Q7 Guideline

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGIA
UNIDAD DE INVESTIGACION, TITULACION Y GRADUACION
EFECTO ANTIMICROBIANO DE LA INFUSIÓN DE MANZANILLA SOBRE
EL ACTINOMYCES ODONTOLYTICUS Y EL ACTINOMYCES VISCOSUS:
ESTUDIO IN VITRO.
TRABAJO DE TITULACIÓN PREVIO A LA OBTENCION DEL GRADO ACADEMICO DE
ODONTOLOGO
AUTOR:
VICTOR OSWALDO GONZALEZ CHILA
TUTORA:
DRA. MARINA ANTONIA DONA VIDALE
QUITO- ECUADOR
FEBRERO, 2016
i
AGRADECIMIENTO.
A los docentes que fueron parte de esta etapa en mi vida, quienes con sus conocimientos
plantaron la similla del saber, esas ganas de querer aprender, el deseo de ser mejores que ayer.
A mi directora de tesis, Dra. Marina Dona por brindarme su amistad, apoyo, dedicación y
motivación a través de todos estos años; por inculcarme los conocimientos, experiencias
necesarias para la práctica en la vida profesional.
A mis amigos quienes contribuyeron de una y de mil formas para hacer divertido este largo
caminar pre-universitario, por el apoyo, por las aventuras buenas y malas, por ser esos hermanos
que Dios pone en nuestras vidas.
ii
DEDICATORIA.
Este trabajo está dedicado a Dios por darme:
Su bendición y protección en cada instante de mi vida, la fuerza y voluntad para luchar cada
día, la luz para ver el camino en medio de la oscuridad, la esperanza para creer que siempre hay
días mejores.
A mi familia, padres, en especial Sisinia y Flor por ser el pilar fundamental en mi camino,
gracias por el apoyo incondicional, confianza, comprensión y por proveer todo lo necesario para
que hoy pueda dar por terminado este capítulo en mi vida.
iii
iv
v
vi
TABLA DE CONTENIDO
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: ............................................................................................ 3
1.1. FORMULACION DEL PROBLEMA. ......................................................................................... 4
2. OBJETIVOS: ........................................................................................................................................ 5
2.1. OBJETIVO GENERAL: ............................................................................................................... 5
2.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS:....................................................................................................... 5
3. JUSTIFICACIÓN: ................................................................................................................................ 6
4. FUNDAMENTO TEORICO. ............................................................................................................... 8
4.1. ANTECEDENTES: ...................................................................................................................... 8
4.2. BASES TEORICAS .................................................................................................................... 10
4.2.1. MANZANILLA “MATRICARIA CHAMOMILLA” ........................................................ 10
4.2.1.1. CLASIFICACIÓN BOTANICA. ................................................................................ 10
4.2.1.2. DESCRIPCIÓN. ......................................................................................................... 10
4.2.1.3. HABITAT. .................................................................................................................. 11
4.2.1.4. COMPONENTES. ...................................................................................................... 11
a. COMPOSICIÓN QUÍMICA................................................................................................... 12
b. ACCIÓN FARMACOLÓGICA ............................................................................................. 12
c. PROPIEDADES E INDICACIONES DE LA MANZANILLA ............................................. 13
4.2.1.5. INFUSIONES DE MANZANILLA. .......................................................................... 14
4.2.1.5.1. DESCRIPCIÓN. ...................................................................................................... 14
4.2.1.5.2. DOSIFICACIÓN. .................................................................................................... 15
vii
4.2.1.5.3. TÉCNICA DE PREPARACIÓN. ............................................................................ 15
4.2.1.5.4. BENEFICIOS DE LA INFUSIÓN DE MANZANILLA. ....................................... 16
4.2.1.5.5. CONSERVACIÓN DE LA INFUSIÓN. ................................................................. 16
4.2.1.5.6. RIESGOS O PELIGROS: ........................................................................................ 17
4.2.2. ACTINOMYCES ............................................................................................................ 17
4.2.2.1. TAXONOMÍA. ........................................................................................................... 17
4.2.2.2. FISIOLOGÍA Y ESTRUCTURA. .............................................................................. 20
4.2.2.3. HÁBITAT. .................................................................................................................. 21
4.2.2.3.1. PERIODONTO SANO. ....................................................................................... 22
4.2.2.3.2. GINGIVÍTIS. ....................................................................................................... 22
4.2.2.3.3. PERIODONTÍTIS. ............................................................................................... 22
4.2.2.4. PATOGENIDAD. ....................................................................................................... 22
4.2.2.5. ACTINOMICOSIS. .................................................................................................... 23
4.2.2.6. ACTINOMYCES ODONTOLYTICUS. .................................................................... 24
4.2.2.7. ACTINOMYCES VISCOSUS. .................................................................................. 25
5. HIPÓTESIS: ....................................................................................................................................... 27
5.1. ALTERNATIVA: ....................................................................................................................... 27
5.2. NULA: ........................................................................................................................................ 27
6. METODOLOGÍA: .............................................................................................................................. 27
6.1. TIPO DE ESTUDÍO. .................................................................................................................. 27
6.2. UNIVERSO Y MUESTRA ........................................................................................................ 28
viii
6.2.1. CRITERIOS DE INCLUSIÓN ........................................................................................... 28
6.2.2. CRITERIOS DE EXCLUSIÓN. ......................................................................................... 28
6.3. OPERACIONALIZACION DE LAS VARIABLES: ................................................................. 29
6.4. PROCEDIMIENTO Y TÉCNICA. ............................................................................................. 29
6.4.1. OBTENCIÓN DE LAS INFUSIONES DE MANZANILLA............................................. 29
6.4.1.1. Recolección de la manzanilla. ..................................................................................... 29
6.4.1.2. Infusiones de manzanilla. ............................................................................................ 30
6.4.1.3. Discos de infusión de manzanilla. ............................................................................... 31
6.4.2. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO. ..................................................................................... 31
6.4.2.1. Reactivación de la cepa. .............................................................................................. 31
6.4.2.2. Preparación del inoculo. .............................................................................................. 32
6.4.2.3. Preparación del Agar Mueller-Hinton. ........................................................................ 32
6.4.2.4. Siembra del microorganismo en el Agar. .................................................................... 33
6.4.2.5. Incubación de las cepas bacterianas con los discos de manzanilla. ............................ 33
6.4.3. RECOLECCIÓN DE DATOS. ........................................................................................... 34
6.4.4. ASPECTOS ÉTICOS .......................................................................................................... 35
7. RESULTADOS................................................................................................................................... 36
7.1. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS. ................................................. 36
7.2. DISCUSION. .............................................................................................................................. 47
8. CONCLUSIONES .............................................................................................................................. 50
9. RECOMENDACIONES ..................................................................................................................... 51
ix
10. BIBLIOGRAFIAS: ............................................................................................................................. 52
11. ANEXOS ............................................................................................................................................ 55
x
xi
xii
xiii
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGIA
EFECTO ANTIMICROBIANO DE LAS INFUSIONES DE MANZANILLA SOBRE EL
ACTINOMYCES ODONTOLYTICUS Y EL ACTINOMYCES VISCOSUS: ESTUDIO IN
VITRO.
AUTOR: Victor Oswaldo Gonzalez Chila.
TUTORA: Dra. Marina Dona.
FECHA: 20 de Enero del 2016
RESUMEN
La manzanilla (Matricaria Chamomilla) es una de las plantas más utilizada en la medicina por sus
múltiples propiedades y beneficios, es así que en la Odontología se ha empezado a utilizar como
colutorios para disminuir inflamaciones, mejorar la higiene bucal. El objetivo de este estudio es
analizar el efecto antimicrobiano de las infusiones de manzanilla sobre el Actinomyces
Odontolyticus y el Actinomyces Viscosus en 4 periodos de tiempo por 24 horas. De las flores de
manzanilla se obtuvo la infusión de manzanilla al 20%. Las cepas fueron reactivadas, sembradas
en agar Mueller Hinton e incubadas por 6 días a 35°C en ambiente anaerobio. La infusión se puso
en contacto con los microorganismos mediante el método de Kirby Bauer, para obtener halos de
inhibición mediante la susceptibilidad por difusión de discos. La medición de los halos de
inhibición se realizaron a las 6-12-18-24 horas; registrándose medidas de 11 y 12 mm a las 6 horas,
y medidas de 0 mm a las 12-18-24 horas. Las pruebas de Kruskal-Wallis revelo que no hay
diferencia en la tendencia central de la población y Friedman indica que existe diferencia relevante
entre los controles. Así demostramos que la infusión de manzanilla es efectiva para el control
microbiano bucal-dental, y que su uso preferencial es entre 4 a 6 horas.
PALABRAS CLAVES: MANZANILLA, INFUSIONES DE MANZANILLA,

ACTINOMYCES, EFECTO ANTIMICROBIANO.
xiv
UNIVERSITY OF CENTRAL ECUADOR
SCHOOL OF DENTISTRY
ANTIMICROBIAL EFFECT OF CHAMOMILE TEA ON ACTINOMYCES
ODONTOLYTICUS AND ACTINOMYCES VISCOSUS: STUDY IN VITRO.
AUTHOR: Victor Oswaldo Gonzalez Chila.

TUTOR: Dra. Marina Dona.
FECHA: 20 de Enero del 2016
ABSTRACT.
Chamomile (Matricaria Chamomilla) is one of the most widely used in medicine for its many
properties and benefits, so that plants in Dentistry has begun to be used as a mouthwash to reduce
inflammation, improve oral hygiene. The aim of this study was to analyze the antimicrobial effect
of chamomile tea on Actinomyces Odontolyticus and Actinomyces Viscosus in 4 time periods for
24 hours. Chamomile flowers chamomile infusion of 20% was obtained. Strains were revived,
plated on Mueller Hinton agar and incubated for 6 days at 35 ° C in anaerobic environment. The
infusion was contacted with the microorganisms by Kirby Bauer method, for zones of inhibition
by disk diffusion susceptibility. The measurement of the inhibition halos were performed at 6-12-
18-24 hours; registering measures 11 and 12 mm at 6 hours, and measurements from 0 mm to 12-
18-24 hours. The Kruskal-Wallis revealed no difference in central tendency of the population and
Friedman indicates that there is significant difference between controls. So we showed that
chamomile tea is effective for oral-dental microbial control, and its preferential use is between 4-
6 hours.
KEYWORDS: CHAMOMILE, CHAMOMILE TEA, ACTINOMYCES,
ANTIMICROBIAL EFFECT.
xv
INTRODUCCIÓN:
Considerando que las alteraciones bucales más frecuentes están estrechamente relacionadas
a microrganismos, el uso de varios productos como enjuagues bucales o colutorios se presentan
como elementos antimicrobianos, de ahí que ciertas plantas por sus propiedades químicas son un
alternativa natural contra las patologías bucales, que además presentan ventajas por su bajo costo
y que se suman a los efectos protectores que su uso provocaría (Veloz, 2011).
Por otro lado, los últimos estudios revelan que Actinomyces spp., desarrollarían un papel
fundamental en la instauración del biofilm siendo una de las especies, junto con Estreptococos
spp., que con más prontitud colonizaría la superficie del diente y que serviría para que otras
especies cariogénicas y periodontopatógenas se estableciesen formando el biofilm. Se conocen
que receptores de proteínas salivares están presentes en Actinomyces spp., que influirían en la
adhesión de éstas bacterias, siendo los primeros colonizadores de la superficie dental. La mejor o
peor capacidad de adherencia de las bacterias a estas proteínas salivales sería fundamental para
poder definir el posible potencial patogénico de cada bacteria (Lawrence, Millie, & Joel, 2003).
La manzanilla es una hierba medicinal que se empezó a utilizar desde tiempos muy
antiguos en la medicina, para tratamientos de dolores, tanto así que Hipócrates el padre de la
medicina; la utilizaba para curar la fiebre. Conforme pasan los años se ha ido descubriendo más
beneficios en la utilización de la manzanilla y en diferentes formas, ya sean aceites, infusiones o
vapores, tiene efectos muy buenos ante diferentes enfermedades como dolores de cabeza, dolores
intestinales, tos, neuralgias faciales, sinusitis, etc. (Daniele, 1995).
Estamos conscientes que la manzanilla así como muchas otras plantas o hierbas
medicinales semejantes serian herramientas que bien podrían ser empleadas en el control de
1
patologías bucodentales, pero no se constituyen por si sola y en ningún momento como el único
mecanismo para este propósito. Así pues pretendemos continuar en la búsqueda de las
verdaderas propiedades fitoquímicas y microbiológicas para un día no muy lejano poder
desarrollar una herramienta de bajo costo y de mucho beneficio para los futuros demandantes de
salud bucal.
2
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:
La medicina natural ha sido utilizada como tratamiento médico general desde hace muchos
años, pero es ahora, donde se está recuperando parte del protagonismo que tuvieron en los
primeros tratamientos médicos, desarrollándose un nuevo auge de sus aplicaciones terapéuticas;
por lo que es muy poco conocido el aporte de la medicina natural en el ámbito Odontológico.
Es así como el uso de los colutorios de manzanilla (Matricaria Chamomilla), ha ido
cogiendo fuerza en la práctica de la Odontología, por tener varios beneficios médicos:
principalmente el antiinflamatorio; por lo que es muy recomendado su uso por muchos
especialistas del área Odontológica; también posee propiedades antiespasmódica, sedante,
vasodilatadora; pero son muy pocos los estudios que afirman que tiene propiedades antisépticas
sobre ciertas bacterias presentes en la cavidad bucal.
Dentro de las enfermedades crónicas, las bucales son las más comunes, y según los
estudios de varios autores, coinciden en que las patologías orales empiezan por un desequilibrio,
de las bacterias presentes en boca, las principales bacterias identificadas fueron los géneros
Streptococcus y Actinomyces. Existen investigaciones que afirman que la manzanilla tiene
efecto bacteriostático sobre los Streptococcus.
Por ende esta investigación va orientada a obtener información del efecto antimicrobiano de
la infusión de manzanilla sobre los Actinomyces; bacterias que actúan desde la formación del
biofilm, como punto de enlaces entre la estructura dental y otro tipo de microorganismos como
son los Streptococcus y la especie F. Nucleatum; y estos a su vez actúan como receptores para la
P. Gingivalis, T. Denticola, P. Intermedia, Agregatibacter; lo que podría provocar que aparezcan
más patologías crónicas y graves en la cavidad bucal, y de acuerdo a varias citas bibliográficas
3
los Actinomyces más comunes presentes en las enfermedades bucodentales son A.
Odontolyticus, A. Israelii y A. Viscosus.
1.1. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA.
¿SERA QUE LA INFUSION DE MANZANILLA UTILIZADA REGULARMENTE EN
LA PRÁCTICA DE LA ODONTOLOGÍA Y DE SUS RAMAS TENDRÁ ALGÚN EFECTO
ANTIMICROBIANO SOBRE LOS MICROORGANISMOS ACTINOMYCES
ODONTOLYTICUS Y EL ACTINOMYCES VISCOSUS?
4
2. OBJETIVOS:
2.1. OBJETIVO GENERAL:
 ANALIZAR EL EFECTO ANTIMICROBIANO DE LA INFUSIÓN DE
MANZANILLA SOBRE EL ACTINOMYCES ODONTOLYTICUS Y
EL ACTINOMYCES VISCOSUS EN UN ESTUDIO IN VITRO.
2.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS:
o Determinar en qué periodo de tiempo hay mayor efecto antimicrobiano de
las infusiones de manzanilla.
o Medir los halos de inhibición de crecimiento bacteriano que produce la
infusión de manzanilla.
o Establecer diferencia del efecto antimicrobiano que produce la infusión de
manzanilla entre el Actinomyces Odontolyticus y el Actinomyces
Viscosus.
5
3. JUSTIFICACIÓN:
Existen investigaciones para estudiar el comportamiento de ciertos compuestos de origen
vegetal sobre la flora bacteriana de la cavidad bucal; es así que, con las infusiones de la
manzanilla ocurre algo similar, por sus múltiples beneficios médicos a los que se le han atribuido
propiedades antiinflamatorias y antisépticas; pero su posible uso como bacteriostático de una de
las principales bacterias implicada en la formación de placa dentobacteriana, no reúne mayores
referencias.
Pamplona (2006) describió que por las propiedades que tiene la manzanilla sobre la mucosa
bucal, se la ha empleado en los diversos tratamientos odontológicos. Entonces Melgarejo &
Álvarez (2008) comentaron que ha ido evolucionando la utilización de la manzanilla en la
medicina, empezándose a utilizar infusiones de manzanilla como colutorios en la higiene diaria
de la boca. Y Gaete (2012) afirmó que las infusiones de manzanilla se han utilizado en las
diversas enfermedades bucodentales que están relacionadas con procesos inflamatorios y/o
infecciosos.
Fue así que Bascones (2009) escribió que no se han aclarado completamente muchos
aspectos sobre la patogenia de la enfermedad periodontal; sin embargo, los microorganismos que
colonizan las áreas dentó-gingivales son el componente etiológico esencial. Por eso Romanelli
(2012) mediante estudios de cultivos revelo un predominio de gérmenes del genero Actinomyces
a lo largo de la encía marginal, donde frecuente mente se encuentran A. Viscosus, A.
Odontolyticus, A. Naeslundii y A. Israelii.
6
Entonces Murray (2013) comentó que estos microorganismos tienen un bajo potencial de
virulencia, y que únicamente pueden provocar enfermedad cuando las barreras mucosas
normales se alteran ya sea por traumatismo, cirugías o infección.
He allí donde se pretende consolidar este aporte a la investigación y por ende al medio
Odontológico. Dada la escasez de investigaciones científicas en esta área, se fortalece el valor
del trabajo propuesto. De esta manera, la presente investigación podrá brindar una alternativa de
elección en la inhibición de placa dentobacteriana y por consiguiente una alternativa en la
prevención y tratamiento de las patologías más frecuentes de la cavidad bucal.
7
4. FUNDAMENTO TEORICO.
4.1. ANTECEDENTES:
Hoogesterger (1994) señaló que el hombre ha conocido y ha aprovechado las propiedades
curativas de múltiples plantas. Por lo que Garrido (2008) mencionó que las plantas han
constituido la farmacia natural de la humanidad, que los hombres hallaron en ellas, los remedios
necesarios para las enfermedades que padecían. Así Carmaco y col. (2011) comentaron que el
colutorio de manzanilla es un producto natural, que no produce tinciones, alteraciones del sabor
y no es toxico; por lo que puede ser utilizado por mujeres embarazadas, adultos mayores y niños.
En su estudio Sadr & Raoof (2006) demostrarón que la manzanilla usada como sustancia
irrigadora en la remoción del barrillo dentinario, tiene mayor efecto en eliminar la capa de frotis
que el NaOCl solo, pero tiene menos efecto que NaOCl en combinación con EDTA. Por otra
parte Romero et al. (2009) demostraron que el efecto antiséptico y antiinfeccioso de la Matricaria
Recutita está dado por la presencia de derivados terpénicos como: matricina, camazuleno, β-
bisabolol y los óxidos α y β del b-bisabolol.
Modesto (2003) realizo un estudio sobre la actividad antimicrobiana de soluciones
utilizadas en la higiene bucal del bebé, el objetivo del estudio fue evaluar y comparar el efecto de
los antibióticos utilizados en soluciones de higiene oral en la microflora de los lactantes. Los
resultados obtenidos y analizados por ANOVA y el test de Tukey, se encontró que la infusión de
Matricaria Chamomilla no mostró efecto antimicrobiano, independiente de la concentración
Sainz de Net y Col (2004) realizaron un estudio de flora bacteriana en pacientes tratados
ortodónticamente, a quienes aplicándoles enjuagues bucales de manzanilla. Se obtuvo como
resultado que los enjuagues ayudan a la no formación de la placa dentobacteriana que se forma
8
alrededor de los brackets en pacientes con tratamiento ortodóncico. Es decir que el enjuague
evita la formación de las bacterias al mismo tiempo la formación de ácidos que desmineralizan el
diente, dejando una pigmentación blanquecina, antiestética.
Romanelli & Adams (2012) mencionaron que la placa subgingival consiste, en una zona
adherida al cemento, dominada fundamentalmente por microrganismos Gram positivos, sobre
todo del genero Actinomyces. Y que estudios realizados en la segunda zona; es decir, la
superficie externa está formada por capas diversas de bacterias, entre las cuales se encontró al A.
Viscosus.
El habitad normal de estos gérmenes es la cavidad bucal, zonas con baja tensión de
oxígeno, surco gingival, bolsas periodontales, cálculos dentales, cavidades cariosas, capuchones
que recubren los terceros molares, criptas amigdalinas. También menciona que pueden formar
biofilm o placa in vitro, y los más identificados son el A. Israelii, A. Odontolyticus, A. Viscosus,
A. Naeslundii. (Negroni, 2014).
Carranza (2003) afirma que el Biofilm constituye un acumulo de material blando,
adherido en los dientes, prótesis y restauraciones; conformado por bacterias. En su estudio
Herrera (2004) menciona que más del 60% de todas las infecciones microbianas son causadas
por biofilms. Por lo que Serrano & Herrera (2005) definen que la placa dental es el principal
agente etiológico de la caries y de las enfermedades periodontales.
Herrera (2004) comenta que el aumento de la resistencia bacteriana a los antimicrobianos
involucra varios mecanismos entre los que se mencionan: inactivación de los antibióticos por
polímeros extracelulares o modificación enzimática, disminución de la tasa de crecimiento por
limitación de nutrientes, cambios fenotípicos en las células bacterianas como resultado de la
9
adquisición de genes de resistencia dentro del biofilm y la persistencia de un pequeño grupo de
células en la comunidad bacteriana.
4.2. BASES TEORICAS
4.2.1. MANZANILLA “MATRICARIA CHAMOMILLA”
4.2.1.1. CLASIFICACIÓN BOTANICA.
Phylum: Euphyta
División: Angiospermae
Clase: Dicotyledones
Orden: Synandrae (Cosco, 2010)
Familia: Asteraceae (Compositae)
Género: Matricaria
Especies: Matricaria camomilla o Matricaria recutita (Cruz, 2009).
4.2.1.2. DESCRIPCIÓN.
La manzanilla es una excelente hierba, dulce y con sabor a fruta, y con multitud de
propiedades. Brunton (2001) menciona que la manzanilla es una planta herbácea, llamada
también “camomila”, es una planta anual que crece entre 15 y 50 cm de altura, con escasas hojas
muy divididas situadas sobre tallos muy ramificados. Garrido en el (2008) describe que presenta
entre 12 a 20 flores terminales con un botón amarillo y abombado en el centro, con pétalos
blancos alojados sobre un receptáculo cónico y hueco. Las flores son un poco amargas y
fragantes por lo que desprenden un olor característico a manzana, de ahí el nombre de
manzanilla.
10
Figura N° 1: Manzanilla (Matricaria Chamomilla)
Fuente: Brunton Jean (2001).
4.2.1.3. HABITAT.
Del Valle (2012) afirmó que la manzanilla es nativa de la región de los Balcanes, desde
donde se difundió en Europa y esta naturalizada en varias regiones del mundo como Asia,
África, América y Australia. Es así como Garrido (2008) menciono que es cultivada para uso
industrial; que también es cultivada en macetas y jardines, pero crece de forma silvestre en
terrenos pedregosos. Además crece con facilidad en suelo bien drenado, con bastante sol, y es
resistente a las heladas.
4.2.1.4. COMPONENTES.
a. HIDRATOS DE CARBONO: fructuosa, galactosa (planta), glucosa (flor).
b. MUCILAGOS.
c. ACIDOS GRASOS: linoleico, palmítico, oleico.
d. VITAMINA C: BETACAROTENOS, COLINA
e. ACIDOS ORGANICO: salicílico, cafeico, gentisico, pectico (planta).
f. ACEITE ESENCIAL (0.2 – 2%): azuleno, alfa-bisabolol (50%), camazuelo (1-15%),
farneseno, cadineno, furfural, matricarina, matricina, sesquiterpenos.
11
g. ACIDOS ANTEMICO (principio amargo que puede ser emético), farnesol, geraniol,
borneol ( planta), luteolina, apigenina, cuarcetin (pigmentos amarillos), cumarinas
(umbeliferona)
h. FLAVONOIDES: agenina, hiperosido, apigetrina, patuletina, jaceidina, axilarina, apiína,
quercetina, rutina.
a. COMPOSICIÓN QUÍMICA.
La parte principal de la manzanilla son las flores, es aquí donde podemos encontrar la
mayoría de sus compuestos químicos como: cumarinas (umbileferona, herniarina), ácidos
fenólicos y lactonas sesquiterpénicas, flavonoides. También se observa la presencia de
glucosidos de luteolol así como heterosidos del quercetol y del isorramnetol (flavonoles),
apigenina. .
En las infusiones se libera entre un 10 al l5% del aceite esencial, el cual contiene
chamuzuelo formado por la descomposición de una lactona sesquiterpénica, la matricina.
Además de diversos sesquiterpenos con esqueleto bisabolol: (-)-α-bisabolol, óxidos A y B de (-
)-α-bisabolol y oxido A de (-)-α-bisabolona. Estos sesquiterpenos representan hasta el 50% del
aceite esencial (Brunton, 2001).
b. ACCIÓN FARMACOLÓGICA.
La manzanilla actúa como un antiinflamatorio natural y esta actividad puede ser debida al
chamazuelo que es inhibidor de la síntesis de leucotrienos, a su precursor y al (-)-α-bisabolol. El
extracto hidro-alcoholico de los cabezales actúa como espasmódico la cual se debe a los
12
flavonoides como la apigenina y también a uno de los esteres biciclicos y al (-)-α-bisabolol
(Brunton, 2001).
El aceite esencial de manzanilla es antibacteriano y antifúngico, estimula la secreción biliar
y se comporta como hipotensor. El (-)-α-bisabolol se opone a la ulcera gástrica inducida, en rata
perros, por diversos agentes (etanol, esteres, indometacina) (Brunton, 2001).
Gaete & Mella (2012) escriben que tinturas de manzanilla tienen un efecto similar al de la
clorhexidina sobre microorganismos presentes en el biofilm dental. Además mencionan que el
efecto antiinflamatorio está dado por un mecanismo que impide la acción directa de la enzima
COX2. Y Romero (2009) dice que la manzanilla en los procesos infecciosos actúa rompiendo los
enlaces de la membrana celular.
c. PROPIEDADES E INDICACIONES DE LA MANZANILLA.
Son muchas las propiedades de esta planta, todas estas confirmadas por investigaciones
científicas. Las propiedades más importantes que se pueden mencionar son:
1. Antiinflamatorio: las infusiones también se aplican en forma de compresas sobre eccema,
erupciones y otras afecciones de la piel. (Pamplona, 2006)
2. Sedante y antiespasmódica: resulta muy útil contra los espasmos del estómago e intestino
debido a nerviosismo o ansiedad. También se administra en cólicos de todo tipo,
especialmente en los renales y biliares mal llamados hepáticos. (Pamplona, 2006).
3. Analgésica: calma los dolores de cabeza y algunas neuralgias. (Pamplona, 2006).
4. Tónico intestinal y carminativo: su acción consiste en regular y normalizar el
funcionamiento intestinal. También Garrido (2008) habla de que actúa como carminativo,
13
es decir estimulando la motilidad del tubo digestivo. Alivia las náuseas y vómitos, y
estimula ligeramente el apetito. (Pamplona, 2006).
5. Emenagoga: estimula la función menstrual, normalizando su cantidad y periodicidad. Por
lo que alivia los dolores de la regla. (Pamplona, 2006).
6. Febrífuga y sudorífica: al hacer bajar la temperatura y provocar la transpiración,
conviene a los enfermos febriles, especialmente a los niños. (Pamplona, 2006).
7. Antialérgica: se emplea en el asma, la rinitis y la conjuntivitis alérgicas. Para obtener
buenos resultados se recomienda combinar la aplicación interna (tisanas) con la externa
(colirios, irrigaciones nasales). (Pamplona, 2006).
8. Cicatrizante y antiséptica: se la utiliza para lavar todo tipo de heridas, úlceras e
infecciones de la piel. Los lavados anales con su infusión, desinflama las hemorroides.
(Pamplona, 2006).
9. Antirreumática: el aceite de manzanilla se usa en fricciones contra el lumbago, tortícolis,
dolores reumáticos y contusiones. (Pamplona, 2006).
4.2.1.5. INFUSIONES DE MANZANILLA.
4.2.1.5.1. DESCRIPCIÓN.
La infusión es el procedimiento ideal para obtener tisanas de las partes delicadas de las
plantas: hojas, flores, tallos tiernos. Con la infusión se extraen una gran cantidad de sustancias
activas, con muy poca alteración de su estructura química, y por lo tanto se conservan al máximo
las propiedades. (Pamplona, 2006).
14
Figura N° 2: Infusión de Manzanilla
Fuente: http://www.saludymedicinas.com
4.2.1.5.2. DOSIFICACIÓN.
Se coloca de 20 a 30 gramos de la planta por un litro de agua, lo que equivale
aproximadamente a una cucharadita de postre (2gr.) por taza de agua (150 ml) (De la Torre &
Navarrete, 2008).
4.2.1.5.3. TÉCNICA DE PREPARACIÓN.
La preparación de las infusiones es de la siguiente manera:
1) Colocación: colocar la parte de la planta a usar (hojas, flores, tallo.) en un recipiente de
porcelana, barro cocido, vidrio o similar, que resista bien la acción súbita del calor. Las
plantas pueden estar sueltas dentro del recipiente o bien juntas en el interior de un colador
para infusiones, que se pone dentro del recipiente.
2) Escaldado: verter 1 litro de agua a punto de hervir sobre las plantas, en la proporción
adecuada.
3) Extracción: tapar el recipiente y esperar durante un tiempo para dar lugar a que se
produzca la extracción y disolución de los principios activos. Normalmente es suficiente
15
con 5 a 10 minutos. Cuantas más duras o gruesas sean las partes de la manzanilla, más
tiempo se requerirá para su extracción.
4) Colado: Filtrar dos veces el líquido pasando la infusión por un colador o papel filtro N°
1. La solución obtenida será considerada como estándar (100%) y será conservada en
refrigeración a 4°C hasta su uso. (Pamplona, 2006).
4.2.1.5.4. BENEFICIOS DE LA INFUSIÓN DE MANZANILLA.
La infusión de manzanilla es muy utilizada para tratar casos de estreñimiento o trastornos
digestivos en general, se las puede emplear para calmar casos de diarreas y cólicos estomacales.
Es muy utilizada para tratar casos de flatulencia, ya que actúa favoreciendo la eliminación de los
gases acumulados en el tubo digestivo. (Brunton, 2001).
Su uso tópico reduce las reacciones alérgicas de la piel, la infusión de manzanilla se aplica
con gasas sobre la piel afectada, y gracias a sus propiedades antinflamatorias, ayudará a reducir
los síntomas y a recuperarse de las cicatrices. (Brunton, 2001).
Aunque bebiéndose la infusión se consigue el efecto antinflamatorio, se utiliza la infusión
para hacer gárgaras cuando hay problemas de garganta o de encías. También tiene propiedades
antimicrobianas y fungicidas (Gartelmann & Ortega, 2011).
4.2.1.5.5. CONSERVACIÓN DE LA INFUSIÓN.
Las infusiones se las puede conservar unas doce horas. Se las prepara por la mañana, y se
tienen que ir bebiendo en el transcurso del día; no es muy aconsejable guardarlas en el
refrigerador, a menos de que el día este muy caluroso. No se deben tomar infusiones que hayan
sido preparadas con más de 24 horas (Pamplona, 2006).
16
4.2.1.5.6. RIESGOS O PELIGROS:
Aunque en ningún caso es toxica, tratamientos prolongados o con demasiada cantidad
pueden conducir a irritaciones digestivas con sensación de vomito. También se han descritos
casos en los que, más que producir un efecto sedante, han conllevado el proceso contrario;
insomnio y nerviosismo (Biazzi, 2009).
El manejo de sus flores puede producir dermatitis de contacto y reacciones alérgicas, el
uso excesivo de la infusión puede ser abortivo por ser un estimulante uterino, de donde está
contraindicado en embarazadas (Cruz, 2009).
4.2.2. ACTINOMYCES
Los Actinomyces son bacterias que en el pasado fueron consideradas como hongos, pero
en la actualidad, se ha demostrado que estas pertenecen al orden de los Actinomycetales. El
nombre de los Actinomyces viene del griego AKINO: RAYO y MIKES: HONGO, por presentar
una estructura en forma radial de los gránulos que se forman en las lesiones de los tejidos.
(Romero R. , 2007).
4.2.2.1. TAXONOMÍA.
Dominio: Bacteria.
Filo: Actinobacteria
Orden: Actinomycetales.
Suborden: Actinomycineae.
Familia: Actinomycetaceae. (Negroni, 2014)
Género: Actinomyces.
17
Especies: A. bovis
A. bowdenii
A. canis
A. cardiffensis
A. catuli
A. coleocanis
A. dentalis
A. denticolens
A. europaeus
A. funkei
A. georgiae
A. gerencseriae
A. graevenitzii
A. hongkongensis
A. hordeovulneris
A. howellii
A. humiferus
A. hyovaginalis
18
A. israelii
A. marimammalium
A. meyeri
A. naeslundii
A. nasicola
A. neuii
A. odontolyticus
A. oricola
A. pyogenes
A. radicidentis
A. radingae
A. slackii
A. streptomycini
A. suimastitidis
A. suis
A. turicensis
A. urogenitalis
A. vaccimaxillae
19
A. Viscosus (Ruiz & Moreno, 2006).
4.2.2.2. FISIOLOGÍA Y ESTRUCTURA.
Estas bacterias son microorganismos bacilares de crecimiento lento, grampositivos, con
tendencia a ramificar. Se segmentan a medida que van creciendo y forman bacilos que se
asemejan a los difteroides. (Romero R. , 2007)
Figura N° 3: Estructura de los Actinomyces (bacterias bacilares).
Fuente: Romero Cabello Raúl (2007).
El género Actinomyces está compuesto por un grupo heterogéneo de bacilos
grampositivos, anaerobios facultativos o microaerófilos, no esporulados, inmóviles y no ácido-
alcohol resistentes. Muchas especies de Actinomyces forman parte de la microflora bucal de
seres humanos y distintos animales (Koneman, y otros, 2008).
Crecen lentamente en medios de cultivos enriquecidos tales, como la infusión de cerebro y
corazón, tioglicolato de sodio y medios con extractos de carne y levadura, siempre en
20
anaerobiosis; además suelen producir infecciones crónicas que se desarrollan con lentitud
(Murray, 2013).
Estos microorganismos son bacterias verdaderas debido a que carecen de mitocondrias y
membrana nuclear, se reproducen por fisión y se inhiben con penicilina, pero no con los
antibióticos antifúngicos (Murray, 2013).
El género Actinomyces tiene mayor interés como posible patógeno responsable de la
mayoría de las infecciones en el ser humano, y en él se ubican varias especies, a saber:
Actinomyces Viscosus, Actinomyces Odontolyticus, Actinomyces Israelii, Actinomyces
Naeslundii, y hasta cuarenta especies más (Negroni, 2014).
4.2.2.3. HÁBITAT.
El hábitat normal de casi todos los microorganismos del genero Actinomyces habitan en la
boca y en la garganta de los humanos y de otros animales, algunos son patógenos. También se
los ha podido aislar del tubo digestivo y de la vagina (Stanier, Ingrahan, Wheelis, & Peinter,
1992).
Los podemos encontrar en la cavidad bucal, zonas con baja tensión de oxígeno, como por
ejemplo: en el surco gingival, bolsas periodontales, los cálculos dentales, las cavidades cariosas,
en los capuchones que recubren los terceros molares, en las zonas periimplantarias y en las
criptas amigdalinas (Negroni, 2014).
Estos microorganismos se pueden encontrar con cierta frecuencia junto con otros, también
pertenecientes a la microbiota normal de la boca o de otras regiones donde se asiente la infección
(Negroni, 2014).
21
4.2.2.3.1. PERIODONTO SANO.
Estudios de cultivos realizados por Slots, Loesche y Syed (1978) citados por Bascones
(2009) habían mostrado un predominio claro de Estreptococos, fundamentalmente el
Estreptococos Sanguis, pero también menciona que se encuentra frecuentemente gérmenes del
género Actinomyces.
4.2.2.3.2. GINGIVÍTIS.
Bascones (2009) menciona que los estudios de cultivo realizados por Loesche y Syed
(1978) revelaron un predominio de Actinomyces a lo largo de la encía marginal. Por otra parte
Marsh y Martin (2013) afirman que hay un aumento entre 10 a 20 veces en la masa de la placa
dental donde hay un predominio de Actinomyces spp.
4.2.2.3.3. PERIODONTÍTIS.
Estudios con microscopia electrónica han demostrado que no existen diferencias entre la
placa supragingival asociada con gingivitis y con la periodontitis. La placa subgingival adherida
al cemento, está dominada por microorganismos Grampositivos, sobre todo el género
Actinomyces (Bascones, 2009).
En las formas crónicas más comunes de periodontitis, predomina el componente de placa
subgingival adherida, en donde son más numerosos los organismos filamentosos, sobre todo
Actinomyces Viscosus, A. Naeslundii y A. Israelii (Bascones, 2009).
4.2.2.4. PATOGENIDAD.
Estos microorganismos tienen un bajo potencial de virulencia, y únicamente provocan
enfermedad cuando las barreras de las mucosas se alteran por traumatismos, cirugías o infección
(Murray, 2013).
22
Su acción patógena se debe a la capacidad de adherirse a la superficie dentaria mediante
fibrillas extracelulares. También se ha comprobado que su patogenicidad se debe a la
coagregación bacteriana, la cual es más difícil de fagocitar (Negroni, 2014).
La mayor parte de enfermedades infecciosas asociadas con los actinomicetos son
polimicrobianas. Pero las infecciones orales las encontramos en: las infecciones de endodoncias,
los abscesos odontogénicos y las infecciones asociadas a implantes dentales (Murray, 2013).
La enfermedad clásica producida por los actinomicetos se conoce como Actinomicosis, la
cual se caracteriza por el desarrollo de lesiones granulomatosas crónicas que se tornan
supurativas y dan lugar a abscesos conectados entre sí mediante fistulas (Murray, 2013).
4.2.2.5. ACTINOMICOSIS.
Es una infección subaguda o crónica, supurativa, tumoral o seudotumoral localizada, pero
progresiva, de origen endógeno y no contagiosa. Se localiza en regiones como: la cabeza y el
cuello, el tórax, las regiones abdominal o pelviana, y solo excepcionalmente se comunican casos
de localización cerebral y diseminada (Negroni, 2014).
Esta infección se caracteriza por evolucionar de adentro hacia fuera, alterando diversos
planos y tejidos, incluido el óseo. Comienza aumentando el volumen de la zona donde se localiza
para posteriormente reblandecerse y fistulizar hacia el exterior por uno o más puntos.
Las infecciones cervicofaciales afectan a individuos con una higiene bucodental deficiente,
por lo que estos microorganismos invaden a tejidos enfermos o bien a aquellos que han sido
sometidas a un procedimiento dental invasivo o a un traumatismo bucal. El tratamiento implica
la combinación del drenaje o el desbridamiento quirúrgico de los tejidos afectados y la
administración prolongada de antibióticos (Murray, 2013).
23
4.2.2.6. ACTINOMYCES ODONTOLYTICUS.
Los Actinomyces Odontolyticus son bacterias Gram-positivas, anaeróbia facultativa, no
esporulada, no ácido resistente, no móvil, que presenta varillas cortas o medianas que se
asemejan a los difteroides. Las varillas más cortas se asemejan a propionibacterias y pueden estar
dispuestas en empalizadas (Lawrence, Millie, & Joel, 2003).
Lawrence y Col. (2003) mencionan que los Actinomyces Odontolyticus han sido aislados
de casos de actinomicosis cervicofacial y torácica, en bacteriemias, endocarditis subaguda y en
las enfermedades periodontales. Así Faba et al. (2014) afirman que estas bacterias son muy
habituales de la flora orofaríngea y que existen en gran cantidad cuando hay caries dentaria o
gingivitis.
En su estudio Aricapa (2009) menciona que Batty en 1958 aisló de lesiones cariosas
dentales al Actinomyces Odontolyticus, que contiene lisina y ornitina en su pared celular.
Además describe que sus fimbrias crecen aeróbicamente en presencia de dióxido de carbono,
pero su crecimiento máximo lo realizan en anaerobiosis.
La identificación de esta especie de Actinomyces según Koneman y Col. (2008) se realiza
por la catalasa negativa, la reducción del nitrato a nitrito, y la producción de ácido a partir de
glucosa, maltosa y sacarosa, aunque también puede fermentar algunas veces al glicerol,
glucógeno y xilosa.
Pueden formar colonias rosadas en agar sangre y colonias rojas en agar infusión de
cerebro y corazón, y α-hemólisis, características que pueden diferenciarlo de otras especies de
Actinomyces (Negroni, 2014).
24
En agar sangre, estas bacterias desarrollan colonias pequeñas, irregulares, de color
blanquecino, son lisas o ligeramente granulares y se puede observar un pigmento rojo oscuro
cuando madura de 2 a 14 días. Esta pigmentación roja es más evidente cuando los cultivos se
quedan al aire a temperatura ambiente después del aislamiento anaeróbica primaria. (Lawrence,
Millie, & Joel, 2003)
4.2.2.7. ACTINOMYCES VISCOSUS.
Es una especie de los Actinomyces, es una bacteria Gram-positiva, anaerobia, filamentosa
que es parte de la microbiota oral de humanos y animales. Tienen forma de bastoncillos, pueden
producir microcolonias filamentosas; que son estructuras densas en el centro y que en la periferia
presenta filamentos cortos, también pueden formar microcolonias suaves, circulares que
presentan una superficie granular y borde entero pero irregular (Aricapa, 2009).
Ha mostrado consistentemente estar asociado con las lesiones de caries radicular, en la
formación de la placa subgingival, además está implicado en la etiología de la enfermedad
periodontal inicial. Además pueden ser identificados por inmunofluorescencia en la periodontitis
crónica (Eley, Soory, & Manson, 2012).
Koneman y Col (2008) describen que esta especie es catalasa positiva, y que las colonias
en agar sangre son pequeñas y producen una área verde a su alrededor producto de la hemólisis;
pero también hidrolizan esculina y urea. Producen acido a partir de glucosa y sacarosa, y
algunas veces de la xilosa. Y Aricapa (2009) escribe que en agar liquido producen turbidez con
un sedimento mucoide.
25
En su estudio Aricapa (2009) menciona que esta especie no presenta ramificaciones y que
en su pared celular contienen glucosa, rammnosa-6-deoxitalosa, manosa y a veces fructuosa, a
veces también pueden presentar ácido octadecanoico y fosfatiletanolamina.
Carranza (2010) nos explica que estos microorganismos poseen estructuras proteínicas
fibrosas llamadas fimbrias que poseen adhesinas con lo que se fijan de manera específica a las
proteínas ricas en prolina que están en la película dental lo que provoca la fijación de la bacteria
a la superficie dental.
Por otra parte Aricapa (2009) dice que las fimbrias tienen la capacidad de sintetizar
grandes cantidades de glucógeno a partir de la glucosa, lo que provocaría la producción de ácidos
y así aumenta el potencial cariogénico.
Investigaciones recientes indican que el Actinomyces Viscosus es un microorganismo
cariogénico que puede ser identificado antes de que se presente la lesión cariosa por producir
una autoflorecencia roja de 600-700 nm de longitud de onda bajo una luz azul (Zhu, Lao, Chen,
Zhang, & Chen, 2015).
Pueden producir Actinomicosis oral debido a un trauma, tal como una extracción dental o
sangrado de las encías; infección granulomatosa con la formación de abscesos en la boca,
pulmones o el tracto gastrointestinal. Y su tratamiento es con antibióticos como el metronidazol.
26
5. HIPÓTESIS:
5.1. ALTERNATIVA:
La infusión de manzanilla si tiene efecto antimicrobiano sobre el Actinomyces
Odontolyticus y el Actinomyces Viscosus.
5.2. NULA:
La infusión de manzanilla no tiene ningún efecto antimicrobiano sobre el Actinomyces
Odontolyticus y el Actinomyces Viscosus.
6. METODOLOGÍA:
6.1. TIPO DE ESTUDÍO.
Es un estudió de tipo experimental, por cuanto se utilizó infusiones de manzanilla para
observar el efecto antimicrobiano, sobre muestras in vitro de Actinomyces Odontolyticus y
Actinomyces Viscosus; los cuales se realizaron mediante las mediciones de los halos de
inhibición en los medios de cultivo empleando paras las cepas puras de Actinomyces
Odontolyticus (ATCC 17929) y Actinomyces Viscosus (ATCC 15987). Este estudio también es
transversal, porque se realizó en un periodo de tiempo corto, de dos a tres semanas entre los
meses Octubre-Noviembre del 2015. Además el estudio es comparativo; porque se está
observando por separado el efecto antimicrobiano de las infusiones de manzanilla sobre las cepas
de Actinomyces Odontolyticus (ATCC 17929) y el Actinomyces Viscosus (ATCC 15987).
27
6.2. UNIVERSO Y MUESTRA
El universo y muestra está constituido por las dos cepas de microorganismos liofilizados de
Actinomyces Odontolyticus (ATCC 17929) y Actinomyces Viscosus (ATCC 15987), las cuales
son obtenidas del laboratorio MEDIBAC; las mismas que son tratadas y manipuladas en base a
las condiciones del laboratorio ya determinadas, esto se realizó en el Laboratorio Clínico
NARVAEZ PAZMIÑO de la ciudad de QUITO-ECUADOR. Con estas cepas de
microrganismos se establecieron 30 unidades experimentales (cajas Petri con Agar Mueller
Hinton suplementado con 5% de sangre de cordero), divididas 15 unidades para cada cepa de
microorganismo, siguiendo los protocolos establecidos por Mosquera y Veloz (2011).
6.2.1. CRITERIOS DE INCLUSIÓN
 Cepas puras de Actinomyces Odontolyticus y Actinomyces Viscosus sin ningún tipo
de contaminación.
 Flores de manzanilla frescas o verdes si presencia de envejecimiento o deterioro.
 Infusiones de manzanilla obtenida mediante proceso químico.
6.2.2. CRITERIOS DE EXCLUSIÓN.
 Las cepas de Actinomyces Odontolyticus y Actinomyces Viscosus que presenten
cualquier tipo de contaminación.
 Cepas microbiológicas que no se activen en el medio de cultivo establecido.
 Infusiones de manzanilla contaminadas u obtenidas por procesos ajenos al estipulado.
28
6.3. OPERACIONALIZACION DE LAS VARIABLES:
VARIABLES TIPO DEFINICIÓN INDICADORES ESCALA CATEGORÍAS
Infusiones de Solución
manzanilla Independiente obtenidas de la Concentración del Nominal Cuantitativa
manzanilla extracto
empleados como
antibacterianos
Diámetro del halo de
Capacidad Inhibición del inhibición del filtro de Nula (-)
antimicrobiana crecimiento de A. papel
sobre Odontolyticus y Sensible (+)
Actinomyces Dependiente A. Viscosus. Razón
Odontolyticus y Muy sensible (++)
Actinomyces
Viscosus Sumamente
sensible (+++)
C.M.I. Interviniente Concentración Concentración mínima Razón Cualitativa
mínima a la que un Turbidez
inhibitoria que antimicrobiano actúa
afecta a una sobre las cepas
bacteria
6.4. PROCEDIMIENTO Y TÉCNICA.
6.4.1. OBTENCIÓN DE LAS INFUSIONES DE MANZANILLA.
6.4.1.1. Recolección de la manzanilla.
Se recolectaron 20 gr. de flores de manzanilla, sin signos de envejecimiento o deterioro.
29
Figura N° 4: Flores de manzanillas
Fuente: Laboratorio Clínico NARVAEZ PAZMIÑO.
6.4.1.2. Infusiones de manzanilla.
En un recipiente de vidrio se procedió a colocar aproximadamente 500 ml de agua para
poner a hervir sobre la estufa, en otro recipiente se colocó los 20 gr de flores de manzanilla, para
poder verter sobre este recipiente 100 ml de agua caliente una vez que haya alcanzado su punto
de ebullición y posteriormente tapar el recipiente. Pasado los 5 a 10 minutos que demanda la
bibliografía se procede al colado o filtrado de la solución mediante un papel filtro sobre otro
recipiente limpio, para poder obtener lo que es la solución pura sin rastros de impurezas visibles
(Castro, 2005).
30
Figura N° 5: Flores de manzanilla sumergidas en agua caliente.
6.4.1.3. Discos de infusión de manzanilla.
Una vez obtenida la infusión de manzanilla, se procede a la preparación de los discos de
infusión de manzanilla, los cuales son discos de papel filtro de 6 mm de diámetro, a los cuales se
los embebió en la infusión de manzanilla, para luego ser sometido a calor durante 24 horas con lo
que lograremos conservar las propiedades de las infusiones de manzanilla en los discos.
6.4.2. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO.
El análisis microbiológico se realizó en el laboratorio clínico NARVAEZ PAZMIÑO. Una
vez adquiridas las cepas puras de Actinomyces Odontolyticus (ATCC 17929) y Actinomyces
Viscosus (ATCC 15987).
6.4.2.1. Reactivación de la cepa.
La reactivación de las cepas de los microorganismos Actinomyces Odontolyticus (ATCC
17929) y Actinomyces Viscosus (ATCC 15987), se realizó en los laboratorios del laboratorio
31
clínico Narváez Pazmiño, de acuerdo a las instrucciones del distribuidor, en este caso la empresa
MEDIBAC. Ver anexo # 03.
6.4.2.2. Preparación del inoculo.
Se realizó todos los pasos sugeridos por el distribuidor MEDIBAC, donde se toma de 3-5
colonias y se siembran en 4-5 ml de caldo tripticasa soya, posteriormente se agitó el tubo por 5
minutos aproximadamente, se incuba a 35ºC por 2-6 horas, observándose una turbidez de 0.5 en
la escala de Mc. Farland, con el fin de poder apreciar mejor los halos de inhibición.
Figura N° 6: Preparación de la suspensión bacteriana.
6.4.2.3. Preparación del Agar Mueller-Hinton.
El agar Mueller-Hinton deshidratado se prepara de acuerdo a las indicaciones del
fabricante. Después de su esterilización en autoclave se deja enfriar en baño María a 50ºC, se
vacía en placas Petri sobre una superficie plana y asegurando una profundidad de 4 mm, se
puede dejar enfriar a temperatura ambiente.
32
Se realiza un control de esterilidad de placas incubando un período de 24 horas. El pH debe
ser controlado entre 7.2 a 7.4 después de solidificado. También se deberá controlar la humedad,
no debe haber agua en la tapa de la placa ni en el agar, si ésta es grande se debe poner las placas
en una estufa a 35ºC por 10-30 minutos.
6.4.2.4. Siembra del microorganismo en el Agar.
Transcurrido el tiempo de incubación del agar, se siembra en la superficie del mismo con
el asa de digralsky cada microorganismos en las cajas Petri, en distintas direcciones; luego se
procedió a la incubación por 48 a 72 horas para los A. Odontolyticus y A. Viscosus, cumplido el
tiempo se observa en las cajas que hay crecimiento bacteriano.
Figura N° 7: Estriación de las bacterias en el agar sangre.
6.4.2.5. Incubación de las cepas bacterianas con los discos de manzanilla.
Una vez que verifico el crecimiento bacteriano en las 15 cajas Petri de las dos cepas
bacteriana, se procedió a la colocación de 6 discos de manzanilla por cada caja para las dos cepas
bacterianas, colocados los discos se tapa las cajas y se sella en fundas herméticas. Se procede a la
33
incubación a 35°C en anaerobiosis por 6, 12, 18, y 24 horas. Los discos se cambiaron en cada
corte de tiempo, posteriormente a la identificación y medición de los halos de inhibición.
Figura N° 8: A: medición de halos de inhibición de A. Viscosus.
B: halos de inhibición del A. Odontolyticus.
6.4.3. RECOLECCIÓN DE DATOS.
En los cortes de tiempo se observó la presencia de halos de inhibición alrededor de cada
uno de los discos, con lo cual se procedió a la medición de los halos de inhibición de forma
individual; es decir caja por caja y disco por disco, de las dos cepas bacterianas. Estas medidas
fueron obtenidas mediante una regla milimetrada. Las medidas fueron registradas en los cortes
de tiempo de 6 horas, 12 horas, 18 horas y 24 horas. (Ver anexo # 09 y 10).
Los datos obtenidos se registraron en tablas de registros prefabricadas clasificándolas en:
 El tipo de bacteria.
 El tiempo.
 Por caja.
 Por disco.
34
6.4.4. ASPECTOS ÉTICOS
Se emitió un certificado de autenticidad de las cepas bacteriológicas de Actinomyces
Odontolyticus y del Actinomyces Viscosus por parte de la distribuidora de bacterias MEDIBAC.
(Ver anexo # 01 y 02).
Se solicitó al laboratorio clínico NARVAEZ PAZMIÑO un certificado que confirme la
realización de este proyecto de investigación en sus instalaciones. De la misma manera se le
solicito otro certificado que haga constancia del personal que colaboro comedidamente en este
proyecto de tesis. (Ver anexo # 11).
Después se procedió al manejo de desechos mediante la recolección por paquetes
señalizados y posterior almacenamiento para tratamiento bajo estrictas normas de bioseguridad
para este tipo de estudios con microorganismos, para lo cual se contará con personas capacitadas
del laboratorio encargadas de dicho proceso.
35
7. RESULTADOS.
7.1. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS.
Los resultados obtenidos luego de haber culminado el estudio experimental, fueron
elaborados y representados mediante tablas y gráficos; los análisis estadísticos se realizaron con
las pruebas de Kruskal-Wallis y las de Friedman, utilizando un valor de significancia del 5%.
Con los datos obtenidos con estos análisis se procedió a la elaboración de una base de datos para
estimar los valores de los halos de inhibición de las infusiones de manzanilla para cada
microorganismo.
Los datos obtenidos al final del experimento se anotaron en unas tablas para su posterior
evaluación y análisis. Se realizaron cinco tablas para cada cepa de microrganismos con iguales
cortes de tiempo, para poder comparar los resultados. Se observó que para las dos cepas en el
primer corte de tiempo se obtuvo buenos resultados, notándose halos de inhibición entre 11 y 12
mm. Lo cual no sucede en los demás cortes de tiempo, dándonos medidas nulas; es decir
medidas de cero, por lo que no se evidencia la presencia de halos de inhibición.
Tabla 1. Valor de los halos de inhibición del Actinomyces Viscosus.
Siembre inicial (4:00 pm) Actinomyces Viscosus

caja 1 caja 2 caja 3 caja 4 caja 5 caja 6 caja 7 caja 8 caja 9 caja 10 caja 11 caja 12 caja 13 caja 14 caja 15
Disco 1 (halo en mm) 11 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12
Disco 2 (halo en mm) 11 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12
Disco 3 (halo en mm) 12 12 12 11 11 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12
Disco 4 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 11 12 12 12 12 12 12 12
Disco 5 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 11 11 12 12 12
Disco 6 (halo en mm) 12 11 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 12
Fuente: Laboratorio clínico NARVAEZ PAZMIÑO.
Elaboración: Victor Gonzalez Chila.
36
En las primeras 6 horas de incubación del Actinomyces Viscosus con los discos de
infusión de manzanilla se pudo obtener resultados favorables para la investigación, se colocaron
6 discos en cada caja para las 15 cajas en total. Como se puede observar se obtuvieron halos de
inhibición de 12 mm en todas las cajas; pero también se puede observar que se registraron halos
de 11 mm en menor cantidad en casi todas las cajas. Solo las cajas 3-6-9-13-15 se registraron
medidas uniformes para todos los discos.
Grafico 1. Valores generales en barras de los halos de inhibición del primer corte de tiempo
del Actinomyces Viscosus.
37
Grafico 2. Variación en las medidas de los halos de inhibición del Actinomyces Viscosus.
ACTINOMYCES VISCOSUS
12,2
12
MILIMETROS DE INHIBICION
11,8
11,6
11,4
caja 1
11,2
caja 2
11 caja 3
10,8
10,6
10,4
1 2 3 4 5 6
DISCOS DE MANZANILLA
Aleatoriamente se escogieron tres cajas del primer corte de tiempo, en las cuales se
observaron los discos con las diferentes medidas que se registraron; es decir, la caja 1 mostro
más medidas de 11mm, la caja 2 solo registro una medida de 11mm y en la caja 3 solo registró
medidas de 12mm. Con lo cual se observó que 12mm es la medida estándar del halo de
inhibición lograda por los discos de infusión de manzanilla.
Tabla 2. Valor de los halos de inhibición a las 6 horas de incubación del Actinomyces
Odontolyticus.
Siembre inicial (4:00 pm) Actinomyces odontolyticus

Disco 1 (halo en mm) 12 12 12 12 12 11 12 12 12 12 12 12 11 12 12
Disco 2 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 12 12 12
Disco 3 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 11 12 12 12 12 12 12 12
Disco 4 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 12
Disco 5 (halo en mm) 12 12 11 12 12 12 11 12 12 12 11 11 12 12 12
Disco 6 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 12
38
En los primeros registros del Actinomyces Odontolyticus se pudo obtener resultados
positivos a las 6 horas de incubación. Se puede observar que se obtuvieron halos de inhibición de
12 mm en todas las cajas; pero también se puede observar que algunos discos de las diferentes
cajas registraron halos de 11 mm en menor cantidad. Solo en las cajas 1-2-4-5-9-10-15 se
registraron medidas uniformes para todos los discos.
Grafico 3. Representación en barras que representan los halos de inhibición en mm de los
A. Odontolyticus en el primer corte de tiempo.
ACTINOMYCES ODONTOLITICUS
12,2
HALOS DE INHIBICION
12
11,8
disco 1
11,6
11,4 disco 2
11,2 disco 3
11 disco 4
10,8
disco 5
10,6
10,4 disco 6
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
CAJAS PETRI
39
Grafico 4. Variación en las medidas de los halos de inhibición del Actinomyces
Odontolyticus.
ACTINOMYCES
ODONTOLYTICUS
12,2
MILIMETROS DE INHIBICION
12
11,8
11,6
11,4
caja 1
11,2
caja 3
11
caja 12
10,8
10,6
10,4
1 2 3 4 5 6
DISCOS DE MANZANILLA
De forma aleatoria se escogieron las medidas de tres cajas del primer corte de tiempo, para
poder comparar las medidas de los discos que se registraron en las cajas; es decir, la caja 1
mostro solo medidas de 12mm, la caja 3 registro solo una medida de 11mm en el disco #5 y en
la caja 13 se registró dos medidas de 11mm en los discos #2 y #5. A lo que se concluyó que
12mm sería la medida estándar de los halos de inhibición lograda por los discos de infusión de
manzanilla.
Se realizó la prueba de Kruskal-Wallis para comparar los valores obtenidos de los halos de
inhibición en el primer corte de tiempo de las 15 cajas en las dos muestras de microorganismos,
40
y así determinar si hay variabilidad en los datos obtenidos. Las hipótesis que maneja esta prueba
son:
 Ho: Las muestras proceden de poblaciones con la misma distribución de probabilidad
(Medias similares)
 Ha: Existen diferencias respecto a la tendencia central de las poblaciones.
Grafico 5. Resultados de la Prueba de Kruskal-Wallis: Comparación cajas con A.
ODONTOLYTICUS.
Elaboración: Ing. Jaime Molina.
41
La prueba de Kruskal-Wallis mostro una Significancia asintomática = 0,587 que es mayor
a 0,05 (95% de confiabilidad), luego NO existen diferencias respecto a la tendencia central de las
poblaciones. Y que todas las medias de las muestras son similares.
Grafico 6. Resultados de la Prueba de Kruskal-Wallis: Comparación cajas con
ACTINOMYCES VISCOSUS.
42
La prueba de Kruskal-Wallis revelo que la Significancia asintomática es = 0,837 la que es
mayor a 0,05 (95% de confiabilidad), luego NO existen diferencias respecto a la tendencia
central de las poblaciones. Y que todas las medias de las muestras son similares.
Se realizó la prueba de Friedman para obtener comparaciones entre los controles que se
realizaron en cada uno de las muestras estudiadas, y poder registrar si existe o no diferencias en
las medidas que se obtuvieron. Las hipótesis que Friedman maneja son:
 Ho: Las muestras proceden de poblaciones con la misma distribución de probabilidad
(Medias similares)
 Ha: Existen diferencias respecto a la tendencia central de las poblaciones.
Grafico 7. Resultados de la Prueba de Friedman: Comparación entre los controles de
ACTINOMYCES ODONTOLYTICUS.
43
La Prueba de Friedman revela que la Significancia asintomática = 0,00 es menor a 0,05
(95% de confiabilidad), luego Si existen diferencias respecto a la tendencia central de las
poblaciones. Las medias son diferentes, se realiza la prueba dos a dos para verificar cuales son
diferentes:
Grafico 8. Prueba de dos a dos para verificar cuales de los controles es diferente.
44
La prueba dos a dos revela que el Control 1 es superior a los otros controles del Actinomyces
Odontolyticus.
Grafico 9. Resultados de la Prueba de Friedman: Comparación entre los controles del
ACTINOMYCES VISCOSUS.
De la Prueba de Friedman se registró un valor de la Significancia asintomática es = 0,00 el que
es menor a 0,05 (95% de confiabilidad), lo que indica que Si existen diferencias respecto a la
tendencia central de las poblaciones, por lo que las medias son diferentes.
45
Grafico 10. Prueba de dos a dos para verificar cuales de los controles es diferente.
46
La prueba dos a dos nos muestra que el Control 1 es superior a los otros controles del
Actinomyces Viscosus.
7.2. DISCUSION.
Las infusiones de manzanilla se las han utilizado para inflamaciones, estomatitis e
irritación de la boca y algunas pocas veces para la garganta. En la literatura consultada se
menciona muy poco su acción antimicrobiana; pero tampoco se específica contra que agentes
microbianos ejerce dicha acción, lo que es importante hacer notar, ya que los resultados
obtenidos reportaron que efectivamente tiene propiedades antimicrobiana.
De los microorganismos que fueron objeto de estudio, los datos obtenidos demostraron que
existe un efecto antibacteriano por parte de la infusión de manzanilla sobre las cepas
Actinomyces Odontolyticus (ATCC 17929) y el Actinomyces Viscosus (ATCC 15987), especies
bacterianas que representan a uno de los principales géneros bacterianos formadores de placa
dental, caries dental y algunas infecciones en el tracto gastrointestinal. Además ninguno de estos
microorganismos mostró significancia alguna en ser más susceptible el uno del otro.
Los datos que se obtuvieron de esta investigación revelan que en las primeras 6 horas se
produce un efecto antimicrobiano, ya que pasada este tiempo, se pierde toda acción sobre el
crecimiento bacteriano lo que se evidencia por la ausencia total de los halos de inhibición. Es así
que con el análisis de las pruebas de KRUSKAL-WALLIS se determina que no hay diferencia
significativa entre las medidas obtenidas de las dos muestras estudiadas; pero la prueba de
FRIEDMAN nos dice que si existe diferencia entre los controles que se realizaron para cada una
de las muestras, y que en ambas muestra el control 1 es el que mostro esa diferencia en
comparación a los otros controles.
47
Los resultados obtenidos por Cárcamo, Oliva, & Gonzalez (2011) en el estudio de los
colutorios de manzanilla, mostraron que mediante el test de ANOVA y el de KRUSKAL-
WALLIS, el recuento bacteriano no presenta diferencias significativas en los tiempos analizados
para mucosas (CM pvalue= 0,25. CX pvalue= 0,176. SF pvalue= 0,939) y para dientes (CM
pvalue= 0,25. CX pvalue= 0,285. SF pvalue= 0,347). Además indican que cada 4 a 6 horas el
colutorio de manzanilla presenta un mayor índice en la disminución de carga bacteriana y que
también tiene importantes propiedades antibacterianas, específicamente sobre Streptococcus y
Staphilococcus.
Romero, Hernández, & Gil (2009) al analizar los resultados de su estudio demostraron que
la manzanilla sobre tres cepas de Streptococcus Mutans, donde obtuvierón halos de inhibición
los entre los 8-11-12 mm en un periodo de tiempo donde hubo escasa reproducción bacteriana
entre las 4 y 8 horas, hay un crecimiento bacteriano exorbitante hasta las 18 horas donde los
halos registraron medidas de 5-8-9 mm, pasado este tiempo el crecimiento bacteriano se vuelve
lento. Por lo que evidenciaron que no hay diferencias significativas en los halos de inhibición en
base a los test de KRUSKAL_WALLIS y el CHI cuadrado.
En el estudio realizado por Sainz de Net (2004) los resultados mostraron que existe
disminución en la cantidad total del número de microorganismos en pacientes tratados con
enjuague de manzanilla y se observa que esta disminución va de 108 a 107 UFC/ml o hasta 106
UFC/ml, comparados con los pacientes controles donde se notó un incremento en las UFC.
Nuestro estudio mostro que la infusión de manzanilla al 20% fue capaz de inhibir el crecimiento
bacteriano de los Actinomyces Odontolyticus y Actinomyces Viscosus, y que a las 6 horas de
hacer el primer control se registraron las medidas de los halos de inhibición de los discos,
observándose en casi su mayoría estas medidas eran de 12 mm; pero en muy pocos discos se
48
obtuvieron medidas de 11 mm; notándose que no es mucho la diferencia en este periodo de
tiempo. Pero en un segundo corte de tiempo a las 12 horas ya había ausencia total de los halos de
inhibición así como en los otros cortes de tiempo.
Cárcamo, L. (1997) en su tesis estudio la infusión de manzanilla a diferentes
concentraciones, donde observo que para el Streptococcus Mutans, el cultivo control con suero
fisiológico tuvo un 0% de inhibición de crecimiento de UFCs. Con la manzanilla al 5% la
inhibición de crecimiento fue de -4.7%. Al 10% se tuvo una inhibición de crecimiento de 32.09%
UFCs y al 20% una inhibición de crecimiento de 24.15%. Para Lactobacillus Acidophillus se
observó un crecimiento de 1582 UFCs en la siembra control. Con la infusión al 5% un
crecimiento de 873 UFCs. Al 10% se tuvo un crecimiento de 834 UFCs y al 20% hubo un
crecimiento de 1005 UFCs. Concluyendo que la infusión de manzanilla al 10% es la más efectiva
para los microorgaismos estudiados.
49
8. CONCLUSIONES
 Se pudo entender que la infusión de manzanilla posee cierta propiedad antimicrobiana
capaz de inhibir el crecimiento de los Actinomyces Odontolyticus y Actinomyces
Viscosus en un periodo de tiempo determinado, luego del cual pierde toda capacidad de
poder inhibir el crecimiento bacteriano.
 Se logró determinar que la infusión de manzanilla presenta mayor eficacia antimicrobiana
en su primer corte de tiempo; es decir en las primeras 6 horas, ya que pasado ese periodo
de tiempo no se identificó la presencia de halos de inhibición.
 Con la ayuda de una regla milimetrada específica para medir halos de inhibición, se
registraron medidas de 12 mm en su mayoría, pero en muy pocos discos se obtuvo
medidas de 11 mm.
 No se pudo establecer diferencia alguna del efecto de la infusión de manzanilla para
ninguna de las muestras estudiadas, por cuanto estas registraron medidas similares.
 Pudimos confirmar que la infusión de manzanilla tiene propiedades antimicrobianas, a
más de la antiinflamatoria, antiespasmódica, sedante y carminativa que la literatura e
investigaciones anteriores afirman.
 Entre las características comunes que presentaron estos microorganismos podemos
destacar que forman parte de la microflora oral, placa bacteriana y caries dental radicular;
pero que van actuar siempre que haya un desequilibrio en la cavidad bucal.
 En base a la literatura y nuestra investigación estos microorganismos pueden crecer en
tioglicolato de sodio y ser cultivados en agar sangre sin ninguna dificultad en un medio
anaerobio.
50
9. RECOMENDACIONES
 Recetar a los pacientes del área Odontológica, a los que se les ha realizados tratamientos
cruentos e invasivos o padezcan de inflamaciones, realizarse enjuagues con infusiones de
manzanilla cada 4 a 6 horas para garantizar un efecto antimicrobiano y antiinflamatorio,
para de esta manera mejorar de forma económica y segura la salud bucodental de los
pacientes.
 Fomentar la investigación en la manzanilla para descubrir las propiedades que posee en
benéfico de la Odontología; y poder aumentar sus efectos con algunas combinaciones de
otras plantas que poseen las mismas características, y porque no intentar patentar algún
producto que resulte de las investigaciones.
51
10. BIBLIOGRAFIAS:
Aricapa, D. P. (2009). Actividad antimicrobiana de las plantas sobre microorganismos cariogenicos.
Bogota: Tesis.
Bascones, A. M. (2009). Periodoncia Clínica e Implantología Oral. Madrid: Avances Médicos Dentales.
Biazzi, E. (2009). El maravilloso poder de las plantas. Buenos Aires: Asociación Casa Editora
Sudamericana.
Brunton, J. (2001). Fitoquímica Plantas Medicinales. Zaragoza: ACRIBIA S.A.
Carcamo, V., Oliva, P., & Gonzalez, P. (2011). Efectividad antimcrobiana del colutorio de Matricaria
Recutita. Odontstomat, 179 - 184.
Carranza, F., Newman, M., Takei, H., & Klokkevold, P. (2014). Periodontología Clínica de Carranza.
Bogota: AMOLCA.
Cosco, D. A. (2010). Actividad inhibitoria del crecimiento de Streotococcus Mutans y de Flora mixta
salival por acción del Aceite esencial de la MATRICARIA CHAMOMILLA. Lima.
Cruz, P. (2009). Elaboracion y control de calidad del gel antimicotico de Manzanilla (Matricaria
chamomilla), Matico (Aristiguietia) y Marco (Ambrosia aborescens). Chimborazo: Tesis .
Daniele, R. (1995). Aromaterapia. BARCELONA: Kairos S.A.
De la Torre, L., & Navarrete, H. (2008). Enciclopedia de la plantas utiles del Ecuador. Quito:
HERBANO QCA.
Del Valle, L., Macias, C., Socarra, B., Marsan, V., Sanchez, M., Palma, L., & Lam, R. (2012). Efecto in
vitro de la Metricaria Recutita sobre la respuesta de linfocitos y neutrofilos. Cubana
Hematológica, Inmunológica y Hemoterápia, 177-184.
52
Eley, B., Soory, M., & Manson, J. (2012). Periodoncia. Barcelona: ELSEVIER.
Faba, R., Trujillo, S., Peña, P., Lobos, G., & Wolff, M. (2014). Actinomicosis Toracica por Actinomyces
Odontolyticus. Chile Enfermedades Respiratorias, 40-45.
Gaete, M. J. (2012). Efectividad del colutorio de Manzanilla comparado con Placebo y Clorhexidinaen
pacientes con gingivitis entre 19 y 25 años: Ensayo clínico controlado. Journal
ODONTOSTOMAT, 151-156.
Garrido, G. (2008). Gran Diccionario de las Plantas Medicinales. Madrid: Libro Hobby Club S.A.
Gartelmann, K. D., & Ortega, F. (2011). La Botica de Dios plantas medicinales y su uso. Quito: Trama
Ediciones.
Herrera, M. T. (2004). El papel del Biofilm en el proceso infeccioso y la resistencia. NOVA, 71-80.
Hoogesteger. (1994). Uso de las plantas Medicinales. Bogota: Arbol.
Koneman, E., Winn, W., Allen, S., Procop, G., Janda, W., & Woods, G. (2008). Koneman Diagnóstico
Microbiológico Texto y Atlas en color. Buenos Aires: Medica Panamericana.
Lawrence, C., Millie, L., & Joel, H. (2003). Actinomyces Odontolyticus Bacteremia. Emerging Infectius
Diseases, 1629 - 1632.
Marsh, P., & Martin, M. (2013). Microbiología Oral. Bogota: AMOLCA.
Melgaredo, N., & Alvarez, G. (2008). Planta medicinaless: Guía para su uso en la atención primaria de
la Salud. Buenos Aires: Corpus.
Modesto, A. (2003). Estudio sobre la actividad antimicrobiana de soluciones utilizadas en la higiene bucal
del bebe. Odontopediatria Odontol Bebe, 18-23.
Murray, R. (2013). Microbiología Médica. Barcelona: EL SEVIER.
53
Negroni, M. (2014). Microbiologia Estomatológica Fundamental y Guia práctica. Buenos Aires: Medica
Panamericana.
Pamplona, J. (2006). Enciclopedia de las Plantas Medicinales. Buenos Aires: SAFELIZ.
Romanelli, H., & Adams, E. (2012). 1001 Tips en periodoncia. Bogota: AMOLCA.
Romero, H., Hernandez, Y., & Gil, M. (2009). Actividad inhibitoria de la Matricaria Recutita
"MANZANILLA ALEMANA" sobre el Streptococcus Mutans. Revista Latinoamericana de
Ortodoncia y Ortopedia, 1-13.
Romero, R. (2007). Microbiología y Parasitología Humana. México DF.: Medica Panamericana.
Ruiz, V., & Moreno, S. (2006). Tratado SEIMC de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica.
Madrid: Medica Panamericana.
Sadr, L., & Raoof, K. (2006). The effect of German Chamomile (MARTICARIA RECUTITA L.) Extract
and Tea Tree (MALALEUCA ALTERNIFOLIA L.) Oil used as irrigantsor removalof smear
layer: A scanning electtron microscopy study. International Endodontic Journal, 190-195.
Sainz de Net, T. (2004). Estudio de la flora bacteriana en pacientes tratados ortodonticamente, aplicando
enjuagues bucales de Matricaria Chamomilla "manzanilla". Foro Odontologia Online, 22-30.
Serrano, J., & Herrera, D. (2005). La placa dental como biofilm. RCEO, 431-439.
Stanier, R., Ingrahan, J., Wheelis, M., & Peinter, P. (1992). Microbiología. Barcelona: Reverte S.A.
Zhu, H., Lao, W., Chen, Q., Zhang, Q., & Chen, H. (2015). A study of the fluorescence characteristics of
common cariogenic microorganisms. INT J CLIN EXP MED, 3651-3661.
Zorzano, L. A. (2005). Manual SEPA de Periodoncia y Terapeutica de Implantes. Madrid: Medica
Panamericana.
54
11. ANEXOS
ANEXOS # 01: Certificado de autenticidad de la cepa Actinomyces Odontolyticus (ATCC
17929)
55
ANEXO # 02: Certificado de autenticidad de la cepa Actinomyces Viscosus (ATCC 15987).
56
ANEXO # 03: Instrucciones de la empresa distribuidora MEDIBAC para la reactivación correcta
de las cepas bacterianas.
57
ANEXO # 04: Procedimientos para la activación de las cepas bacterianas.
ANEXO # 05: Estriación y crecimiento bacteriano luego de 6 días de incubación.
58
ANEXO # 06: Incubación de las cepas bacterianas a 35°C en medio de anaerobiosis.
ANEXO # 07: Halos de inhibición del Actinomyces Odontolyticus en las 24 horas.
59
ANEXO # 08: Halos de inhibición del Actinomyces Viscosus en las 24 horas.
60
ANEXO # 09: Tablas de medidas de los halos de inhibición del Actinomyces
Odontolyticus.
MANZANILLA SOBRE:
A. ODONTOLYTICUS
Siembre inicial (4:00 pm) Actinomyces odontolyticus

Disco 1 (halo en mm) 12 12 12 12 12 11 12 12 12 12 12 12 11 12 12
Disco 2 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 12 12 12
Disco 3 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 11 12 12 12 12 12 12 12
Disco 4 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 12
Disco 5 (halo en mm) 12 12 11 12 12 12 11 12 12 12 11 11 12 12 12
Disco 6 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 12
(10:00 pm) Actinomyces odontolyticus

Disco 1 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 2 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 3 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 4 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 5 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 6 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
(04:00 am) Actinomyces odontolyticus

Disco 1 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 2 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 3 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 4 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 5 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 6 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
(10:00 am) Actinomyces odontolyticus

Disco 1 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 2 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 3 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 4 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 5 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 6 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
(4:00 pm) Actinomyces odontolyticus

Disco 1 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 2 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 3 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 4 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 5 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 6 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
61
ANEXO # 10: Tabla de mediciones de los halos de inhibición del Actinomyces Viscosus.
MANZANILLA SOBRE:
A. VISCOSUS
Siembre inicial (4:00 pm) Actinomyces Viscosus

Disco 1 (halo en mm) 11 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12
Disco 2 (halo en mm) 11 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12
Disco 3 (halo en mm) 12 12 12 11 11 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12
Disco 4 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 11 12 12 12 12 12 12 12
Disco 5 (halo en mm) 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 11 11 12 12 12
Disco 6 (halo en mm) 12 11 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12 11 12
(10:00 pm) Actinomyces Viscosus

Disco 1 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 2 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 3 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 4 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 5 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 6 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
(04:00 am) Actinomyces Viscosus

Disco 1 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 2 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 3 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 4 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 5 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 6 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
(10:00 am) Actinomyces Viscosus

Disco 1 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 2 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 3 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 4 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 5 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 6 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
(4:00 pm) Actinomyces Viscosus

Disco 1 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 2 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 3 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 4 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 5 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Disco 6 (halo en mm) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
62
ANEXO # 11: Certificado del Laboratorio Clínico Pazmiño Narvaez.
63
ANEXO # 12: Tabla utilizada en la realización del análisis estadístico.
MANZANILLA SOBRE: MANZANILLA SOBRE:

A. ODONTOLYTICUS
A. VISCOSUS
NO EXISTE DIFERENCIA ENTRE CAJAS NO EXISTE DIFERENCIA ENTRE CAJAS

controles controles
control_1 control_2 control_3 control_4 control_5 control_1 control_2 control_3 control_4 control_5
cajas (4:00 pm) (10:00 pm) (04:00 am) (10:00 am) (4:00 pm) cajas (4:00 pm) (10:00 pm) (04:00 am) (10:00 am) (4:00 pm)
1 12 0 0 0 0 1 11 0 0 0 0
1 12 0 0 0 0 1 11 0 0 0 0
1 12 0 0 0 0 1 12 0 0 0 0
1 12 0 0 0 0 1 12 0 0 0 0
1 12 0 0 0 0 1 12 0 0 0 0
1 12 0 0 0 0 1 12 0 0 0 0
2 12 0 0 0 0 2 12 0 0 0 0
2 12 0 0 0 0 2 12 0 0 0 0
2 12 0 0 0 0 2 12 0 0 0 0
2 12 0 0 0 0 2 12 0 0 0 0
2 12 0 0 0 0 2 12 0 0 0 0
2 12 0 0 0 0 2 11 0 0 0 0
3 12 0 0 0 0 3 12 0 0 0 0
3 12 0 0 0 0 3 12 0 0 0 0
3 12 0 0 0 0 3 12 0 0 0 0
3 12 0 0 0 0 3 12 0 0 0 0
3 11 0 0 0 0 3 12 0 0 0 0
3 12 0 0 0 0 3 12 0 0 0 0
4 12 0 0 0 0 4 12 0 0 0 0
4 12 0 0 0 0 4 12 0 0 0 0
4 12 0 0 0 0 4 11 0 0 0 0
4 12 0 0 0 0 4 12 0 0 0 0
4 12 0 0 0 0 4 12 0 0 0 0
4 12 0 0 0 0 4 12 0 0 0 0
5 12 0 0 0 0 5 12 0 0 0 0
5 12 0 0 0 0 5 12 0 0 0 0
5 12 0 0 0 0 5 11 0 0 0 0
5 12 0 0 0 0 5 12 0 0 0 0
5 12 0 0 0 0 5 12 0 0 0 0
5 12 0 0 0 0 5 12 0 0 0 0
6 11 0 0 0 0 6 12 0 0 0 0
6 12 0 0 0 0 6 12 0 0 0 0
6 12 0 0 0 0 6 12 0 0 0 0
6 12 0 0 0 0 6 12 0 0 0 0
6 12 0 0 0 0 6 12 0 0 0 0
6 12 0 0 0 0 6 12 0 0 0 0
7 12 0 0 0 0 7 12 0 0 0 0
7 12 0 0 0 0 7 12 0 0 0 0
7 12 0 0 0 0 7 12 0 0 0 0
7 12 0 0 0 0 7 12 0 0 0 0
7 11 0 0 0 0 7 12 0 0 0 0
7 12 0 0 0 0 7 12 0 0 0 0
8 12 0 0 0 0 8 12 0 0 0 0
8 12 0 0 0 0 8 12 0 0 0 0
8 11 0 0 0 0 8 12 0 0 0 0
8 12 0 0 0 0 8 11 0 0 0 0
8 12 0 0 0 0 8 12 0 0 0 0
8 12 0 0 0 0 8 12 0 0 0 0
9 12 0 0 0 0 9 12 0 0 0 0
9 12 0 0 0 0 9 12 0 0 0 0
9 12 0 0 0 0 9 12 0 0 0 0
9 12 0 0 0 0 9 12 0 0 0 0
9 12 0 0 0 0 9 12 0 0 0 0
9 12 0 0 0 0 9 12 0 0 0 0
10 12 0 0 0 0 10 12 0 0 0 0
10 12 0 0 0 0 10 12 0 0 0 0
10 12 0 0 0 0 10 12 0 0 0 0
10 12 0 0 0 0 10 12 0 0 0 0
10 12 0 0 0 0 10 11 0 0 0 0
10 12 0 0 0 0 10 12 0 0 0 0
11 12 0 0 0 0 11 12 0 0 0 0
11 12 0 0 0 0 11 12 0 0 0 0
11 12 0 0 0 0 11 12 0 0 0 0
11 12 0 0 0 0 11 12 0 0 0 0
11 11 0 0 0 0 11 11 0 0 0 0
11 12 0 0 0 0 11 12 0 0 0 0
12 12 0 0 0 0 12 12 0 0 0 0
12 11 0 0 0 0 12 12 0 0 0 0
12 12 0 0 0 0 12 12 0 0 0 0
12 12 0 0 0 0 12 12 0 0 0 0
12 11 0 0 0 0 12 11 0 0 0 0
12 12 0 0 0 0 12 12 0 0 0 0
13 11 0 0 0 0 13 12 0 0 0 0
13 12 0 0 0 0 13 12 0 0 0 0
13 12 0 0 0 0 13 12 0 0 0 0
13 12 0 0 0 0 13 12 0 0 0 0
13 12 0 0 0 0 13 12 0 0 0 0
13 12 0 0 0 0 13 12 0 0 0 0
14 12 0 0 0 0 14 12 0 0 0 0
14 12 0 0 0 0 14 12 0 0 0 0
14 12 0 0 0 0 14 12 0 0 0 0
14 11 0 0 0 0 14 12 0 0 0 0
14 12 0 0 0 0 14 12 0 0 0 0
14 11 0 0 0 0 14 11 0 0 0 0
15 12 0 0 0 0 15 12 0 0 0 0
15 12 0 0 0 0 15 12 0 0 0 0
15 12 0 0 0 0 15 12 0 0 0 0
15 12 0 0 0 0 15 12 0 0 0 0
15 12 0 0 0 0 15 12 0 0 0 0
15 12 0 0 0 0 15 12 0 0 0 0
64
ANEXO # 13: Certificado estadístico.
65

Q7 Guideline

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Q7 Guideline

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

EFECTO ANTIMICROBIANO DE LA INFUSIÓN DE MANZANILLA SOBRE

EL ACTINOMYCES ODONTOLYTICUS Y EL ACTINOMYCES VISCOSUS:

TRABAJO DE TITULACIÓN PREVIO A LA OBTENCION DEL GRADO ACADEMICO DE

VICTOR OSWALDO GONZALEZ CHILA

DRA. MARINA ANTONIA DONA VIDALE

Este trabajo está dedicado a Dios por darme:

1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: ............................................................................................ 3

1.1. FORMULACION DEL PROBLEMA. ......................................................................................... 4

2.1. OBJETIVO GENERAL: ............................................................................................................... 5

2.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS:....................................................................................................... 5

4. FUNDAMENTO TEORICO. ............................................................................................................... 8

4.1. ANTECEDENTES: ...................................................................................................................... 8

4.2. BASES TEORICAS .................................................................................................................... 10

4.2.1. MANZANILLA “MATRICARIA CHAMOMILLA” ........................................................ 10

4.2.1.1. CLASIFICACIÓN BOTANICA. ................................................................................ 10

4.2.1.2. DESCRIPCIÓN. ......................................................................................................... 10

4.2.1.3. HABITAT. .................................................................................................................. 11

4.2.1.4. COMPONENTES. ...................................................................................................... 11

b. ACCIÓN FARMACOLÓGICA ............................................................................................. 12

c. PROPIEDADES E INDICACIONES DE LA MANZANILLA ............................................. 13

4.2.1.5. INFUSIONES DE MANZANILLA. .......................................................................... 14

4.2.1.5.1. DESCRIPCIÓN. ...................................................................................................... 14

4.2.1.5.2. DOSIFICACIÓN. .................................................................................................... 15

4.2.1.5.4. BENEFICIOS DE LA INFUSIÓN DE MANZANILLA. ....................................... 16

4.2.1.5.5. CONSERVACIÓN DE LA INFUSIÓN. ................................................................. 16

4.2.1.5.6. RIESGOS O PELIGROS: ........................................................................................ 17

4.2.2. ACTINOMYCES ............................................................................................................ 17

4.2.2.1. TAXONOMÍA. ........................................................................................................... 17

4.2.2.2. FISIOLOGÍA Y ESTRUCTURA. .............................................................................. 20

4.2.2.3. HÁBITAT. .................................................................................................................. 21

4.2.2.3.1. PERIODONTO SANO. ....................................................................................... 22

4.2.2.3.2. GINGIVÍTIS. ....................................................................................................... 22

4.2.2.3.3. PERIODONTÍTIS. ............................................................................................... 22

4.2.2.4. PATOGENIDAD. ....................................................................................................... 22

4.2.2.5. ACTINOMICOSIS. .................................................................................................... 23

4.2.2.6. ACTINOMYCES ODONTOLYTICUS. .................................................................... 24

4.2.2.7. ACTINOMYCES VISCOSUS. .................................................................................. 25

5.1. ALTERNATIVA: ....................................................................................................................... 27

5.2. NULA: ........................................................................................................................................ 27

6.1. TIPO DE ESTUDÍO. .................................................................................................................. 27

6.2. UNIVERSO Y MUESTRA ........................................................................................................ 28

6.2.2. CRITERIOS DE EXCLUSIÓN. ......................................................................................... 28

6.3. OPERACIONALIZACION DE LAS VARIABLES: ................................................................. 29

6.4. PROCEDIMIENTO Y TÉCNICA. ............................................................................................. 29

6.4.1. OBTENCIÓN DE LAS INFUSIONES DE MANZANILLA............................................. 29

6.4.1.1. Recolección de la manzanilla. ..................................................................................... 29

6.4.1.2. Infusiones de manzanilla. ............................................................................................ 30

6.4.1.3. Discos de infusión de manzanilla. ............................................................................... 31

6.4.2. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO. ..................................................................................... 31

6.4.2.1. Reactivación de la cepa. .............................................................................................. 31

6.4.2.2. Preparación del inoculo. .............................................................................................. 32

6.4.2.3. Preparación del Agar Mueller-Hinton. ........................................................................ 32

6.4.2.4. Siembra del microorganismo en el Agar. .................................................................... 33

6.4.3. RECOLECCIÓN DE DATOS. ........................................................................................... 34

6.4.4. ASPECTOS ÉTICOS .......................................................................................................... 35

7.1. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS. ................................................. 36

7.2. DISCUSION. .............................................................................................................................. 47

11. ANEXOS ............................................................................................................................................ 55

múltiples propiedades y beneficios, es así que en la Odontología se ha empezado a utilizar como

analizar el efecto antimicrobiano de las infusiones de manzanilla sobre el Actinomyces

Odontolyticus y el Actinomyces Viscosus en 4 periodos de tiempo por 24 horas. De las flores de

inhibición mediante la susceptibilidad por difusión de discos. La medición de los halos de

inhibición se realizaron a las 6-12-18-24 horas; registrándose medidas de 11 y 12 mm a las 6 horas,