Marco teórico

Colesterol

El colesterol es una molécula lipídica de suma importancia ya que forma parte de las membranas
celulares, siendo precursor de varias moléculas señal. Según Quesada (2003), es un esterol que se
encuentra en los tejidos corporales y plasma sanguíneo, forma parte de lipoproteínas, ácidos
biliares y hormonas esteroideas. Al existir un exceso de colesterol se produce una enfermedad
llamada aterosclerosis accidente cerebro vascular o enfermedad vascular periférica ya que el
colesterol se deposita en arterias vitales. La importancia de controlar los niveles de colesterol en
los pacientes radica en la prevención de los trastornos mencionados, sabiendo que los niveles
normales en sangre varían según la población y la edad.

Urea

La urea es el producto resultante de la degradación de las proteínas llevada a cabo por el hígado.
Filtrada por los riñones, la urea se elimina a través de la orina, como un residuo del organismo. Su
eliminación en la orina representa la principal vía de excreción del nitrógeno. Según Contreras
(2009), la elevación de sus valores se utiliza como indicador de disfunción de la filtración renal y es
utilizado como para establecer la necesidad de diálisis en pacientes con insuficiencia renal crónica.
Es considerada una prueba de función renal. La concentración sanguínea y urinaria se pueden
incrementar por: la actividad muscular, traumas, infecciones, ayuno, etc). Se encuentran
concentraciones elevadas de urea en plasma como consecuencia de una dieta hiperproteíca, o
tratamiento con glucocorticoides (uremia prerrenal).

Acido Urico

En el hombre, el ácido úrico es el principal producto del catabolismo de las bases púricas, las
cuales se obtienen principalmente de la síntesis in vivo, tanto de novo como reciclaje, y una
mínima parte de la dieta. En otras especies el ácido úrico también es producto de degradación de
aminoácidos. Según Contreras (2009), concentraciones elevadas de ácido úrico en suero u orina
pueden ser atribuibles a una sobreproducción de urato (síntesis incrementada de purinas), a una
disminución en el reciclaje o a una eliminación defectuosa de urato. La hiperuricemia se asocia
generalmente con la gota, disminución de la función renal, deshidratación, alteraciones
mieloproliferativas, inanición, hipertensión inducida por el embarazo, síndrome de Lesch-Nyhan,
leucemia, psoriasis, sarcoidosis, uso prolongado de diuréticos y otros fármacos.

Materiales y Métodos

Determinación de la concentración de colesterol

Método GOD – PAP

Este método consiste en una prueba enzimática colorimétrica sin desproteinización. Se dispone de
un estuche con los reactivos detallados a continuación:

Tabla M1

Reactivos del quit de trabajo para determinación de colesterol en sangre.

 RGT 4x100 ó 1000 mL Reactivo enzimático
Buffer fosfato (pH 6,5) 100 mmol/L
4-aminoantipirina 0,3 mmol/L
Fenol 5 mmol/L
Peroxidasa >5 kU/L
Colesterolesterasa >150 U/L
Colesteroloxidasa >100 U/L
Azida de Sodio >100 U/L0,05 %
STD 3 mL Estándar
Colesterol 200 mg/dL o 5,17 mmol/L

Fuente: HUMAN. (s.f.). BG Analizadores. Soluciones Personalizadas. Obtenido de Área de Química

Clínica: http://www.bganalizadores.com.ar/

El método consiste en la identificación de colesterol colorimétricamente, el indicador de color es

la quinoneimina; esta quinoneimina se presenta después de la hidrólisis enzimática de esteres de
colesterol, la oxidación de colesterol y finalmente como producto de la reacción de peróxido de
hidrógeno con aminoantipirina y fenol. Para comprender paso a paso se definen las reacciones a
continuación:
𝐶𝐻𝐸
𝐸𝑠𝑡𝑒𝑟𝑒𝑠 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 + 𝐻2 𝑂 → 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 + 𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑔𝑟𝑎𝑠𝑜𝑠
𝐶𝐻𝑂
𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 + 𝑂2 → 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑛𝑒 − 3 − 𝑜𝑛𝑎 + 𝐻2 𝑂2
𝐶𝐻𝑂
𝐻2 𝑂2 + 4 − 𝑎𝑚𝑖𝑛𝑜𝑎𝑛𝑡𝑖𝑝𝑖𝑟𝑖𝑛𝑎 + 𝑓𝑒𝑛𝑜𝑙 → 𝑞𝑢𝑖𝑛𝑜𝑛𝑒𝑖𝑚𝑖𝑛𝑎 + 4𝐻2 𝑂
Para que todas estas reacciones sean posibles se trabaja con el quit de trabajo anteriormente
mencionado.

Determinación de la concentración de urea

Método GLDH

Este método consiste en una prueba enzimática para determinaciones cinéticas de urea. Se
dispone de un estuche con los reactivos detallados a continuación:

Tabla M2

Reactivos del quit de trabajo para determinación de urea en sangre.

ENZ 8x40 mL Enzimas

Buffer Tris (pH 7,8) 120 mmol/L
ADP 750 mmol/L
Ureasa >=40 kU
GLDH >=0,4 kU
ENZ 8x10 mL Substrato
2-Oxoglutarato 250 mmol/L
NADH 1,2 mmol/L
STD 1x3 mL Estándar
 Urea 80 mg/dL o 13,3 mmol/L

Fuente: HUMAN. (s.f.). BG Analizadores. Soluciones Personalizadas. Obtenido de Área de Química

Clínica: http://www.bganalizadores.com.ar/

El método consiste en la identificación de urea enzimáticamente, el indicador es de color verde;

esta coloración se presenta después de la hidrólisis de la urea en presencia de ureasa, el amonio
producido se combina con 2-oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato deshidrogenasa
(GLDH) para formar glutamato y NAD. Para comprender paso a paso se definen las reacciones a
continuación:
𝑢𝑟𝑒𝑎𝑠𝑎
𝑈𝑟𝑒𝑎 + 𝐻2 𝑂 → 2𝑁𝐻4+ + 𝐶𝑂32−
𝐺𝐿𝐷𝐻
2 − 𝑜𝑥𝑜𝑔𝑙𝑢𝑡𝑎𝑟𝑎𝑡𝑜 + 2𝑁𝐻4+ + 𝑁𝐴𝐷𝐻 → 𝐿 − 𝑔𝑙𝑢𝑡𝑎𝑚𝑎𝑡𝑜 + 𝐻2 𝑂 + 𝑁𝐴𝐷 +
Para que todas estas reacciones sean posibles se trabaja con el quit de trabajo anteriormente
mencionado.

Determinación de la concentración de ácido úrico

Método PAP

Este método consiste en una prueba enzimática colorimétrica para ácido úrico con un factor
aclarante de lípidos. Se dispone de un estuche con los reactivos detallados a continuación:

Tabla M3

Reactivos del quit de trabajo para determinación de ácido úrico en sangre.

RGT 4x30 ó 4x100 mL Reactivo enzimático

Buffer fosfato (pH 7,5) 50 mmol/L
4-aminofenazona 0,3 mmol/L
DCHBS 4 mmol/L
Uricasa >200 U/L
Peroxidasa >1 kU/L
STD 3 mL Estándar
Ácido úrico 8 mg/dL o 476 umol/L

Fuente: HUMAN. (s.f.). BG Analizadores. Soluciones Personalizadas. Obtenido de Área de Química

Clínica: http://www.bganalizadores.com.ar/

El método consiste en la identificación de ácido úrico colorimétricamente, el indicador de color es

la quinoneimina; esta quinoneimina se presenta después de que el peróxido de hidrogeno
formado por el ácido úrico reacciona con el ácido 3,5-dicloro-2-hydroxybenzenesulfónico (DCHBS)
y 4 aminofenazona (PAP) por la acción catalítica de la peroxidasa. Para comprender paso a paso se
definen las reacciones a continuación:
𝑢𝑟𝑖𝑐𝑎𝑠𝑎
Á𝑐𝑖𝑑𝑜 ú𝑟𝑖𝑐𝑜 + 𝑂2 + 𝐻2 𝑂 → 𝑎𝑙𝑙𝑎𝑛𝑡𝑜í𝑛𝑎 + 𝐶𝑂2 + 𝐻2 𝑂2
 𝑝𝑒𝑟𝑜𝑦𝑑𝑎𝑠𝑎
2𝐻2 𝑂2 + 𝐷𝐶𝐻𝐵𝑆 + 𝑃𝐴𝑃 → 𝑞𝑢𝑖𝑛𝑜𝑛𝑒𝑖𝑚𝑖𝑛𝑎 + 𝐻𝐶𝑙 + 4𝐻2 𝑂
Para que todas estas reacciones sean posibles se trabaja con el quit de trabajo anteriormente
mencionado.

Resultados

Determinación de la concentración de colesterol

La concentración de colesterol se determinó a través del método CHOD – PAP. Presentado las
absorbancias correspondientes al grupo de trabajo en la tabla R1 y calculando la concentración en
sangre mediante la ecuación:
∆𝐴𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑚𝑔
𝐶 = 200 × [ ⁄𝑑𝐿]
∆𝐴𝑆𝑇𝐷
Tabla R1

Resultados de la concentración de colesterol en sangre.

Grupo 3 STD M1 M2
Abs 0,259 0,141 -
𝑚𝑔 108,88 -
[ ⁄𝑑𝐿]

Los datos correspondientes a la muestra 2 no se pudieron obtener debido a que no el operador no

pudo localizar la vena del paciente.

Determinación de la concentración de urea

La concentración de urea se determinó a través del método GLDH. Presentado las absorbancias
correspondientes al grupo de trabajo en la tabla R2 y calculando la concentración en sangre
mediante la ecuación:
∆𝐴𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑚𝑔
𝐶 = 80 × [ ⁄𝑑𝐿]
∆𝐴𝑆𝑇𝐷
Tabla R2

Resultados de la concentración de colesterol en sangre.

Grupo 3 STD M1 M2
Abs 0,599 0,194 0,085
𝑚𝑔 25,91 11,35
[ ⁄𝑑𝐿]

Determinación de la concentración de ácido úrico

La concentración de ácido úrico se determinó a través del método PAP. Presentado las
absorbancias correspondientes al grupo de trabajo en la tabla R3 y calculando la concentración en
sangre mediante la ecuación:
 ∆𝐴𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑚𝑔
𝐶 =8× [ ⁄𝑑𝐿]
∆𝐴𝑆𝑇𝐷
Tabla R3

Resultados de la concentración de colesterol en sangre.

Grupo 3 STD M1 M2
Abs 0,134 0,104 0,216
𝑚𝑔 6,209 12,896
[ ⁄𝑑𝐿]

Discusión

Nivel de colesterol

Según HUMAN (s.f.) los valores normales de colesterol serán menores a 220 mg/dL, sospechosos
de 220 a 260 mg/dL y elevados sobre los 260 mg/dL.

Pombo (1997), señala que la edad del paciente influirá en el rango de los niveles aceptables de
colesterol en la sangre. Indica que los niveles de colesterol para un recién nacido es de 70 mg/dL.
HUMAN (s.f) también indica que para adultos menores de 30 años se espera valores aproximados
a 180 mg/mL mientas que para adultos mayores de 30 años se espera valores cercanos a 200
mg/dL.

Dado que los pacientes se encuentran entre los 18 y 22 años de edad se tomara como valor
aceptable concentraciones menores a 180 mg/dL de colesterol en sangre, tal como se mencionó
anteriormente. Se determinó que el paciente 1 (~108 mg/dL) se encuentra dentro del rango
normal, mientras que de paciente 2 no se pudo realizar la prueba debido a que no se pudo
obtener la muestra de sangre.

Pero dado que los niveles del paciente 1 son relativamente bajos, según Cancela (2011) estos
bajos niveles podrían causarse por: hipertiroidismo, patologías hepáticas, enfermedades de
malabsorción, enfermedad Celíaca, enfermedades genéticas, deficiencia de manganeso,
enfermedades hematológicas, alimentación insuficiente. Sus consecuencias estarían relacionadas
con la presencia de estados depresivos, problemas circulatorios (hemorragias) y enfermedades
respiratorias.

Sin embargo es importante reconocer que “tipo de colesterol” es el de mayor predominancia, es

decir, cual es el valor de la concentración de colesterol “bueno” y “malo”; técnicamente se refiere
a los valores de LDL y HDL.

Nivel de urea

Según HUMAN (s.f.) los valores de referencia para urea estarían entre 10 – 50 mg/dL en sangre.

En la prueba de urea los pacientes 1 y 2 se encuentran en niveles normales, siendo 25,91 y 11,35
mg/dL respectivamente, valores que se encuentran entre el rango de referencia antes
mencionado.
Nivel de ácido úrico

Según HUMAN (s.f.) los valores de referencia para ácido úrico en sangre estarían entre 3,5 – 7,0
mg/dL en hombres y 2,4 – 5,7 mg/dL en mujeres. Ya que ambos pacientes son hombres
utilizaremos la primera referencia para el análisis.

En la prueba de urea el pacientes 1 presenta niveles normales (6,209 mg/dL), mientras que el
paciente 2 presenta niveles elevados (12,896 mg/dL).

La concentración elevada de ácido úrico puede estar asociada a la hiperuricemia, la cual según
Contreras (2009) puede llevar a la precipitación de ácido úrico en las articulaciones, en
aproximadamente el 10 % de las personas puede desencadenarse, además, un proceso
inflamatorio conocido como gota.

Sin embargo el diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de este
único ensayo, sino que debe integrar más datos clínicos y de laboratorio.

Bibliografía
Cancela, M. d. (2011). Colesterol bajo: Causas y consecuencias. Obtenido de A Bajar Colesterol:
http://www.abajarcolesterol.com/colesterol-bajo-causas-y-consecuencias/

Contreras, J. (2009). Guias Biologia Molecular. Obtenido de GEOCITIES:

http://www.geocities.ws/jorgecon/

HUMAN. (s.f.). Área de Química Clínica. Obtenido de BG Analizadores. Analizadores. Soluciones

Personalizadas: http://www.bganalizadores.com.ar/

Pombo, A. (1997). Tratado de Endocrinología Pediatrica. Madrid: Dias de Santos .

Quesada, A. (2003). Diagnóstico de Laboratorio Principales pruebas de Bioquímica Clínica y de

Laboratorio (Primera ed.). San José, Costa Rica: Litografía e Imprenta Lehmann.