UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA Versión:

SANTANDER
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL Fecha de
MEDIO AMBIENTE Aprobación
ASIGNATURA MICROBIOLOGÍA GENERAL Página:
PARA INGENIERÍAS

GUÍA No 1: NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE

MICROBIOLOGÍA

DOCENTE: ZAIDA ROCIO CONTRERAS VELASQUEZ

1. INTRODUCCIÓN

Un laboratorio de microbiología es un lugar convenientemente habilitado donde se pueden

manejar y examinar microorganismos. Este tipo de trabajo debe ser llevado a cabo con
una buena técnica aséptica y por tanto se requiere de un ambiente limpio y ordenado y es
por ello que se debe trabajar en condiciones adecuadas de esterilidad.

2. OBJETIVOS
 Dar a conocer a los estudiantes de microbiología las normas de bioseguridad que
se deben tener en cuenta, para una correcta manipulación de microorganismos en
el laboratorio.

 Minimizar los riesgos relacionados con una infección debido a mala manipulación
en el laboratorio de microbiología

3. FUNDAMENTO

Todos los microorganismos que sean manipulados deben considerarse patógenos

aunque no lo sean y por ello todos los cultivos deben ser manejados con precaución. Es
importante tener en cuenta dos de los siguientes requisitos:

 Se debe restringir la presencia de microorganismos en estudio a los recipientes,

materiales de laboratorio, cuadernos, lapiceros y medios de cultivos estériles con
el fin de evitar el riesgo por contaminación.

 Evitar que los microorganismos ambientales presentes en la piel, pelo, aire, ropa,
etc., contaminen las muestras obtenidas durante los procedimientos.

3.1 BUENAS PRÁCTICAS EN EL LABORATORIO

a. TODO EL PERSONAL QUE INGRESE AL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

DEBE CONOCER Y ESTAR EN CAPACIDAD DE ACTUAR DE ACUERDO A
 CADA UNA DE LAS NORMAS DE BIOSEGURIDAD EXIGIDAS PARA EL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA.

b. Es indispensable el uso de bata (se recomienda manga larga y en tela antifluidos),

guantes, tapabocas y gafas protectoras.

c. Al inicio y al final del laboratorio, lavarse las manos con agua y jabón antibacterial
preferiblemente.

d. Antes de comenzar es conveniente desinfectar la superficie de trabajo teniendo en

cuenta las concentraciones de los desinfectantes y detergentes.

e. El lugar de trabajo debe estar siempre limpio y organizado. Cualquier material que
no se utilice en la realización de la práctica (lápices, cuadernos, bolsos, etc), debe
estar apartado del lugar del trabajo.

f. Trabajar con calma y concentración y teniendo en cuenta todas las

recomendaciones de manejo dadas por el docente.

g. Está terminantemente prohibido comer, beber, fumar y maquillarse. Cuando se

manipulan microorganismos hay que evitar llevarse las manos a la boca nariz, ojos
u oídos. Si es necesario hacerlo se deben lavar los guantes y descartarlos y
posteriormente lavarse las manos.

h. Se deben retirar objetos que se tengan en las manos tales como anillos, relojes,
pulseras, etc.

i. No se debe pipetear con la boca, utilizar siempre pipeteadores manuales o pipetas

automáticas.

j. El asa debe ser esterilizada en llama (hasta que esté roja) antes del iniciar el
trabajo, entre repique y repique y al terminar el trabajo.

k. Los microorganismos SIEMPRE deben manejarse siempre alrededor de la llama

del mechero o en una campana de seguridad.

l. Teniendo en cuenta que uno de los mayores riesgos en el laboratorio de

microbiología es la generación de aerosoles pues en éstos pueden ir
microorganismos o esporas de éstos, por lo tanto, se deben evitar las operaciones
bruscas en las que se manejan líquidos y que puedan generar aerosoles:
centrifugaciones, vertidos rápidos (pipeteos y trasvases, etc).

m. Es conveniente evitar movimientos bruscos, desplazamientos innecesarios en el

laboratorio o trabajar con ventanas abiertas que generen corrientes de aire que
originen contaminaciones o produzcan accidentes.

n. El transporte y almacenamiento de placas y recipientes que contienen cultivos

representan un riesgo evidente; por lo tanto, al sacar el material de la incubadora o
al introducirlo en ella se debe realizar en una sola operación.
o. Cuando el material se coloque en la incubadora se debe tener especial cuidado de
que este se ubique de manera segura para que no se caiga y se produzcan
derrames.

p. No se debe sacar ninguna muestra contaminada del laboratorio.

q. El material contaminado NO se debe descartar en la fregadera, papelera o basura

común. Todo material contaminado se debe esterilizar en el laboratorio antes de
procesarlos como residuos.

Por ejemplo: el material contaminado contenido en cajas de Petri se debe

autoclavar antes de tirarlo a la basura, el material de vidrio contaminado
(portaobjetos, tubos, etc) se debe autoclavar para luego lavar, secar y volverse a
emplear.

El material cortopunzante (agujas, lancetas, etc) se debe descartar en

contenedores específicos para tal fin.

r. En un laboratorio de microbiología debe estar disponible un botiquín básico de

primeros auxilios.

s. En caso de accidente (rotura o derrame del contenido de un tubo o recipiente que

contenga microorganismos) se debe avisar inmediatamente al auxiliar o asistente
del laboratorio, dejando una persona responsable que vigile para evitar que otros
se contaminen. El derrame debe cubrirse con un líquido desinfectante.

t. El suministro de gas para los mecheros de Bunsen requiere tomar las

precauciones propias de estas instalaciones.

Los escapes de gas son muy peligrosos, por lo tanto, hay que asegurarse de
cerrar todas las llaves de paso de gas al finalizar el trabajo, evitar la presencia de
sustancias inflamables y revisar periódicamente las conducciones. Cuando se
maneja éste tipo de mecheros, se deben tener detectores de humo, extintores y
mantas ignífugas fácilmente visibles desde cualquier lugar del laboratorio. Los
extintores se emplean sobre objetos pero, por su potencia pueden derribar los
recipientes con disolventes, por lo que conviene cerrar el gas de la zona. Las
mantas se usarán sobre el persona cuya ropa se haya incendiado o sobre el que
haya caído un disolvente inflamado.

u. Normalmente los mecheros de Bunsen tienen un regulador de entrada de la

cantidad de aire con el que hay que obtener una mezcla de aire-gas, de forma que
la llama tenga la temperatura suficiente. Las llamas “frías” son anaranjadas y se
ven bien, pero no esterilizan; las llamas muy “calientes” son de un azul
prácticamente invisible, lo cual supone un riesgo si no se trabaja con cuidado, pero
esterilizan.

v. En un laboratorio de microbiología es frecuente el empleo de disolventes

inflamables (alcohol, acetona, xylol, etc). Es conveniente tener los recipientes con
este tipo de disolventes sobre una pequeña bandeja, de forma que si se incendia y
se derrama, el disolvente no se extienda por el laboratorio.
 En el caso de que se provoque algún pequeño fuego no se deberá soplar nunca
sobre el disolvente ni emplear un extintor si no es estrictamente necesario, ya que
un chorro fuerte de aire extendería el disolvente ardiendo por toda la zona. Se
deberá emplear una manta ignífuga (o una toalla empapada en agua) para cubrir
el recipiente, bandeja o zona incendiada.

Si el fuego se extiende, usar el extintor dirigiéndolo a la base de las llamas.

w. Cuando se trabaje con luz ultravioleta debe tenerse en cuenta que la exposición a
este tipo de radiación es peligrosa, puede producir graves quemaduras e incluso
tiene poder mutagénico. Por lo tanto, nunca se debe mirar al foco emisor. Deberán
protegerse los ojos con gafas y cualquier zona de la piel expuesta a la radiación
con guantes, mascaras, etc.

3.2 CLASIFICACION DE LOS MICROORGANISMOS INFECCIOSOS POR GRUPOS DE

RIESGO

 Grupo de Riesgo 1: Riesgo individual o poblacional escaso o nulo.

Tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los
animales.

 Grupo de Riesgo 2: Riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo.

Agentes patógenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero
tienen pocas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de
laboratorio, la población el ganado o el medio ambiente. La exposición en el
laboratorio puede provocar una infección grave pero existen medidas preventivas y
terapéuticas eficaces y el riesgo de propagación es limitado.

 Grupo de Riesgo 3: Riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo

Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades humanas animales graves,
pero que de ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen medidas
preventivas y terapéuticas eficaces.

 Grupo de Riesgo 4: Riesgo individual y poblacional elevado.

Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o
los animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa o
indirectamente. Normalmente no existen medidas preventivas y terapéuticas
eficaces.

3.3 RELACIÓN DE LOS GRUPOS DE RIESGO CON LOS NIVELES DE

BIOSEGURIDAD, LAS PRÁCTICAS Y EL EQUIPO

Los laboratorios se clasifican de acuerdo al nivel de bioseguridad basado en una

combinación de las características de diseño, medios de contención, equipo, prácticas y
procedimientos de operación necesarios para trabajar con agentes patógenos de los
distintos grupos de riesgo. En el siguiente cuadro se relacionan, no se equiparan, los
grupos de riesgo con el nivel de bioseguridad de los laboratorios destinados al trabajo con
microorganismos de cada uno de esos grupos.
4. CUESTIONARIO

 Teniendo en cuenta la información presentada en la guía No 1, realice un análisis

sobre el laboratorio de microbiología, determine los riesgos que se presentan y la
forma de prevenirlos.
 Establezca en qué nivel de riesgo y en qué nivel de bioseguridad se encuentra el
laboratorio de microbiología.
 Investigue la diferencia entre desinfección y esterilización.
 Que métodos de tipo físico y químicos se utilizan para realizar una correcta
desinfección.
 Investigue lo que significa desactivación de baja, mediana y alta eficiencia. En qué
casos aplica cada uno de éstos procesos y como se lleva a cabo.
 El hipoclorito de sodio o cloro es el desinfectante universal y se presenta en la
forma comercial en una concentración entre el 4% y el 6%. Si usted desea realizar
la desinfección de mesones del laboratorio y limpieza de equipos, se requiere una
concentración entre 0,5% y 1% o sea entre 500 y 1000 ppm. Explique cómo
realizaría la dilución para preparar 1 lt de hipoclorito de concentración 0,05% o 500
ppm

Tenga en cuenta que esta es la solución que se va a preparar para todos los
laboratorios que se realicen de microbiología.

 Explique los siguientes métodos de esterilización utilizados en el laboratorio de

microbiología:
o Esterilización por calor húmedo
o Esterilización por calor seco
  Qué técnicas de las anteriores se utilizan para esterilizar: vidriería, medios de
cultivo, material de pasta, etc.
 De los siguientes equipos de laboratorio, pegue una imagen y describa su
funcionalidad en microbiología.
o Autoclave
o Incubadora
o Incubadora de anaerobiosis
o Cabina de flujo laminar

5. MATERIALES NECESARIOS PARA LAS PRÁCTICAS

Para cada laboratorio de manera individual, cada estudiante debe traer:
Como elemento de protección personal:
 Bata manga larga con cierre hasta el cuello y en material antifluido
 2 pares de guantes
 Gafas de protección
 Cofia o gorro
 Tapabocas
Como material para trabajar:
 Sharpie
Para cada laboratorio, en grupo, los estudiantes deben traer:
 Asa recta
 Asa redonda
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Alcohol de 96°
 Alcohol de 70° envasado en atomizador entre 100-150 ml
 Hipoclorito al 1% ya preparado y envasado en atomizador entre 100-150ml
 Jabon detergente en un recipiente de orina
 Jabón antibacterial para lavarse las manos
 1 esponja
 1 rollo de Scott de cocina
 Cinta tirrow de 1 ½ cm
 1 rollo envoplast partido 4 veces
 Fosforos o encendedor
 1 paquete de 20 – 50 hisopos
Todo el grupo debe acordar traer:
 Bolsa de descarte

5. BIBLIOGRAFÍA

GAMAZO, LOPEZ –GOÑI y DÍAZ. Carlos, Ignacio y Ramón. Manual Práctico de

Microbiología. Masson. Tercera edición. Barcelona – España 2005. [En Línea]
http://books.google.com.co/books?id=MfW3TuHLa4gC&pg=PR4&lpg=PP1&hl=es#v=onep
age&q&f=false
MINISTERIO DE SALUD. Conductas Básicas en bioseguridad: Manejo Integral. Santa Fe
de Bogotá, D.C. Abril de 1997. [En Línea] http://www.ecocapitalinternacional-
sa.com/descargas/Manual%20de%20Bioseguridad.pdf
ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD. Manual de Bioseguridad en el Laboratorio.
Tercera Edición. Ginebra. 2005. [En Línea]
http://www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/CDS_CSR_LYO_2004_11SP.pdf