Ciencias naturales para maestros

PRÁCTICA DE LABORATORIO
Observaciones con el microscopio óptico

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GRUPO: ______

CURSO: 20___ - 20___

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Índice

¿De qué trata esta práctica de laboratorio? 03

Materiales 04

Cosas que ya sabes ... 05

Cosas que debes saber ... 06

Cosas que debes hacer ... 09

¿Qué conclusiones extraes? 16

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¿De qué trata esta práctica de laboratorio?

Todos los seres vivos están formados por unidades básicas llamadas células: los
organismos unicelulares contienen una única célula y los organismos pluricelulares
contienen dos o más células. En función de su complejidad, se pueden distinguir dos tipos
de células: células procariotas, que son aquellas que no tienen un núcleo diferenciado, y
células eucariotas, que son aquellas que sí tienen un núcleo diferenciado.

Para observar estructuras microscópicas que se encuentran por debajo de la capacidad de

visión del ojo humano utilizamos el microscopio. Actualmente, podemos clasificar los
distintos tipos de microscopios que existen en:

 Microscopios ópticos: Presentan juegos de lentes que aumentan el tamaño de la

imagen. Tienen una capacidad hasta de 2500 aumentos, por lo que permiten la
observación de células (Figura 1).
 Microscopios electrónicos: Utilizan haces de electrones que chocan contra el objeto
que se desea observar. Posteriormente, los electrones impactan contra una película de
fotografía que queda impresionada. Lo que se observa no es una muestra, sino una
fotografía que se saca de esa muestra. Tienen una capacidad hasta de 500 000
aumentos, por lo que permiten observar estructuras del interior de la célula (Figura 1).

Figura 1. Tamaños relativos a escala logarítmica. Imagen: CNX OpenStax [CC BY 4.0].

A través de esta práctica de laboratorio aprenderemos a utilizar el microscopio óptico y

observaremos distintos tipos de células.

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Materiales

 Microscopio óptico

 Portaobjetos y cubreobjetos

 Pinzas

 Escalpelo

 Frasco lavador

 Placa Petri

 Agua

 Azul de metileno

 Cebolla

 Palillos planos o cucharilla de raspado

 Papel de filtro

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Cosas que ya sabes ...

1. Identifica los principales componentes de la célula animal en el dibujo siguiente.

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2. ¿Qué componentes celulares son exclusivos de las células vegetales?

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Cosas que debes saber …

El microscopio óptico es un instrumento que usa luz visible y un sistema de lentes para
producir imágenes ampliadas de objetos muy pequeños. Es uno de los instrumentos más
utilizados en el estudio de células y microorganismos.

Partes del microscopio óptico

1) Sistema mecánico, formado por aquellos componentes que no intervienen en la

formación de la imagen ni en el camino de la luz:

 Platina: plataforma horizontal con un orificio central sobre el que se coloca la

muestra y que permite el paso de los rayos procedentes del sistema de
iluminación situado debajo. Dispone de una o dos pinzas que sirven para
sujetar la muestra sobre la platina. Se puede mover de derecha a izquierda y
hacia delante y detrás mediante los tornillos de desplazamiento.

 Tubo: pieza cilíndrica y hueca que contiene el ocular en su parte superior y el

revólver con los objetivos en la inferior.

 Revólver: sistema que contiene los objetivos de diferentes aumentos y que gira
para poder utilizar un objetivo u otro, alineándolo con el ocular.

 Tornillos de enfoque: mueven la platina o el tubo de arriba a abajo para

enfocar la muestra. El tornillo macrométrico permite desplazamientos más
amplios para un enfoque inicial y el tornillo micrométrico, desplazamientos
muy cortos para un enfoque más preciso.

 Brazo: estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfoque.

 Base: parte inferior bastante pesada que permite al microscopio mantenerse

de pie y le confiere estabilidad.

2) Sistema de iluminación, formado por aquellos componentes encargados de iluminar la

muestra del portaobjetos:

 Foco: emite la luz con la que se ilumina la muestra.

 Diafragma: permite regular la cantidad de luz que llega al condensador.

 Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la muestra.

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3) Sistema óptico, formado por todos los elementos que colaboran en la ampliación de la
imagen de la muestra del portaobjetos:

 Ocular: lente sobre la que se sitúa el ojo del observador. Capta y amplía la
imagen producida por el objetivo. Normalmente tiene un aumento de 10X.

 Objetivo: lente situada en el revólver sobre la platina. Es el elemento óptico

más importante del microscopio ya que es el que produce la imagen ampliada
del objeto. Normalmente hay tres objetivos de distinto aumento (4X, 10X y
40X), y siempre se debe empezar a enfocar la muestra con el objetivo de
menor aumento. La imagen resultante está ampliada tantas veces como el
producto del aumento del ocular y el aumento del objetivo con el que se está
realizando la observación (p.ej., si se usa un ocular 10X y un objetivo 4X, el
aumento total será de 40X, es decir, la imagen se verá 40 veces más grande
que su tamaño original).

Figura 2. Partes del microscopio óptico.

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Preparación de muestras

Dispones de dos láminas de vidrio para preparar las muestras que vas a observar con el
microscopio: el portaobjetos, que es la más grande y sobre la que se coloca la muestra, y
el cubreobjetos, que es la más pequeña y que se coloca sobre la muestra.

En primer lugar, debes limpiar con mucho cuidado el portaobjetos y el cubreobjetos. Para
limpiar el portaobjetos, sujétalo por los bordes para no mancharlo con los dedos y frótalo
con un papel limpio y suave (si está muy sucio, puedes humedecerlo con agua y secarlo
después). Para limpiar el cubreobjetos, debes cogerlo por los bordes sin apretar para no
romperlo ya que es muy frágil y limpiarlo solo con dos dedos y la ayuda de un papel limpio
y suave.

A continuación, para preparar la muestra que quieras observar con el microscopio debes
colocar el material a observar sobre el portaobjetos limpio. Una vez tratada la muestra,
debes colocar el cubreobjetos cogiéndolo delicadamente con el pulgar y el índice,
apoyándolo sobre uno de sus lados en el portaobjetos y dejándolo caer en el portaobjetos
con cuidado de que no se formen burbujas de aire.

Mantenimiento y precauciones

 No comas ni bebas mientras estés trabajando en el laboratorio.

 Al finalizar la práctica de laboratorio debes dejar todo limpio y recogido, igual que te
lo has encontrado al principio. Limpia y revisa tu microscopio. Debes dejar puesto el
objetivo de menor aumento en posición de observación y asegurarte de que la parte
mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma. Deja el microscopio
cubierto con su funda.
 Nunca debes tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, deberás limpiarlas muy
suavemente con un papel limpio y suave.
 No dejes el portaobjetos puesto sobre la platina si no estás utilizando el microscopio.
 No dejes encendido el microscopio si no lo estás utilizando.
 No fuerces nunca los tornillos giratorios del microscopio.
 El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la
muestra para prevenir el roce de la lente con el portaobjetos. No cambies nunca de
objetivo agarrándolo por su tubo ni mientras estés observando a través del ocular.
 Mantén limpia y seca la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido,
sécala con un paño.

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Cosas que debes hacer …

Uso del microscopio óptico

1. Preparación de la muestra 1:

Recorta una letra de un papel de periódico. Sitúala sobre un portaobjetos y fíjala con
una gota de agua. Coloca el cubreobjetos con cuidado.

2. Observación de una muestra:

Coloca el objetivo de menos aumento en posición de observación y baja la platina

completamente. Abre el diafragma al máximo para que entre una mayor cantidad de
luz.

Pon la muestra en la platina y sujétala con las pinzas. Girando el tornillo macrométrico
y mirando directamente (no a través del ocular), acerca cuidadosamente la platina al
objetivo hasta que casi toque el cubreobjetos.

Mirando a través del ocular, ve separando lentamente el objetivo de la muestra con el

tornillo macrométrico hasta lograr una imagen enfocada y nítida. Puedes ajustar aún
más el enfoque con el tornillo micrométrico.

Ajusta la intensidad de la luz con el diafragma. Normalmente, para un menor aumento

del objetivo hace falta menos cantidad de luz.

Si quieres observar la muestra a mayor aumento, deberás bajar la platina antes de

girar el revólver para prevenir el roce de la lente con el portaobjetos. No cambies
nunca de objetivo agarrándolo por su tubo ni mientras estés observando a través del
ocular. Después de cambiar el objetivo, vuelve a enfocar la imagen como antes.

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3. ¿Qué observas con el microscopio? Dibújalo. ¿Qué aumento total has utilizado?

4. ¿Qué sucede con el campo visual (zona visible de la muestra que se observa a través
del microscopio) cuando cambias los objetivos?

5. ¿Qué diferencia encuentras entre la letra del papel de periódico y la observada con el
microscopio?

6. Si mueves con los tornillos de desplazamiento el portaobjetos lentamente sobre la

platina de derecha a izquierda, ¿hacia qué lado se mueve la imagen que ves por el
microscopio?

7. Si mueves con los tornillos de desplazamiento el portaobjetos lentamente sobre la

platina hacia delante y detrás, ¿hacia qué lado se mueve la imagen que ves por el
microscopio?

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8. ¿Qué conclusiones extraes sobre cómo se observan las muestras con el microscopio?
¿Por qué sucede esto?

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Observación de células con el microscopio óptico

1. Preparación de las muestras 2 y 3:

Separa la epidermis (tejido transparente que cubre las capas de la cebolla) de una de
las capas de la cebolla con ayuda de las pinzas. Repártela y colócala sobre 2
portaobjetos procurando que quede bien extendida.

Añade unas gotas de agua en una de las muestras (muestra 2). Coloca el cubreobjetos
con cuidado.

Añade unas gotas de azul de metileno a la otra muestra (muestra 3) y espera 3 - 5

minutos a que actúe. Lava la muestra con agua para eliminar el exceso de azul de
metileno. Coloca el cubreobjetos con cuidado.

2. ¿Qué tipo de células estás observando?

3. Dibuja lo que observas con el microscopio para la muestra 2. ¿Qué aumento total has
utilizado?

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4. Dibuja lo que observas con el microscopio para la muestra 3. ¿Qué aumento total has
utilizado?

5. ¿Qué diferencias observas entre ambas muestras? ¿Qué componentes celulares eres
capaz de observar? Señálalos en los dibujos anteriores.

6. En la muestra 3, has hecho una tinción con azul de metileno. ¿Qué es el azul de
metileno? ¿Para qué sirve hacer una tinción?

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7. Preparación de las muestras 4 y 5:

Raspa suavemente con un palillo o cucharilla de raspado la cara interior de tu mejilla

para obtener una muestra de tu mucosa bucal. Extiende con el palillo la mucosa
extraída sobre un portaobjetos limpio y seco. Añade una gota de agua sobre la
muestra (muestra 4). Coloca el cubreobjetos con cuidado.

Añade unas gotas de azul de metileno sobre un portaobjetos limpio y seco. Vuelve a
raspar suavemente con un palillo o cucharilla de raspado la cara interior de tu mejilla
para obtener una muestra de tu mucosa bucal. Extiende con el palillo la mucosa
extraída sobre el azul de metileno del portaobjetos (muestra 5) y espera 3 – 5 minutos
a que actúe. Lava la muestra con agua para eliminar el exceso de azul de metileno.
Coloca el cubreobjetos con cuidado.

8. ¿Qué tipo de células estás observando?

9. Dibuja lo que observas con el microscopio para la muestra 4. ¿Qué aumento total has
utilizado?

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10. Dibuja lo que observas con el microscopio para la muestra 5. ¿Qué aumento total has
utilizado?

11. ¿Qué diferencias observas entre ambas muestras? ¿Qué componentes celulares eres
capaz de observar? Señálalos en los dibujos anteriores.

12. ¿Qué diferencias observas entre las muestras 2/3 (epidermis de cebolla) y las muestras 4/5
(mucosa bucal)?

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¿Qué conclusiones extraes?

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