HISTOLOGÍA

OBJETIVOS:

• Conocer los diferentes tipos de tejido que posee el cuerpo humano.

• Aprender a diferenciar los 4 tipos de tejidos fundamentales y conocer sus funciones.

• Observar laminillas con los diferentes tipos de tejido.

INTRODUCCIÓN

En el presente trabajo hablaremos sobre histología, además de definir este término y los

métodos que se estudian en él tanto en tejidos como en órganos, vamos a tratar de

prepararnos para un estudio más detallado de algunas estructuras que constituyen el cuerpo.

Nuestra finalidad en este trabajo es el de dar una perspectiva más profunda de investigación

así como orientarnos hacia lo más importante de esta interesante materia.

También nos prepararemos para el análisis del material en cortes microscópicos como se

observan en los laboratorios.

Cabe recalcar que para estudiar esta materia se necesita conocer en detalle de un

vocabulario técnico tanto en biología como en medicina.

Antes de iniciar con este estudio de los tejidos, y su descripción detallada, debemos dejar

establecido, que todos los tejidos corporales están compuestos por:

Células, Matriz Extracelular y Líquido Tisular.

 Histología

 DEFINICIÒN

Histología proviene de los griegos: Histo=Tejidos y Logos=Tratados, por ello para

definirla podemos decir que es la ciencia que estudia los tejidos.

La palabra histología la empleamos como sinónimo de anatomía microscópica, esto se

debe a que su materia no sólo incluye la estructura microscópica de los tejidos sino

también la de la célula, órganos y sistemas.

Pues mediante su descubrimiento se dieron observaciones microscópicas las cuales

confirmaron que el organismo estaba conformado por tejidos y que las células son

aquellas que constituyen la unidad morfológica y funcional de los seres vivos, estas

mismas forman animales y plantas.

Es necesario entender que el cuerpo está compuesto de: células, matriz intercelular y

una sustancia líquida, el líquido extracelular o líquido tisular, que impregna estos

componentes.

- El líquido extracelular, que deriva del plasma sanguíneo, se encarga de transportar

nutrientes, oxígeno y moléculas de señalamiento a las células del cuerpo. Por el

contrario, las moléculas de señalamiento, los productos de desecho y el CO2 que liberan

las células del organismo llegan a la sangre como también a los vasos linfáticos a través

del líquido extracelular.

El objeto de la histología no aborda en el solamente en la estructura del cuerpo, sino

también su funcionamiento.

Las células poseen diversos atributos funcionales, estos están expresados en diversos

grados por los tejidos, por ende cada uno de estos tejidos desempeña funciones

específicas.
 TEJIDOS

Entendemos como tejido al cual consiste en un grupo de células similares las cuales

están estrechamente asociadas y realizan funciones específicas.

Podemos definir a un tejido básico, como un agrupamiento de células con morfología

Semejante, cuyos productos tienen una función común y su origen se debe a cualquiera

de las tres hojas embrionarias: Ectodermo, Endodermo y Mesodermo, siendo las más

comunes las dos primeras.

Su clasificación, puede ser realizada bajo diferentes puntos de vista, por lo que

tendremos en cuenta la más general que es en base a la estructura microscópica y su

función que desempeñan. Por lo que, los rasgos más característicos para identificar,

diferenciar y clasificar los tejidos deben extraerse del tipo, proporción y distribución de

las células que se diferencian entre sí por estar estructuralmente especializadas y por el

hecho de desempeñar funciones particulares que dependen de las propiedades

fisiológicas del protoplasma y la estructura de la matriz extracelular. Y por ello son

clasificados, como Epitelial, Conjuntivo, Muscular y Nervioso contando además cada

uno de ellos con particularidades que los subclasifican.

Cuando nosotros observamos un órgano al microscopio, estos presentan una estructura,

que por sí sola los identifica en su característica propia, sin embargo tienen patrones

que se pueden asemejar en su anatomía macroscópica por la distribución regular de los

tejidos, por lo que lo podemos encontrar como: Órganos Tubulares, Órganos Macizos y

Secciones Corporales o Sistemas Esqueléticos. Esta forma de organización presenta

característica que van de lo más simple a lo más complejo, lo que ayuda a su

comprensión y estudio.
  GENERALIDADES DE LOS TEJIDOS.

A medida que los organismos evolucionaron, sus características morfofuncionales se

hicieron más complejas y se incrementaron el número y las variedades de células que lo

integraban.

Las células se diferencian y especializan, por lo que sus organitos y otros componentes

citoplasmáticos presentan diferentes grados de desarrollo, aparecen nuevas

especializaciones en la superficie y se modifica la cantidad y calidad de los productos

extracelulares elaborados por las mismas células.

En los organismos multicelulares las células diferenciadas y especializadas se organizan y

constituyen los tejidos.

Estos están formados por conjuntos de células que tienen origen común, que poseen

características morfológicas similares y que desempeñan las mismas funciones básicas. Por

lo regular, las células de un tejido son relativamente uniformes en sus propiedades

morfológicas y funcionales.

Bichat, anatomista francés que utilizó la palabra francesa tissu= TEJIDO. Este anatomista

se percató, según las disecciones que realizó, de que existían diversas capas en el

organismo, las cuales tenían diferente textura y clasificó los tejidos en más de 20

variedades.

En el siglo XIX el descubrimiento del microscopio óptico permitió precisar que no había

tantos tejidos como Bichat lo había descrito, sino que sólo existían cuatro tejidos básicos y

que cada uno de ellos tenía dos o más subtipos.

Antes de pasar a describir las características de los cuatro tejidos básicos del organismo,

debemos precisar que todos los tejidos corporales están integrados por: células, matriz

extracelular y líquido tisular.

  FIBRAS COLÁGENAS.

Son las fibras más abundantes de los tejidos conjuntivos y están constituidas por una

proteína fibrilar: la colágena, denominada así porque se hidrata ante la cocción y se

transforma en gelatina (cola). Se conocen también con el nombre de fibras blancas, porque

presentan este color en estado fresco, sobre todo en los órganos que como los tendones o

las aponeurosis están formadas principalmente por este tipo de fibra. Morfología. Son fibras

largas y de forma cintada; y en un corte transversal presentan forma elíptica. Se disponen

en haces ondulados que forman espirales en su trayecto que varían en los diferentes tejidos.

Tienen un diámetro que oscila entre 1-12 µm.

Propiedades físicas. Las fibras colágenas son fibras birrefringentes y anisótropas.

Aplicándoles luz polarizada aparecen dotadas de birrefringencia uniáxica positiva, lo cual

indica una orientación longitudinal de las fibrillas.

Propiedades químicas. Como se planteó anteriormente, el agua a la temperatura de

ebullición transforma las fibras colágenas en una masa espesa y viscosa, la que se convierte

finalmente en gelatina. Los ácidos y los álcalis débiles las disuelven pues las tornan

hidrófilas y se tumefactan por imbibición.

Son digeridas por las enzimas colagenasa y la pepsina en solución ácida; sin embargo,

resisten la acción de la tripsina. Cuando se trata con sales de metales pesados o ácido

tánico, forman un producto insoluble. Este método se utiliza para curtir los cueros animales

que incluyen principalmente fibras colágenas.

Composición química. Se caracterizan, en el aspecto químico, por el predominio en su

constitución de los aminoácidos: glicina, prolina, hidroxiprolina e hidroxilisina.

Características tintoriales. En general, las fibras colágenas no son difíciles de reconocer en

los cortes histológicos. Con la hematoxilina y eosina toman un color rosado y con los
colorantes de anilina ácidos, como la fucsina ácida de la coloración de Van Gieson,

adquieren un color rojo. Con el azul de anilina del método de Mallory toman color azul y

con el método tricrómico de Masson, color verde.

 MODELOS DE TEJIDOS

Modelo del Órgano Tubular

También llamados huecos o cavitarios, presentan a la inspección macroscópica una cavidad

central delimitada por una pared que histológicamente presenta una distribución de tejidos

del centro a la periferia, que comprende: Tejido Epitelial, Tejido Conjuntivo, Tejido

Muscular y Tejido Conjuntivo, estando el Tejido Nervioso disperso entre estos

componentes. El patrón más estudiado en la generalización, aplicable a los órganos en las

paredes, el siguiente:

1. Mucosa

. Membranas o epitelios de revestimiento

. Tejido Conjuntivo General Laxo

2. Muscular

. Tejido muscular liso

3. Adventicia o Serosa

.Tejido Conectivo General Laxo, que en el caso de la Serosa está cubierto por un epitelio de

tipo mesotelio.

Modelo del órgano masizo

Estos, presentan a la inspección macroscópica una apariencia sólida, de consistencia

variable, en la que resalta la asociación entre el Tejido epitelial (Parénquima) y el

Tejido Conectivo (Estroma). Definiéndose el primero como la parte esencial o específica y

funcional del órgano, y al segundo como la trama o armazón de tejido conjuntivo, que sirve
para sostener, entre sus mallas los elementos celulares. Con los conocimientos actuales ya

es evidente que los componentes estomáticos pueden también tener algunas funciones

parenquimatosas específicas de cada tipo de órgano.

El patrón más estudiado en su identificación es:

1. Estroma

Cápsula

Tejido Conjuntivo que rodea al órgano, llamándose a la zona engrosada por donde

entran y salen estructuras vasculares y nerviosas Hilio o Zona hiliar.

Tabiques o Trabéculas

Pared divisoria que se extiende desde la cápsula del órgano, hasta diferentes niveles de

profundidad del mismo, delimitando zonas denominadas lóbulos ó lobulillos en

dependencia de su tamaño, que contienen porciones de parénquima y que pueden tener una

relativa independencia funcional.

Red de fibras o malla reticular

Distribución en malla de elementos fibrilares de la matriz extracelular del tejido

Conjuntivo.

2. Parénquima.

Agrupación de células cuya disposición es peculiar en cada órgano, por lo que

lo caracterizan tanto en lo estructural como en lo funcional.

Modelo de sección corporal o esquelético

Este modelo, refleja la expresión de un corte transversal a cualquier nivel de las

extremidades donde se observe la anatomía topográfica de dicha zona. Desde el punto de

vista histológico, siempre se observan de la superficie corporal al centro los siguientes

tejidos: Epitelial, Conjuntivo General, Conjuntivo Especial de tipo óseo o cartilaginoso con

el Nervioso distribuido entre ellos, identificándose macroscópicamente como:

1. Piel

. Membrana epitelial de cubierta

. Tejido conjuntivo laxo general, tejido conjuntivo denso y tejido adiposo

2. Músculos esqueléticos

.Tejido muscular estriado esquelético

3. Huesos largos o cartílago

. Tejido óseo o cartilaginoso

Es evidente, que aunque estos modelos generalicen gran parte del organismo, quedan

excluidas zonas, que por sus características especiales no son aplicables, como son la

mayoría de los órganos de la cabeza y del cuello, no obstante al dominar los modelos

anteriormente expuestos estos servirán de base para conceptuar la importante relación

existente entre la presencia de los tejidos epitelial y muscular con el tejido conectivo

general, así como las peculiaridades que encontrarán al estudiar el tejido nervios

A continuación, y basándonos en los conocimientos adquiridos, estudiaremos los diversos

tipos celulares que integran los tejidos.

Las propiedades fisiológicas fundamentales de las células son expresadas en 4

tejidos básicos:

1) Tejido Epitelial:
Este tejido cubre el cuerpo y protege sus cavidades. El tejido epitelial se caracteriza

por la cohesión de las células que lo integran. Se origina a partir del ectodermo, el

endodermo y el mesodermo.

El tejido epitelial constituye:

-La capa externa de la piel

-Revestimientos del tubo digestivo, las vías respiratorias y las cavidades excretorias

y reproductivas.

Consiste en células que se encuentran firmemente ajustadas entre sí formando una

capa continua o lámina de células.

Por otro lado el tejido epitelial que rodea el tracto digestivo absorbe nutrientes y

agua.

En este tejido vamos a encontrar Glándulas las cuales consisten en una o más

células epiteliales especializadas en la producción y secreción de una sustancia

como por ejemplo el sudor, leche, moco, cera, saliva, hormonas o enzimas

Las Células del tejido epitelial se pueden dividir en:

-Escamosas: Estas son delgadas y aplastadas

 -Cuboidales: Tienen forma de cilindros cortos, parecen cubos o dados

-Columnares: Son columnas delgadas o cilindros alargados. Su núcleo en ocasiones

se encuentra cerca de la base.

2) Tejido Conectivo: Se distingue porque sus células se hallan separadas por

cantidades variables de matriz extracelular. Sus células derivan del mesodermo. Las

funciones de este tejido son de unión, sostén, relleno, almacenamiento de sustancias

y de defensa.

Características:

-Unen otras estructuras corporales y les dan sostén.

-Cubre casi todos los órganos, y provee amortiguamiento.

-Es clasificado por tejidos específicos más que por tipos de células.

-Compuesto de fibras rodeadas por una matriz

-En ocasiones esta matriz puede ser fluida como la sangre o elástica como el

cartílago.

-Es originado en el mesénquima del embrión

Tipos de Tejidos Conectivos:

-Tejido Conectivo Denso y suelto: Conecta órganos y sirve de reserva de sales y

fluidos

-Tejido Conectivo Elástico: Para estructuras que se tienen que expandir y contraer

como por ejemplo pulmones y arterias

-Tejido Conectivo Reticular: Forma una base de apoyo para muchos órganos como

por ejemplo el hígado y el nodo linfático.

-Tejido Conectivo Adiposo: Este se encarga de almacenar grasa

 -Sangre y Linfa: Este es un tejido de circulación que provee comunicación a

diferentes partes del cuerpo

-Cartílago y Hueso: Tienen la función de formar el esqueleto de los vertebrados.

3) Tejido Nervioso: Consta, como elemento característico, de células nerviosas o

neuronas, que poseen prolongaciones y tienen la propiedad de generar y conducir el

impulso nervioso. Cumple funciones tales como de soporte, nutrición y defensa. Su

origen es ectodérmico.

Este tejido controla músculos, glándulas y otros órganos pues las neuronas

transmiten impulsos. Y por otro lado las células gliales sostienen y nutren a las

neuronas.

4) Tejido Muscular: Su característica principal es la propiedad de contractilidad de sus

células. Las características que las distinguen son la forma alargada, fibrilar y las

miofibrillas que se encuentran presentes en su citoplasma. Las células musculares

derivan del mesodermo.

Este tejido se especializa en la contracción.

Tipos de Músculos

-Músculo esquelético: Tiene fibras cilíndricas alargadas su movimiento es

voluntario. En él se pueden apreciar estrías al igual que muchos núcleos periféricos

en cada fibra. Se localiza unido al esqueleto.

-Músculo liso: Tiene fibras alargadas, con las puntas agudas, cuyo movimiento es

involuntario. Poseen sólo un núcleo por fibra, localizado en el centro de la misma.

Se localiza en las paredes de estómago e intestinos.

-Músculo cardiaco: Es el tejido principal del corazón. Tiene fibras unidas por discos

intercalares.
 FIBRAS ELÁSTICAS.

Se encuentran en el tejido conjuntivo laxo, aunque no tan ampliamente distribuidas

en el organismo como las fibras colágenas. Pueden ser sintetizadas principalmente

por fibroblastos, condrocitos y células musculares lisas.

En estado fresco, las fibras elásticas son ligeramente amarillas, por lo que también

se les denomina fibras amarillas. Se localizan preferiblemente en los tejidos que

están sometidos a fuerzas expansivas, tales como las arterias, la pleura, la tráquea,

los bronquios, los tabiques alveolares, las cuerdas vocales y la piel. En los vasos de

mayor calibre, como la aorta, forma extensas láminas u hojas perforadas llamadas

membranas fenestradas.

Morfología. Constituyen cilindros o cintillas aplanadas con un diámetro que varia

de menos de 1 µm hasta 4 µm, aunque en algunos ligamentos llegan a alcanzar

hasta 10-12 µm.

Propiedades físicas. Son más refringentes (brillantes) que las fibras colágenas,

propiedad que sirve para identificarlos microscópicamente.

Propiedades químicas. Es uno de los elementos del organismo más resistente a la

ebullición y a los ácidos álcalis débiles y es digerida enzimáticamente por la

elastasa, enzima que se obtiene del páncreas.

Composición química. Desde el punto de vista químico puede considerarse como un

polipéptido semejante al colágeno en su contenido en glicina y prolina, pero que

difiere por su alto contenido de valina.

Características tintoriales. Las fibras elásticas poseen intensa acidofilia, pero no

siempre se tiñen bien con la H/E, por lo que a veces se dificulta su identificación
 con esta técnica. Existen métodos especiales para la tinción de las fibras elásticas,

tales como la orceina (pardo) y la fucsina-resorcina (azul intenso a púrpura).

Características estructurales. Los estudios al M/E demostraron que estas fibras

carecen de una estructura molecular periódica y que en ella se distinguen dos

componentes: microfibrillas tubulares con diámetros de 13 nm y asociadas a estas,

Otros componente amorfo que constituye una masa central de elastina.

En el desarrollo de las fibras elásticas aparecen primero las microfibrillas y después

el componente amorfo. Se describen dos tipos de fibras elásticas cuyo desarrollo se

ha detenido. En la piel existen fibra elásticas en que predominan las microfibrillas

en lugar de la elastina y en los tendones fibras elásticas que sólo poseen

microfibrillas.

 FIBRAS RETICULARES.

Son fibras muy finas de diámetro menor que las fibras colágenas y se encuentran en

el organismo, formando redes a manera de un retículo.

Propiedades físicas. Son muy similares a las de las fibras colágenas: muy resistentes

y presentan también birrefringencia uniáxica positiva, que indica una orientación

longitudinal de las fibrillas.

Propiedades químicas. Las fibras reticulares no se disuelven con los ácidos diluidos.

Composición química. Su composición química es similar a las fibras colágenas.

Además presentan carbohidratos asociados íntimamente a su estructura,

aproximadamente 10 veces más que en las fibras colágenas, lo que explica su

afinidad por el PAS y las técnicas de impregnación argéntica.

Características tintoriales. Estas fibras no se observan fácilmente al M/O con

hematoxilina y eosina, pero sí se tiñen bien con la técnica de PAS y con los métodos
 de impregnación argéntica. Con esta última las fibras se visualizan con mucha

facilidad, por lo que se les denomina también fibras argirófilas.

Este tipo de fibra suele localizarse en zonas en que el tejido conjuntivo está en

contacto con otros tejidos. Se encuentran alrededor de los vasos sanguíneos, en

especial de los capilares, en torno a las fibras musculares y nerviosas, integrando las

membranas basales y formando el retículo de los órganos hematopoyéticos y el

estroma de las glándulas endocrinas.

Características estructurales. Debido a la distribución y a sus propiedades

tintoriales, se consideró que las fibras reticulares constituían un tipo particular de

fibras. Sin embargo, los estudios al M/E demostraron que estaban formadas por

fibrillas con la estructura periódica típica del colágeno. Aún cuando los

conocimientos actuales demuestran que las fibras colágenas y las reticulares son

esencialmente idénticas, continuaremos empleando los términos de retículo y de

fibras reticulares, para designar a las fibras que muestran las características antes

mencionadas.

 SUSTANCIA AMORFA.

Las células y las fibras del tejido conjuntivo están inmersas en un material viscoso,

incoloro, transparente y ópticamente homogéneo que se denomina sustancia

intercelular amorfa. Este material amorfo es de difícil observación al microscopio

empleando técnicas convencionales, ya que los fijadores histológicos no la

preservan debidamente.

Las características principales de la sustancia amorfa están dadas por su

composición química y el estado físico coloidal (sol-gel) que permiten que:

 1. Sean un factor importante en el control de la difusión de los nutrientes y

sustancias de desecho a través del líquido tisular.

2. Puedan colaborar a la retención de agua, con lo que mantienen la turgencia de los

tejidos.

3. Por su viscosidad, tengan una importante función de lubricación.

4. Puedan inhibir o regular la actividad de ciertas enzimas.

5. Constituyan en parte una barrera a la entrada de partículas extrañas.

La sustancia intercelular amorfa está constituida principalmente por agua, sales

minerales y complejos de mucopolisacáridos y proteínas, denominados

proteoglicanos (95% de carbohidratos), asociados a glucoproteínas (60 % de

carbohidratos) estructurales. Los mucopolisacáridos actualmente se denominan

glucosaminoglicanos (GAG) (glicano: polisacárido y glucosamino: disacarido

repetido) formado por la polimerización de una unidad constituida por un ácido

urónico y un aminoazúcar (hexosamina). El ácido urónico es casi siempre el

glucorónico y la hexosamina la glucocosamina o galactosamina.

Los glucosaminoglicanos pueden ser o no sulfatados. Entre los no sulfatados el más

frecuente en el tejido conjuntivo es el ácido hialurónico y entre los sulfatados son

más abundantes los sulfatos de condroitina.

o GENERALIDADES DE LAS TÉCNICAS UTILIZADAS EN

HISTOLOGÍA

La histología moderna no es sólo una ciencia descriptiva sino que también incluye

muchos aspectos de la biología molecular y celular, que ayudan a describir la

organización y función celular.

Las técnicas utilizadas por los histólogos son diversas. En la actualidad, se utilizan para

histología ya sea microscopios ópticos o con mayor frecuencia la microscopía virtual,

que representa varios métodos para examinar muestras microscópicas en la pantalla de

un ordenador o dispositivo móvil.

Anteriormente, se realizaba una interpretación más detallada de la microanatomía con

un microscopio electrónico, tanto con el microscopio electrónico de transmisión, como

con el microscopio electrónico de barrido. En la actualidad el microscopio de fuerza

atómica también puede proporcionar imágenes de alta resolución que son comparables

o incluso mejores que las obtenidas a través del microscopio electrónico de transmisión.

Tanto el microscopio electrónico como el microscopio de fuerza atómica, debido a su

mayor resolución y más útil aumento, suelen ser el último paso en la adquisición de

datos a partir de muchas técnicas auxiliares de la biología celular y molecular. Estas

técnicas auxiliares incluyen:

• Histoquímica y citoquímica,

• Inmunoquímica y técnicas de hibridación,

• Autorradiografía,

• Cultivo de tejido y órganos,

• Separación de células y orgánulos por centrifugación diferencial,

• Microscopios y técnicas microscópicas especializadas.

 PREPARACIÓN DEL TEJIDO

-Tinción con hematoxilina y eosina con fijación en formalina

El corte de rutina teñido con hematoxilina y eosina es la muestra que se utiliza con

mayor frecuencia.
A veces se utilizan otras técnicas de tinción para mostrar componentes específicos

de las células y los tejidos; varias de estas técnicas las describiremos más adelante.

o El primer paso en la preparación de una muestra de tejido u órgano es la

fijación para conservar la estructura.

La fijación, obtenida en general mediante una sustancia química, conserva de forma

permanente la estructura del tejido.

Las muestras deben sumergirse en el fijador inmediatamente después de extraerse

del organismo. La fijación se utiliza para:

• Abolir el metabolismo celular,

• Impedir la degradación enzimática de las células y tejidos por la autólisis

(autodigestión),

• Destruir microorganismos patógenos tales como bacterias, hongos o virus.

• Endurecer el tejido como resultado de la formación de enlaces cruzados o de la

desnaturalización de moléculas proteicas.

El fijador de uso más común es la formalina, una solución acuosa de formaldehído

al 37 %, en diluciones variadas y en combinación con otras sustancias químicas y

amortiguadores

o En el segundo paso, la muestra se dispone para su inclusión en parafina con

el fin de permitir su corte.

Para examinar una muestra se requiere de su infiltración con un medio de inclusión

que permita realizar corte muy delgados, por lo general en el rango de 5 mm a

15mm.

Después de la fijación la muestra se lava y se deshidrata en una serie de soluciones

alcohólicas de concentración creciente hasta alcanzar alcohol al 100 %.

En el paso siguiente, el aclarado, se utilizan solventes orgánicos tales omo el xileno

o tolueno que son miscibles tanto en alcohol como en parafinas, para extraer el

alcohol antes de la infiltración de la muestra con la parafina fundida.

Cuando la parafina fundida se ha enfriado y endurecido, se empareja para formar un

bloque de tamaño adecuado. Este bloque se coloca en una máquina cortadora

especial, el micrótomo que lo corta en rebanadas finas con una cuchilla de acero.

Los cortes obtenidos se montan sobre portaobjetos de vidrio utilizando un medio de

montaje como adhesivo.

o En el tercer paso, la muestra se tiñe para permitir su examen.

Debido a que los cortes en parafina son incoloros, la muestra todavía no está lista

para su examen bajo el microscopio óptico.

Para colorear o teñir los cortes histológicos, la parafina debe disolverse y extraerse,

con xileno o tolueno y los tejidos estos deben rehidratarse mediante el uso de una

serie de soluciones de alcohol de concentración decreciente.

Después, el tejido sobre el portaobjetos se tiñe con hematoxilina en agua. Debido

a que el colorante de contraste, la eosina, es más soluble en alcohol que en agua, se

vuelve a deshidratar la muestra a través de una serie de soluciones alcohólicas de

concentración y después se tiñe con eosina en alcohol.

Después de la tinción, la muestra se pasa por xileno o tolueno y se le coloca un

medio de montaje no acuoso antes de cubrirla con un cubreobjetos para obtener un

preparado permanente.