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Nutrición microbiana
Macronutrientes
En las fermentaciones heterótrofas se necesita que las fuentes de carbono estén
en concentraciones de entre 10-20g/L o mayores, ya que estos proveen
“esqueletos” de carbón para la biosíntesis y también sirven como fuente de
Ana Sahirí Arámbula De La Torre 291773
Micronutrientes
El fosforo normalmente proviene de los iones fosfato, a veces como buffer de
pH. Este elemento es esencial para la síntesis de ácidos nucleicos,
intermediarios del metabolismo de carbohidratos y compuestos que trabajan en
la traducción de energía. Las concentraciones del medio normalmente no se
necesitan mayores de 100mg/L.
Otro micronutriente necesario para los microorganismos para la producción de
azufre que contienen los aminoácidos, que son la cistina y la metionina y
algunas vitaminas. Para incorporarlo en el medio se utilizan sulfatos inorgánicos
o sal de sulfuro en concentraciones de 20-30mg/L.
Los elementos como calcio, hierro, potasio y magnesio, se agregan en
cantidades menores de 10-20mg/L. El hierro se utiliza para la oxidación-
reduccion de enzimas, el potasio lo requieren las enzimas que están en la
síntesis de proteínas y también como contraión para la columna vertebral de
fosfato de ADN. El magnesio estabiliza los ribosomas, y son necesarios para
mantener la pared celular e integridad de la membrana. El sodio y el potasio se
utilizan como bombas de energía quimiosmótica.
Elementos traza
Los elementos traza incluyen cobalto, cobre, manganeso, molibdeno, niquel,
selenio y zinc. Estos elementos se utilizan en concentraciones de 0.1-1mg/L o
menores. Los microorganismos que pueden vivir a estas bajas concentraciones
se llaman fotótrofos. Los llamados auxotrofos son los que no pueden crecer sin
sustancias orgánicas adicionales, como aminoácidos o vitaminas.
Absorción de nutrientes
Los nutrientes del medio son transportados adentro de la celula a través de la
membrana celular.
La difusión pasiva es la que no requiere portadores, pero este mecanismo es
ineficiente, ya que la mayoría de los solutos deben de ser transportados por
mecanismos activos específicos, porque las membranas son permeables
selectivamente. En la difusión facilitada no utiliza una entrada directa de energía,
si no que utiliza únicamente el gradiente de concentración a través de la
membrana y este es reversible. La absorción de nutrientes nunca termina, ya
que al momento que entran estos se metabolizan.
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Los mecanismos de transporte activo deja que se acumulen los materiales, sin
que afecte el gradiente de concentración. Estos mecanismos utilizan energía
metabolica, ATP o gradientes de proton para llevar a cabo el transporte, además
que los portadores de proteína también están involucrados.
Los nutrientes que entran a la celula, como el azúcar, aminoácidos o una
molecula acida molecular son transportados con un proton, esto se llama
simporte y se lleva a cabo por los gradientes de proton que también son usados
para establecer un gradiente del ion sodio a través de la membrana. Donde los
iones de sodio salen para que los protones entren a la celula, esto es llamado
antiporte. Algunos microorganismos pueden modificarse durante la absorción,
como cuando se lleva a cabo las translocación de grupos.
En los periodos donde las concentraciones de los nutrientes son muy bajas,
algunos organismos producen metabolitos que pueden eliminar los iones
metálicos que quedan.
El crecimiento Bacth conlleva varias etapas, siendo estas la fase retardo, fase de
aceleración, fase de crecimiento exponencial, fase de desaceleración, fase
estacionaria y la muerte, en la figura 2.1 se muestran estas fases en una grafica.
En la fase de retardo, no pasa relativamente nada, no se observa crecimiento ni
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duplicación, lo único que pasa es que las células están adaptándose al medio.
Cuando las células se inoculan estas no contienen las enzimas, vitaminas, ni
cofactores para llevar a
cabo la división celular.
La fase de retardo puede
ser mayor si la fuente de
carbono que se utiliza en
el medio es diferente a la
que se utilizo en el
crecimiento de los
microorganismos, de
igual manera afecta la
presión osmótica del
medio, si se pasa de uno
de menor presión(menor concentración de soluto) a uno con mayor presión
(mayor concentración de soluto). También afectan la edad, concentración,
viabilidad y morfolofia del inoculo. Anteriormente se han utilizado
microorganismos que se encuentran en la fase exponencial para disminuir el
tiempo de retardo. Ya que se adaptan las celulas se comienza la fase de
aceleración. Las células se dividen aumentando su frecuencia hasta alcanzar la
tasa de crecimiento máxima (𝜇 max), aqui es donde se dice que el crecimiento
exponencial inicia y el numero de celulas y biomasa aumentan de forma
constante. Se puede considerar que el aumento de la biomasa de la célula es
una reaccion catalitica, entonces la tasa de crecimiento es dependiente de la
concentracion de biomasa.
El modelo de Monod
(figura 2.3) explica como
es que los nutrientes
limitantes afectan en la
tasa de crecimiento, esto
puede llevar a una
interrupción de
crecimiento. La ecuacion
de Monod de representa
de la siguiente manera 𝜇 =
𝜇𝑚𝑎𝑥 𝑆
donde 𝜇𝑚𝑎𝑥 es el crecimiento especifico maximo por hora de las celulas.
𝐾 +𝑆
𝑠
Cuando la concentracion del sutrato no es limitante se puede tomar en cuenta
𝑔
los siguientes factores 𝑆 = 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑙𝑖𝑚𝑖𝑡𝑎𝑛𝑡𝑒 ( 𝐿 ) ; 𝐾𝑠 =
𝑐𝑜𝑛𝑠𝑡𝑎𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝑠𝑎𝑡𝑢𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛, concentración (g/L) del nutriente limitante que deja que
el crecimiento se de a la mitad de la tasa especifica mayor.
La fase de desacerelacion comienza cuando el nivel del sutrato disminuye y se
empieza a hacer limitante y ya no puede sostener la 𝜇𝑚𝑎𝑥 .
Cuando inicia la fase estacionaria es cuando el crecimiento ya no se lleva a
cabo, pero aunque no haya crecimiento, ni mas aumento en la biomasa, no
significa que la celula ya no esta activa metabolicamente, si no que esta esta
intentando de sobrevivir utilizando los compuestos que tiene guardados
intracelularmente, tambien pueden utilizar los nutrientes de las celulas que ya se
lisaron y tambien pueden llegar a producer metabolitos secundarios.
Dependiendo de la forma en la que las celulas sobreviven a las situaciones
adversas del medio ambiente les da la capacidad de alargar el period de no
llegar a la fase de muerte.
Los sistemas Batch nunca llegan a una condicion de estabilidad. Es por esto que
tiene mucho impacto economico por los tipos de operaciones que se llevan a
cabo, porque llega un mometno donde no se esta produciendo ningun product
microbiano en el reactor.
Para poder escoger el reactor y todos sus parametros es necesario jugar con las
condiciones de operación, como varira los constituyentes del medio, la
concentracion de los componentes, pH, temperatura, etc., tambien es muy
importante determinar la tasa de crecimiento específica máxima (𝜇 max). Para
que se de la productividad óptima el microorganismo debe de cultivarse a la
1 𝐾 1 1
𝜇 max. Para calcular 𝜇 max, se utiliza 𝜇 = 𝜇 𝑆 ∗ 𝑆 + 𝜇 x, que tiene la forma de
𝑚𝑎𝑥 𝑚𝑎𝑥
ecuacion de la recta.
Entre más alta sea la tasa de dilución, más rápido crecen las células, que a la
vez resulta un crecimiento simultaneo en la concentración residual del sustrato y
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Las células crecen más rápido con el aumento de la temperatura, pero como
todo, esto tiene un límite, llega un momento donde se desnaturalizan. También
hay una temperatura mínima hasta donde se da el crecimiento. De estas forma
se induce que todos los organismos tienen una temperatura óptima de
crecimiento y diferentes grupos de microorganismos han evolucionado para
crecer en diferentes rangos de temperaturas.
La actividad baja del agua se usa mucho para preservar alimentos o también se
incluye la remoción de agua con calor o secado frio o también la actividad del
agua se reduce por la adición de solutos como sal y azúcar.
También para destruir microorganismos se pueden utilizar microondas, UV,
rayos X y radicación gamma. La radiación UV tiene la desventaja de que no
puede penetrar vidrio, películas de suciedad, agua y otras sustancias. Lo que
tienen los rayos X y rayos gamma es que estos si pueden penetrar los
materiales.
La irradiación se utiliza comercialmente para esterilizar cajas Petri y en algunos
países, especias, frutas y vegetales para que duren más en almacenamiento
(hasta un 500%), este proceso es caro y no llega a destruir todos los
microorganismos, ya que la radiación no es suficiente porque también puede
destruir algunas vitaminas.
Otra técnica no térmica es el tratamiento eléctrico pulsado de alta intensidad que
trata a las muestras exponiéndolas a un campo eléctrico de 15-20 kV/cm por
unos pocos milisegundos o menos. Esta aún no es una técnica tan utilizada ya
que le faltan estudios.
La filtración estéril trata de separar todas las células de un líquido o un gas, pero
los productos aún pueden tener virus por lo que se lleva a ultrafiltración para
removerlos. Hay filtros profundos (filtros de fibra delgada o granular), filtros de
membrana (filtros delgados con poros de 0.2 o 0.4 𝜇𝑚 y filtros de aire de
partículas de alta eficiencia.
Quimioterapia antimicrobiana
Esta se utiliza para destruir microorganismos que causan enfermedades. Lo
importante de estos es que tienen toxicidad selectiva, estos agentes actúan
inhibiendo o matando los microorganismos patogénicos, pero estos tienen muy
poco o no tienen efectos tóxicos en el huésped.
Los agentes químicos antimicrobianos son sintetizados, por otra parte, los
antibióticos son de peso molecular bajo y son producidos por microorganismos
como metabolitos secundarios para matar o inhibir otros microorganismos. Los
antibióticos son clasificados de acuerdo al rango de efectividad y del grupo
microbiano contra el que van a actuar. El espectro de acción es el rango de
bacterias u otros microorganismos afectados por el antibiótico. Los que son
efectivos contra Gram-positivos y Gram negativos se llaman de amplio espectro,
sin son efectivas predominantemente contra Gram-positivos y Gram negativos
son de espectro estrecho y los de espectro limitado son los que son efectivos
solo contra un solo organismo o enfermedad.
Los modos primarios de acción de los antibióticos son los inhibidores de la
síntesis de la pared celular, inhibidores de la membrana celular, inhibidores de la
síntesis de proteínas y los efectos en los ácidos nucleicos.