Explorați Cărți electronice
Categorii
Explorați Cărți audio
Categorii
Explorați Reviste
Categorii
Explorați Documente
Categorii
2|Page
B. Filtrarea – este operaţia de separare a unui solid dintr-un amestec
eterogen solid – lichid, cu ajutorul unor mase poroase, permeabile numai pentru
lichid. Se utilizează când densitatea solidului este mai mică sau egală cu a
lichidului.
Lichidul care trece prin hârtia de filtru se numeşte filtrat. În practică, filtrarea
este folosită pentru obţinerea apei potabile. Ca materiale filtrante sefolosesc
straturi succesive de pietriş şi nisip. Există şi filtre de aer folosite pentru
purificarea aerului.
3|Page
D . Distilarea - operaţia de separare a componenţilor dintr-un amestec
omogen de lichide, prin fierbere urmată de condensare. Această
metodă de separare este utilizată la obţinere alcoolului şi în
prelucrarea ţiţeiului în rafinării pentru obţinerea benzinei, petrolului lampant
şi a motorinei.
4|Page
METODE DE PURIFICARE A SUBSTANTELOR
CHIMICE
In general substantele de analizat nu sunt pure ci reprezinta
amestecuri cu grade de complexitate diferite. Aceasta observatie este
valabila atat pentru substantele din natura cat si pentru cele care se obtin in
urma unor reactii chimice in laborator.Literatura de specialitate contine
valori ale principalelor constante fizico-chimice ale substantelor pure ,asa
incat aprecierea asupra identitatii unei substante si asupra caracteristicilor
sale se poate face dupa ce ea a fost separata de alte substante si supusa
analizelor.Metodele de separare si purificare au fost perfectionate de-a
lungul timpului , deoarece eficienta lor are influenta asupra calitatii
produselor rezultate din diversele procese tehnologice.
Alegerea metodei de separare sau purificare se face in functie de
proprietatile substantelor aflate in amestec, mai precis de caracteristicile
fizico-chimice ale acestora..
Principalele metode de separare ,purificare ori concentrare a
componentelor din amestecuri omogene sau eterogene care se utilizeaza
frecvent in cadrul analizelor de laborator sunt :
Metode mecanice : separarea sub lupa sau microscop ,
sedimentare si decantare , centrifugare , filtrare ;
Metode fizice : distilare si rectificare , extractie , absorbtie ,
adsorbtie , sublimare ;
Metode chimice : precipitare , cristalizare .
7|Page
Exista de asemenea hartie de filtru speciala cu adaosuri silicioase cu
efect de limpezire a filtratului sau cu adaos de carbune activ pentru
decolorarea filtratului.
Placile de sticla poroasa au avantajul unei bune rezistente la
coroziune si se monteaza in diverse dispozitive de filtrare.
METODE DE FILTRARE
1) Filtrarea lichidelor la presiune normala ( atmosferica )
Filtrarea la temperatura normala se realizeaza pe baza presiunii
hidrostatice proprii a lichidului care trece prin filtru. Se foloseste in special
la filtrarea solutiilor concentrate fierbinti. Instalatia de filtrare la presiune
normala este alcatuita din palnie de sticla ,portelan, material plastic, cu
unghiul partii conice cuprins intre 58 si 62 de grade,hartie de filtru ,stativ
metalic,bagheta,pahare.Hartia de filtru poate fi asezata in palnie pana la
1cm mai jos de partea superioara a palniei , in forma neteda sau cutata.
Pentru a adera etans la suprafata palniei,hartia de filtru se umecteaza si se
preseaza catre peretele palniei. Operatia de filtrare se realizeaza cu ajutorul
unei baghete tinuta in pozitie verticala in zona cu hartie dubla,pe care se
prelinge lichidul de deasupra precipitatului sau fazei solide a amestecului
eterogen.Apoi se trece pe hartia de filtru si faza solida , dupa care se fac
patru spalari ale paharului pentru ca trecerea fazei solide sa se realizeze
cantitativ.
Filtrarea la cald se foloseste cand amestecul de separat contine
impuritati care la temperatura normala sunt in stare solida sau au o
vascozitate mai mare, ori pentru cazul in care viteza de filtrare este mica.
In aceste cazuri se folosesc palnii care sunt prevazute cu manta de
incalzire ,sau palnii introduse in recipienti cu agent de incalzire(apa
calda,vapori de apa, aer cald ).
Filtrarea la temperaturi coborate poate utiliza aceleasi dispozitive
de mai sus,doar ca in locul agentilor de incalzire vor fi introdusi in
mantale agenti de racire.
2) Filtrarea la presiune redusa (in vid ) are ca scop accelerarea
operatiei de separare a fazelor prin crearea unei diferente de presiune
intre cele doua parti ale filtrului. Procedeul se aplica mai ales in
procesele de recristalizare. Presiunea mai mica din vasul de filtrat se
realizeaza prin legarea sa la o trompa de apa sau la o pompa de vid.Se
folosesc palnii speciale Buchner,din portelan sau sticla,palnii Hirsch,din
8|Page
portelan ,sau creuzete filtrante Gooch , prevazute cu placi de portelan
perforate pe care se aseaza hartii de filtru umectate cu diametrul putin
mai mic decat placa. In loc de hartie de filtru se mai poate folosi azbest,
vata de sticla sau celuloza. Palniile pot sa aiba un alt tip de placa -
poroasa-.Palnia,se ataseaza etans (prin intermediul unui dop de cauciuc
) unui « vas de trompa « care are o legatura la un vas de
siguranta.Trompa de apa este legata la sursa de apa si la vasul de
siguranta. La deschiderea apei se creaza o subpresiune in vasul de
siguranta, implicit in vasul de trompa, care realizeaza o succtiune la
nivelul suprafetei hartiei de filtru, marindu-se astfel viteza de filtrare.
9|Page
Instalatie de filtrare a atmosferei
Rol biologic
Proteinele sunt componente de baza ale tuturor celulelor vii, alaturi
de lipide, zaharide, vitamine, enzime, apa si saruri anorganice, formand
impreuna un sistem complex in cadrul caruia se petrec o serie de reactii
chimice care asigura reproducerea, dezvoltarea si functionarea normala a
fiintelor vii. Sunt componente ale structurilor celulare si au functii biologice
fundamentale : enzimatice, hormonale , imunologice. Sunt proteine unele
substante cu puternica activitate biologica ale celulelor ca: enzimele,
pigmentii respiratori, multi hormoni si anticorpii.
Clasificarea proteinelor
1. Dupa sursa de provenienta :
proteine de origine vegetala
proteine de origine animala
2. Dupa solubilitatea in apa si in solutii de electroliti :
insolubile (fibroase)
10 | P a g e
solubile (globulare)
3. Dupa produsii rezultati la hidroliza totala:
proteine propriu-zise ( dau prin hidroliza totala numai α- aminoacizi)
proteine conjugate sau proteide ( prin hidroliza totala se obtine, pe langa
α- aminoacizi, si o alta substanta care in structura proteinei apare ca
grupa prostetica)
Proteinele fibroase se gasesc in organismul animal in stare solida si confera
tesuturilor rezistenta mecanica (proteine de schelet) sau protectie impotriva
agentilor exteriori.
COMPOZITIA PROTEINELOR
Toate proteinele contin elementele: C, H, O, N si S; in unele proteine se
mai gasesc, in cantitati mici: P, Fe, Cu, I, Cl, si Br. Continutul procentual al
elementelor principale este de: C 50-52 %, H 6,8-7,7 %, S 0,5-2 %, N 15-18 %.
Prin hidroliza, proteinele se transforma in aminoacizi. Hidroliza proteinelor se
poate efectua cu acizi, cu baze sau cu enzime. Hidroliza acida se face prin
fierbere indelungata (12-48 ore) cu acid clorhidric de 20% sau mai bine cu acid
formic continand HCl (2 ore). Hidroliza cu hidroxizi alcalini sau cu hidroxid de
bariu are loc intr-un timp mai scurt. Prin hidroliza se obtine un amestec care
poate sa contina circa 20 L-aminoacizi. Se formeaza si amoniac prin hidroliza
grupelor CONH2 ale asparaginei si glutaminei.
11 | P a g e
nitrobenzen, cloroform, CCl4, pesticide organoclorurate, sulfamide, antibiotice
toxice - tetraciclina, saruri de Au s.a.).
4. Energetic - prin ardere dau 4,1 Kcal/g proteine; nu ard complet dand
nastere unor substante toxice (amine toxice: indol, triptamina, histamina) care
cer un efort hepatic suplimentar .
NECESARUL DE PROTEINE
Depinde de necesitatile organismului:
Copii: 0-6 ani - 3-4 g prot/kg corp/24 h
7-12 ani - 2-3 g prot/kg corp/24 h
12-20 ani - 1,5-1,7 g prot/kg corp/24 h
Adulti: 1,2-1,5 g/kgc/zi (ex: 75 kg ® 85-105 g proteine/zi)
Gravide si mame care alapteaza: 2 g/kgc/zi
Sportivi, muncitori, refaceri musculare: 2-3 g/kgc/zi
SURSE DE PROTEINE
- Produse animale: lapte, branzeturi (100g branza = 25-30 g proteine), carne
(20% proteine),viscere (ficat, rinichi, inima, splina, peste), oua.
- Leguminoase: fasole (20-25%), mazare, soia (35%).
- Cereale : paine (8%).
- Nuci, arahide, alune, cartofi, ciuperci, legume, fructe
12 | P a g e
Aminoacizii sunt compuși cu funcțiune mixtă (compuși care au grupe
funcționale diferite în molecula lor) care conțin în molecula lor gruparile
13 | P a g e
Aminoacizii sunt cei mai importanti nutrienti din corp, de multe ori
mentionati ca “elemente care ne formeaza viata”. Acest lucru se datoreaza
faptului ca aminoacizii stau la baza formarii tuturor proteinelor. 75% din corp
(excluzand apa) este alcatuit din proteine – neluand in considerare apa si
grasimea, proteinele reprezinta trei sferturi din ceea ce ramane.
Fibra musculara, membranele celulare, enzimele care ajuta creierul sa
functioneze sunt formate din proteine. Deoarece proteinele joaca un rol atat de
important in organismul nostru este esential sa le intelegem functia elementelor
cheie, si anume aminoacizii.
Aminoacizii sustin vitaminele si mineralele pentru a functiona corect si eficient
in organismul nostru . Daca aminoacizii lipsesc, asimilarea si utilizarea altor
nutrienti vor avea de suferit. Daca aportul oricaruia dintre aminoacizi este prea
mic pentru a indeplini nevoile corpului, niciunul dintre ceilalti aminoacizi nu
pot fi folositi pentru dezvoltarea si mentinerea sanatatii tesuturilor . Este foarte
important ca aminoacizii necesari sa provina atat din alimente cat si din
administrarea de suplimente nutritionale.
14 | P a g e
Ce se intampla cu aminoacizii si proteinele din corpul nostru?
In final polipeptidele vor fi desfacute una cate una de catre un alt grup de
enzime in dipeptide sau tripeptide, adica lanturi de doi sau trei aminoacizi.
Acestea vor fi absorbite in circulatia sangelui si transportate la ficat, unde
unul din patru va fi transormat intr-un aminoacid diferit, folosit apoi pentru
formarea de proteine specifice.
16 | P a g e
totalitate sau în parte, fibrele, cum ar fi cazul grâului, devenit făină, apoi
pâine albă. Mai mult, glucidele rafinate aduc un aport de calorii, dar foarte
puţine elemente nutritive. Atenţie, deci, la cerealele rafinate care sunt tot
atâtea zaharuri rapide care măresc indicele glicemic al unei mese.
FRUCTOZĂ
Glucid prezent in organism si in alimentatie. Fructoza face parte din
glucidele simple, de tipul hexoza (molecula lor cuprinde sase atomi de
carbon). Ea poate exista ca atare sau sub forma de zaharoza, formata prin
asocierea de molecule de fructoza si a unei molecule de glucoza.
Fructoza adusa prin alimentatie este continuta in zahar, in fructe (mar,
para, strugure), in miere. In organism, ea este transformata in glucoza.
Fructoza, solutie injectabila.
Compozitie:
Fiole a 100 ml solutie apoasa injectabila continand fructoza 20%.
Actiune terapeutica:
Monozaharida asimilata si metabolizata cu usurinta, participa la
metabolismul glucidic chiar in absenta insulinei, se transforma inglicogen,
reface rezervele energetice, protejeaza proteinele de catabolizare.
Indicatii :
Aport caloric in cadrul alimentatiei parenterale.
Contraindicatii:
Intoleranta la fructoza-sorbita, deficit de fructozo-1, 6-difosfataza,
hiperlactatemie, intoxicatie acuta cu alcool metilic (favorizeaza oxidarea in
17 | P a g e
formaldehida); la diabetici trebuie stabilita in prealabil toleranta la fructoza.
Reactii adverse:
Congestia fetei, epigastralgii, sudoratie (dozele mari); in caz de intoleranta
poate provoca hipoglicemie, leziuni hepatice si renale; tromboflebita locala .
Mod de administrare:
In perfuzie intravenoasa lenta, dozata dupa caz (a nu se depasi 800
mg fructoza/kilocorp si ora).
GLUCOZA
18 | P a g e
cartilajul de rechin etc. Condroitina confera elasticitate cartilajului si
previne distrugerea lui de catre enzime. Glucozamina este vitala pentru
construirea cartilajului. Cartilajul este un tesut intalnit in mai multe zone
ale corpului si functioneaza ca o perna intre oase si articulatii. Cartilajul
articular necesita glucozamina fiind un precursor al glicozaminoglicanilor,
componenta majora a cartilajului articular. Pe masura ce inaintam in varsta,
nivelul de glucozamina scade, ceea ce poate conduce la o eventuala
deterioare a cartilajului. Exista dovezi conform carora glucozamina reduce
simptomele osteoartritei la genunchi si incetineste progresia, reduce
rigiditatea, precum si umflarea articulatiilor .
19 | P a g e
Perfuzia rapida poate declansa o diureza osmotica nedorita;
injectarea paravenoasa a solutiilor 20% sau mai concentrate provoaca
iritatie sinecroza, iar injectarea intravenoasa de solutii concentrate poate fi
cauza de tromboflebita locala sau sclerozarea venei.
Mod de administrare:
Intravenos, in injectii lente sau perfuzii, pana la 1l/zi pentru solutia
5%; pana la 550 ml/zi pentru solutiile 33% si 40% (cantitatea nu trebuie sa
depaseasca 800-900 mg glucoza/kg corp si ora, adica circa 300 ml din
solutia 20% pentru un adult de 70 kg)
Compozitie:
Actiune terapeutica:
Indicatii:
Contraindicatii:
20 | P a g e
pentru solutii concentrate administrarea se face sub controlul glicemiei;
atentie la eventuala suplimentare de potasiu si insulina.
Reactii adverse:
Mod de administrare:
21 | P a g e
Necesitatea asigurării unui anumit nivel de lipide în raţia alimentară
este demonstrată de funcţiile lor în organism, şi anume:
Tipuri de lipide
23 | P a g e
In general, 60-70% din cantitatea totala de colesterol este purtata
prin organism de particulele LDL. Aceste particule asigura transportul
colesterolului de la ficat la locul unde este necesara prezenta lui. Daca
nivelul de colesterol din sange este mai mare decat necesarul organismului,
acesta nu este folosit de celule, circula liber si astfel ajunge sa se ataseze de
peretii vaselor de sange si ingreuneaza circulatia sangelui. Aceste blocaje
pot duce la afectiuni grave ale sistemului cardiovascular (infarctul
miocardic).
CONTRAINDICATII)
SURSE
25 | P a g e
Riboflavina o gasim in carne precum si in migdale, ciuperci, cereale
integrale, boabe de soia si legume verzi.
Acidul folic il gasim la fasole, legume cu frunze verzi, citrice, sfecla, germeni
de grau si carne.
27 | P a g e
Vitamina C sau acidul ascorbic exercită o influenţă pozitivă asupra
metabolismului din organism, contribuie la o bună utilizare a proteinelor
din hrană; ea este necesară pentru menţinerea integrităţilor pereţilor
capilarelor.
28 | P a g e
29 | P a g e
Enzime digestive . Hormoni estrogeni .
Prezentare in farmacii ( tratamente de vitamine si
contraindicatii )
Enzimele digestive sunt fermenti de natura proteica si structura
coloidala complexa, specifici plantelor si animalelor, necesare pentru
digestie deoarece au roluri importante in transformarea alimentelor
ingerate in substante primare necesare nutritiei, precum minerale,
vitamine,aminoacizi.
30 | P a g e
Enzimele se pot gasi in special in alimentele negatite precum:
Naturali
Estriadol
Estriol
Estrona
31 | P a g e
efect iar dacă sunt administraţi pe cale injectabilă se metabolizează foarte
repede, efectul lor fiind ineficient. Din acest motiv, sunt folosiţi estrogeni
sintetici ( fie prin esterificare a hormonului natural, fie prin substituirea lor
cu derivaţi care vor fi metabolizaţi mai încet în organism)
32 | P a g e
• în timpul sarcinii nivelul estrogenilor creşte de 10-100 de ori; din ziua a
8-a după concepţie placenta va secretahormonul hCG ( hormon
gonadotrop) şi o cantitate crescută de estrogeni; din acest motiv, hipofiza
nu mai poate primi „semnalul” (când scade estrogenul) şi trebuie eliminat
ovulul, deci nu mai are loc ovulaţia.
Sintetici:
● Etinilestradiol
● Mestranolul -ambii hormoni sunt derivaţi din estrogenul natural, endogen
● Estradiolul -hormonul sintetic
33 | P a g e
În tot acest timp el se hrăneşte din secreţiile de la nivelul trompei. Dacă
transportul lui este foarte mult accelerat de către estrogenii sintetici, riscă
să nu se termine diviziunea, nu se mai hrăneşte, deci va fi distrus şi eliminat
( avortat !)
-estrogenii sintetici stimulează sistemul imun, motiv pentru care un
tratament estrogenic poate induce boli autoimune precum Lupus
Eritematos Sistemic, Eritem nodos precum şi reacţii autoimune ca: prurit,
eczeme, etc.
- estrogenii sintetici pot avea efecte negative asupra psihicului precum
depresii, şi insomnii.
34 | P a g e
Rolul enzimelor in etapele digestiei ( bucala , gastrica,
intestinala ) .Bolile metabolismului glucidic
Digestia reprezintă totalitatea transformărilor mecanice şi fizico-
chimice pe care lesuferă alimentele, pentru a putea fi absorbite .
DIGESTIA BUCALĂ.SALIVA
În cavitatea bucală are loc fărâmiţarea alimentelor prin masticaţie şi
formareabolului alimentar prin amestecarea loc cu salivă. Saliva este
produsă de glandele parotide, glande submaxilare
şisublinguale.Cantitatea totală de salivă secretata este în 24 de ore
de 1.5l. Compoziţia salivei secretata de aceste 3 glande diferă. Saliva
produsă de glandele parotide este mai bogată în amilaza şi mai săracă în
mucoproteine. Cea produsă deglandele submaxilare, sublinguale este mai
vâscoasă datorită conţinutului mai marede mucoproteine.Saliva are un
aspect apos.Saliva conţine 99,5% apă, 0,5% substanţe solide. Din acestea
0,2 % sunt săruriminerale şi 0, 3% substanţe organice.Dintre subsstantele
organice importanta ceamai mare o are amilaza=ptialina, enzima ce
acţionează asupra amidonului şiglicogenului.Deoarece alimentele
rămân în cavitatea bucală o scurtă perioadă detimp, acţiunea amilazei
salivare este este de scurtă durată.
35 | P a g e
DIGESTIA GASTRICĂ.SUCUL GASTRIC
36 | P a g e
FERMENŢII GASTRICI
DIGESTIA INTESTINALĂ
LICHIDUL DUODENAL
37 | P a g e
sucului pancreatic se mai găsesc electroliti-Na, K, Că, Cl,bicarbonate,
precum şi proteine, enzime .
SUCUL INTESTINAL
38 | P a g e
BOLILE METABOLISMULUI GLUCIDIC
Diabetul zaharat este un sindrom foarte frecvent, in prezent
existand aproximativ 200 de milioane de bolnavi. Diabetul zaharat este
cunoscut din antichitate, manifestarile sale fiind descrise in Papirusul Ebers
– 1500 i.e.n. In 1889 este dovedita legatura dintre DZ si pancreas. In 1921
este descoperita insulina de catre savantul roman Nicolae Paulescu, iar in
1922 este pentru prima data administrata la om. In 1955 incepe era
medicamentelor antidiabetice orale, iar in 1963 se reuseste sinteza
insulinei.
Diabetul zaharat este o boala metabolica cu evolutie cronica, datorata
fie carentei absolute sau relative de insulina eficienta, fie rezistentei la
insulina, ceea ce determina in primul rand perturbarea metabolismului
glucidic, urmata de perturbarea metabolismului lipidic, protidic,
hidromineral si acido-bazic. Este cea mai frecventa boala metabolica,
afectand circa 5% din populatia generala in tarile dezvoltate (inca peste
50% din cazuri raman nediagnosticate).
DZ tip 1(insulino-dependent) . Majoritatea cazurilor ar avea la baza
un proces inflamator autoimun cu distructia selectiva a celulelor beta
Langerhans, cu prezervarea celulelor alfa secretoare de glucagon si gama
secretoare de somatostatina. Acest proces ar surveni preferential la indivizi
predispusi genetic. Factorii de mediu declansatori ar putea fi de origine
virala (v. urlian, al rujeolei, al hepatitei epidemice, Epstain-Barr, coxsackie,
citomegalovirus) sau toxica (inclusiv alimentari).
39 | P a g e
DZ tip 2 (non-insulinodependent) . Caracterul heredo-colateral al DZ
tip 2 este demonstrabil in numeroase cazuri, agregarea familiala
explicandu-se insa atat prin factori genetici, cat si prin transmiterea unui
mod de viata riscant, caracterizat prin obiceiuri alimentare nocive si
neglijarea activitatii fizice (sedentarism): ereditatea; obiceiuri vicioase
nocive (aport hipercaloric, exces de glucide concentrate, exces de lipide);
sedentarismul; stresul; factori chimici: alimentari; alcool, coloranti,
conservanti, stabilizatori; medicamentosi: hormoni (corticoizi,
contraceptive), diuretice tiazidice, antidepresive triciclice; toxici industriali
sau de uz gospodaresc (pesticide).
Tratamentul igieno-dietetic
Exercitiu fizic (alergare, gimnastica, mers pe jos sau cu bicicleta, inot
etc.) are certe efecte benefice: amelioreaza sensibilitatea la insulina,
normalizand metabolismul intracelular al diabeticului; scade colesterolul
total si trigliceridele plasmatice si creste HDL colesterolul, scazand astfel
40 | P a g e
riscul vascular; scade insulinemia, ceea ce diminueaza de asemenea riscul
vascular.
Tratamentul medicamentos
Arsenalul medicamentos cuprinde 3 categorii de medicamente:
insuline; sulfamide; biguanide.
41 | P a g e
Tulburari ale metabolismului proteic si lipidic. Cai
comune de metabolizare a alimentelor
42 | P a g e
neuroendocrin, în sinteza unor hormoni implicați direct (STH ) sau
indirect (TSH , ACTH , FSH ), în metabolismul lipidelor;
genetici, care pot predispune organismul, la dezechilibre metabolice,
manifestate fie prin prevalența anabolismului (tendința de îngrășare),
fie prin cea a catabolismului lipidic (tendința de menținere la un nivel
scăzut a depozitelor lipidice corporale).
În consecință, orice disfuncție în derularea acțiunilor specifice factorilor
enumerați mai sus, are darul de a induce tulburări ale metabolismului
lipidelor.
Tulburările metabolismului lipidelor ,intră în categoria lipidozelor se
manifestă la nivelul:
metabolismului lipidelor neutre;
metabolismului lipidelor complexe.
44 | P a g e
Calcul metabolism bazal
Formula Harris-Benedict - este bazata pe varsta (V), greutate (G),
inaltime (I)
• pentru femei (kcal): 655 + (9,56 x G) + (1,85 x I) - (4,68 x V)
• pentru barbati (kcal): 655 + (13,75 x G) + (5 x I) - (6,78 x V)
Formula Mifflin-St.Jeor - pentru adulti cu varsta cuprinsa intre 19-78 ani
• pentru femei: (10 x G) + (6,25 x I) - (5 x V) - 161
• pentru barbati: (10 x G) + (6,25 x I) - (5 x V) + 5
45 | P a g e
EXEMPLE DE PH-METRE, SPECTROFOTOMETRE,
CROMATOGRAFE SI ELECTROFOREZE UTILIZATE IN
LABORATOARE MEDICALE SI DE REVOLUTIE
Hartia indicatoare de ph
Aparatura
46 | P a g e
47 | P a g e
Mod de lucru
48 | P a g e
Spectrofotomere
49 | P a g e
proiectia absorbantei versus concentratie determina o linie dreapa,
absorbanta crescand odata cu cresterea concentratiei (transmitanta scade
odata cu cresterea concentratiei de analit).
Pentru a utiliza un spectrofotometru este necesara stabilirea unei
serii cunoscute de dilutii a unor cantitati cunoscute de solut. Una din
acestea nu contine solut si este cunoscuta ca “blank”. Este utilizata pentru
ajustarea instrumentului sa citeasca 100% transmitanta pentru absorbanta
0. O valoare a transmitantei de 0% (absorbanta infinita) este stabilita prin
plasarea unei bariere intre sursa de lumina si fotocelula. Toate celelalte
masuratori sunt apoi efectuate prin simpla plasare a probelor in calea
luminii. Dupa inregistrarea absorbantei pentru o serie de probe standard
este efectuata o dreapta absorbanta versus concentratie. Panta dreptei
reprezinta coeficientul de extinctie. Aceasta valoare este o constanta si este
utilizata pentru conversia oricarei absorbante masurate in concentratia
corespunzatoare (C = A/ε).
Un spectrofotometru poate utiliza atat lumina vizibila (de obicei avand ca
sursa de lumina o lampa cu tugsten/halogen), cat si lumina UV. Singura
modificare necesara este inlocuirea tuburilor de sticla cu cuvete de quartz
(sticla absoarbe lumina UV si nu este potrivita pentru un spectrofotometru
UV).
Majoritatea testelor de chimie clinica efectuate pe analizorul automat
sunt teste colorimetrice, distingandu-se urmatoarele tipuri de teste:
- teste enzimatice colorimetrice in care substanta de analizat este tratata cu
una sau mai multe enzime specifice, in urma reactiei rezultand hidrogen
peroxid, care in prezenta unui substrat, sub actiunea peroxidazei duce la
formarea unui pigment iminoquinonic care este determinat fotometric,
intensitatea culorii formate fiind proportionala cu concentratia analitului
respectiv (ex: determinarea acidului uric cu utilizarea uricazei);
- teste colorimetrice in care substanta de analizat se cupleaza specific cu
reactivul cu formarea unui produs conjugat colorat care este determinat
fotometric (ex.: bilirubina se cupleaza cu ionul diazoniu in mediu puternic
acid cu formarea azobilirubinei de culoare rosie); in cazul determinarii
enzimelor, acestea cliveaza enzimatic un substrat specific, produsul rezultat
fiind colorat/ se cupleaza cu un cromogen si formeaza un complex colorat;
- teste UV: NADH/NADPH care este fie produs, fie consumat in timpul
reactiilor care au loc este determinat fotometric in lumina ultravioleta,
concentratia sa fiind direct, respectiv invers proportionala cu concentratia
analitului de determinat (ex: determinarea ALT si AST).
- teste kinetice: produsul final este determinat kinetic (in timp fix), ceea ce
ofera o linearitate mai mare (ex.: test kinetic UV pentru determinarea
ureei).
50 | P a g e
Cromatograf
51 | P a g e
patrunde prin pori in ochiurile retelei si astfel se vor deplasa mai lent prin
coloana si vor elua ultimele din solutie. Pe masura ce proba elueaza la
capatul coloanei fractiunile sunt colectate in tuburi. Fractiunile eluate sunt
apoi testate pentru determinarea compozitiei si cantitatii componentelor
respective prin spectrofotometrie, electroforeza sau teste functionale.
Cromatografia cu gel filtrare este utilizata in primul rand pentru a purifica
proteine sau alte molecule si poate fi utilizata pentru estimarea marimii
unor proteine necunoscute (coloane calibrate cu proteine cu GM
cunoscuta).
In cromatografia cu schimb de ioni moleculele sunt separate pe baza
incarcaturii lor ionice. Faza stationara este reprezentata de o rasina cu
incarcatura fixa; daca aceasta incarcatura este negativa (carboximetil
celuloza), procesul se numeste cromatografie cu schimb de cationi, iar daca
incarcatura este pozitiva (dietilaminoetil celuloza), este cromatografie cu
schimb de anioni. Faza mobila este reprezentata de o solutie tampon. Atunci
cand o proteina trece prin coloana se poate lega de matrice si poate fi in
continuare eluata prin cresterea concentratiei ionice a solutiei tampon
(elutia poate fi privita ca o competitie pentru situsurile de legare ale
matricei; pe masura ce puterea ionica a tamponului creste, o sare ionica din
tampon va ocupa un situs al matricei si proteina va fi eluata din coloana).
pH-ul solutiei tampon este critic in cromatografia cu schimb de ioni. Exista
doua cai de efectuare a elutiei: prin gradient, in care concentratia salina
creste constant si gradual in timpul procesului de elutie si elutia brusca, in
care modificarea in concentratia salina este abrupta.
Electroforeza, ca si cromatografia cu schimb de ioni, poate fi utilizata ca un
instrument eficient pentru analiza unui amestec de ioni. O fasie de hartie
sau gel polimeric saturata cu un electrolit este asezata astfel incat sa
traverseze doua solutii care contin electrozi. Amestecul de analizat este
aplicat pe hartie/gel si cei doi electrozi sunt conectati la o sursa de inalta
energie (~5000 volti). Ionii pozitivi vor migra intr-o directie, iar cei negativi
in cealalta directie. Cu cat este mai mare incarcatura ionului, cu atat va
migra mai departe. Metoda este in mod special utila pentru separarea
amestecurilor proteice.
In cromatografia cu faza inversa moleculele sunt legate de o matrice
hidrofoba (hidrocarburi cu lant lung legate de o matrice de silicon) intr-un
tampon hidrofil. Moleculele pot fi apoi eluate prin scaderea polaritatii
tamponului, de exemplu prin cresterea concentratiei de alcool sau alt
solvent nepolar din tampon.
52 | P a g e
Electroforeza
Valori normale
53 | P a g e
Analize medicale si valori normale . Analiza grupelor de
sange . Sistemul OAB . Sistemul RH
Valori in sange
Substanta analizata Valori normale Factorul de Valori normale
in grame si submultiplii multiplicare in moli si submultiplii
0.020-0.050 g/l mg/1X5.95
Acidul uric 119-297 mmol/l
2.0-5.0 mg/100ml mg/100mlX59.5
Amoniacul 0.1-0.3 mg/l mg/1X58.5 5.85-17.55 mmol/l
0.008-0.010 g/l
Bilirubina indirecta mg/1X1.71 13.6-17.1 mmol/l
0.8-1 mg/100ml
0-0.0025 g/l
Bilirubina directa mg/1X1.71 0-4.30 mmol/l
0-0.25 mg/100ml
0.008-0.0125 g/l mg/1X1.71
Bilirubina totala 13.68-21.30 mmol/l
0.8-1.25mg/100ml mg/100mlX17
0.090-0.110 g/l
Calciul mg/1X0.025 2.25-2.75 mmol/l
9-11mg/100ml
54 | P a g e
55 | P a g e
2-3 51-77
Potasiul g/24hX25.6
g/24h mmol/24h
4-6 174-261
Sodiul g/24hX43.5
g/24h mmol/24h
10-35 166-581
Ureea g/24hX16.6
g/24h mmol/24h
Sistemul OAB
Sistemul Rh
58 | P a g e
Explorarea secretiilor digestive. Tehnici de ionometrie
Datorita caracterului acid ( suc gastric) si alcain ( suc intestinal) al
secretiilor digestive , pH-ul acestor secretii poate fi utilizat ca parametru
specific de bilant digestiv .
Determinarea pH-ului secretiilor digestive se realizeaza in clinica prin
tehnici electrochimice de ionmetrie / pH – metrie , care masoara diferenta
de potential generate la introducerea unui electrod metallic intr-o solutie
apoasa care contine o sare a acelui metal . Tehnica presupune utilizarea
unei cellule electrochimice , formate din 2 electrozi ( unul sensibil la ion si
altul de referinta ) conectati prin fire de Ag / AgCl la bornele unui
galvanometru .
Sucul gastric este secretat de stomac, fiind compus din apa, acid
clorhidric, pepsina ( enzima ), mucus si minerale. El contribuie la digestia
alimentelor din stomac, in special al acelora care contin proteine: carne,
lapte, oua.
Sucul gastric este un lichid incolor, limpede, cu reactie acida ( in gastrita
cronica, pelagra sau in tumorile stomacului, aciditatea gastrica este scazuta
sau chiar lipseste) si are pH-ul 0,9 – 1. Sucul gastric este secretat de
glandele gastrice ( oxintice si pilorice ) si contine 99% apa si 1% substante
organice si anorganice.
Dintre substantele anorganice cel mai important este acidul clorhidric in
care este in proportie de 0,5% si da sucului gastric reactia acida necesara
activitatii enzimelor gastrice si ii confera proprietati antiseptice fata de
bacteriile ingerate cu alimentele. Dintre constituentii organici rolul cel mai
important il au mucina si fermentii.
59 | P a g e
Valori normale :
60 | P a g e
Parametrii obtinuti pot fi utilizati in vederea realizarii unor buletine
de analiza a secretiei gastrice:
61 | P a g e
Analize de urina. Examenul fizic si chimic al urinei
PH-ul urinar sau reactia urinei arata daca urina este acida sau
alcalina. Determinarea pH-ului se face cu o hartie impregnata cu tinctura de
turnesol (sau cu alta substanta indicatoare). Se introduce hartia in urina si
se observa modificarea culorii benzii de hartie. Sub pH-ul 7,0 urina este
considerata acida si hartia se inroseste, iar peste pH-ul 7,0 urina este
considerata alcalina si hartia se albastreste. In mod normal urina este acida
avand pH-ul cuprins intre 5,5 si 6,5. Dupa o alimentatie bogata in carne si
medicamente acide (sare de lamaie, vitamina C), se elimina o urina mai
acida, iar dupa un regim alimentar vegetarian, dupa medicamente alcaline
(bicarbonat, ape minerale) sau dupa infectii ale aparatului urinar, devine
alcalina. Urina care este permanent prea acida sau prea alcalina, predispune
la formarea de calcului urinari de acid uric, respectiv de fosfat si carbonat
de calciu.
63 | P a g e
Proprietatile chimice ale urinei
Albumina din urina (albuminuria)
64 | P a g e
Corpii cetonici din urina (cetonuria)
Corpii cetonici nu se gasesc in urina normala. Dar dupa cum s-a aratat
la diagnosticul de laborator al diabetului, concentratia lor urinara creste
foarte mult in diabetul zaharat netratat. Si alte cauze pot sa creasca
concentratia corpilor cetonici din urina: infectii microbiene, intoxicatii
grave, dupa un post prelungit sau dupa un regim alimentar sarac in dulciuri
si bogat in grasimi, in cursul sarcinii, dupa varsaturi prelungite. Unele
medicamente luate de bolnavi produc o reactie falsa pentru corpii cetonici.
Prezenta corpilor cetonici se noteaza cu 1-3 plusuri.
Pigmenti biliari
Urobilinogenul
65 | P a g e