CICLO CELULAR Y CITOGENÉTICA

Autor: Br. Óscar Núñez

Ciclo celular: secuencia de acontecimientos autorregulada que controla el

crecimiento y la división de las células. Objetivo: producir dos células
hijas con cromosomas idénticos a los de la célula progenitora.
La división celular puede ser somática o germinal.
Consta de dos fases: interfase y mitosis.

Interfase

Crecimiento continuo de la célula o stádium de no división. Se divide en 4

períodos de estado proliferante:

Períodos Proceso
interfásicos
G1 (gap1 espacio) a) Más largo y variable. Comienza luego de la fase M.
b) Duración: 9-12 h.
c) Síntesis de RNA y proteínas + componentes celulares
La célula crece d) Célula capta sustancias nutritivas.
S (síntesis) a) Duración: 7,5-10 h.
b)Se inicia en sitios llamados replicones.
Se estudia c) Síntesis de DNA (replicación de cromátides)
mediante d) El núcleo contiene el doble de proteínas nucleares.
radioautografía
con timidina
radiactiva.
G2 (gap2) a) Duración: tan corto como 1 h. En promedio 3,5-4,5
Célula sufre h.
crecimiento b) Célula examina DNA duplicado.
ulterior/seguridad c) Reorganización de orgánulos citoplasmáticos.
de DNA. d) Continúa síntesis de RNA y proteínas.
G0: estado de células quiescentes, pueden reingresar al ciclo celular
después de un estímulo específico. No entran en mitosis.,

Si sufre diferenciación terminal GTD: células que nunca se dividirán. Ej., adipocitos
maduros, osteocitos, neuronas.

PUNTOS DE REGULACIÓN DEL CICLO CELULAR

a)Pto. de control del daño del DNA: verifica la integridad del DNA de
duplicación reciente.
DNA con daño irreparable--- se aumenta concentración de proteína
supresora de tumores p53 y no permite paso a fase S. Ocurre apoptosis.
b)Pto. de restricción (o de no retorno): MÁS IMPORTANTE. Célula
G1 autoevalúa su propio potencial replicativo. Es sensible al volumen
celular, al estado fisiológico y a las interacciones con la matriz
celular. Está mediado por interacciones de proteína de susceptibilidad
al retinoblastoma (pRb) + factores de transcripción esenciales (E2F)
con sus promotores diana = desactivación de genes y bloqueo de ciclo
celular.
S Pto. de control del daño del DNA en S: verifica DNA en el proceso de
duplicación.
G2 a) Pto de control del daño del DNA en G2
b) Pto de control del DNA no duplicado: impide la progresión celular
hacia la fase M antes de que se complete la síntesis de DNA.
 REGULACIÓN DEL CICLO CELULAR
Oscilación bioquímica regulada por complejos citoplasmáticos proteicos.
Es dada por las ciclinas y las cinasas o proteinquinasas dependientes de
ciclinas (Cdk)

1970- Factor promotor de la maduración (MPF): proteína que controla el

inicio de la Fase M compuesta por otras dos proteínas: CdK1 y Ciclina B.

Complejo ciclina-Cdk: controla el ciclo celular. Aumento de actividad:

ciclinas // Inhibición actividad: proteínas Ink (inhibidoras de cinasas);
Cip (proteínas inhibidoras de cinasas)y las Kip (proteínas inhibidoras de
cinasas).

CICLINAS: son proteínas constitutivas que son degradadas por la ubicuitina

presente en los proteosomas. Controlan la actividad de las CDK para formar
el complejo ciclina-CDK. En mamíferos son 6 (A-F)
CDK: son enzimas que mediante fosforilación de proteínas desencadenan el
ciclo celular. Transfiere grupos fosfatos desde ATP a un sustrato
específico o diana. La diana puede activarse o inactivarse mediante la
fosforilación. En mamíferos son 5 (CDK1-CDK5). Son señaladores celulares.
Tienen dos lóbulos entre los cuales se inserta el ATP (donador de
fosfatos)

GENES DE CONTROL Activación de CDK en el complejo ciclina-CDK viene dada por 3 enzimas, dos
PRIMARIO proteinquinasas y una fosfatasa. Se fosforila el CDK y se bloquea la
actividad por la proteinquinasa Wee1. La segunda fosforilación por la
proteinquinasa Mik1. Se activa finalmente con la eliminación de fosfato por
cdc: codifican
parte de la proteinfosfatasa Cdc25.
ciclinas
cdc2:codifican CDK
ACTIVACIÓN COMPLEJO CICLINA-CDK: equilibrio entre Wee1, Mik1, Cdc25.
G1: incremento de ciclinas G1. En punto de control: se activa complejo
ciclina E-CDK2 (quinasa de inicio).
S: incremento de ciclinas mitóticas. Se activa complejo ciclina B-CDK2
(factor promotor de mitosis FPM)

La mayoría de las células del organismo adulto se encuentran en G0

Factores de crecimiento:
- Sufren autofosforilación.
Factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF). - Activan proteína G ligada a
Factor de crecimiento epidérmico (EGF). membrana llamada Ras
Factor de crecimiento nervioso (NGF). - Ras activo induce actividad
proteinquinasas activadas por
Genes oncogénicos y supresores de tumores: mitogéno (MAPquinasas) que
actúan como proliferantes
Pueden ser proliferantes o antiproliferantes. celulares.

a) Se conocen más de 20 proliferantes y se llaman protooncogenes, y cuando

mutan se llaman oncogenes o genes oncogénicos. Se nominan por nombres de
tres letras. Mutaciones son dominantes en fenotipo. Regulan positivamente.
b) Se conocen más de 10 antiproliferantes y se llaman antoncogenes o genes
supresores tumorales. Mutaciones son recesivas en fenotipo. Regulan
negativamente el ciclo celular.

Las ciclinas y CDK regulan el ciclo celular positivamente y fosforilan

serinas y treoninas de proteínas diana.
RB1: gen supresor tumoral que codifica proteína pRB. Inhibe la
proliferación de códigos estimulantes. Mutación ulterior en el gen =
retinoblastoma (CA de retina). El gen produce la pérdida de capacidad de
supresión de genes de respuesta temprana como los protooncogenes myc, fos
y jun. Éstos inducen la activación de los genes de respuesta retardada que
producen productos como ciclinas y CDK. La unión de los productos de fos y
jun (Fos y Jun con letra capital en mayúscula que son proteínas) mediante
una leucina forman el factor de transcripción AP1 que se activa en el
ciclo celular cuando existe un estímulo extracelular.

CÁNCER: proliferación celular excesiva originada por mutaciones en

oncogenes que se expresan de manera intensa y excesiva.

p53: supresor tumoral que activa genes que detienen el ciclo celular en la
fase G1 en caso de haber daño en DNA e induce la apoptosis de la célula.
También favorece la reparación del DNA. A su vez, controla la expresión
del gen p21 que inhibe la transcripción de CDK mediante la proteína CDKN1A
y regula el ciclo celular en la fase G1. Si su acción falla, estimula la
apoptosis celular.

Apoptosis celular: es una forma de muerte celular que está desencadenada

por señales celulares controladas genéticamente. Forma dos cuerpos
apoptóticos: uno de heterocromatina y uno citoplasmático.

FE DE ERRATAS: en la parte brillante dice "Fosfatasa cdc25 // Proteínas

asociadas a la cromatina, histona H1, láminas nucleares"
Los CDK poseen en su entrada al canal del centro catalítico, una treonina que debe estar fosforilada para que la
quinasa actúe.
En el caso de inhibición, en el propio centro catalítico hay 2 treoninas que se fosforilan.
El sitio de unión con las ciclinas se llama PSTAIRE. En la región alejada del centro se une la proteína CKS que regula la
actividad quinasa de la CDK.

Transiciones en el ciclo celular: son 4.

G0 a G1 Proliferación
G1 a S Replicación
S a G2 Mitosis
Metafase a anafase

La división celular se clasifica en cariocinesis (división nuclear) y

citocinesis (división citoplasmática).

Mitosis

Punto de control de ADN no replicado de fase M: inhibición de cdc25 que

activa ciclina A/B Cdk1

Proceso rígidamente ordenado por el cual se reparten 2 juegos

idénticos de moléculas de DNA (originados mediante el proceso de
replicación) en dos núcleos recién formados. Por citocinesis posterior, se
crean dos células. Es un proceso ecuacional.

Proceso de segregación cromosómica y de división nuclear, seguido por

división citoplasmática, que produce dos células hijas con la misma
cantidad de cromosomas y contenido de DNA que la célula progenitora.
Presenta duplicación de centríolos, ensamblaje del aparato mitótico según
carga de filamentos y organización cromosómica.
Cromosoma: DNA + proteínas específicas (histonas y no
histónicas).
Células somáticas: 23 pares homólogos, 22 pares de autosomas y 1
par sexual. 2 cromátides + centrosoma = 1 cromosoma.

Sigue a la fase S del ciclo celular y consta de cuatro fases:

Transición de interfase a profase: se duplica el centrosoma= 2 centrosomas

(orgánulo celular que no está rodeado por una membrana; consiste en dos
centriolos apareados, embebidos en un conjunto de agregados proteicos que
los rodean y que se denomina “material pericentriolar”). Es el COMT
(Centro Organizador de Microtúbulos). Además, comienza a condensarse la
cromatina (conjunto de ADN, histonas y proteínas no histónicas).

a) Desaparición de nucléolos.
b) Cromosomas duplicados se condensan mediante la histona H1
y se hacen uniformemente visibles al microscopio como hebras,
PROFASE se distinguen las cromátides hermanas unidas mediante
cohesinas en un centrómero no teñido en una constricción
primaria formado por heterocromatina de secuencias CEN, de
 DNA repetido.
c) Centríolos migran a los polos de la célula.

d) Se forma el huso mitótico mediante la polimerización de

tubulina soluble desde los dos centrosomas polares y algunos
de los nuevos microtúbulos se fijan a los cinetocoros según
la carga de los primeros (35 por cinetocoro en mamíferos).

a) Degradación de la envoltura nuclear (nucleolema) en

vesículas de transporte a través de la fosforilación de sus
láminas ocasionando su despolimerización.
PROMETAFASE b) Aparición de cinetocoros formados por DNA satélite (DNA
específico repetido) frente al centrómero en cada cromátide.
(Profase Los cinetocoros son complejos proteicos discoides que atrapan
tardía) los microtúbulos del huso mitótico.
c) Microtúbulos invaden el área nuclear.
d) Comienza el movimiento de los cromosomas a través del
huso.
e) Se forman los microtúbulos astrales que son cortos e
irradian en todas las direcciones desde cada uno de los
centrosomas, tomando una forma de estrella llamada áster que
no tienen relación con el huso mitótico. Se nuclean a partir
de los anillos de tubulina γ.
a) El huso mitótico formado por 3 tipos de microtúbulos
(polar, cinetocóricos y astral) se organiza alrededor de los
METAFASE MTOC. El cinetocoro interactúa con los microtúbulos
(Fase más cinetocóricos.
larga, dura b) Movimiento de los cromosomas hacia el plano ecuatorial,
20 min) perpendicular al huso mitótico. Es debido a dos fuerzas:
b.1)Tracción: ejercida por microtúbulos del cinetocoro.
b.2)Rechazo: ejercida por el áster que aleja los
cromosomas.
Ocurre el punto de control de ensamblaje del huso: activa
porteína Mad2 que impide la degradación de la segurina. Esto
hace que no se segreguen las cromátidas hermanas hasta que
todas se hayan unido al huso.
a) División de centrómeros
b) Separación de cromátidas hermanas debido a degradación de
cohesinas y se acortan los microtúbulos cinetocóricos debido
a la despolimerización de tubulina. ANAFASE TEMPRANA o A
ANAFASE c) Cromátidas se dirigen a los polos por motores moleculares
llamados dineínas (proteínas) que se deslizan por los
microtúbulos cinetocóricos hacia el MTOC.
d) Se alargan los microtúbulos no cinetocóricos (separación
de los MTOC --- elongación del huso mitótico) debido a la
polimerización de la tubulina por el ATP. ANAFASE TARDÍA o B.
e) Superposición de cromátidas.
a) Reconstitución de envoltura nuclear (nucleolema) por
disminución de la fosforilación alrededor de los cromosomas
en cada polo por la degradación de ciclinas y la inactividad
de las CDK.
TELOFASE b)Desenrrollamiento de cromosomas.
c) Reaparición de nucléolos.
d) Duplicación de organelas citoplasmáticas.
d) Termina la cariocinesis.
e) Comienza citocinesis con un surco o hendidura de escisión
dado por un anillo contráctil formado por actina y miosina
 formando el cuerpo medio y la citocalasina que impide la
polimerización de los filamentos de actina y finalmente los
hace desaparecer cuando la hendidura se interrumpe por
completo alrededor de microtúbulos polares formando dos
células hijas 2n.

Los microtúbulos pueden ser cinetocóricos (si se fijan a las

cromátides hermanas, polares (si no se fijan a las cromátides) o astrales
(que parten de cada centrosoma y no forman parte del huso mitótico)

Heterocromatina: regiones de la cromatina más compactas, condensadas, empaquetadas

que se tiñen fuertemente con coloraciones para ADN. Puede ser constitutiva (idéntica para las
células del organismo) o facultativa (diferente en grupos celulares). Casi nunca está activa.

Eucromatina: forma de la cromatina ligeramente con una gran concentración de genes, y a

menudo (no siempre) se encuentra en transcripción activa.

CROMOSOMA HOMÓLOGO: tiene mismo tamaño, forma, DNA y genes. Del par, un
cromosoma viene del padre y otro de la madre.

Cromátidas hermanas: son los brazos de los cromosomas unidos entre sí por un centrómero.

MEIOSIS

Es un proceso, una forma de división celular, mediante el cual se

desarrollan las células sexuales o gonadales o germinales. Comprende dos
divisiones nucleares secuenciales seuidas por divisiones citoplasmáticas
que producen gametos con la mitad del contenido de DNA con respecto a las
células somáticas. Se reduce de diploide a haploide, permite la variación
genética y es reduccional.

PRIMERA DIVISIÓN MEIÓTICA

PROFASE I: consta de varios estadíos.

Leptoteno Cromosomas se vuelven visibles como largos filamentos

RM: largo delgados.
a) Cromosomas se acortan.
b) Unión de cromosomas homólogos.
c) Sinapsis entre zonas equivalentes
d) Se forma hendidura de 100 nm en donde se fija el complejo
Cigoteno sinaptonémico que es una estructura proteica tripartita cuyo
aspecto es similar a un riel de tren que consta de dos
RM: sinapsis- estructuras paralelas llamadas elemento lateral y elemento
unión central a lo largo de cada cromosoma homólogo. El complejo
sinaptonémico se une a la cromatina por las regiones de
asociación específica (SARs).
e) Ocurre la sinapsis (apareamiento físico) entre CROMOSOMAS
HOMÓLOGOS (uno paterno y otro materno) Y CROMÁTIDAS NO
HERMANAS
a) Aparecen los segmentos de apareamiento. Éstos en el caso
del XY son dissímiles y limitados.
 a) Cromosomas se hacen cortos y gruesos.
Paquiteno b) Se completa la sinapsis (los cromosomas se vuelven
(más largo, bivalentes: par de cromosomas).
puede durar c) Ocurre el crossing over o recombinación génica mediante
días) nódulos de recombinación (lugar multienzimático donde ocurre
el entrecruzamiento) dando la transposición de segmentos de
RM: DNA entre dos cromosomas homólogos y cromátidas no hermanas.
grueso- d) El complejo sinaptonémico toma forma de cremallera o
recombinación escalera.
a) Cromosomas se separan parcialmente y se condensan aún
más.
Diploteno b) Se forman tétradas ya que cada cromosoma bivalente está
o dictioteno formado por 4 cromátides.
en mujeres c) Se disuelve el complejo sinaptonémico.
(más de 50 d) Se forman quiasmas (sitios o secciones donde se realizó
años) intercambio de DNA.
e)Síntesis de ARNm.
RM: quiasmas
a) Cromosomas se condensan y acortan alcanzando su espesor
Diacinesis máximo.
b) Quiasmas se dirigen hacia los telómeros o extremos de los
RM: final cromosomas (terminalización)
c) Desaparecen los nucléolos y el nucleolema
RM: Regla Mnemotécnica

a) Igual que en mitosis, sólo que son cromosomas bivalentes

que aún están unidos por quiasmas.
b)Al final se separan e interactúan con los microtúbulos
Metafase I polares a través del cinetocoro (estructura trilaminar) que
por estar en la tétrada, son 4 y los de las cromátides
hermanas se unen formando un cinetocoro compuesto común para
las dos mencionadas.
c) Alineación de cromosomas en el plano ecuatorial.
a) No hay división de centrómeros
b) Ocurre una separación casual o distribución aleatoria de
los cromosomas, en donde puede variar el número de cromosomas
Anafase I maternos y paternos, representando la base de la segunda ley
de Mendel.
c) Cada polo recibe 23 cromosomas (n) (cada uno formado por 2
cromátidas hermanas).
Telofase I Se regeneran los nucleolemas y cada uno tiene 23 cromosomas
compuestos cada uno por dos cromátides hermanas.

El resultado de la primera división meiótica, que es reduccional, son los

espermatocitos secundarios o los oocitos secundarios.

NOTA DE PROFASE I: la membrana nuclear desaparece. Un cinetocoro se forma

por cada cromosoma, no uno por cada cromátida (clave de reducción), y los
cromosomas adosados a fibras del huso comienzan a moverse. Algunas veces
las tétradas son visibles al microscopio. Las cromátidas hermanas
continúan estrechamente alineadas en toda su longitud, pero los cromosomas
homólogos ya no lo están y sus centrómeros y cinetocoros se encuentran
separados.

Interfase: corta y no pasa por fase S, es decir, no se sintetiza DNA.

 SEGUNDA DIVISIÓN MEIÓTICA: es ecuacional.
a) Se parece a la mitosis sólo que se lleva a cabo con 1n.
b) Una proteinasa (separasa) rompe los complejos de cohesión entre las
cromátides hermanas en Anafase II y hace que las cromátidas hermanas se
separen hacia los polos.
c) Finalmente se dividen como cuatro células haploides.

El resultado de la segunda división meiótica son los oocitos maduros y las

espermátidas

CITOGENÉTICA: ciencia de los cromosomas. Comienza en década 50's. Estudia

cromosomas normales y alteraciones patológicas y no patológicas.

Cada par de cromosomas: 2 cromosomas homólogos, uno materno y uno paterno.

Partes del cromosoma: telómeros, brazo corto (p), centrómero, brazo largo
(q).
Tipos de cromosomas
Metacéntrico: centrómero en medio p=q
Submetacéntrico: brazos desiguales p menor que q
Acrocéntrico: constricción secundaria en un p mucho menor que q
cromosoma + dos satélites en dos de los extremos
del cromosoma en los que se forman los
nucléolos.
CLASIFICACIÓN: 7 Pares Tipo de cromosomas
grupos.
1: mayor metacéntrico
A 2: mayor submetacéntrico
3: 2do mayor metacéntrico
B 4 y 5 (2do y tercer submetacéntrico)
C 6-12 + X (del par sexual): submetacéntricos
D 13-14-15: mayores acrocéntricos
E 16-17-18: submetacéntricos
F 19-20: metacéntricos pequeños
G 21-22-Y (del par sexual): acrocéntricos pequeños
Metacéntricos: 4 pares
Submetacéntricos: 13 pares + X
Acrocéntricos: 5 pares + Y

1.- OBTENCIÓN DE MUESTRA

a) Esterilización de tejido del dedo anular de mano izquierda con alcohol
al 90º y éter etílico.
b) Punzar dedo, succionar sangre periférica y verter 5-6 gotas en medio de
cultivo.
2.- MEDIO DE CULTIVO:
 ROMI 1650 (medio Roswell Park Memorial Institute) medio celular usado
para cultivos celulares. Contiene una gran cantidad de fosfatos y está
diseñado para ser utilizado en una atmósfera al 5% de dióxido de
carbono. Se formuló con la idea de mantener fibroblastos en suspensión,
si bien hoy en día se utiliza para el mantenimiento de numerosas líneas
celulares e hibridomas.
 Tampón Hermes: (ácido 4 - (2-hidroxietil)-1-piperazinetanosulfónico) es
un ión zwitteriónico.
 Suero fetal de ternera inactivado al 10% (alimenta a los leucocitos).
 L-Glutamina al 1,5%.
 Antibióticos: penicilina + estreptomicina 1% + antimicóticos.
 3.- CULTIVO Y COLCHINADO
a) Se añaden 5 gotas de fitohemaglutinina PHA-M (glicoproteína
proliferante de linfocitos).
b) Sangre se incuba en CO2 72 h a 37ºC y se agita cada 12h.
c) Se aplican 4 gotas de colchicina al 0,01% (fármaco antimitótico que
detiene o inhibe la división celular en metafase o en anafase debido a que
evita la polimerización de la tubulina de los microtúbulos).

4.- RECOGIDA DE CULTIVO

a) Se centrifuga a 1000 rpm por 10 min.
b) Eliminación de sobrenadante con pipeta Pasteur.
c) Se añade solución hipotónica de KCL al 0,075 M, primero 1 ml, luego 5
ml, dejando actuar por 15 min a 37ºC.
d) Se repite el paso a.
e) Se repite paso b y se añade lentamente 4 ml de fijador Carnoy (metanol
y ácido acético en proporción 3:1).
f) Se resuspende y se deja actuar 20 min a 25ºC.
g) Se repite el paso a.
h) Se repite el paso e.
i) Se repite el paso a.
j) Se repite el paso b y se añade 1 ml de fijador, dejando suspender.
k) Añadir 3 gotas de cultivo sobre un porta objetos.
l) Se deja secar.
m) Se añade tripsina (enzima peptidasa para inducir digestión celular
rompiendo los enlaces peptídicos).
m) Se tiñe.
n) Se fotografían cromosomas, se amplían, se recortan en un computador y
se forma un cariotipo.

5.- TINCIÓN
a) Tinción Giemsa (tinción hematológica purpura - rojizo) al 4% en tampón
fosfato pH 6,8 por 10-15 min.
b) Se lava la preparación con agua destilada.
c) En ocasiones se añaden 2-3 gotas de DPX (medio de montaje permanente).

TINCIONES DE BANDAS:
a) Modificación de Tinción Giemsa: bandas G. Permite visualizar
delecciones de hasta 4000 kb.
b) Tinción de bandas en prometafase o método de tinción de bandas de alta
resolución. Permite ver delecciones muy pequeñas.
c) Quinacrina: permite visualizar bandas Q transversales mediante
microscopía de fluorescencia.

Para romper la célula y obtener los cromosomas se puede dejar caer la

muestra a una altura de 30 cm una vez que la célula se encuentra hinchada
tras haber estado en el medio hipotónico o se puede calentar hasta que sde
induce la lisis.

Cariotipo: patrón cromosómico de una especie expresado a través de un código,

establecido por convenio, que describe las características de sus cromosomas.
Idiograma: esquema cromosómico no ordenado.

Tipos de sondas
a) Painting o coating
b) Sondas repetitivas de DNA alfa satélite
c) Sondas de ADN de secuencia única.
 Citogenética convencional: 1960. Se basaba en bandeo para analizar número
y estructura de cromosomas: Banda G (de rutina)/Banda R/ Banda C/ Banda T

HIBRIDACIÓN IN SITU POR FLUORESCENCIA (FISH)

Hibridación de cromosomas en metafase o interfase con sondas que

emiten fluorescencia y permiten la visualización, distinción y estudio de
los cromosomas así como de las anomalías que puedan presentar. Esta
técnica permite la rápida determinación de aneuploidías, microdeleciones,
duplicaciones, inversiones, así como la adjudicación de un marcador
genético a un cromosoma (cartografía genética).
OJO: Un fragmento marcado de DNA especifico de un cromosoma (sonda) se
expone a cromosomas desnaturalizados en metafase, profase o interfase.

a) Permite obtener en 24 h un diagnóstico prenatal a partir de núcleos

interfásicos procedentes del líquido amniótico o vellosidad corial
(diagnóstico genético preimplantatorio DGP).
b) Utiliza sondas de copia de cromosomas 13, 21, alfa satélites de 18, X y
Y con el fin de descartar síndromes asociados con tales cromosomas y
aneuploidías sexuales.
c) Se emplea contraste de yoduro de propidio (DAPI) a través de un
microscopio de epifluorescencia.

PERMITE VISUALIZAR HASTA 1 millón de pares de bases.

PREPARACIÓN PREVIA DE LA MUESTRA

-
- PREPARACIÓN DE LAS PLACAS
- PREPARACIÓN DE LAS SONDAS
- HIBRIDACIÓN
- LAVADOS POST-HIBRIDACIÓN
- DETECCIÓN
- TINCIÓN DE CONTRASTE (yoduro de propidium o DAPI)
- VISUALIZACIÓN (microscopio de epifluorescencia)

ES MENOS LABORIOSO Y MÁS RÁPIDO QUE LOS BANDEOS DE ALTA RESOLUCIÓN,

ES UNA TÉCNICA FACTIBLE Y PODEROSA EN RESOLUCIÓN.

GEN SRY: es un gen de determinación sexual en los mamíferos marsupiales y

placentarios; está presente en el brazo corto del cromosoma Y, es uno de los
responsables para determinar que las aproximadamente 4000 células germinales de los
órganos genitales del embrión empiecen a formar los testículos. Su ausencia, una
mutación que afecte el marco de lectura del gen o una translocación al cromosoma X,
generan individuos XY femeninos e individuos XX masculinos.

HIBRIDACIÓN GENÓMICA COMPARADA (CGH)

Es una técnica citogenética mediante la cual es posible identificar y

analizar alteraciones genéticas en un segmento cromosómico del tipo
duplicaciones o deleciones. No detecta mutaciones puntuales, es una
comparación cuantitativa

TODOS LOS CROMOSOMAS SON DISTINTOS

 Pruebas citogenéticas
Análisis de rutina cuando el
paciente no ha recibido
transfusiones.
Cultivo de linfocitos periféricos a) Permite diagnosticar el síndrome
del cromosoma X frágil.
b) Se estudia en prometafase.
Cultivo de fibroblastos Análisis luego de transfusión
sanguínea o análisis post mortem.
Cultivo de amniocitos Diagnóstico prenatal.
a) Análisis para aneuploidía
Biopsia de médula ósea b) Análisis de estado maligno de
leucemia.
Análisis de tumor Análisis de estado maligno.
Prueba de estrés mitógeno Sospecha de anemia Fanconi.
a) Sospecha de anomalía de
Intercambio de cromátides hermanas reparación de DNA como síndrome de
Bloom o ataxia-telangiectasia.
(Síndrome de Louis-Barr).

INDICACIONES PARA ESTUDIO CITOGENÉTICO

La amniocentesis es
una prueba prenatal
común en la cual se
extrae una pequeña
muestra del líquido
amniótico que rodea
al feto para analizarla.

VNTR: repetición en
tándem que permite
estudiar el polimorfismo
genético y la variación del
número de microsatélites.
 ALTERACIONES CROMOSÓMICAS o MUTACIONES (variaciones permanentes del DNA)

1.- Numéricas: monosomías, trisomías, poliploidías. Ocurren en la meiosis

I o II. Las últimas ocurren principalmente por la no disyunción o falta de
separación de las cromátides.
2.- Estructurales o mutaciones longitudinales:
a) Delección: falta de un segmento de cromosoma. Oligospermia o azospermia
se desarrolla por delección de cromosoma Y. Síndrome de Lejune.
b) Translocación recíproca: intercambio de segmentos entre cromosomas no
homólogos. Ej. En leucemia mieloide crónica.
c) Translocación simple: transferencia de un segmento de un cromosoma a
otro cromosoma.
d) Translocación robertsoniana: dos cromosomas no homólogos pierden sus
brazos cortos mientras que los largos se unen por el centrómero de uno de
los cromosomas, formándose un cromosoma único. Una parte de un cromosoma
acrocéntrico se intercala en otro. Ej. Síndrome de Down en un 4% de los
casos. Afecta a los cromosomas acrocéntricos con el brazo p muy pequeño.
d) Duplicación: duplicación de una región cromosómica concreta, por lo que
su portador tendrá material genético extra.
e) Inversiones: segmento del cromosoma cambia su orientación dentro de
este. Existen dos tipos de inversiones: Pericéntrica, cuando el centrómero
forma parte del segmento invertido, o Paracéntrica en el caso contrario.
Tienen una frecuencia muy baja y no suelen causar grandes trastornos. Ej.
infertilidad parecida al S. de Klinefelter. Malformaciones menores.
f) Inserción: consiste en la inserción de un segmento de ADN en un lugar
diferente, lo que puede dar como resultado la alteración de la estructura
y función normales de un gen.
g) Isocromosoma: cromosoma que ha perdido un brazo y el otro se ha
duplicado, de modo que existe una monosomía parcial debido al brazo
perdido, y a una trisomía parcial, debido al brazo duplicado. Ocurre en
Turner y ocasionalmente en Edwards. Resultado: 2 cromosomas iguales.
h) Cromosoma en anillo: se presenta cuando ambos brazos de un cromosoma se
fusionan formando un anillo. Ocurre por la ruptura de ambos lados del
centrómero. Aunque son poco frecuentes, también están implicados en
enfermedades. Por ejemplo, una de las causas del síndrome de Turner es la
formación de un anillo en el cromosoma X, leucemias, sarcomas, carcinomas
y Síndrome del cromosoma 15 en anillo. Está asociado con retraso mental y
tumores de médula ósea.

También existen mutaciones puntuales que son variaciones limitadas de una

sola base, con reemplazo de un nucleótido por otro y mudas cuando no
tienen importancia funcional.

REPARACIONES DE MUTACIONES

Por escisión: enzimas identifican bases anormales y las eliminan.

De desajuste: similar al de escisión pero es catalizado por otros
reparadores.

Otra clasificación de mutaciones:

Mutaciones somáticas: no se transmiten por herencia. Ej. cáncer.

Mutaciones gaméticas: hereditarias. Pueden ser monogénicas o poligénicas.

Se conocen más de 5000. Las enfermedades genéticas hereditarias también
pueden provenir d mutaciones de DNA mitocondrial, hereditario sólo por la
madre.

Se han mapeado más de 16000 genes humanos.

Cromatina sexual: presente en el cromosoma X en los cuerpos de Barr

basófilos.

El cromosoma Filadelfia, también llamado translocación Filadelfia, es una anormalidad genética

asociada a la leucemia mieloide crónica (LMC). Ocurre por una translocación recíproca. Se
determina a través de FISH

Mosaicismo: alteración genética en la que, en un mismo individuo,

coexisten dos o más poblaciones de células con distinto genotipo
(dos o más líneas celulares), supuestamente originadas a partir de
un mismo cigoto.

Mutaciones estructurales pueden ser:

Equilibradas: no se gana ni pierde DNA. Son la translocación recíproca y la inversión.
No equilibradas: se gana o pierde DNA. Son inserción, translocación robertsoniana, duplicación,
delección, cromosoma en anillo, isocromosoma.
DUPLICACIÓN. Patologías asociadas: muy raras.

Síndrome de la duplicación 10q

Síndrome de la duplicación 6q, parcial

Síndrome de la duplicación 10q, Distal

Síndrome de la duplicación 15q, Distal

Síndrome de la duplicación 6q, Distal

Síndrome de la duplicación 15q, Parcial

Síndrome o Alteración Características o síntomas Fórmula
enfermedad
a) Retraso mental leve o moderado, IQ de 50. Frecuencia 1/700.
b) Cabeza grande, o pequeña o deformada.
c) Manos cortas, anchas, dedos cortos con una sola articulación interfalángica con línea simiana en palma de mano.
Down Trisomía 21 d) Problemas cardíacos. 47, XX, + 21
e) Ocurre en 92% por no disyunción, 5% por translocación en acrocéntricos y 3% por mosaicismo.
f) Rasgos faciales característicos.
g) Las mujeres con pueden concebir: 47, XX, + 21
h) Los varones son infértiles: 47, XY, + 21
i) Riesgo de recurrencia: no disyunción: 1-2 % / Translocación: 5-12% / Mosaicismo: 1%.
j) En 4% casos ocurre por translocación robertsoniana.
a) Bajo peso al nacer b) Microcefalia d) Polidactilia de manos y pies e) Malformaciones cardíacas (80%) g) Retraso psicomotor
b) Microftalmia o anoftalmia c) Labio y paladar hendido e) Criptorquidia f) Holoprosencefalia h) Muerte precoz
o ciclopía
-20% y 30% de los nacidos mueren en el primer mes de vida.
-90% muere al año.
Patau Trisomía 13 -5% y 10% de los nacidos sobreviven al primer año de vida.
-Es Muy raro 47, XX, +13
-Ocurre I en 15,000 nacidos vivos, la mayoría mueren in útero.
-Letal.
-La mitad muere dentro del mes siguiente.
-La medio de sobrevivencia es de 6 meses.
-La frecuencia se incrementa con la edad de los padres.
-20% y 30% de los nacidos mueren en el primer mes de vida.
-90% muere al año.
-5% y 10% de los nacidos sobreviven al primer año de vida.

a) Muy raro.
b) I en 10,000 nacidos vivos, la mayoría mueren in útero.
c) La mayoría muere dentro de los 6 meses siguientes .
d) Características físicas inusuales.
Edwards Trisomía 18 e) El primer y quinto dedos unidos superponiendo al tercero y cuarto dedo.
f) Ha sido atribuido a una no-disyunción en la meiosis II del Oocito. 47, XX, +18
g) Pies equinos, riñón en herradura, divertículo de Meckel, ducto CIV, micrognatia, pabellones displásicos bajos, hipertelorismo, área umbilical única,
contracturas articulares, dolicocefalia, microcefalia, occipucio prominente.
h) Puede ser ocasionada por isocromosomas.
i) Pelvis estrecha.
j) Criptorquidia o hhipertrofia de clítoris.
k) Malformaciones cardíacas en un 95%, renales y hepáticas.
l) Retraso psicomotor.
a) Se presenta sólo en varones.
b) Esterilidad, pene pequeño, testículos pequeños y firmes (hipogonadismo), disfunción sexual, tejido mamario hipertrófico (ginecomastia), 47, XXY (75%)
Al menos un desproporción corporal, dificultad con aprendizaje. 20%: mosaicos con
Klinefelter cromosoma X c) Afecta 1/500 hombres, ocurre por no disyunción en meiosis. variantes: 48, XXXY:
adicional d) Factor de riesgo: edad materna avanzada. 48, XXYY y en un
e) Vello púbico, axilar y facial disminuido. 5% 49, XXXXY
f) Estatura alta, miembros inferiores largos, tronco corto).
 a) Se presenta en las niñas.
b) Es la única monosomía compatible con la vida.
c)El Dr. Henry Turner describió el síndrome en 1938, en 1959 se identificó la causa.
d) No se asocia con edad materna.
Turner Monosomía X e) Cromosoma ausente: error meiótico paterno (80%) o materno (20%). 45, XO
f) Puede ser ocasionada por isocromosomas. y cromosoma X en anillo.
g) Baja estatura.
h) Cuello palmeado (ptedridium colli).
i) Pezones muy separados entre sí, ausencia de vello púbico, desarrollo insuficiente de genitales y mamas, amenorrea, infertilidad por ausencia de
ovarios, posible retraso mental.
Delección del a) Cianosis, dificultades para deglución, maullido de gato por debilidad de epiglotis, microcefalia, hipertelorismo y micrognatia.
Lejune brazo corto de b) Ocurre 1/50.000. 46, XX, 5p-
cromosoma 5 c) También es llamado Cri du Chat.
Doble Y o a) Estatura alta, miembros largos, en algunos casos acné severo.
superhombres Y adicional b) 1/1000 hombres, más del 50% presenta dificultad para aprendizaje y retardo en el desarrollo del lenguaje. 47, XYY
c) Ocurre por no disyunción meiótica.
Polisemia X o a) Es un mosaicismo.
superhembras Trisomía X b) Ocurre 1/1500 mujeres. 47, XXX
c) Son fértiles, poseen problemas de aprendizaje, bajo coeficiente intelectual, problemas de coordinación, problemas mentales.
Retinoblastoma Delección del Retinoblastoma, anomalías oculares 13q14
cromosoma 13
Prader-Willi Delección del Hipotonía neonatal, obesidad, hipogonadismo, hiperfagia. Si ocurre en cromosoma materno, se llama Síndrome de Agelman y presenta otras 15q11
brazo q en características.
cromosoma 15
paterno
Tumor de Wills Delección Aniridia, tumor de Wills, retardo mental, dismorfia facial. 11p13
cromosoma 11
Fibrosis Defecto de gen en Mucosidad espesa en pulmones, infecciones crónicas.
quística brazo largo de
cromosoma 7
Delección dle Aumento en la síntesis de leucoctios.
Leucemia brazo largo del
mieloide cromosoma 22 46, XX, 22q-
crónica (cromosoma
Filadelfia)
Insuficiencia de Deficiencia de coagulación de sangre
Hemofilia A factor de
coagulación VIII
Deficiencia Despigmentación piel y cabello
Albinismo metabolismo
melanina
Tay-Sachs Ausencia de Acumulación de sustancia grasa en las neuronas.
hexosaminidasa A
Constricción Retraso mental
Síndrome de X secundaria cerca
frágil del extremo del
brazo largo de X
Alcaptonuria Defecto Orina oscura y artritis,
metabolismo de
tirosina

Algunas patologías ocasionadas por mutaciones moleculares del DNA:

Herencia autosómica dominante Distrofia miotónica

Herencia autosómica recesiva Fibrosis quística, enfermedad de Tay-Sachs
Herencia recesiva ligada al cromosoma X Hemofilia A
Herencia dominante ligada al cromosoma Y Incontinencia pigmentaria
Herencia multifactorial Defectos del tubo neural como espina bífida abierta y
anencefalia.

En los cánceres, generalmente se presentan triploidias y poliploidías como 69, XXX.

Frecuencia de alteraciones cromosómicas

 1% en nacidos vivos.
 Anomalías numéricas:estructurales---- 1%:1%.
 Cromosomas sexuales alterados: 0,25%.
 Aberraciones autosómicas: 0,4-0,6%.
 Trisomías más comunes: Down y Klinefelter.
 Rearreglo estructural más común: fusión céntrica de par 13-14.
 20 a 50% de abortos espontáneos del primer trimestre son de cromosomopatía.
 Turner y triploidías: 20 a 25% de casos.
 Edad materna avanzada: óvulo envejecido presenta mayor riesgo de errores de anafase I meiótica.
Contribuye en la incidencia de Down, Edwards y Klinefelter.

O.N.