filtración estéril trata de separar todas las células de un líquido o un gas, pero
los productos aún pueden tener virus por lo que se lleva a ultrafiltración para
removerlos. Hay filtros profundos (filtros de fibra delgada o granular), filtros de
membrana (filtros delgados con poros de 0.2 o 0.4 𝜇𝑚 y filtros de aire de
partículas de alta eficiencia.

Control de crecimiento microbiano con agentes químicos


La antisepsia es la prevención de la infección del tejido vivo, se usan agentes
que no dañan las membranas mucosas y los desinfectantes son agentes que
matan a los microorganismos pero no siempre a las esporas, estos no son tan
seguros de utilizar.
Los preservativos antimicrobianos normalmente son agentes estáticos que
inhiben el crecimiento de los microorganismos en los alimentos, farmacéuticos y
cosméticos. Para esto se basan en lo que dice la FDA, pasa saber si no son
dañinos al medio ambiente o a la salud humana. En la tabla 2.5 se muestran
diferentes agentes antimicrobianos. En la tabla 2.6 son los preservativos
comunes en los alimentos. Y en la figura 2.7 son ejemplos de químicos
antisépticos utilizados en la esterilización de alimentos.
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Quimioterapia antimicrobiana
Esta se utiliza para destruir microorganismos que causan enfermedades. Lo
importante de estos es que tienen toxicidad selectiva, estos agentes actúan
inhibiendo o matando los microorganismos patogénicos, pero estos tienen muy
poco o no tienen efectos tóxicos en el huésped.
Los agentes químicos antimicrobianos son sintetizados, por otra parte, los
antibióticos son de peso molecular bajo y son producidos por microorganismos
como metabolitos secundarios para matar o inhibir otros microorganismos. Los
antibióticos son clasificados de acuerdo al rango de efectividad y del grupo
microbiano contra el que van a actuar. El espectro de acción es el rango de
bacterias u otros microorganismos afectados por el antibiótico. Los que son
efectivos contra Gram-positivos y Gram negativos se llaman de amplio espectro,
sin son efectivas predominantemente contra Gram-positivos y Gram negativos
son de espectro estrecho y los de espectro limitado son los que son efectivos
solo contra un solo organismo o enfermedad.
Los modos primarios de acción de los antibióticos son los inhibidores de la
síntesis de la pared celular, inhibidores de la membrana celular, inhibidores de la
síntesis de proteínas y los efectos en los ácidos nucleicos.

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