Análisis de un fármaco por espectroscopia infrarroja con transformada de Fourier (FT-IR).

1. Objetivos.

 Analizar los espectros del ácido salicílico y ácido acetilsalicílico.

 Analizar el espectro del fármaco, que en este caso es una tableta de aspirina comercial y
comparar los espectros obtenidos.

2. Marco teórico.

Los enlaces químicos de las moléculas tienen frecuencias de vibración específicas que corresponden
a los niveles de energía de estas, donde las frecuencias dependen de la forma de la superficie de la
energía potencial de la molécula, la geometría molecular, las masas atómicas y, posiblemente, el
acoplamiento vibracional y en esto se basa la espectroscopia infrarroja (IR). Si la molécula recibe luz
con la misma energía de esa vibración, entonces la luz será absorbida cumpliendo ciertas reglas de
selección. Para que una vibración aparezca en el espectro de infrarrojo, debe someterse a un cambio
en su momento dipolar durante la vibración. En particular, una aproximación de Born-
Oppenheimer y aproximaciones armónicas; es decir, cuando el hamiltoniano molecular
correspondiente al estado electrónico estándar puede ser aproximado por un oscilador armónico
cuántico en las cercanías de la geometría molecular de equilibrio, las frecuencias vibracionales de
resonancia son determinadas por los modos normales correspondientes a la superficie de energía
potencial del estado electrónico estándar. No obstante, las frecuencias de resonancia pueden estar,
en una primera aproximación, en relación con la longitud del enlace y las masas de los átomos en
cada extremo del mismo. Los enlaces pueden vibrar de seis maneras: estiramiento simétrico,
estiramiento asimétrico, tijeras, rotación, giro y wag. Con el fin de hacer medidas en una muestra,
se transmite un rayo monocromo de luz infrarroja a través de la muestra, y se registra la cantidad
de energía absorbida. Repitiendo esta operación en un rango de longitudes de onda de interés (por
lo general, 4000-400 cm-1) se puede construir un gráfico. Al examinar el gráfico de una sustancia, un
usuario experimentado puede obtener información sobre la misma. Esta técnica funciona casi
exclusivamente en enlaces covalentes, y se usa mucho en química, en especial en química orgánica.
Se pueden generar gráficos bien resueltos con muestras de una sola sustancia de gran pureza. Sin
embargo, la técnica se utiliza habitualmente para la identificación de mezclas complejas.

Para la preparación de las muestras, si las muestras son de gases de un líquido de bajo punto de
ebullición o gas lo cual permite que la muestra se expanda en una celda especial y adecuada. Este
tipo de celdas puede variar desde centímetros hasta metros en la longitud de la trayectoria de la
luz. Las mayores longitudes de trayectoria se obtienen en celdas compactas proporcionando
superficies reflectoras internas de modo que el haz hace numerosas pasadas por la muestra antes
de salir de la celda. Por lo general las celdas son de 10 cm de longitud. La celda se vacía y se llena a
través de una válvula de aguja. Las muestras líquidas pueden ser prensadas en dos planchas de una
sal de alta pureza. Estas placas deben ser transparentes a la luz infrarroja para no introducir ninguna
línea en el espectro de la muestra. Las placas obviamente son solubles en agua, por lo que la
muestra, los reactivos de lavado y el medio deben ser anhidros. Las muestras sólidas se preparan
mezclando una cierta cantidad de muestra con una sal altamente purificada (generalmente se utiliza
bromuro de potasio). Esta mezcla se tritura y se prensa con el fin de formar una pastilla por la que
pueda pasar luz. Al igual que el cloruro de sodio, el bromuro de potasio no absorbe la radiación
infrarroja, por lo que las únicas líneas espectrales provendrán del analito.

Funcionamiento del equipo (Método Típico).

Figura 1. Esquema de un espectrofotómetro IR de haz doble.

Un haz de luz infrarroja es generado y dividido en dos rayos. Uno pasa por la muestra, y el otro por
una referencia que suele ser la sustancia en la que está disuelta o mezclada la muestra. Ambos haces
se reflejan de vuelta al detector, pero primero pasan a través del separador, que alterna
rápidamente cuál de los dos rayos entra en el detector. Las dos señales se comparan y, a
continuación, se registran los datos. Hay dos razones por las que se utiliza una referencia:

 Evita que las fluctuaciones de energía eléctrica de la fuente afecten a los resultados finales,
ya que tanto la muestra como la referencia se ven afectadas del mismo modo. Por esa
misma razón, también impide la influencia de variaciones sobre el resultado final, debido al
hecho de que la fuente no necesariamente emite la misma intensidad de luz para todas las
longitudes de onda.

 Permite que los efectos del disolvente se anulen, porque la referencia es normalmente la
forma pura del disolvente en el que se encuentra.

Espectroscopia de infrarrojo por transformada de Fourier (FT-IR).

Esta técnica de análisis es utilizada obtener el espectro infrarrojo con mayor rapidez. En lugar de
registrar los datos variando la frecuencia de luz infrarroja monocromática, se guía la luz IR (con todas
las longitudes de onda de pista utilizada) a través de un interferómetro. Después de pasar por la
muestra, la señal medida da el interferograma. La realización de una transformada de Fourier de la
señal produce un espectro idéntico al de la espectrometría infrarroja convencional (dispersiva).

3. Materiales.
 Espectrómetro FTIR.  Película de Poliestireno para
 Balanza Analítica. calibración.
 Espátula Pequeña.  Guantes desechables.
 Mortero de Ágata.  Prensa para hacer la pastilla.
 Toallas de papel.

4. Reactivos.
 KBr (Bromuro de Potasio).
 Ácido Salicílico.
 Ácido Acetilsalicílico.
 Tableta de Aspirina Comercial.

5. Metodología.

A. Encender el espectrómetro IR.

Calentar el espectrofotómetro IR (Mirar el manual de operación del instrumento y leer las

instrucciones de operación del equipo) antes de iniciar el experimento.

B. Preparación de la pastilla de KBr.

El material que contenga la muestra debe ser transparente a la radiación infrarroja para
asegurar la medida de absorción solo de la muestra. Las sales halogenadas (incluido el KBr)
tienen excelente transparencia en el IR. Las muestras liquidas se colocan, por lo general,
entre dos cristales pulidos de KBr, los cuales se colocan en el espectrofotómetro. Para las
muestras sólidas se mezcla una pequeña cantidad de muestra pulverizada con KBr
pulverizado en un mortero de ágata y después se hace una pastilla con esta mezcla, la cual
se coloca en el espectrofotómetro. Las muestras gaseosas se colocan en una celda especial
para gases y luego esta celda se coloca en el espectrofotómetro.

a) Blanco pastilla de KBr:

i. Triturar hasta un polvo fino 200 a 300 mg de KBr utilizando un mortero de ágata.
ii. Siguiendo las instrucciones de la prensa manual, hacer una pastilla de KBr.

b) Pastilla de Ácido Salicílico en KBr:

i. Triturar hasta un polvo fino 200 a 300 mg de KBr utilizando un mortero de ágata.
ii. Adicionar 1 a 2 mg de Ácido Salicílico al KBr pulverizado y mezclar bien hasta obtener
polvo fino.
 iii. Realizar la pastilla utilizando esta mezcla.

c) Pastilla de Ácido Acetilsalicílico en KBr:

i. Triturar hasta un polvo fino 200 a 300 mg de KBr utilizando un mortero de ágata.
ii. Adicionar 1 a 2 mg de Ácido Acetilsalicílico al KBr pulverizado y mezclar bien hasta obtener
polvo fino.
iii. Realizar la pastilla utilizando esta mezcla.

d) Pastilla de Aspirina comercial en KBr:

i. Triturar hasta un polvo fino 200 a 300 mg de KBr utilizando un mortero de ágata.
ii. Adicionar 1 a 2 mg de aspirina comercial al KBr pulverizado y mezclar bien hasta obtener
polvo fino.
iii. Realizar la pastilla utilizando esta mezcla.

C. Obtención de los espectros IR.

Consultar en el manual del usuario como se opera el FT-IR Prestige 21 de Shimatzu. Obtener
todos los espectros utilizando los siguientes parámetros:
Resolution: 2.0 cm-1,
Apodization: Strong,
Range: 4400 cm-1 to 450 cm-1,
Mode: Ratio Number of Scans: 4

a) Espectro del Background:

Obtener el espectro del background del IR sin muestra en el equipo siguiendo las
instrucciones del manual del usuario.

b) Calibración del Espectrofotómetro:

Espectro del Poliestireno. Antes de realizar una asignación cuantitativa de bandas en los
espectros, es necesario realizar un calibrado de frecuencias del espectrofotómetro. Dicho
calibrado suele realizarse mediante la medida del espectro de una película de Poliestireno
de espesor conocido.

c) Blanco pastilla de KBr

Colocar la pastilla de KBr en el compartimiento de la muestra y obtener el espectro.

d) Espectro del Ácido Salicílico

Colocar la pastilla de Ácido Salicílico/KBr en el compartimiento de la muestra y obtener

el espectro.
 e) Espectro del Ácido Acetilsalicílico

Colocar la pastilla de Ácido acetilsalicílico/KBr en el compartimiento de la muestra y

obtener el espectro.

f) Espectro de la Aspirina Comercial

Colocar la pastilla de Aspirina Comercial/KBr en el compartimiento de la muestra y

obtener el espectro.

Incluir en el informe.

1. Explique porque el espectro IR del background tiene picos a pesar de que el compartimiento
de la muestra se encontraba vacío.

2. Examinar el espectro del acido salicílico y usando las tablas de asignación de picos y la
estructura de la molécula identificar los picos de mayor intensidad.

3. Examinar el espectro del acido acetilsalicílico y usando las tablas de asignación de picos y la
estructura de la molécula identificar los picos de mayor intensidad.

4. Examinar el espectro de la aspirina comercial y determinar las contribuciones espectrales

del acido salicílico y del acido acetilsalicílico.

6. Referencias.
 “Guía Unificada de Fundamental IV MAESTRIA EN QUIMICA”, tomado de:
http://www.unipamplona.edu.co/unipamplona/portalIG/home_154/recursos/general
/29042015/guiaanalisisdefarmaco.pdf
 G. Pérez, “Espectrometría Infrarroja”, tomado de:
https://www.espectrometria.com/espectrometra_infrarroja